液質(zhì)AB4500操作規(guī)程

一、開關(guān)機(jī)AA、開機(jī)翻開S電源，翻開氮?dú)獍l(fā)生器〔氣瓶，確認(rèn)ns的輸入壓力為，gas1/20.7MPa，exhuast為0.4MPa。翻開機(jī)械泵電源開關(guān)〔5500系列直接翻開質(zhì)譜主機(jī)電源，儀器自動啟動機(jī)械泵〕30min翻開質(zhì)譜主機(jī)電源開關(guān)過夜抽真空BB、關(guān)機(jī)停頓輸液：關(guān)停針泵或液相泵，或斷開輸液管線〔一般質(zhì)譜主機(jī)Standby后液相系統(tǒng)也自動待機(jī)，輸液泵自動關(guān)停，但建議操作人員再次確認(rèn)，必需保證沒有任何液體再泵入質(zhì)譜〕使儀器待機(jī)，并滅活配置關(guān)閉質(zhì)譜儀主機(jī)電源開關(guān)〔5500VENT按鍵排放真空〕30min關(guān)閉機(jī)械泵上的電源開關(guān)〔5500系列會自動關(guān)停機(jī)械泵，待機(jī)械泵停頓后即可關(guān)閉5500系列主機(jī)上的電源開關(guān)〕關(guān)閉氣體發(fā)生器或氣瓶二. 儀器校準(zhǔn)與調(diào)諧本節(jié)包括如何在Analyst軟件中進(jìn)展手動質(zhì)量校準(zhǔn)，一般儀器在開關(guān)機(jī)后才需要做調(diào)諧或每個季度例行調(diào)諧。11analyst軟件，雙擊HardwareConfigure，在硬件配置HardwareConfigure菜單下單擊massSpecOnly(只連質(zhì)譜機(jī))，單擊Activeprofile激活儀器。硬件配置表中massSpecOnly消滅綠勾后，表示質(zhì)譜儀主機(jī)與計算機(jī)通訊正常，關(guān)閉HardwareConfigurationEditor。3、雙擊左邊工具菜單NavigationBar中的ManualTuning，翻開一個空白質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置及運(yùn)行窗口，進(jìn)入手動調(diào)諧模式：4、在project工具條中選擇installation--開頭的工程文件夾5、點(diǎn)擊Fileopen6、選擇AcquisitionMethod翻開四極桿校準(zhǔn)方法文件列表(如：Q1PosPPG.dam，Q1NegPPG.dam，Q3PosPPG.dam，Q3NegPPG.dam方法文件，文件名有可能不同)。依據(jù)要校準(zhǔn)的目標(biāo)(Q1正離子、Q1負(fù)離子、Q3正離子、Q3負(fù)離子)選擇相應(yīng)的方法翻開。7 、該方法會出現(xiàn)在質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置及運(yùn)行窗口：8、用針泵進(jìn)質(zhì)量校準(zhǔn)溶液，調(diào)離子源噴霧針位置到5mm處。對于不同儀器、測定極性，PPG10ul/min9、采集PPGStart，數(shù)據(jù)采集時在窗口下部消滅兩個實時數(shù)據(jù)圖：左邊TIC(總離子流圖)，右邊質(zhì)譜圖。待采集完成后，點(diǎn)擊resolution，再點(diǎn)擊advanced，彈出區(qū)分率窗口，再在右邊質(zhì)譜圖中按鼠標(biāo)右鍵消滅一菜單，選菜單中Openfile：fromspectrum按鈕〔〕10、單擊其中任一個PPG質(zhì)譜峰的圖(fromspectrum按鈕〔〕11、在消滅的MassCalibrationOptions窗口中，從Standard下拉菜單項選擇擇適宜的標(biāo)準(zhǔn)品類型：PPGsPos(正離子)或PPGsNeg(負(fù)離子)；然后點(diǎn)擊12、儀器校準(zhǔn)結(jié)果圖中有三欄:上欄顯示此次校準(zhǔn)與理論值的質(zhì)量偏差(massshift)，中欄顯示所有PPG校準(zhǔn)峰的半峰寬(區(qū)分率PPG校準(zhǔn)點(diǎn)峰強(qiáng)度變化的百分比。AA、手動調(diào)整區(qū)分率目標(biāo)是讓每個數(shù)據(jù)點(diǎn)都應(yīng)當(dāng)落在兩條虛線之間，假設(shè)某些PPG峰寬超出區(qū)分率范圍，應(yīng)進(jìn)展手動調(diào)整。調(diào)整Offset值會影響區(qū)分率，以中心實線為基準(zhǔn)，半峰寬偏大的調(diào)大offset值〔考慮正負(fù)，半峰寬偏小的調(diào)小t值〔考慮正負(fù)，對t值調(diào)整幅度為每次0.003，轉(zhuǎn)變offsetApply鈕。認(rèn)要保存這些修改〕，認(rèn)要保存這些修改〕，重復(fù)9-12 步直到全部點(diǎn)的區(qū)分率符合區(qū)分率范圍。B、質(zhì)量校正當(dāng)offset值設(shè)定適宜，全部PPG離子的區(qū)分率在倆虛線范圍內(nèi)后，進(jìn)展最終的質(zhì)量校準(zhǔn)。再采集一次G數(shù)據(jù)〔重復(fù)9到1步；在snt按ecalibration 按鈕進(jìn)展更，軟件系統(tǒng)會提示是否用的校準(zhǔn)曲線替換已存在的校準(zhǔn)曲線，當(dāng)消滅提示時，答復(fù)“YES”三. 化合物參數(shù)優(yōu)化本節(jié)描述如何用針泵連續(xù)進(jìn)樣(10ul/min)ManualTuning窗口下優(yōu)化化合物參數(shù)。1、找母離子：Q1MS全掃描A、選擇你的project；雙擊NavigationBar下的Manual--Tuning；從ScanType下拉菜單中選擇：Q1Scan(Q1)；選擇極性：Positive(正離子)、Negative〔負(fù)離子；勾選h選項；設(shè)置采集時間:n；在表格中〕欄填入待優(yōu)化化合物的分子量，With(Da)6，Time〔sec〕填1；左側(cè)Source/Gas項用以R)或〔負(fù)離子M120e；項用以下推舉值：DP60，EP10或默認(rèn)值；B、運(yùn)行針泵〔10ul/min〕,startTIC序號穩(wěn)定后再連續(xù)采1minstopTIC1min譜圖，再雙擊選中的譜圖，在下方彈出窗口記錄目標(biāo)化合物峰的中心對應(yīng)的橫坐標(biāo)分子量作為該化合物的準(zhǔn)確分子量。、找子離子：ProductIonScan〔MS2〕A、在當(dāng)前方法文件的ne下選擇tnn〔；去除h選項；在Productof欄填入上一步找到的母離子的準(zhǔn)確分子量；在表格中start(Da)50，stop(Da)欄填入質(zhì)量大于母離子分子量即可，Time〔sec〕1；檢查Source/GasQ1〔CAD默認(rèn)值即可)；CompoundDP60，EP10或默認(rèn)值，CE5，CXP15或默認(rèn)值；B、點(diǎn)擊t采集數(shù)據(jù)，手動調(diào)整E值〔每次增加5，直到右側(cè)質(zhì)譜圖中母離子的信號約1min，點(diǎn)擊stop，在左側(cè)TIC圖上按住鼠標(biāo)左鍵托選最終1min譜圖，再雙擊選中的譜圖，在下方平均譜圖中記錄兩個最強(qiáng)的碎片離子分子量。3、優(yōu)化離子對參數(shù)：MRMAScanType下選擇MRMQ1欄填母離子分子量，Q3(Da)欄子離子分子量，Time〔msec〕填50，ID欄填化合物名稱〔信號強(qiáng)的離子對名稱后空格加1，信號弱的為，每個離子對填一行；檢查s項是否與1掃描時一樣D默認(rèn)值即可)；B、點(diǎn)擊EditRampparameterDP,用默認(rèn)值，點(diǎn)擊OK.C、點(diǎn)擊start開頭優(yōu)化，在右側(cè)質(zhì)譜圖上記錄峰輪廓最高的位置對應(yīng)的橫坐標(biāo)的DP值，填CompoundDP項。D、點(diǎn)擊EditRampparameter下拉菜單里選擇CE,OK，點(diǎn)擊startCE值，再在上方表格內(nèi)點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵選擇CE單擊，表格中則會顯CECE,Filesave即可保持該化合物參數(shù)，填入方法名稱即可.四、建立LC--MS 方法〔以島津液相為例〕1、開HPLC電源，將HPLC系統(tǒng)接上柱子，將出口管線與離子源連好。調(diào)離子源噴霧2mmHardwareConfigure4000+LC(液相)Activeprofile激活儀器。2、選擇你的Project；雙擊Buildacquisitionmethod，彈出方法模板。在模板左側(cè)點(diǎn)acquisitionmethod，模板右邊顯示對應(yīng)的參數(shù)，確認(rèn)synchronizationmode選擇LCSync。3MRM,在模板右側(cè)ScanType下選擇MRMpolarity下選擇化合〔負(fù)離子n處填寫與液相分別一樣的時間；在表格中Q1欄填母離子分子量，Q3(Da)欄子離子分子量，Time〔msec〕填50，ID欄填化合〔信號強(qiáng)的離子對名稱后空格加1、、CXPDP、CEEditparameter設(shè)置離子源參數(shù)：Source/GasR)或〔負(fù)離子M1555，iheon；4shimadzuLCsystempumpspumpingmodebinaryflow，total0.2-0.5timeprogram欄下設(shè)置液相梯度。最終點(diǎn)擊五、建立采樣列表ok。1Buildacquisitionbatchsampleaddset，再點(diǎn)擊addsample，在彈出的窗口內(nèi)的numberok。2samplename〔樣品名稱、rackcode〔樣品架類型