GMP質量體系醋酸可的松檢驗操作規(guī)程

PAGE4PAGE1目的：為檢驗醋酸可的松規(guī)定標準的程序，以便獲得準確的實驗數(shù)據(jù)。范圍：適用于醋酸可的松的檢驗。職責：檢驗室主任、檢驗員。規(guī)程：1.性狀：本品為白色或幾乎白色結晶性粉末，無臭，初無味，隨后有持久的苦味。本品在氯仿中易溶，在丙酮或二氧六環(huán)中略溶，在乙醇或乙醚中微溶，在水中不溶。1.1比旋度：取本品精密稱取250mg置于量瓶，加二氧六環(huán)溶解并稀釋至刻度，搖勻，依法（SOP--QC--310--00）測定,比旋度為+210°至+217°為符合規(guī)定。計算：a：旋光儀讀數(shù)；w：樣品稱重量（mg）；B：水分含量（%）1.2吸收系數(shù)：精密稱取本品50mg置于100mg量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精吸2ml置于100ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（SOP-QC-301-00），在241nm的波長處測定吸收度，吸收系數(shù)為383—407為符合規(guī)定。2.鑒別:2.1試劑與儀器2.1.1甲醇 2.1.2硫酸苯肼試液2.1.3硫酸 2.1.4乙醇制氫氧化鉀試液2.1.5硫酸溶液（1→2） 2.1.6燒杯2.1.7電子天平（萬分之一g） 2.1.8移液管（1ml,2ml,10ml,）2.1.9紅外光譜儀 2.2項目與步驟2.2.1取本品約0.1mg，加甲醇1ml溶解后，加新制的硫酸苯肼試液8ml，在70°加熱分鐘15分鐘，即顯黃色，為符合規(guī)定。2.2.2取本品約2mg，加硫酸2ml使溶解，放置5分鐘，顯黃色或微帶橙色；加水10ml，稀釋后顏色即消失，溶液應澄清，為符合規(guī)定。2.2.3取本品約50mg，加乙醇制氫氧化鉀試液2ml，置于水浴加熱5分鐘，放冷加硫酸溶液（1→2）2ml，緩緩煮沸1分鐘，即發(fā)生醋酸乙酯的香氣為符合規(guī)定。2.2.4取本品，按紅外光光度法（SOP—QC—302—00）檢驗，紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集544圖）一致為符合規(guī)定。3．檢查3.1試劑與儀器3.1.1氯仿—甲醇（9：1） 3.1.2堿性四氮唑試液3.1.3二氯甲烷—乙醚—甲醇水（385：60：15:2）3.1.4硅膠G薄層板3.1.5移液管（2ml）3.1.6容量瓶（200ml、100ml）3.1.7層析缸3.1.8烘箱3.1.9電子天平(萬分之一克)3.1.10微量進樣器3.1.11噴霧器3.1.12稱量瓶3.2項目與步驟3.2.1其它甾體：取本品，精密稱取100mg置于10ml量瓶中，加氯仿—甲醇（9：1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取2ml置200ml量瓶中加氯仿-甲醇（9:1）稀釋至刻度，依為對照溶液。照薄層色譜法（SOP-QC-304-00）試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙醚-水（385：60：15：2）為展開劑，展開后，晾干，在105℃干燥10分鐘，放冷。噴以堿性四氮啖藍試液，立即檢視，供試品溶液如顯雜質斑點，不得多于3個，其顏色與對照溶液的主斑點比較，不得更深為符合規(guī)定。3.2.2干燥失重：稱取本品約1g，置稱量瓶中，按干燥失重測定法（SOP-QC-325-00）在105℃干燥至恒重，減失重量不得過0.5%為符合規(guī)定。4.含量測定4.1試劑與儀器4.1.1C18硅膠色譜柱4.1.2甲醇炔諾酮4.1.3醋酸可的松對照品4.1.4溶量瓶（25ml,100ml）,單標移液管（5ml）4.1.5注射器（10ml），過濾器，濾膜4.1.6電子天平(萬分之一克),稱量瓶4.1.7高效液相色譜儀4.2檢驗步驟:按高效液相色譜法（SOP-QC-306-00）檢測。4.2.1色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗:用C18硅膠色譜柱，流動相為甲醇-水（70：30），流速為1.0ml/min，檢測波長為240nm，量取醋酸可的松對照溶液與內標溶液的混合對照溶液[*]10ml，注入液相色譜儀，醋酸可的松峰與內標物質峰的分離度不得少于1.5，理論板數(shù)按醋酸可的松峰計算應不得低于2700。4.2.2內標溶液的制備：取炔諾酮40mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。4.2.3醋酸可的松對照溶液與樣品混合溶液的制備用測定：醋酸可的松與內標物溶液的混合對照溶液的制備：取醋酸可的松對照品50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。[*]精密量取上述溶液與內標準溶液各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照溶液。樣品溶液與內標物溶液混合溶液的制備：取樣品50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液與內標物溶液各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，量取10μl注入液相色譜儀，將醋酸可的松的混合對照溶液按同法測定。按下式計算本品中醋酸可的松（C23H3O6）的折干含量，應在97.0%～103.0%。為符合規(guī)定。Cd：本品的折干含量；Cw：本品的混合含量；B%：本品的含水百分數(shù)；WS：內標物的稱樣量（g）；AS：內標物溶液中炔諾酮的峰面積或峰高；A1：樣品溶液中醋酸可的松峰高面積或峰高；A1：樣品的稱樣量（g）；f：為校正因子；AS、、WS同上式意義；A2：醋酸可的