孕前遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室流程和臨床意義

孕前遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室流程和臨床意義第一頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日

醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)圍繞人外周血染色體制備、SCE觀察分析、性狀調(diào)查及皮紋分析等方面的工作，在掌握基本的實(shí)驗(yàn)方法及技能同時(shí)引導(dǎo)學(xué)生制定實(shí)驗(yàn)路線。在實(shí)驗(yàn)中有意識(shí)地培養(yǎng)同學(xué)們規(guī)范操作、仔細(xì)觀察和收集數(shù)據(jù)、科學(xué)的歸納分析等嚴(yán)謹(jǐn)、實(shí)事求是的科學(xué)素養(yǎng)。第二頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日人外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)一第三頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)試劑與儀器實(shí)驗(yàn)步驟注意事項(xiàng)結(jié)果分析作業(yè)及思考題第四頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日了解人類(lèi)外周血淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)方法。熟悉人類(lèi)染色體的基本形態(tài)特點(diǎn)。掌握染色體標(biāo)本的制備方法。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡谖屙?yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日二、實(shí)驗(yàn)原理外周血中的淋巴細(xì)胞幾乎都是處在G0期或G1期，一般情況下是不分裂的。當(dāng)在培養(yǎng)基中加入植物血凝素（phytohemagglutinin,PHA）時(shí)，這種小淋巴細(xì)胞受到刺激后轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，并開(kāi)始進(jìn)行有絲分裂。經(jīng)過(guò)短期培養(yǎng)后，用秋水仙素處理、低滲、固定、滴片和染色，就可獲得大量中期分裂相的細(xì)胞，制片后可以清楚地對(duì)染色體進(jìn)行觀察。第六頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日這種培養(yǎng)方法是Moorhead于1960年建立的。在人類(lèi)遺傳分析中普遍采用外周血培養(yǎng)的方法獲取分裂的細(xì)胞，進(jìn)而開(kāi)展臨床和基礎(chǔ)遺傳學(xué)的研究。這對(duì)于遺傳疾病的檢出以及遺傳咨詢(xún)等工作發(fā)揮了重要作用。第七頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日抽濾器、恒溫水浴箱、離心機(jī)培養(yǎng)瓶、注射器、移液管、量筒RPMI1640、小牛血清、NaHCO3、生理鹽水、肝素、1.0g/L秋水仙素溶液、低滲液（0.025MKCl）、固定液三、實(shí)驗(yàn)試劑及儀器

第八頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日1.植物血凝素(PHA)

刺激外周血淋巴細(xì)胞從G0期返回正常細(xì)胞周期。2.秋水仙素阻止微管組裝。①中期染色體無(wú)法排列赤道板。②抑制姐妹染色體的分離，將細(xì)胞停留在中期。目的:獲得大量的中期細(xì)胞。第九頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日3.固定劑新配置的甲醇&冰醋酸混合液(3:1)。4.染料Giemsa。第十頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日四、實(shí)驗(yàn)步驟

培養(yǎng)液4ml小牛血清1mlPHA0.2ml全血培養(yǎng)72小時(shí)每ml培養(yǎng)液加1ug繼續(xù)培養(yǎng)3-5小時(shí)培養(yǎng)秋水仙素培養(yǎng)瓶第十一頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日取樣

取1ml培養(yǎng)液于10ml離心管1.1000rpm離心5分鐘棄上清離心2.加KCl5ml混勻37℃處理20分鐘低滲3.第十二頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日離心（同前）制片預(yù)冷冰片距離20cm以上玻片傾斜30℃迅速吹氣過(guò)火焰3-5次7.8.9.第十三頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日空氣干燥Giemsa染色10min細(xì)水流沖洗染色10.11.12.第十四頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日吹干鏡檢13.14.第十五頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日1)離心機(jī)平衡：離心管的重量平衡；離心管偶數(shù)、對(duì)稱(chēng)放置2)細(xì)心、溫柔混勻沉淀；3)冰、濕玻片；4)確定將材料滴在玻片上；5)不能烘烤!!!五、注意事項(xiàng)

第十六頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日六、結(jié)果分析

第十七頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日人中期細(xì)胞染色體

（2N=46）第十八頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日七、作業(yè)及思考題1.觀察人類(lèi)染色體的形態(tài)、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。2.總結(jié)做好本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵因素。第十九頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日核型分析及SCE觀察實(shí)驗(yàn)二第二十頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟注意事項(xiàng)作業(yè)與討論第二十一頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆杖旧w組型分析的各種數(shù)據(jù)指標(biāo)學(xué)習(xí)染色體組型分析的基本方法掌握SCE（姐妹染色單體互換）形成的原理和方法熟悉SCE計(jì)數(shù)方法并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行顯著性測(cè)驗(yàn)。第二十二頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日二、實(shí)驗(yàn)原理定義：染色體組型又稱(chēng)核型，是指將動(dòng)物、植物、真菌等的某一個(gè)體或某一分類(lèi)群（亞種、種、屬等）的體細(xì)胞內(nèi)的整套染色體，按它們相對(duì)恒定的特征排列起來(lái)的圖像。核型模式圖是指將一個(gè)染色體組的全部染色體逐個(gè)按其特征繪制下來(lái)，再按長(zhǎng)短、形態(tài)等特征排列起來(lái)的圖像。第二十三頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日在DNA復(fù)制過(guò)程中，加入外源的5-溴脫氧尿苷(BrdU)使DNA雙鏈的化學(xué)組成形成差別，經(jīng)過(guò)分化染色處理，導(dǎo)致2條姐妹染色單體呈現(xiàn)深淺不同的色差。第二十四頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日第二十五頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日染色體的特征數(shù)目（2n=46）長(zhǎng)度（絕對(duì)長(zhǎng)度、相對(duì)長(zhǎng)度）著絲粒位置（M\SM\ST\T）隨體與次溢痕的數(shù)目、大小和位置帶型分析第二十六頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日應(yīng)用意義染色體組型分析——染色體水平上的表型識(shí)別單條染色體、基因定位臨床應(yīng)用（染色體疾病、產(chǎn)前診斷）第二十七頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日人類(lèi)23對(duì)染色體第二十八頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日三、試驗(yàn)材料毫米尺、剪刀、膠水、計(jì)算器、白紙人染色體放大照片第二十九頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日組型分析實(shí)驗(yàn)方法染色體數(shù)目確定染色體形態(tài)特征：長(zhǎng)度：絕對(duì)、相對(duì)相對(duì)長(zhǎng)度=每條染色體的長(zhǎng)度/全套染色體長(zhǎng)度臂比=長(zhǎng)臂/短臂著絲點(diǎn)指數(shù)=短臂/（長(zhǎng)+短臂）隨體的有無(wú)第三十頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日分組排隊(duì)原則1.著絲粒類(lèi)型相同，相對(duì)長(zhǎng)度相近的分一組；2.同一組的按染色體長(zhǎng)短順序配對(duì)排列；3.各指數(shù)相同的染色體配為一對(duì)；4.可根據(jù)隨體的有無(wú)進(jìn)行配對(duì)；5.將染色體按長(zhǎng)短排隊(duì)，短臂向上。第三十一頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日第三十二頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日四、實(shí)驗(yàn)步驟1.計(jì)數(shù)，沿邊緣剪下染色體，編號(hào)；2.初步目測(cè)配對(duì)，分組；3.測(cè)量長(zhǎng)度，計(jì)算相對(duì)長(zhǎng)度、著絲粒指數(shù)、臂比，相同的染色體間配對(duì)；4.將配對(duì)好的染色體排列并粘貼在紙上，每一組下面畫(huà)一橫線，在兩端注明起止號(hào)，并在橫線下的中部寫(xiě)明A-G組號(hào)，染色體從大到小編為1-22號(hào)，性染色體單獨(dú)列為一組。第三十三頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日五、注意事項(xiàng)觀察細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)為：1.細(xì)胞形態(tài)完整、輪廓清晰。2.染色體形態(tài)和分散良好。3.在所觀察的細(xì)胞周?chē)?，沒(méi)有離散的單個(gè)或多個(gè)染色體存在，以免影響計(jì)數(shù)。4.油鏡使用完后要及時(shí)清潔鏡頭。第三十四頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日結(jié)果分析第三十五頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日第三十六頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日作業(yè)與討論1.制作核型分析板——作出書(shū)面報(bào)告。2.統(tǒng)計(jì)分析SCE交換率。

第三十七頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日人類(lèi)某些遺傳性狀調(diào)查實(shí)驗(yàn)三第三十八頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日

人類(lèi)單基因遺傳的性狀或疾病在上下代之間的傳遞遵循孟德?tīng)柖?，在一個(gè)大的群體中，通過(guò)調(diào)查分析這些性狀，可以對(duì)該群體的某一基因頻率及基因型頻率做出估計(jì)；另外某些性狀在臨床診斷上可以做為遺傳病的診斷參考。第三十九頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日

較為常見(jiàn)的單基因遺傳性狀有：苯硫脲（phenylthiocarbamide，PTC）嘗味、ABO血型、眼瞼的單與雙、耳垂的有或無(wú)、能卷舌和不能卷舌及額前發(fā)際的形狀等，均屬于單基因控制的性狀。第四十頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日一、PTC嘗味實(shí)驗(yàn)1．實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

（1）了解PTC嘗味實(shí)驗(yàn)的基本原理（2）掌握PTC嘗味實(shí)驗(yàn)的基本操作第四十一頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日PTC是一種白色結(jié)晶狀藥物，由于其含有N－C=S基團(tuán)而有苦澀味，但對(duì)人無(wú)毒副作用；不同種族、民族和個(gè)體之間，對(duì)該物質(zhì)的嘗味能考不同；人體對(duì)苯硫脲的嘗味能力是由一對(duì)等位基因(Tt)所控制的性狀，T對(duì)t為不完全顯性。2．實(shí)驗(yàn)原理第四十二頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日3．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容器材：試管、試管架、滴管。試劑PTC溶液的配制：配制PTC原液，濃度約為1／750。PTC嘗味使用液配制：將PTC原液編為1號(hào)液，將1號(hào)液用蒸餾水稀釋1倍編為2號(hào)液，將2號(hào)液再稀釋一倍編為3號(hào)液，以此類(lèi)推，直至配成14號(hào)PTC溶液，14號(hào)液濃度為1／6000000，將配好的14種不同濃度的PTC溶液分別置于消毒好的白色試劑瓶?jī)?nèi)。(1)器材和試劑第四十三頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日①讓受試者坐在椅子上，仰頭張嘴，用滴管滴5～10滴14號(hào)液于舌根部，讓受試者徐徐下咽品味，并用蒸餾水作對(duì)照試驗(yàn)。（2）操作步驟②詢(xún)問(wèn)受試者能否鑒別此兩種溶液的味道，若不能鑒別或不能斷定，則依次用13號(hào)、12號(hào)……溶液重復(fù)試驗(yàn)(應(yīng)注意與蒸餾水交替測(cè)試)，直到明確鑒別出PTC的苦味為止。第四十四頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日③tt基因型的閾值范圍為1～6號(hào)液，Tt基因型的閾值范圍為7～10號(hào)液，TT基因型的閾值范圍為11～14號(hào)液。為簡(jiǎn)化操作程序，也可只用6，7，10，11和13號(hào)五種溶液進(jìn)行測(cè)試，嘗不出6號(hào)苦味者為tt基因型，嘗出7號(hào)和10號(hào)液的苦味者為T(mén)t基因型，嘗出11號(hào)者為T(mén)T基因型。④統(tǒng)計(jì)所測(cè)人員的測(cè)試結(jié)果，按Hardy－Weinberg定律計(jì)算出所測(cè)人群中的PTC嘗味基因的基因型頻率和基因頻率。第四十五頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日PTC溶液濃度基因型表型﹤1／750000TT純合嘗味者1／40000～1／500000Tt雜合嘗味者﹥1／24000tt味盲PTC溶液濃度，個(gè)體基因型與個(gè)體表型的關(guān)系第四十六頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日

人類(lèi)對(duì)PTC嘗味能力屬于不完全顯性遺傳(半顯性遺傳),而且已知純合體味盲（tt）容易患結(jié)節(jié)性甲狀腺腫，因此可以把PTC的嘗味能力，作為一種輔助性診斷指標(biāo)。我國(guó)漢族人群中，PTC味盲約占10％。小結(jié)第四十七頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日二、ABO血型檢測(cè)（1）了解決定ABO血型的等位基因（2）掌握抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)ABO血型的原理和方法1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡谒氖隧?yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日2．實(shí)驗(yàn)原理

血型是人體的遺傳性狀，基本的血型系統(tǒng)有16種之多，ABO血型是紅細(xì)胞血型系統(tǒng)中的一種；它受一組復(fù)等位基因(IA、IB、i)控制。人類(lèi)的紅細(xì)胞表面有A和B兩種抗原，血清中有抗B(β)和抗A(α)兩種天然抗體，依抗原和抗體存在的情況，可將人類(lèi)的血型分為A，B，AB和O四種血型。第四十九頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日

一種血液中紅細(xì)胞在A型標(biāo)準(zhǔn)血清中發(fā)生凝集者為B型，在B型標(biāo)準(zhǔn)血清中凝集者為A型，在兩種標(biāo)準(zhǔn)血清中都凝集者為AB型，在兩種標(biāo)準(zhǔn)血清中都不凝集者為O型。第五十頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日3．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容器材：顯微鏡、雙凹玻片或普通載玻片、采血針、青霉素小瓶、膠布、記號(hào)筆、牙簽或小玻棒、棉球、小鏡子。試劑：A型(抗B)和B型(抗A)標(biāo)準(zhǔn)血清、70％酒精、O.9％生理鹽水。(1)器材和試劑第五十一頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日(2)操作步驟①取一清潔的雙凹玻片(或用普通載玻片用玻璃蠟筆劃出方格代替)，兩端上角分別用記號(hào)筆或膠布注明A和B及受試者姓名，然后分別用吸管吸取A和B型標(biāo)準(zhǔn)血清各一滴，滴人相應(yīng)凹格(或方格)內(nèi)。②用70％酒精棉球消毒受試者的耳垂或指端，待酒精干后，用無(wú)菌的采血針刺破皮膚，用吸管取1～2滴血放入盛有0.3～0.5ml生理鹽水的青霉素小瓶中，用吸管輕輕吹打成約5％的紅細(xì)胞生理鹽水懸液。第五十二頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日③在玻片的每一凹格(或方格)內(nèi)分別滴一滴制好的紅細(xì)胞懸液(注意滴管不要觸及標(biāo)準(zhǔn)血清)，然后立即用牙簽或小玻棒分別攪拌液體，使血球和標(biāo)準(zhǔn)血清充分混勻。第五十三頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日④在室溫下每隔數(shù)分鐘輕輕晃動(dòng)玻片幾次，以加速凝集，等10～30min后觀察有無(wú)凝集現(xiàn)象。若混勻的血清由混濁變?yōu)橥该鳎霈F(xiàn)大小不等的紅色顆粒，表示紅細(xì)胞已凝集。若仍呈混濁狀，無(wú)顆粒出現(xiàn)，則表明無(wú)凝集現(xiàn)象；若觀察不清可用顯微鏡在低倍鏡下觀察；若室溫過(guò)高，可將玻片放于加有濕棉花的培養(yǎng)皿中，以防干涸；室溫過(guò)低可將玻片置于37℃恒溫箱中，以促其凝集。第五十四頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日第五十五頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日表一ABO血型的凝集反應(yīng)和基因型血型紅Cell抗原標(biāo)準(zhǔn)A血清（抗B抗體）標(biāo)準(zhǔn)B血（抗A抗體）基因型OO--iiAA-+IAi或IAIABB+-IBi或IBIBABAB++IAIB第五十六頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日⑤根據(jù)ABO血型檢查結(jié)果，判斷自己及受檢者的血型。注意事項(xiàng)：標(biāo)準(zhǔn)血清必須有效；紅細(xì)胞懸液不宜過(guò)濃或過(guò)稀；反應(yīng)時(shí)間及溫度要適中，應(yīng)注意辨別假陰性和假陽(yáng)性。第五十七頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日一般實(shí)驗(yàn)室常用的方法有試管法與玻片法。試管法的優(yōu)點(diǎn)是敏感，較少發(fā)生假凝集；玻片法則簡(jiǎn)便易行，但玻片法如控制不好，易發(fā)生不規(guī)則的凝集現(xiàn)象;本實(shí)驗(yàn)用玻片法。第五十八頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日三、常規(guī)性狀的調(diào)查1.卷舌性狀調(diào)查部分人能夠卷舌：舌的兩側(cè)能夠在口腔中向上卷成槽行，甚至卷成筒狀。卷舌著受顯性基因T控制。圖2卷舌1、有卷舌2、無(wú)卷舌第五十九頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日2.眼瞼性狀調(diào)查：人群中的眼瞼可以分為單重眼瞼（單眼皮）和雙重眼瞼（雙眼皮）兩種性狀；一般認(rèn)為雙眼皮是受顯性基因控制，位顯性性狀；單眼皮為隱性性狀。第六十頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日3.耳垂性狀調(diào)查：人群中依個(gè)體不同，耳朵明顯區(qū)分為有耳垂和無(wú)耳垂，有耳垂為顯性性狀，受一對(duì)等位基因控制，無(wú)耳垂的為隱性性狀。第六十一頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日4.額前發(fā)際調(diào)查：有些人的額前的發(fā)際明顯的在前額正中發(fā)際向下延伸呈峰形，成V字型（又稱(chēng)美人尖），屬于顯性；而額前發(fā)際基本屬于平線的屬于隱性。圖3前額中央發(fā)際有一三角形突出稱(chēng)美人尖1、有美人尖2、無(wú)美人尖第六十二頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日5.發(fā)式和發(fā)旋的調(diào)查：人群中發(fā)式有直發(fā)和卷發(fā)之分，其中直發(fā)為隱性性狀，東方人多是此性狀；卷發(fā)屬于顯性性狀。人群中的發(fā)旋螺紋方向受遺傳因素控制，順時(shí)針?lè)较驗(yàn)轱@性性狀，逆時(shí)針為隱性性狀。第六十三頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日6.拇指端關(guān)節(jié)外展的調(diào)查：人群中某些人的拇指的最后一節(jié)能夠彎向橈側(cè)，與拇指垂直軸線呈60度，該性狀為純合隱性性狀。圖4拇指豎起時(shí)彎曲情形1、挺直2、拇指向指背面彎曲第六十四頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日7.達(dá)爾文結(jié)節(jié)的調(diào)查：人群中有些人的耳輪邊緣上有一個(gè)（或2個(gè)及其以上）小的突起成為達(dá)爾文結(jié)節(jié)，該性狀為顯性性狀。第六十五頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日1．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）了解皮膚紋理的形成與遺傳的關(guān)系（2）掌握皮紋的印取和皮紋的類(lèi)型四、人類(lèi)皮紋的觀察分析第六十六頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日

皮膚紋理(dermatoglyph)簡(jiǎn)稱(chēng)皮紋。是指人體某些特殊部位，如手指、手掌、腳趾和腳掌等處皮膚上出現(xiàn)的紋理圖形。它是由真皮乳頭向表皮突起，形成的一條條凸起的乳頭線，其上有汗腺開(kāi)口，稱(chēng)嵴紋(ridge)；各嵴紋間凹下的部分稱(chēng)為溝，這些凸凹的嵴和溝就構(gòu)成特定的指紋和掌紋。2．實(shí)驗(yàn)原理第六十七頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日

一般認(rèn)為，人的皮紋終生不變；每個(gè)人都有其特定的皮紋，故有種族和個(gè)體的差異，因此皮紋長(zhǎng)期以來(lái)作為偵破案件的手段之一。

大量的研究表明，某些遺傳病，特別是一些染色體病、先天性代謝病和先天畸形等常伴有皮膚紋理異常，故皮紋檢查可作為某些遺傳病診斷的輔助指標(biāo)。第六十八頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日3．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(1)器材和試劑器材：放大鏡、量角器、直尺、鉛筆、紅色印油(或黑色油墨)、人造海綿墊、搪瓷盤(pán)、八開(kāi)白紙。試劑：2.5％亞鐵氰化鉀[KFe(CN)6]水溶液、2％三氯化鐵(FeCl3)水溶液。第六十九頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日①將紅色印油適量地倒入瓷盤(pán)的海綿墊上，涂抹均勻，再將白紙平鋪于桌面或玻璃板上，準(zhǔn)備取印。②受檢者洗凈雙手，擦干后將手掌按在海綿墊上，使掌面獲得均勻的印油(注意不要來(lái)回涂抹，印油不宜粘得過(guò)多)。(2)操作步驟第七十頁(yè)，共七十八頁(yè)，2022年，8月28日③取印時(shí)先將