同型半胱氨酸測定試劑注冊

附件3同型半胱氨酸測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對同型半胱氨酸測定試劑資料的技術(shù)審評提供參考。指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。一、適用范圍同型半胱氨酸測定試劑用于體外定量測定人血清或血漿中在醫(yī)學(xué)實驗室采用酶循環(huán)法進(jìn)行同型半胱氨酸定量檢驗所使用1（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第號知（2013242號，同型半胱氨酸測定試劑管理類6840。二、注冊申報資料要求（一）綜述資料（國家食品藥品監(jiān)督5（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公201444體內(nèi)的同型半胱氨酸（HCY）來源于蛋氨酸，蛋氨酸主要來ATPS-腺苷蛋氨50Bouskey274666HCY5膽固醇增加587649mol/Lmol/L能的影響因素（年齡、性別、吸煙史和高膽固醇血癥等9—mol/L患者病死率是血清水平9mol/L患者的倍p；而同型半胱氨酸水平為1—mol/L患者病死率則是血清水平9mol/L（p為20mol/L患者病死率則是血清水平9mol/L（p險預(yù)測因子。（二）主要原材料研究資料（如需提供）主要原材料（例如酶及其他主要原料）試驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主量的生產(chǎn)工藝。2長等條件的確認(rèn)資料及試驗數(shù)據(jù)，校準(zhǔn)方法、質(zhì)控方法等。（四）分析性能評估資料究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法（如有、研究結(jié)論3臨床樣本來源等。1.準(zhǔn)確度對測量準(zhǔn)確度的評價依次包括：與國家標(biāo)準(zhǔn)品（和/或國際標(biāo)準(zhǔn)品）根據(jù)實際情況選擇以下方法的一項或幾項進(jìn)行研究。與國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品的相對偏差如果研究項目有相應(yīng)國（國際（國際標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行驗證，重點觀察對相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果的偏差情況?；厥赵囼炗糜谠u估定量檢測方法準(zhǔn)確測定加入純品（或標(biāo)準(zhǔn)溶液）3—5回收試驗注意事項：（或標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)生基質(zhì)的變化；水平（10~20μmol/L；③純品（或標(biāo)準(zhǔn)溶液的回收樣本。方法學(xué)比對采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類（40），從測定結(jié)果間的差異了解擬申報試劑與參比方法擬申報試劑與對比方法相比不會產(chǎn)生差異結(jié)果。濃度分布范圍并對結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。2.空白吸光度完成后的吸光度值，測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值。3.空白吸光度變化率（如適用）差值，空白吸光度變化率（ΔA/min）應(yīng)不大于企業(yè)規(guī)定值。分析靈敏度用試劑測試同型半胱氨酸已知濃度在（5—15）μmol/L樣本，記錄在試劑規(guī)定參數(shù)下的吸光度差值。對于終點法測試的試劑，μmol/L樣本的吸光度變化（ΔA）應(yīng)不小于。對于速率法測試的試劑，μmol/L樣本的吸光度變化率（ΔA/min）應(yīng)不小于。重復(fù)性C）應(yīng)不大于5%（±）μmol/L5所得結(jié)果的變異系數(shù)（CV）36.批間差3（±）μmol/L

樣本，每個批號測試337.線性建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度達(dá)到預(yù)期測定上限的混合人血清（或其他人源樣本，制備低濃度樣本時應(yīng)充分考慮稀釋對樣本基質(zhì)的影響，建議稀釋液盡量采用陰性血清。建立線性范圍時，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇7—11130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)試驗結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點（最終不得少于7直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。驗證線性范圍5—7必要時應(yīng)提供基質(zhì)效應(yīng)研究有關(guān)的資料。干擾試驗考察樣本中常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響（如））何種藥物及其濃度進(jìn)行。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品賦值（如適用）應(yīng)參照GB/T21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）度計算記錄，提供質(zhì)控品定值及其靶值范圍確定的記錄。均一性取同批號的一定數(shù)量最小包裝單元的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，每包裝單元測試1次，按下面的公式計算測試結(jié)果的平均值（X ）1和標(biāo)準(zhǔn)差S1

；另用一個上述校準(zhǔn)品最小包裝單元連續(xù)測試相同（

2

；按下列各公式2計算瓶間重復(fù)性CV%，所有參數(shù)的瓶間重復(fù)性結(jié)果均應(yīng)符合要求。公式1公式2公式1公式2公式3公式4iXi1Xi(2n1X)2inSS2S2S122瓶間CV (%)S /X 100瓶間 瓶間 1當(dāng)S<S時，令CV =01 2 瓶間式中：X 平均值；S 標(biāo)準(zhǔn)差；7n 測量次數(shù)；x----指定參數(shù)第i次測量值。i其他需注意問題項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。相關(guān)性研究以確認(rèn)二者檢測結(jié)果是否完全一致或存在某種相關(guān)性（如系數(shù)關(guān)系。對于血漿樣本，申請人應(yīng)對不同的抗凝劑進(jìn)行研究以確認(rèn)最適的抗凝條件以及是否會干擾檢測結(jié)果。（五）參考區(qū)間確定資料計方法等。數(shù)均應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。相應(yīng)說明。（六）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究主要包括效期穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、開瓶（復(fù)溶）3（注：若有相關(guān)文獻(xiàn)中已明確說明，亦）（七）臨床評價資料（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告201416）的要求，同時研究資料的形式應(yīng)符合《關(guān)于公布體外診（201444規(guī)定。下面僅對臨床試驗中的基本問題進(jìn)行闡述。研究方法選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市的性能不低于擬申報產(chǎn)品的同類產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗用體外診斷試劑（以下稱考核試劑之進(jìn)行比較研究試驗，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。臨床研究單位的選擇應(yīng)在至少兩家經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理總局備案的臨床試量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。倫理要求臨床試驗必須符合赫爾辛基宣言的倫理學(xué)準(zhǔn)則，必須獲得臨9床試驗機(jī)構(gòu)倫理委員會的同意。研究者應(yīng)考慮臨床試驗用樣本，如血清、血漿等的獲得或試驗結(jié)果對受試者的風(fēng)險性，應(yīng)提交倫理委員會的審查意見及受試者的知情同意書。對于例外情況，如客觀上不可能獲得受試者的知情同意或該臨床試驗對受試者幾乎沒有風(fēng)險，可經(jīng)倫理委員會審查和批準(zhǔn)后免于受試者的知情同意。臨床試驗方案試驗方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入則應(yīng)對額外的樣本類型進(jìn)行驗證。研究對象選擇臨床試驗應(yīng)選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。申研究總體樣本數(shù)不少于200例，并覆蓋線性范圍，應(yīng)充分考80如果聲稱同時適用于血清和血漿樣本，那么血清（或血漿的試驗例數(shù)參照上述要求，并采用考核試劑同時驗證其中至少100（或血清樣本測試結(jié)果100具體變更情況，酌情增加臨床試驗總樣本數(shù)。統(tǒng)計學(xué)分析/偏態(tài)分布等情況，建議統(tǒng)計學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)/偏差及相對偏倚/t）11判定系數(shù)（R、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）核試劑與對比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。t臨床試驗總結(jié)報告撰寫根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通（201416臨床試驗總體設(shè)計及方案描述研究人員簡介等基本情況介紹。②病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、不同人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)。③樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。④統(tǒng)計學(xué)方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。具體的臨床試驗情況信息。列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比?？仄愤\行情況，對檢測精密度、質(zhì)控品回收（或測量值、抽查結(jié)果評估。④具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本長期保存等。統(tǒng)計學(xué)分析涉及對方案的修改。②定量值相關(guān)性和一致性分析y=a+bxrR2是對比試劑結(jié)果，bayr（要求r＞，如r＜，應(yīng)適當(dāng)擴(kuò)大樣本量以擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍，是判定系數(shù)（通常要求2≥，計算回歸系數(shù)及截距的95%可信區(qū)間。分別計算醫(yī)學(xué)決定水平處（或正常參考區(qū)間上限）相對偏倚/95%置信區(qū)間。醫(yī)學(xué)決定水平處（或正常參考區(qū)間上限）相對偏倚應(yīng)不大于允許誤差（建議參照1/2CLIA’88、1/2。應(yīng)給出考核試劑與對比試劑之間的差值（絕對偏倚/偏差或比值（相對偏倚/偏差）散點圖，觀察并分析各點的偏倚分布情況。t試劑與對比試劑等效性。討論和結(jié)論床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗結(jié)論。（八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料申請人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可13能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見的危害等0316—2016《醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。（九）產(chǎn)品技術(shù)要求（5（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告20149）的相關(guān)規(guī)定。1產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)GB/T191—2008GB/T21415—2008YY/T 0316—2016YY/T—2009YY/T 1258—2015

包裝儲運圖示標(biāo)志體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號第1部分：通用要求同型半胱氨酸測定試劑（盒（酶循環(huán)法）試劑空白、分析靈敏度、線性、精密度、準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性等。各性能指標(biāo)應(yīng)不低于YY/T1258—2015《同型半胱氨酸檢測試劑（盒（酶循環(huán)法》的要求，如有相應(yīng)的國家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布或情況增加下列檢驗項目：試劑空白吸光度變化率（如適用）度差值（ΔA，計算空白樣本的吸光度變化率（ΔA/min）應(yīng)不大于企業(yè)規(guī)定值。準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對）用待測試劑盒與申請人選定分析系統(tǒng)（參考方法或國內(nèi)/國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑）40r（區(qū)間上限）相對偏倚應(yīng)不大于企業(yè)規(guī)定值。復(fù)溶穩(wěn)定性（干粉或凍干試劑適用（復(fù)溶后至少符合線性范圍、準(zhǔn)確度和重復(fù)性。校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（如適用）21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品②性能要求：外觀、裝量、均一性（瓶間差準(zhǔn)品和定值質(zhì)控品為單獨注冊單元應(yīng)考察賦值的準(zhǔn)確性。附錄品、質(zhì)控品的賦值程序。（十）產(chǎn)品注冊檢驗報告15（國家食品藥品監(jiān)督管5（十一）產(chǎn)品說明書（201417（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令6結(jié)合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（201417指導(dǎo)注冊申報人員更合理地完成說明書編制。于確實無適當(dāng)中文表述的詞語，可使用相應(yīng)英文或其縮寫?！绢A(yù)期用途】應(yīng)包括以下幾部分內(nèi)容：說明試劑用于體外定量測定人血清和/或血漿中同型臨床或?qū)嶒炇以\斷方法等?！緳z驗原理】2HCYHCYHCYHCY-S腺苷同型半胱氨酸（SAH，SAH被SAH-水解酶水解生成腺苷和HCYHCYHCYNADHNADHNADH（或量）成正比。HCYHCY（CBS）催化下和絲氨酸反應(yīng)生成L-β-分解酶（CBL）HCYNH3HCY（LDH）的催化下將NADH轉(zhuǎn)變?yōu)镹AD+HCY濃度與NADH（或量成正比。【主要組成成分】試劑內(nèi)如包含校準(zhǔn)品和/17【儲存條件及有效期】息作詳細(xì)介紹。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。品總有效期以其中效期最短的為準(zhǔn)。12【適用儀器】便用戶能夠做出最好的選擇。6.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：應(yīng)注明對抗凝劑的要求。盡可避免此類樣本。樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件及期限、/對儲存樣本的添加劑要求等。（運輸，并應(yīng)及時分離出血漿（或血清）樣本。最大可稀釋倍數(shù)、稀釋溶液等信息。【檢驗方法】詳細(xì)說明試驗操作的各個步驟，包括：試驗具體操作步驟。試劑配制方法、注意事項。的注意事項。制。應(yīng)注明推薦的校準(zhǔn)周期。以及推薦的質(zhì)控周期等，如質(zhì)控不合格應(yīng)提供相關(guān)的解決方案?！緟⒖紖^(qū)間】間確定的方法。簡單介紹設(shè)定該參考區(qū)間所選健康人群的區(qū)域特征，各實驗室建立自己的參考區(qū)間”?！緳z驗結(jié)果的解釋】說明可能對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響的因素。10.【檢驗方法的局限性】除病例的依據(jù)。說明該檢驗方法由于哪些原因會使測量結(jié)果產(chǎn)生偏離，19或測量結(jié)果還不能完全滿足臨床需要。如：干擾（蛋白、甘油三酯等）等?！井a(chǎn)品性能指標(biāo)】空白吸光度、試劑空白吸光度變化率（如適用、分析靈敏度、簡要總結(jié)?！咀⒁馐马棥繎?yīng)至少包括以下內(nèi)容：本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/況綜合考慮。操作者采取必要的防護(hù)措施。是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，如S-甲硫氨酸