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《血紅蛋白的提取和分離》試題庫(kù)總分:41分考試時(shí)間:分鐘學(xué)校__________班別__________姓名__________分?jǐn)?shù)__________題號(hào)一總分得分一、綜合類(共41分)1.下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)樣品的加入(圖1)和洗脫(圖2)示意圖,請(qǐng)據(jù)圖完成下列問(wèn)題。圖1圖2(6分)1).在加樣示意圖中,正確的加樣順序是_________。(1分)2).用吸管加樣時(shí),應(yīng)注意正確操作,分別是:①_________、②_________、③_________。(3分)3).等樣品_________時(shí),才加入緩沖液。(1分)4).待_________接近色譜柱底端時(shí),用試管收集流出液,每mL收集一管,連續(xù)收集。(1分)2.凝膠色譜技術(shù)是20世紀(jì)60年代初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離技術(shù),由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、不需要有機(jī)溶劑、對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果,目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用,不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。 參照上圖,完成問(wèn)題:(7分)1).a、b均為蛋白質(zhì)分子,其中先從層析柱中洗脫出來(lái)的是_________,原因是_________。(2分)2).自己制作凝膠色譜柱時(shí),在色譜柱底部d位置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由_________替代。(1分)3).裝填凝膠色譜柱時(shí),色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,原因是_________。(1分)4).若選用SephadexG100,則“G”表示,100表示_________。(1分)5).洗脫用的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體_________(相同/不同),洗脫時(shí),對(duì)洗脫液的流速要求是_________。(2分)3.對(duì)于DNA的粗提取的實(shí)驗(yàn)材料的選擇,經(jīng)過(guò)了多次實(shí)驗(yàn)效果的比較,最終選擇雞血作實(shí)驗(yàn)材料。(8分)1).雞血細(xì)胞中紅細(xì)胞_________,家雞屬于鳥(niǎo)類,新陳代謝旺盛,因而血液中_________細(xì)胞數(shù)目較多,可以提供豐富的_________。(3分)2).實(shí)驗(yàn)前由老師用血細(xì)胞液供同學(xué)們作實(shí)驗(yàn)材料,而不用雞全血,主要原因是_________。(1分)3).在牧區(qū)采集牛、羊和馬血比較方便,若用該材料按實(shí)驗(yàn)要求完成實(shí)驗(yàn)步驟后,結(jié)果是_________,這是因?yàn)檫@些動(dòng)物和人類一樣,_________,但若改用動(dòng)物肝臟作實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行。這是因?yàn)開(kāi)________。(3分)4).若選用動(dòng)物肝臟作實(shí)驗(yàn)材料,在提取之前,最好增加_________程序,使組織細(xì)胞更易分離。(1分)4.閱讀材料,完成問(wèn)題: 將哺乳動(dòng)物(或人)的成熟紅細(xì)胞特殊處理后,造成紅細(xì)胞破裂發(fā)生溶血現(xiàn)象。再將浴出細(xì)胞外的物質(zhì)沖洗掉,剩下的結(jié)構(gòu)就是較純凈的細(xì)胞膜,在生物學(xué)上稱為“血影”。(3分)1).如何處理紅細(xì)胞才能使其發(fā)生溶血現(xiàn)象?(0分)2).紅細(xì)胞溶血后,浴出細(xì)胞外的物質(zhì)應(yīng)該是_________,這種物質(zhì)的特性是_________,因而使紅細(xì)胞具有_________的功能。(3分)5.下面是4組實(shí)驗(yàn)材料: ①無(wú)色洋蔥頭,紫色洋蔥頭;②白蘿卜,胡蘿卜;③鯉魚(yú)的卵巢,精巢;④黃瓜葉,黃瓜(果實(shí)部分)。請(qǐng)完成下面的問(wèn)題:(0分)1).用①作質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)材料,最好用_______,因?yàn)開(kāi)___________________________。(0分)2).用②作可溶性糖的鑒定,最好用______,因?yàn)開(kāi)_________________________________。(0分)3).用③作DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)材料,最好用______,因?yàn)開(kāi)__________________________。(0分)4).用④作葉綠體中色素的提取和分離,最好用______,因?yàn)開(kāi)_______________________。(0分)5).以鯉魚(yú)的精巢為原料,設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)提取DNA。(0分)6.科學(xué)家在分析細(xì)胞膜的化學(xué)成分時(shí),需要制備較純凈的細(xì)胞膜,首選的材料是哺乳動(dòng)物或人的成熟的紅細(xì)胞。將其特殊處理后,紅細(xì)胞會(huì)破裂發(fā)生溶血現(xiàn)象,再將溶出細(xì)胞外的物質(zhì)沖洗掉,剩下的結(jié)構(gòu)就是較純凈的細(xì)胞膜,在生物學(xué)上稱之為“血影”。對(duì)“血影”進(jìn)行分析得知其化學(xué)組成如下:蛋白質(zhì)49%,脂質(zhì)12%,糖類8%。如果將“血影”中的脂質(zhì)提取出來(lái),使其在空氣—水界面上鋪展成單分子層,則所形成的膜面積是原來(lái)細(xì)胞整個(gè)表面積的兩倍。(2分)1).此實(shí)驗(yàn)為什么不選用植物細(xì)胞__________。 ①光學(xué)顯微鏡下觀察,植物細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞膜②植物細(xì)胞有細(xì)胞壁,提取細(xì)胞膜的過(guò)程比較煩瑣③植物細(xì)胞內(nèi)會(huì)有其他膜結(jié)構(gòu)干擾④植物細(xì)胞細(xì)胞液中的有機(jī)酸會(huì)溶解膜(0分)A.①②B.②③C.②④D.③④2).選擇哺乳動(dòng)物或人的成熟的紅細(xì)胞的主要原因是______。(0分)A.該細(xì)胞個(gè)大,好操作B.無(wú)細(xì)胞壁C.紅細(xì)胞有顏色便于觀察D.該細(xì)胞除了細(xì)胞膜外無(wú)其他膜結(jié)構(gòu)3).請(qǐng)推測(cè)成熟紅細(xì)胞的異化作用類型與下列哪種生物相似______。(0分)A.硝化細(xì)胞B.酵母菌C.乳酸菌D.煙草4).紅細(xì)胞溶血后,溶出細(xì)胞外的物質(zhì)由4條肽鏈(574個(gè)氨基酸)組成,則控制該物質(zhì)合成的基因中至少含有多少個(gè)脫氧核糖核苷酸?_________個(gè)。(1分)5).脂質(zhì)單分子層的面積是細(xì)胞表面積的兩倍,這說(shuō)明了_________。(1分)7.有4瓶失去標(biāo)簽的無(wú)色透明液體。已知各裝有:大腸桿菌超標(biāo)的自來(lái)水,丙種球蛋白溶液(一種抗體),溶解著DNA分子的2mol/L的NaCl溶液,葡萄糖溶液。(0分)1).請(qǐng)根據(jù)提供的第一步鑒定方法,簡(jiǎn)要寫出用相應(yīng)物質(zhì)進(jìn)行鑒定的其余步驟和結(jié)果。 第一步:各取4種液體少許分別倒入4支試管中,緩慢加入蒸餾水并用玻璃棒攪拌,則。 第二步:……(0分)2).除上述鑒定DNA的方法外,還可以用哪些方法進(jìn)行鑒定?(0分)8.紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的,血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),來(lái)提取和分離血紅蛋白,請(qǐng)完成下列有關(guān)問(wèn)題:(7分)1).血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步:_________、_________、_________和_________。(4分)2).實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來(lái),馬上進(jìn)行離心,收集血紅蛋白溶液。 ①加入檸檬酸鈉的目的是_________。 ②以上所述的過(guò)程即是樣品處理,它包括_________、_________收集血紅蛋白溶液。(3分)3).收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過(guò)透析,這就是樣品的粗分離。 ①透析的目的是______________________________。 ②透析的原理是______________________________。(0分)4).然后通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化,最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。 ①樣品純化的目的是__________________。 ②血紅蛋白有什么特點(diǎn)? 。這一特點(diǎn)對(duì)進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離有什么意義?。(0分)9.對(duì)血紅蛋白的研究結(jié)果表明,血紅蛋白實(shí)際上是由珠蛋白、原卟啉和二價(jià)鐵離子(Fe2+)所組成的結(jié)合蛋白質(zhì)。有4條肽鏈各結(jié)合一個(gè)輔基即血紅素,O2結(jié)合于Fe2+上,血紅蛋白與氧疏松結(jié)合形成氧合血紅蛋白(HbO2),這種氧合作用于氧分壓高時(shí)容易進(jìn)行,于氧分壓低時(shí)易于解離。紅細(xì)胞結(jié)合和攜帶O2的過(guò)程并不影響二價(jià)鐵離子,也就是說(shuō)不使之氧化為三價(jià)鐵離子(Fe3+無(wú)攜帶O2的能力)。CO與Hb的親和力大于O2,結(jié)合成HbCO后不能重新分離,致使Hb喪失運(yùn)輸O2和CO2的機(jī)能,此稱一氧化碳中毒即煤氣中毒。(5分)1).用凝膠色譜法分離出血紅蛋白時(shí),待_________接近色譜柱底端時(shí),才用試管收集。血紅蛋白因含_________而呈現(xiàn)紅色。(2分)2).要使血紅蛋白從紅細(xì)胞中釋放出來(lái),可選用_________的方法。(1分)3).紅細(xì)胞具有運(yùn)輸氧的功能,是因?yàn)榫哂衉________的特性。(1分)4).亞硝酸鹽為強(qiáng)氧化劑,進(jìn)入人體后,可使血紅蛋白失去運(yùn)輸氧的功能,導(dǎo)致組織缺氧,其可能的原因是_________。(1分)10.科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn),人的血液pH通常在~之間變化,其變化范圍很小,這是由于血液中含有許多對(duì)緩沖物質(zhì),如H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4等,其中H2CO3/NaHCO3在血液中濃度最高,緩沖能力最強(qiáng),對(duì)維持血液正常最重要。(3分)1).當(dāng)人體內(nèi)堿性物質(zhì)(如Na2CO3)增加時(shí),H2CO3/NaHCO3緩沖液中的_________就與之作用,生成_________,過(guò)多的該物質(zhì)可由腎臟排出,從而維持pH基本不變。(2分)2).若人體內(nèi)酸性物質(zhì)(如無(wú)氧呼吸產(chǎn)物乳酸)增加時(shí),則該緩沖對(duì)中的_________就會(huì)與乳酸作用,從而維持pH基本不變。(1分)題號(hào)一總分得分二、填空類(共0分)1.為了純化提取的DNA,可以將濾液放在_________的恒溫水浴箱中保溫_________min。2.在作凝膠色譜分析時(shí),加樣前,_________流出口,使緩沖液緩慢下降到與_________平齊,關(guān)閉出口。加樣后,打開(kāi)出口,使樣品滲入_________內(nèi)。等樣品完全進(jìn)入后_________。3.在提取和分離血紅蛋白時(shí),所用的緩沖液是濃度為_(kāi)________的_________緩沖液4.采集血樣后,及時(shí)分離紅細(xì)胞。采用_________速短時(shí)間離心,如_________離心2min。用吸管吸出_________層血漿,下層暗紅色紅細(xì)胞液倒入燒杯,加入五倍體積的_________緩慢攪拌_________min,低速短時(shí)間離心,重復(fù)洗滌_________次,至上清液中無(wú)_________,則表明紅細(xì)胞洗滌干凈。解析:離心后試管內(nèi)會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象,血漿成分輕,在上層,細(xì)胞成分重,在下層,所以要將血漿吸去,可以減少雜質(zhì),另外也可以提高DNA的相對(duì)含量。加入生理鹽水的目的是為了使之與紅細(xì)胞的滲透壓相平衡,使紅細(xì)胞目前不至于破裂,便于進(jìn)行充分的洗滌。5.分離血紅蛋白溶液時(shí),將混合液離心后可看到試管中的溶液分為4層;第1層為_(kāi)________的_________,第2層為_(kāi)________固體,是_________的沉淀層,第3層是_________的液體,是_________的水溶液,第4層是其他雜質(zhì)的_________的沉淀物。6._________和_________是兩種常用的電泳方法,在_________時(shí)通常運(yùn)用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳。7.蛋白質(zhì)各種特性的差異,如_________、_________、溶解度、_________和對(duì)其他分子的親和力等等,可以用來(lái)分離不同的蛋白質(zhì)。題號(hào)一總分得分三、單選類(共0分)1.將攪拌好的混合液離心來(lái)分離血紅蛋白溶液時(shí),第二層是A.甲苯B.血紅蛋白水溶液C.脂溶性物質(zhì)的沉淀層D.其他雜質(zhì)的沉淀2.提取分離DNA時(shí),加入洗滌劑的目的是A.破壞細(xì)胞質(zhì)B.瓦解細(xì)胞壁和細(xì)胞膜C.溶解DNAD.溶解蛋白質(zhì)3.假設(shè)PCR反應(yīng)中,只有一個(gè)DNA的片段作為模板,在5次循環(huán)后,反應(yīng)物中大約有這樣的DNA片段個(gè)A.8B.16C.32D.644.符合PCR反應(yīng)條件的一項(xiàng)是() ①穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境②DNA模板③合成引物④四種脫氧核苷酸⑤DNA聚合酶⑥D(zhuǎn)NA解旋酶⑦限制性內(nèi)切酶⑧溫控設(shè)備A.①②③④⑤⑥B.①②③④⑤⑥⑦⑧C.③④⑤⑥⑦⑧D.①②③④⑤⑧5.在DNA的粗提取過(guò)程中,初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品的濃度及其名稱分別是() ①g/mL的檸檬酸鈉溶液②2mol/L的NaCl溶液③mol/L的NaCl溶液④體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液 ⑤mol/L的NaCl溶液⑥mol/L的NaCl溶液A.①③⑤B.③④C.②④D.②③④6.蛋白酶能將蛋白質(zhì)水解而使染色質(zhì)中的DNA分離出來(lái),下列藥品可達(dá)到上述同一目的的是A.蒸餾水B.NaCl溶液C.NaOH溶液D.鹽酸7.在PCR反應(yīng)中,只有一個(gè)DNA的片段作為模板,經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,含引物Ⅰ的DNA單鏈占DNA總單鏈數(shù)的A.1/2B.1/4C.1D.1/88.一分子血紅蛋白最多可攜帶的O2分子數(shù)和CO2分子數(shù)分別是A.4、2B.4、4C.2、1D.1、19.在DNA的粗提取過(guò)程中,先后兩次向燒杯加入蒸餾水的作用分別是A.稀釋血液;沖洗樣品B.使血細(xì)胞破裂;降低NaCl濃度使DNA析出C.使血細(xì)胞破裂;增大DNA溶解量D.使血細(xì)胞破裂;提取含雜質(zhì)較少的DNA10.有關(guān)PCR技術(shù),下列敘述不正確的是A.是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是以DNA聚合酶在體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)B.在用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí),DNA的復(fù)制過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似C.PCR反應(yīng)只需在一定的緩沖溶液中提供:DNA模板以及四種脫氧核苷酸D.PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)分為變性、復(fù)性、延伸11.在裝填凝膠柱時(shí),不得有氣泡存在的原因是A.氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果B.氣泡阻礙蛋白質(zhì)的運(yùn)動(dòng)C.氣泡能與蛋白質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)D.氣泡會(huì)在裝填凝膠的時(shí)候,使凝膠不緊密12.關(guān)于凝膠色譜柱的裝填不正確的是()A.交聯(lián)葡聚糖凝膠(G75)“G”表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示凝膠得水值B.色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡,必須重裝C.用300mL的物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12hD.凝膠用自來(lái)水充分溶脹后,配成凝膠懸浮液13.凝膠色譜法之所以能將相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分開(kāi),是因?yàn)锳.凝膠是大小不同的實(shí)心球體B.凝膠是大小相同的實(shí)心球體C.凝膠是大小相同的多孔球體,小分子蛋白質(zhì)可以進(jìn)入D.凝膠是大小相同的多孔球體,大分子蛋白質(zhì)可以進(jìn)入14.TaqDNA聚合酶與一般DNA聚合酶相比,具有的特點(diǎn)是A.具有高效性B.具有專一性C.耐高溫D.能催化子鏈按5′→3′的方向延伸15.有關(guān)DNA復(fù)制過(guò)程中,下列物質(zhì)的作用敘述正確的是A.解旋酶的作用是破壞磷酸和脫氧核糖之間相連的化學(xué)鍵B.DNA聚合酶能催化合成DNA分子C.引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的5′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸D.DNA母鏈能提供DNA復(fù)制的模板16.在DNA濾液中加入NaCl,當(dāng)NaCl濃度為2mol/L時(shí),是為了除去什么,當(dāng)NaCl濃度為mol/L時(shí),是為了除去什么,依次為A.不溶性雜質(zhì),溶液中的可溶性雜質(zhì)B.可溶性雜質(zhì),溶液中的可溶性雜質(zhì)C.可溶性雜質(zhì),溶液中的不溶性雜質(zhì)D.不溶性雜質(zhì),溶液中的不溶性雜質(zhì)17.蛋白酶不能破壞下列哪種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)A.胰島素B.卵清蛋白C.生長(zhǎng)激素D.DNA18.從雞血細(xì)胞中提取DNA所用的提取液是()A.NaCl溶液B.酒精C.二苯胺D.檸檬酸鈉19.在盛有紅褐色的Fe(OH)3膠體的U形管的兩個(gè)管口,各插一個(gè)電極,通直流電后,發(fā)現(xiàn)陰極附近的顏色逐漸加深,這說(shuō)明()A.Fe(OH)3膠體粒子帶正電荷,向陰極移動(dòng)B.Fe(OH)3膠體粒子帶負(fù)電荷,向陽(yáng)極移動(dòng)C.Fe(OH)3膠體粒子帶正電荷,向陽(yáng)極移動(dòng)D.Fe(OH)3膠體粒子帶負(fù)電荷,向陰極移動(dòng)20.洗滌紅細(xì)胞的目的是()A.去除血清B.去除雜蛋白C.除去血小板D.除去水21.血紅蛋白因含有而呈紅色()A.O2B.COC.CO2D.血紅素22.緩沖溶液的作用是()A.維持pH基本不變B.使pH升高C.使pH降低D.改變?nèi)芤簆H23.亞鐵血紅素基團(tuán)可攜帶()A.一分子COB.一分子NOC.一分子O2或CO2D.一分子NO224.裝填凝膠色譜柱時(shí),下端的尼龍管應(yīng)()A.先打開(kāi)后關(guān)閉B.關(guān)閉C.先關(guān)閉后打開(kāi)D.打開(kāi)25.凝膠色譜法中移動(dòng)速度快的是()A.相對(duì)分子質(zhì)量大的B.溶解度高的C.相對(duì)分子質(zhì)量小的D.溶解度低的26.催化合成DNA子鏈的是()A.解旋酶B.DNA聚合酶C.引物D.淀粉酶27.引物與DNA母鏈的關(guān)系是()A.堿基順序相同B.長(zhǎng)度相同C.堿基互補(bǔ)配對(duì)D.完全相同28.DNA的粗提取和分離實(shí)驗(yàn)中,選擇的生物材料()A.DNA含量高B.DNA含量低C.蛋白質(zhì)豐富D.蛋白質(zhì)含量低29.TaqDNA聚合酶的特點(diǎn)是()A.耐高溫B.耐強(qiáng)酸C.耐強(qiáng)堿D.不耐熱30.在PCR反應(yīng)中,只有一個(gè)DNA的片段作為模板,經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,含引物Ⅰ的DNA單鏈占DNA總鏈數(shù)的()A.1/2B.1/4C.1D.1/831.PCR反應(yīng)的延伸過(guò)程,所需溫度大約是()A.90℃以上B.50℃左右C.72℃左右D.30℃左右32.將攪拌好的混合液離心來(lái)分離血紅蛋白溶液時(shí),第2層是()A.甲苯B.血紅蛋白水溶液C.脂溶性物質(zhì)的沉淀層D.其他雜質(zhì)的沉淀33.DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)染成()A.磚紅色B.紅色C.紫色D.藍(lán)色34.提取出的含雜質(zhì)少的DNA應(yīng)是()A.白色塊狀B.黃色絲狀C.黃色塊狀D.白色絲狀35.解旋酶的作用是()A.打開(kāi)DNA雙鏈B.提供DNA復(fù)制的模板C.催化合成DNA子鏈D.增加PCR的效率36.許多生物大分子具有的可解離的基團(tuán),在______條件下,會(huì)帶上正電或負(fù)電()A.一定溫度B.一定pHC.一定壓強(qiáng)D.一定容器37.DNA中磷酸基團(tuán)末端稱為()A.3′端B.2′端C.5′端D.1′端38.DNA的直徑約為()A.20×10-20mB.20×10-10mC.20×20-20mD.20×20-10m39.利用凝膠色譜法什么樣的蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)()A.相對(duì)分子質(zhì)量大的B.溶解度高的C.相對(duì)分子質(zhì)量小的D.所帶電荷多的40.用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)()A.路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢B.路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較快C.路程較短,移動(dòng)速度較慢D.路程較短,移動(dòng)速度較快41.提取分離DNA時(shí),加入洗滌劑的目的是()A.破壞細(xì)胞質(zhì)B.瓦解細(xì)胞膜C.溶解DNAD.溶解蛋白質(zhì)42.選用紅細(xì)胞作分離蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)材料,有何好處()A.血紅蛋白是有色蛋白B.紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核C.紅細(xì)胞蛋白質(zhì)含量高D.紅細(xì)胞DNA含量高43.DNA在波長(zhǎng)為_(kāi)_____的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰()A.100nmB.200nmC.150nmD.260nm44.假設(shè)PCR反應(yīng)中,只有一個(gè)DNA的片段作為模板,在5次循環(huán)后,反應(yīng)物中大約有個(gè)這樣的DNA片段()A.8B.16C.32D.6445.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不斷加入蒸餾水的目的是()A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解雜質(zhì)的速度C.減少DNA的溶解度,加快DNA析出D.減少雜質(zhì)的溶解度,加快雜質(zhì)的析出46.用某種藥飼喂動(dòng)物,一段時(shí)間后測(cè)得實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組動(dòng)物血漿中血紅蛋白含量明顯增高。該藥物的作用可能是()A.增強(qiáng)血紅蛋白的合成能力B.提高血漿蛋白的含量C.增加紅細(xì)胞的生成數(shù)量D.對(duì)紅細(xì)胞有破壞作用47.凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中使用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG75),其中G、75的含義分別是()A.G表示凝膠的使用量,75表示加75g水B.G表示凝膠的交聯(lián)程度,75表示需加熱至75℃C.G表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示每克凝膠及膨脹時(shí)吸水gD.G表示凝膠的膨脹體積,75表示每克凝膠膨脹后體積可達(dá)75cm348.有關(guān)透析的敘述,錯(cuò)誤的是()A.用于透析的薄膜要具有選擇透過(guò)性B.透析膜一般是用硝酸纖維素制成的C.透析能使小分子自由出入,而將大分子保留在袋內(nèi)D.透析可用于更換樣品的緩沖液49.在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉的目的是()A.調(diào)節(jié)pHB.維持紅細(xì)胞的能量供應(yīng)C.防止微生物生長(zhǎng)D.防止血液凝固50.使用十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺電泳過(guò)程中,不同蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于()A.電荷的多少B.分子的大小C.肽鏈的多少D.分子形狀的差異51.蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步,符合要求的一項(xiàng)為()A.粗分離→樣品處理→純化→純度鑒定B.粗分離→純化→樣品處理→純度鑒定C.樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定D.純化→純度鑒定→粗分離→樣品處理52.用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的過(guò)程中,關(guān)于蛋白質(zhì)的敘述,正確的是()A.相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程大于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)B.相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程小于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)C.相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程等于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)D.二者根本無(wú)法比較53.蛋白質(zhì)的各種特性的差異,可以用來(lái)分離不同種類的蛋白質(zhì),下列對(duì)這種特性的描述中正確的一項(xiàng)是()A.分子的形狀、大小和溶解度B.所帶電荷的性質(zhì)和多少、吸附性質(zhì)C.對(duì)其他分子的親和力D.以上三項(xiàng)都是54.隨著人類跨入蛋白質(zhì)組時(shí)代,對(duì)蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用越來(lái)越深入,首先要做的一步是()A.弄清各種蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)B.弄清各種蛋白質(zhì)的功能C.弄清各種蛋白質(zhì)的合成過(guò)程D.獲得高純度的蛋白質(zhì)55.血紅蛋白由____________個(gè)肽鏈組成()A.2B.4C.3D.556.制作凝膠色譜柱時(shí),橡皮塞頂部凹穴內(nèi)插入的移液管的部位及長(zhǎng)度是()A.移液管頭部5cmB.移液管尾部5cmC.移液管頭部3cmD.移液管尾部3cm57.SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是()A.增大蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量B.改變蛋白質(zhì)的形狀C.掩蓋不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別D.減少蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量58.洗滌紅細(xì)胞時(shí),分離所用方法為()A.低速長(zhǎng)時(shí)間離心B.低速短時(shí)間離心C.高速長(zhǎng)時(shí)間離心D.高速短時(shí)間離心59.透析時(shí)取血紅蛋白溶液裝入透析袋內(nèi),放入緩沖溶液中()A.2mLB.mLC.mLD.1mL60.________________的蛋白質(zhì)能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道()A.相對(duì)分子質(zhì)量大的B.吸附性高的C.相對(duì)分子質(zhì)量小的D.溶解度低的61.將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中,離心后,可以明顯看到試管中的溶液分為4層,其中第3層是()A.無(wú)色透明的甲苯層B.脂溶性物質(zhì)的沉淀層C.血紅蛋白的水溶液D.其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物62.血紅蛋白由條肽鏈組成()A.2B.4C.3D.563.凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是()A.對(duì)其他分子的親和力B.溶解度C.所帶電荷多少D.相對(duì)分子質(zhì)量的大小64.分離血紅蛋白溶液時(shí),離心后試管中的溶液分四層,血紅蛋白在第_______層()A.一B.二C.三D.四65.凝膠色譜法中所用的凝膠的化學(xué)本質(zhì)大多是()A.糖類化合物B.脂質(zhì)C.蛋白質(zhì)D.核酸66.下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作不正確的是()A.是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開(kāi)的一種方法B.在洗脫過(guò)程中,大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出,而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部而流速緩慢,最后流出C.凝膠內(nèi)部有很微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔隙大小與被分離的物質(zhì)分子的大小無(wú)相應(yīng)關(guān)系D.一般情況下,凝膠對(duì)要分離的物質(zhì)沒(méi)有吸附作用,因此所有要分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來(lái)題號(hào)一總分得分四、簡(jiǎn)答類(共0分)1.閱讀下列材料,完成問(wèn)題: 用冰冷的稀三氯醋酸或稀高氯酸溶液在低溫下抽提菜花勻漿,以除去酸溶性小分子物質(zhì);再用有機(jī)溶劑,如乙醇、乙醚等抽提,去掉脂溶性的磷脂等物質(zhì)。最后用濃鹽溶液(10%氯化鈉溶液)和mol·L-1高氯酸(70℃)分別提取DNA和RNA,再進(jìn)行定性鑒定。由于核糖和脫氧核糖有特殊的顏色反應(yīng),經(jīng)顯色后所呈現(xiàn)的顏色深淺在一定范圍內(nèi)和樣品中所含的核糖和脫氧核糖的量成正比,因此可用定糖法來(lái)定性定量測(cè)定核酸。測(cè)定核酸的常用方法是苔黑酚(即3,5二羥甲苯)法(Orcinol反應(yīng))。當(dāng)含有核糖的RNA與濃鹽酸及3,5二羥甲苯在沸水中加熱10~20分鐘后,有綠色物質(zhì)產(chǎn)生。測(cè)定脫氧核糖的常用方法是二苯胺法。DNA在酸性條件下和二苯胺在沸水浴中共熱10分鐘后,產(chǎn)生藍(lán)色。(1)用菜花作實(shí)驗(yàn)材料提取DNA和RNA,補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)步驟:①取菜花的花冠20g,剪碎后置于研缽中,加入20mL95%乙醇和400mg海砂,研磨成勻漿。然后用布氏漏斗抽濾,棄去濾液。②_______________________________________,抽濾,棄去濾液。③再向?yàn)V渣中加入20mL丙酮,攪拌5分鐘后抽干(用力擠壓濾渣,盡量除去丙酮)。④在冰鹽浴中,將濾渣懸浮在預(yù)冷的20mL5%高氯酸溶液中。攪拌抽濾,棄去濾液。⑤將濾渣懸浮于20mL95%乙醇中,抽濾,棄去濾液。⑥向?yàn)V渣中加入20mL丙酮,攪拌5分鐘。抽濾至干,用力擠壓濾渣盡量除去丙酮。⑦_(dá)________________________________;在沸水浴中加熱15分鐘。放置,冷卻,抽濾至干,留濾液。并將此操作重復(fù)進(jìn)行一次。將兩次濾液合并,為提取物Ⅰ。⑧_________________________________,加熱到70℃,保溫20分鐘(恒溫水?。┖蟪闉V,留濾液(提取物二)。(2)用二苯胺法和苔黑酚法來(lái)檢驗(yàn)提取物Ⅰ和提取物Ⅱ,請(qǐng)預(yù)測(cè)現(xiàn)象。2.蘿卜貯藏根組織細(xì)胞中是否存在蛋白質(zhì)和DNA?某生物小組對(duì)此進(jìn)行研究,他們從網(wǎng)上查閱資料得知: ①蛋白質(zhì)在10%NaCl溶液中可沉淀析出; ②在蛋白質(zhì)溶液中,加入雙縮脲試劑,溶液呈現(xiàn)特有的顏色; ③DNA溶于10%NaCl溶液但在95%酒精中呈白色絮狀沉淀,析出。 實(shí)驗(yàn)材料:白蘿卜。實(shí)驗(yàn)用具:粉碎機(jī)、燒杯、漏斗、試管、濾紙、玻棒、鑷子、載玻片、天平、紗布。 藥品及試劑:蒸餾水、NaCl、95%酒精、甲基綠染液、雙縮脲試劑、蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品。 請(qǐng)你根據(jù)所提供的條件參與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并完成實(shí)驗(yàn)。 一、材料處理: 二、提?。?三、鑒定及結(jié)果: 四、討論: (1)蛋白質(zhì)在蘿卜貯藏根組織細(xì)胞中所起的作用是___________________________________________________________________________。 (2)DNA主要來(lái)自蘿卜貯藏根組織細(xì)胞的______。參考答案:一、綜合類(共41分)1.本題答案如下1)④→①→②→③ 2)(1)不要觸及破壞凝膠面 (2)貼著管壁加樣 (3)使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng) 3)完全進(jìn)入凝膠層 4)紅色的蛋白質(zhì)5 2.本題答案如下1)(1)a (2)a相對(duì)分子質(zhì)量大,無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動(dòng),路程較短,移動(dòng)速度較快 2)尼龍網(wǎng)和尼龍紗 3)氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果 4)凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍凝膠得水值,即每克凝膠膨脹時(shí)吸水10g 5)(1)相同 (2)保持穩(wěn)定 3.本題答案如下1)(1)有細(xì)胞核 (2)紅 (3)DNA 2)DNA主要存在于細(xì)胞核中,而血漿中不含 3)(1)很難提取出DNA (2)成熟紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核 (3)肝細(xì)胞中有細(xì)胞核 4)研磨 4.本題答案如下1)在盛紅細(xì)胞的燒杯中加入蒸餾水,使其吸水漲破 2)(1)血紅蛋白 (2)既容易與氧結(jié)合,也容易與氧分離 (3)運(yùn)輸氧 5.本題答案如下1)紫色洋蔥細(xì)胞壁呈紫色,易于觀察 2)白蘿卜可溶性還原糖的鑒定,要用斐林試劑最后形成磚紅色沉淀,而胡蘿卜有色素接近磚紅色,干擾效果,說(shuō)服力不強(qiáng) 3)精巢卵巢的卵中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),增加DNA提取的難度 4)黃瓜葉黃瓜葉色素含量比黃瓜果實(shí)高 5)①在鯉魚(yú)精巢中提取精子,放入燒杯中。 ②在燒杯中加入蒸餾水,用玻璃棒沿一個(gè)方向快速攪拌5分鐘,過(guò)濾后收集濾液。 ③在濾液中加入2mol·L-1的NaCl溶液(體積為濾液的2倍),使其混合均勻。 ④沿?zé)瓋?nèi)壁加入蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒沿一個(gè)方向不停地輕輕攪拌,直到黏稠物不再增加時(shí)停止加入蒸餾水。過(guò)濾,留取黏稠物。 ⑤用2mol·L-1的NaCl溶液再溶解黏稠物,過(guò)濾,收集濾液。 ⑥在濾液中加入冷卻的、體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液,用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌。 6.本題答案如下1)B2)D3)C4)3444 5)構(gòu)成細(xì)胞膜的磷脂分子呈雙層排列 7.本題答案如下1)第一步:出現(xiàn)絲狀物的溶液,為溶解著DNA分子的2mol/L的NaCl溶液第二步:向其余3支試管中加入伊紅—美藍(lán)試劑,呈現(xiàn)深紫色的為大腸桿菌超標(biāo)的自來(lái)水。第三步:將其余2種溶液各取少許倒入2支試管中,加入雙縮脲試劑,呈現(xiàn)紫色反應(yīng)的為丙種球蛋白溶液。最后一瓶為葡萄糖溶液。 2)用二苯胺沸水浴變?yōu)樗{(lán)色;或加入冷卻的酒精,攪拌出現(xiàn)絲狀物。 8.本題答案如下1)(1)樣品處理 (2)粗分離 (3)純化 (4)純度鑒定 2)(1)①防止血液凝固 (2)②紅細(xì)胞的洗滌 (3)血紅蛋白的釋放 3)①去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)②透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而大分子則保留在袋內(nèi) 4)①通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去②血紅蛋白呈現(xiàn)紅色,在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液這使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。 9.本題答案如下1)(1)紅色區(qū)帶 (2)血紅素 2)將紅細(xì)胞置于蒸餾水中,加體積分?jǐn)?shù)為40%的甲苯,并攪拌使之破裂 3)紅細(xì)胞中的血紅蛋白與氧在氧分壓高時(shí)容易結(jié)合,在氧分壓低時(shí)又容易分離 4)亞硝酸鹽可使血中低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白 10.本題答案如下1)(1)H2CO3 (2)NaHCO3 2)NaHCO3 二、填空類(共0分)1.(1)60~75℃ (2)10 2.(1)打開(kāi) (2)凝膠面 (3)凝膠床 (4)關(guān)閉下端出口 3.(1)20mmol·L-1 (2)磷酸 4.(1)低 (2)500r/min (3)上 (4)生理鹽水 (5)10 (6)三 (7)黃色 5.(1)無(wú)色透明 (2)甲苯層 (3)白色薄層 (4)脂溶性物質(zhì) (5)紅色透明 (6)血紅蛋白 (7)暗紅色 6.(1)瓊脂糖凝膠電泳 (2)聚丙烯酰胺凝膠電泳 (3)測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量 7.(1)分子的形狀和大小 (2)所帶電荷的性質(zhì)和多少 (3)吸附性質(zhì) 三、單選類(共0分)1.C2.B3.C4.D5.B6.B7.B8.B9.B10.C11.A12.D13.C14.C15.D16.A17.D18.A19.A20.B21.D22.A23.C24.D25.A26.B27.C28.A29.A30.B31.C32.C33.D34.D35.A36.B37.C38.B39.A40.D41.B42.A43.D44.C45.C46.D47.C48.A49.D50.B51.C52.A53.D54.D55.B56.A57.C58.B59.D60.C61.C62.B63.D64.C65.A66.C四、簡(jiǎn)答類(共0分)1.(1)②向?yàn)V渣中加入20mL丙酮,攪拌均勻 ⑦將干燥的濾渣重新懸浮在40mL10%的NaCl溶液中 ⑧將濾渣重新懸浮在20mol·L-1的高氯酸溶液中 (2)提取物Ⅰ遇二苯胺(沸水?。┳兯{(lán);提取物Ⅱ無(wú)此現(xiàn)象;提取物Ⅰ為DNA。 提取物Ⅱ用苔黑酚法檢測(cè),產(chǎn)生綠色物質(zhì);提取物Ⅰ無(wú)此現(xiàn)象;提取物Ⅱ?yàn)镽NA。 2.一、稱取50g白蘿卜洗凈切塊,加入30mL蒸餾水,粉碎機(jī)粉碎,將勻漿經(jīng)紗布過(guò)濾。 二、(1)向經(jīng)紗布過(guò)濾得到的濾液中加入10%NaCl,直至沉淀析出。經(jīng)濾紙過(guò)濾,將濾紙上的沉淀物放入試管中,加入1mL蒸餾水,振蕩,用于蛋白質(zhì)鑒定。 (2)在除去蛋白質(zhì)的濾液中,加入95%酒精,用玻棒輕輕攪拌,見(jiàn)有白色絮狀沉淀產(chǎn)生,經(jīng)濾紙過(guò)濾,用鑷子將濾紙上的絮狀沉淀置于載玻片上,用于DNA鑒定。 三、(1)在用于蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)試管中,加入雙縮試劑,產(chǎn)生呈色反應(yīng),同時(shí)將蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品和1mL蒸餾水放入另一試管,加入雙縮脲試劑產(chǎn)生呈色反應(yīng),觀察到兩試管中顏色基本一致,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)試管中有蛋白質(zhì)存在。 (2)在用于DNA鑒定的載玻片上,滴加甲基綠染液,DNA呈現(xiàn)藍(lán)綠色。說(shuō)明該白色絮狀沉淀為DNA。 (3)通過(guò)對(duì)白蘿卜貯藏根勻漿過(guò)濾液的檢測(cè),說(shuō)明有蛋白質(zhì)和DNA的存在。 四、(1)是細(xì)胞膜等生物膜的結(jié)構(gòu)成分,酶等功能蛋白質(zhì)的組成成分,也是糊粉粒等貯存蛋白質(zhì)的成分(2)細(xì)胞核 解析:一、綜合類(共41分)1.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析3)無(wú)解析4)無(wú)解析2.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析3)無(wú)解析4)無(wú)解析5)無(wú)解析3.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析3)無(wú)解析4)無(wú)解析4.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析5.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析3)無(wú)解析4)無(wú)解析5)無(wú)解析6.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析3)無(wú)解析4)無(wú)解析5)無(wú)解析7.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析8.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析3)無(wú)解析4)無(wú)解析9.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析3)無(wú)解析4)無(wú)解析10.無(wú)解析1)無(wú)解析2)無(wú)解析二、填空類(共0分)1.無(wú)解析2.無(wú)解析3.無(wú)解析4.無(wú)解析5.無(wú)解析6.無(wú)解析7.無(wú)解析三、單選類(共0分)1.無(wú)解析2.無(wú)解析3.無(wú)解析4.無(wú)解析5.無(wú)解析6.無(wú)解析7.無(wú)解析8.無(wú)解析9.無(wú)解析10.無(wú)解析11.無(wú)解析12.無(wú)解析13.無(wú)解析14.無(wú)解析15.無(wú)解析16.無(wú)解析17.無(wú)解析18.DNA在不同濃度的氯化鈉溶液中,溶解度不同。19.Fe(OH)3膠體離子帶正電荷,向陰極移動(dòng),從而使陰極附近聚集大量的紅褐色Fe(OH)3粒子而顏色逐漸加深。20.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白,以利于后續(xù)步驟的分離和純化。21.無(wú)解析22.緩沖溶液的作用是維持pH基本不變,在pH升高和降低的時(shí)候及時(shí)調(diào)節(jié)。23.血紅蛋白的每條肽鏈環(huán)繞一個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán),此基團(tuán)攜帶一個(gè)O2分子和一個(gè)CO2分子。24.裝填凝膠色譜柱時(shí),下端的尼龍管應(yīng)打開(kāi),防止裝填時(shí)有氣泡存在。25.相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道,路程長(zhǎng),移動(dòng)速度慢。26.在DNA復(fù)制過(guò)程中,起催化作用的是DNA聚合酶。27.引物是一小段DNA或RNA,它能與DNA母鏈的一段堿基序列互相配對(duì)。28.無(wú)解析29.考查酶的耐熱性特點(diǎn)。TaqDNA能耐高溫。30.經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,DNA單鏈共4條,含引物Ⅰ的DNA單鏈只有1條。31.PCR反應(yīng)與溫度關(guān)系密切,其中每次循環(huán)中變性、復(fù)性和延伸溫度不同,延伸溫度大約為72℃。32.血紅蛋白液離心后分四層,其中第二層是脂溶性物質(zhì)的沉淀層。33.DNA可用二苯胺試劑鑒定,DNA遇二苯胺試劑在加熱的情況下呈藍(lán)色。34.考查
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