HLC的故障診斷及其維修

HPLC的故障診斷與維修I.常見(jiàn)問(wèn)題基線噪音可能的原因：流動(dòng)池臟檢測(cè)器燈有問(wèn)題如果是周期性的，電壓或泵的脈沖溫度對(duì)檢測(cè)器的影響氣泡經(jīng)過(guò)檢測(cè)器Time(min.)基線漂移梯度洗脫

溫度不穩(wěn)定(示差檢測(cè)器）

流動(dòng)相中有污染物

柱中的流動(dòng)相沒(méi)有平衡體系中有污染物流出可能的原因：鬼峰鬼峰——即使不進(jìn)樣也會(huì)出現(xiàn)的峰沒(méi)有進(jìn)樣601530150371517問(wèn)題1-流動(dòng)相臟問(wèn)題2-容器污染問(wèn)題3-柱子污染20%-100%MeOH沒(méi)有進(jìn)樣峰型雙峰柱塌陷正常峰

雙峰柱中有死體積

過(guò)濾片部分堵塞只有一個(gè)雙峰——組分的共洗脫可能原因：樣品與溶劑不匹配，溶劑與柱子不匹配峰型所有的峰都展寬柱效降低——柱死體積大進(jìn)樣量/質(zhì)量高粘度流動(dòng)相

部分峰展寬前次進(jìn)樣后流出的組分大分子量樣品——蛋白或聚合物峰展寬樣品與流動(dòng)相不匹配峰型拖尾峰對(duì)稱(chēng)性>1.2NormalTailingNormalTailing原因：部分峰拖尾二次保留效應(yīng)——?dú)埩艄璐蓟姆磻?yīng)小峰緊跟在大峰的后面流出柱頭有污染金屬所有峰拖尾額外的柱效應(yīng)柱壞/不適當(dāng)?shù)娜軇┎贿m當(dāng)?shù)臉悠妨糠逍驼７迳焐喾迩吧旆宀粚?duì)稱(chēng)性<0.9可能的原因柱過(guò)載在大峰前，有小峰流出樣品溶劑不適當(dāng)柱死體積過(guò)濾片部分堵塞峰型原因:

流動(dòng)相吸收本底高進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)了空氣離子對(duì)分離中的系統(tǒng)峰樣品組分的吸收(RI或UV)低于流動(dòng)相寬峰柱外體積增加*

在進(jìn)樣口到柱或柱到檢測(cè)器之間，使用細(xì)的短的連接管*保證所有的管路接頭都使用正確*用小體積檢測(cè)池*減少進(jìn)樣量或降低樣品濃度HPLC常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)問(wèn)題題系統(tǒng)統(tǒng)壓壓力力問(wèn)問(wèn)題題壓力力高高壓力力低低或或沒(méi)沒(méi)有有壓壓力力壓力力不不穩(wěn)穩(wěn)流路路基基線線噪噪音音問(wèn)問(wèn)題題基線線不不穩(wěn)穩(wěn)定定(不重重復(fù)復(fù))長(zhǎng)、、短短程程振振蕩蕩基線線漂漂移移噪音音脈脈沖沖尖尖刺刺HPLC常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)問(wèn)題題分分析析系統(tǒng)統(tǒng)壓壓力力問(wèn)問(wèn)題題壓力力高高的的原原因因溫度度太太低低流速速太太高高流動(dòng)動(dòng)相相粘粘度度大大管路路堵堵塞塞儀器器或或色色譜譜柱柱堵堵塞塞壓力力傳傳感感器器問(wèn)問(wèn)題題HPLC常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)問(wèn)題題分分析析(續(xù))系統(tǒng)統(tǒng)壓壓力力問(wèn)問(wèn)題題壓力力低低或或沒(méi)沒(méi)有有壓壓力力溫度度太太高高;流速速太太低低泵關(guān)關(guān)閉閉或或保保險(xiǎn)險(xiǎn)絲絲斷斷了了泵未未輸輸送送流流動(dòng)動(dòng)相相儲(chǔ)液液瓶瓶中中無(wú)無(wú)溶溶劑劑低低壓壓限限設(shè)設(shè)置置不不當(dāng)當(dāng)泵泵未未正正確確排排氣氣溶劑劑入入口口過(guò)過(guò)濾濾頭頭堵堵入入口口管管路路中中有有空空氣氣泵泵失失效效系統(tǒng)統(tǒng)內(nèi)內(nèi)有有滲滲漏漏處處所用用溶溶劑劑不不正正確確自動(dòng)動(dòng)進(jìn)進(jìn)樣樣器器在在Purge時(shí)卡卡住住HPLC常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)問(wèn)題題分分析析(續(xù))系統(tǒng)統(tǒng)壓壓力力問(wèn)問(wèn)題題壓力力不不穩(wěn)穩(wěn)壓力力傳傳感感器器問(wèn)問(wèn)題題泵排排氣氣不不充充分分泵失失效效流動(dòng)動(dòng)相相未未正正確確脫脫氣氣所用用溶溶劑劑不不混混溶溶或或易易揮揮發(fā)發(fā)HPLC常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)問(wèn)題題分分析析(續(xù))流路路基基線線噪噪音音問(wèn)問(wèn)題題短程程振振蕩蕩泵壓壓不不穩(wěn)穩(wěn)泵入入口口管管松松,彎或或堵堵塞塞溶劑劑混混合合不不充充分分檢測(cè)測(cè)池池中中有有大大氣氣泡泡泵入入口口閥閥臟臟或或失失效效泵柱柱塞塞桿桿密密封封墊墊磨磨損損檢測(cè)測(cè)器器出出口口溶溶液液成成滴滴狀狀流流入入廢廢液液瓶瓶判斷斷故故障障與與故故障障排排除除的的原原則則規(guī)則則一一∶確確認(rèn)認(rèn)問(wèn)問(wèn)題題至至少少發(fā)發(fā)生生兩兩次次以以上上。。如如果果問(wèn)問(wèn)題題不不重重復(fù)復(fù)出現(xiàn)現(xiàn)，，很很難難證證實(shí)實(shí)其其確確實(shí)實(shí)存存在在。。規(guī)則則二二∶一一次次只只變變化化一一個(gè)個(gè)因因素素，，以以使使你你能能夠夠確確認(rèn)認(rèn)所所變變因因素與問(wèn)題題之間的的關(guān)聯(lián)。。規(guī)則三∶恢復(fù)原原狀。如如果使用用更換組組件方法法來(lái)查找找問(wèn)題之所在,完畢后應(yīng)應(yīng)將原有有完好組組件安裝裝回原處處。否則,換下的組組件將來(lái)來(lái)很難再再利用,會(huì)造成浪浪費(fèi)。規(guī)則四∶嘗試預(yù)預(yù)測(cè)將來(lái)來(lái)可能發(fā)發(fā)生的問(wèn)問(wèn)題。利利用成功功的故障排除經(jīng)經(jīng)驗(yàn)來(lái)改改善您目目前的預(yù)預(yù)防保養(yǎng)養(yǎng)工作,使現(xiàn)有問(wèn)題再再發(fā)率降降至最低低。規(guī)則五∶養(yǎng)成記記錄的好好習(xí)慣。。一個(gè)好好記錄是是成功地地進(jìn)行故障排除除的關(guān)鍵鍵。色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題主要有有兩類(lèi):色譜峰峰峰形異常常問(wèn)題例如負(fù)峰峰,寬峰,肩峰,雙峰,峰形不對(duì)對(duì)稱(chēng)等色譜峰保保留時(shí)間間問(wèn)題保留時(shí)間間不穩(wěn)定定等色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題分析(一)色譜峰峰峰形異常常問(wèn)題:色譜圖中中未出峰峰:進(jìn)樣問(wèn)題題:未進(jìn)樣或或樣品分分解流動(dòng)相問(wèn)問(wèn)題:泵未輸液液或流動(dòng)動(dòng)相不正正確檢測(cè)器設(shè)設(shè)置不正正確,或檢測(cè)器器有問(wèn)題題一個(gè)或幾幾個(gè)峰是是負(fù)峰流動(dòng)相吸吸收本底底高進(jìn)樣過(guò)程程中進(jìn)了了空氣離子對(duì)分分離中的的系統(tǒng)峰峰樣品組分分的吸收收(RI或UV)低于流動(dòng)動(dòng)相色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題分析(一)(續(xù))色譜峰峰峰形異常常問(wèn)題:峰比預(yù)想想的要小小樣品粘度度過(guò)大進(jìn)樣器有有問(wèn)題或或進(jìn)樣體體積有誤誤檢測(cè)器設(shè)設(shè)置不正正確,定量環(huán)(Loop)體積不正正確檢測(cè)器輸輸出未置置零用了不正正確的檢檢測(cè)器輸輸出信號(hào)號(hào)檢測(cè)池被被污染檢測(cè)器的的燈可能能有問(wèn)題題色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題分析(一)(續(xù))色譜峰峰峰形異常常問(wèn)題:雙峰或肩肩峰進(jìn)樣量或或樣品濃濃度過(guò)大大保護(hù)柱或或色譜柱柱進(jìn)口堵堵塞保護(hù)柱或或色譜柱柱污染或或失效前伸峰進(jìn)樣量或或樣品濃濃度過(guò)大大溶樣的溶溶劑相對(duì)對(duì)于流動(dòng)動(dòng)相太強(qiáng)強(qiáng)保護(hù)柱或或色譜柱柱污染或或失效色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題分析(一)(續(xù))色譜峰峰峰形異常常問(wèn)題:拖尾峰保護(hù)柱或或色譜柱柱問(wèn)題:污染或失失效(選擇合適適的柱子子)進(jìn)樣問(wèn)題題檢測(cè)器時(shí)時(shí)間常數(shù)數(shù)不正確確平頭峰檢測(cè)器設(shè)設(shè)置不正正確進(jìn)樣體積積太大或或樣品濃濃度太高高色譜峰保保留時(shí)間間問(wèn)題:保留時(shí)間間飄忽不不定(各次運(yùn)行行之間)系統(tǒng)不穩(wěn)穩(wěn)定或未未達(dá)化學(xué)學(xué)平衡泵壓力不不穩(wěn)(泵頭里有有氣泡)進(jìn)樣體積積過(guò)大或或樣品濃濃度過(guò)大大溫度波動(dòng)動(dòng)流動(dòng)相混混合不均均勻色譜柱被被污染色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題分析(二)色譜峰保保留時(shí)間間問(wèn)題:保留時(shí)間間增加或或減少(各次運(yùn)行行之間)系統(tǒng)不穩(wěn)穩(wěn)定或化化學(xué)平衡衡不足泵流速變變化溫度變化化色譜柱污污染,柱效下降降流動(dòng)相被被污染溶劑入口口過(guò)濾器器堵或管管路堵塞塞系統(tǒng)滲漏漏色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題分析(二)(續(xù))色譜圖常常見(jiàn)問(wèn)題題分析(二)(續(xù))色譜峰保保留時(shí)間間問(wèn)題:保留時(shí)間間改變到到一個(gè)新新的恒定定值流動(dòng)相不不正確或或其組成成不正確確泵流速變變化實(shí)際輸液液的流速速不正確確(泵失靈或或故障)環(huán)境溫度度變化；；柱溫不不正確色譜柱尺尺寸或類(lèi)類(lèi)型不正正確色譜柱被污污染流動(dòng)相含有有穩(wěn)定劑或或穩(wěn)定劑發(fā)發(fā)生變化輸液系統(tǒng)的的梯度滯后后體積不正正確色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題主要要有兩類(lèi):色譜峰峰形形異常問(wèn)題題例如負(fù)峰,寬峰,肩峰,雙峰,峰形不對(duì)稱(chēng)稱(chēng)等色譜峰保留留時(shí)間問(wèn)題題保留時(shí)間不不穩(wěn)定等色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(一)色譜峰峰形形異常問(wèn)題題:色譜圖中未未出峰:進(jìn)樣問(wèn)題:未進(jìn)樣或樣樣品分解流動(dòng)相問(wèn)題題:泵未輸液或或流動(dòng)相不不正確檢測(cè)器設(shè)置置不正確,或檢測(cè)器有有問(wèn)題一個(gè)或幾個(gè)個(gè)峰是負(fù)峰峰流動(dòng)相吸收收本底高進(jìn)樣過(guò)程中中進(jìn)了空氣氣離子對(duì)分離離中的系統(tǒng)統(tǒng)峰樣品組分的的吸收(RI或UV)低于流動(dòng)相相色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(一)(續(xù))色譜峰峰形形異常問(wèn)題題:所有的峰均均為負(fù)峰:信號(hào)電纜接接反或檢測(cè)測(cè)器輸出極極性設(shè)置顛顛倒光學(xué)裝置尚尚未達(dá)到平平衡所有的峰都都是寬峰系統(tǒng)未平衡衡或未達(dá)到到化學(xué)平衡衡溶樣的溶劑劑比流動(dòng)相相強(qiáng)很多色譜柱類(lèi)型型或尺寸不不正確色譜柱或保保護(hù)柱被污污染或降級(jí)級(jí)溫度變化對(duì)對(duì)色譜柱的的影響色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(一)(續(xù))色譜峰峰形形異常問(wèn)題題:較早洗脫的的峰呈寬峰峰進(jìn)樣體積過(guò)過(guò)大或樣品品濃度太高高進(jìn)樣器有問(wèn)問(wèn)題,定量環(huán)(Loop)大小不合適適在線過(guò)濾器器,保護(hù)柱,色譜柱或管管路堵塞管路問(wèn)題:內(nèi)徑不對(duì)或或切管不正正確管路連接問(wèn)問(wèn)題:接頭或錐箍箍不正確檢測(cè)器時(shí)間間常數(shù)不正正確色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(一)(續(xù))色譜峰峰形形異常問(wèn)題題:峰比預(yù)想的的要小樣品粘度過(guò)過(guò)大進(jìn)樣器有問(wèn)問(wèn)題或進(jìn)樣樣體積有誤誤檢測(cè)器設(shè)置置不正確,定量環(huán)(Loop)體積不正確確檢測(cè)器輸出出未置零用了不正確確的檢測(cè)器器輸出信號(hào)號(hào)檢測(cè)池被污污染檢測(cè)器的燈燈可能有問(wèn)問(wèn)題色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(一)(續(xù))色譜峰峰形形異常問(wèn)題題:雙峰或肩峰峰進(jìn)樣量或樣樣品濃度過(guò)過(guò)大保護(hù)柱或色色譜柱進(jìn)口口堵塞保護(hù)柱或色色譜柱污染染或失效前伸峰進(jìn)樣量或樣樣品濃度過(guò)過(guò)大溶樣的溶劑劑相對(duì)于流流動(dòng)相太強(qiáng)強(qiáng)保護(hù)柱或色色譜柱污染染或失效色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(一)(續(xù))色譜峰峰形形異常問(wèn)題題:拖尾峰保護(hù)柱或色色譜柱問(wèn)題題:污染或失效效進(jìn)樣問(wèn)題檢測(cè)器時(shí)間間常數(shù)不正正確平頭峰檢測(cè)器設(shè)置置不正確進(jìn)樣體積太太大或樣品品濃度太高高色譜峰保留留時(shí)間問(wèn)題題:保留時(shí)間飄飄忽不定(各次運(yùn)行之之間)系統(tǒng)不穩(wěn)定定或未達(dá)化化學(xué)平衡泵壓力不穩(wěn)穩(wěn)(泵頭里有氣氣泡)進(jìn)樣體積過(guò)過(guò)大或樣品品濃度過(guò)大大溫度波動(dòng)流動(dòng)相混合合不均勻色譜柱被污污染色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(二)色譜峰保留留時(shí)間問(wèn)題題:保留時(shí)間增增加或減少少(各次運(yùn)行之之間)系統(tǒng)不穩(wěn)定定或化學(xué)平平衡不足泵流速變化化溫度變化色譜柱污染染,柱效下降流動(dòng)相被污污染溶劑入口過(guò)過(guò)濾器堵或或管路堵塞塞系統(tǒng)滲漏色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(二)(續(xù))色譜圖常見(jiàn)見(jiàn)問(wèn)題分析析(二)(續(xù))色譜峰保留留時(shí)間問(wèn)題題:保留時(shí)間改改變到一個(gè)個(gè)新的恒定定值流動(dòng)相不正正確或其組組成不正確確泵流速變化化實(shí)際輸液的的流速不正正確(泵失靈或故故障)環(huán)境溫度變變化；柱溫溫不正確色譜柱尺寸寸或類(lèi)型不不正確色譜柱被污污染流動(dòng)相含有有穩(wěn)定劑或或穩(wěn)定劑發(fā)發(fā)生變化輸液系統(tǒng)的的梯度滯后后體積不正正確本資料來(lái)源源9、靜夜四無(wú)無(wú)鄰，荒居居舊業(yè)貧。。。1月-231月-23Wednesday,January4,202310、雨中黃黃葉樹(shù)，，燈下白白頭人。。。20:32:4420:32:4420:321/4/20238:32:44PM11、以以我我獨(dú)獨(dú)沈沈久久，，愧愧君君相相見(jiàn)見(jiàn)頻頻。。。。1月月-2320:32:4420:32Jan-2304-Jan-2312、故故人人江江海海別別，，幾幾度度隔隔山山川川。。。。20:32:4420:32:4420:32Wednesday,January4,202313、乍見(jiàn)翻翻疑夢(mèng)，，相悲各各問(wèn)年。。。1月-231月-2320:32:4420:32:44January4,202314、他鄉(xiāng)生白發(fā)發(fā)，舊國(guó)見(jiàn)青青山。。04一月20238:32:44下午20:32:441月-2315、比比不不了了得得就就不不比比，，得得不不到到的的就就不不要要。。。。。。一月月238:32下下午午1月月-2320:32January4,202316、行動(dòng)動(dòng)出成成果，，工作作出財(cái)財(cái)富。。。2023/1/420:32:4420:32:4404January202317、做前，能能夠環(huán)視四四周；做時(shí)時(shí)，你只能能或者最好好沿著以腳腳為起點(diǎn)的的射線向前前。。8:32:44下下午8:32下下午20:32:441月-239、沒(méi)沒(méi)有有失失敗敗，，只只有有暫暫時(shí)時(shí)停停止止成成功功??！。。1月月-231月月-23Wednesday,January4,202310、很很多多事事情情努努力力了了未未必必有有結(jié)結(jié)果果，，但但是是不不努努力力卻卻什什么么改改變變也也沒(méi)沒(méi)有有。。。。20:32:4420:32:4420:321/4/20238:32:44PM11、成成功功就就是是日日復(fù)復(fù)一一日日那那一一點(diǎn)點(diǎn)點(diǎn)點(diǎn)小小小小努努力力的的積積累累。。。。1月月-2320:32:4420:32Jan-2304-Jan-2312、世間成事事，不求其其絕對(duì)圓滿(mǎn)滿(mǎn)，留一份份不足，可可得無(wú)限完完美。。20:32:4420:32:4420:32Wednesday,January4,202313、不知香積積寺，數(shù)里里入云峰。。。1月-231月-2320:32:4420:32:44January4,202314、意志堅(jiān)強(qiáng)的的人能把世界界放在手中像像泥塊一樣任任意揉捏。04一月20238:32:44下午20:32:441月-2315、楚楚塞塞三三湘湘接接，，荊荊門(mén)門(mén)九九派派通通。。。。。。一月月238:32下下午午1月月-2320:32January4,202316、少年十五二二十時(shí)，步行行奪得胡馬騎騎。。2023/1/420:32:4420:32:4404January202317、空山新雨雨后，天氣氣晚來(lái)秋。。。8:32:44下下午8:32下下午20:32:441月-239、楊柳散散和風(fēng)，，青山澹澹吾慮。。。1月-231月-23Wednesday,January4,202310、閱讀一切好好書(shū)如同和過(guò)過(guò)去最杰出的的人談話(huà)。20:32:4420:32:4420:321/4/20238:32