標準解讀
GB/T 14926.57-2001 是一項由中國國家標準化管理委員會發(fā)布的國家標準,全稱為《實驗動物 犬細小病毒檢測方法》。這項標準詳細規(guī)定了在實驗動物領域中,針對犬細小病毒(Canine Parvovirus, CPV)的檢測方法和程序,旨在確保實驗結(jié)果的準確性和可比性,以及提升實驗動物管理和疾病防控水平。以下是該標準的主要內(nèi)容概覽:
標準適用范圍
本標準適用于實驗動物中犬細小病毒的檢測與診斷,主要針對使用實驗犬進行科研活動的機構(gòu),包括但不限于實驗室、獸醫(yī)院、動物繁育中心等。
檢測原理
標準推薦使用血清學方法和分子生物學方法(如聚合酶鏈反應,PCR)來檢測犬細小病毒。血清學方法通過檢測動物血清中對犬細小病毒的特異性抗體來判斷病毒感染狀態(tài);而分子生物學方法則直接檢測樣本中的病毒核酸,具有更高的靈敏度和特異性。
樣本要求
標準明確了適合用于檢測的樣本類型,通常包括新鮮或冷凍保存的糞便、組織樣本、以及血液樣本(主要用于血清學檢測)。樣本采集、處理及保存需嚴格遵循無菌操作,以防止污染和保持病毒活性。
檢測步驟
- 樣本預處理:根據(jù)樣本類型,采取相應的方法進行前處理,如糞便樣本需進行離心濃縮。
- 病毒抗原或核酸提取:從預處理后的樣本中提取犬細小病毒的抗原或核酸。
- 檢測實施:
- 血清學方法可能包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等,通過特異性抗體與病毒抗原的結(jié)合來判定。
- 分子生物學方法,尤其是PCR技術,通過擴增病毒特異性核酸序列來檢測病毒的存在。
- 結(jié)果判定:依據(jù)實驗中陽性與陰性對照的結(jié)果,判斷樣本中是否含有犬細小病毒及其感染狀況。
質(zhì)量控制
標準強調(diào)了實驗過程中必須實施嚴格的質(zhì)量控制措施,包括使用標準品進行校準、設立陰性和陽性對照,以及定期進行方法驗證和實驗室間比對,以確保檢測結(jié)果的可靠性和準確性。
報告要求
檢測報告應詳細記錄樣本信息、檢測方法、所用試劑與儀器、實驗過程、結(jié)果分析及結(jié)論等,以便于結(jié)果的審核和追蹤。
結(jié)論
該標準為實驗動物中犬細小病毒的檢測提供了科學、統(tǒng)一的技術指導,有助于提升實驗動物健康管理、疾病監(jiān)控及研究數(shù)據(jù)的可靠性,對促進動物福利和保障科研質(zhì)量具有重要意義。
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文檔簡介
ICS65.020.30B44中華人民共和國國家標準GB/Tr14926.57-2001實驗動物犬細小病毒檢測方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofcanineparvovirus(CpV)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實施中華民民共.和.發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局
GB/T14926.57-2001前本標準規(guī)定丁犬細小病毒的檢測方法。犬細小病毒性腸炎是犬的主要烈性傳染病之一,在我國犬群中廣泛流行,是普通級犬和SPF犬的必檢項目。因此增加該病毒的檢測方法。本標準由中華人民共和國科學技術部提出并歸口。本標準起草單位:中國實驗動物學會。本標準主要起草人:田克恭。
中華人民共和國國家標準實物GB/T14926.57-2001犬細小病毒檢測方法Lahorntoryanimal-MethodforexaminationofCanineparvovirus(CPV)范圍本標準規(guī)定了犬細小病毒(CPV)的檢測方法、試劑等本標準適用于犬CPV的檢測2引用標準下列標準所包含的條文·通過在本標準中引用而構(gòu)成為本標準的條文。本標淮出版時,所示版本均為有效。所有標準都會被修訂,使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。GB/T14926.50-2001實驗動物酶聯(lián)免疫吸附試驗GB/T14926.54-2001實驗動物血凝抑制試驗3原理根據(jù)免疫學原理,采用CPV抗原檢測犬血清中CPV抗體:或根據(jù)CPV在一定的條件下,能凝集豬紅細胞,這種凝集紅細胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理,檢測犬血清中CPV抗體。主要試劑和器材4.1試劑4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特異性抗原CPV感染FK81細胞·接種3~5d后.當病變達十十十~十十十十時收獲。凍融三次或超聲波處理后,低速離心去除細胞碎片,上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成EIISA抗原。4.1.1.2正??乖璅K81細胞凍融破碎后,經(jīng)低速離心去除細胞碎片而獲得的上清液4.1.2血凝素CPV接種FK81細胞,培養(yǎng)3~5d,當病變達十十十~十十十十時收獲。凍融三次或超聲波處理后·低速離心去除細胞碎片,上清液分裝后低溫保存。4.1.3陽性血清CPV實驗感染或自然感染的犬血清。4.1.4陰性血清無CPV感染、未經(jīng)
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