學(xué)習(xí)情景七細菌的接種與分離技術(shù)

學(xué)習(xí)情景七

細菌的接種與分離技術(shù)

Q1什么叫細菌的接種？接種的目的是什么？Q2為什么要細菌分離？細菌分離的方法有哪幾種？細菌的接種技術(shù)細菌接種就是將目標菌種轉(zhuǎn)移到事先配好的培養(yǎng)基上使其繁殖增長的一種活動。接種的目的就是獲得更多的目標菌，或者篩選出自己想要的菌。

接種和分離工具1．接種針2.接種環(huán)

3.接種鉤

4.5.玻璃涂棒

6.接種圈

7.接種鋤

8.小解剖刀細菌的接種工具接種工具的滅菌細菌的接種程序

接種程序通常分為5個步驟：①滅菌接種環(huán)(針)；②待冷；③蘸取細菌或標本；④進行接種；⑤滅菌接種環(huán)（針）不同培養(yǎng)基中細菌接種技術(shù)一、液體二、固體三、半固體一、液體培養(yǎng)基中細菌的接種菌種液體培養(yǎng)基接種工具菌液菌苔液體培養(yǎng)基中細菌生長現(xiàn)象菌膜生長沉淀生長均勻混濁二、固體培養(yǎng)基中細菌的接種固體培養(yǎng)基連續(xù)劃線

固體培養(yǎng)基平板培養(yǎng)菌落:單個細胞在固體培養(yǎng)基表面經(jīng)過培養(yǎng)形成肉眼可見的微生物集團。菌落的鑒定價值：不同菌的菌落不同。同種菌在不同培養(yǎng)基上菌落不同。同種菌在不同培養(yǎng)條件下菌落不同。菌落的特征：

包括大小、形狀、顏色、邊緣、質(zhì)地、透明度、光澤、表面、濕潤度等。細菌菌落的特征一般都較小，菌落與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密，用接種針容易挑起，多數(shù)表面較光滑、濕潤、較粘稠，易挑取，質(zhì)地均勻，色澤多樣。固體培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)菌苔：

微生物密集生長所形成的。其作用是可用來保存菌種。固體培養(yǎng)基中細菌的生長情況菌落（S型）菌苔菌落（R型）三、半固體培養(yǎng)基中細菌的接種穿刺接種法半固體培養(yǎng)基中無鞭毛菌：僅沿穿剌線呈明顯線狀生長。鞭毛菌：除沿穿剌線生長外并呈羽毛狀或云霧狀擴散生長。無動力有動力

不同的培養(yǎng)基，接種方法不盡相同，生長現(xiàn)象也各異：若細菌在液體培養(yǎng)基中生長，可表現(xiàn)為液體均勻混濁、出現(xiàn)菌膜或沉淀等不同現(xiàn)象；若在固體培養(yǎng)基上生長，可觀察到菌苔（斜面培養(yǎng)）或菌落（平板分離培養(yǎng)）；在半固體培養(yǎng)基中可見擴散生長或沿接種線生長。

細菌分離培養(yǎng)是為了獲得較純的目的菌。1．劃線分離法2．涂布分離法細菌的分離技術(shù)劃線分離法

用接種環(huán)蘸培養(yǎng)后的樣品菌液后在含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿平板上劃線，在劃線過程中菌液逐漸減少，細菌也逐漸減少。劃線到最后，可使細菌間的距離加大。在培養(yǎng)10～20h后，可由一個細菌產(chǎn)生單菌落，菌落不會重疊。

涂布分離法

先將培養(yǎng)的菌液稀釋，通常稀釋到10－5～10－7之間，然后取0.1ml不同稀釋度的稀釋菌液放在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上，用涂布棒或玻璃刮刀涂布在培養(yǎng)基平面上進行培養(yǎng)，在適當?shù)南♂尪认拢?/p>