標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 21101-2007 動(dòng)物源性飼料中豬源性成分定性檢測(cè)方法 PCR方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，主要針對(duì)動(dòng)物源性飼料中是否含有豬源性成分進(jìn)行定性分析。該標(biāo)準(zhǔn)采用聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction, 簡(jiǎn)稱(chēng)PCR）技術(shù)作為檢測(cè)手段，通過(guò)特異性引物擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段來(lái)判斷樣品中是否存在豬的遺傳物質(zhì)。

根據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，首先需要對(duì)樣品進(jìn)行前處理，包括但不限于取樣、研磨等步驟，以確保能夠有效提取出DNA。接著是DNA的提取過(guò)程，這一步驟要求使用適當(dāng)?shù)姆椒◤奶幚砗蟮臉悠分蟹蛛x出高質(zhì)量的DNA，為后續(xù)的PCR反應(yīng)提供基礎(chǔ)材料。

PCR反應(yīng)體系構(gòu)建時(shí)，除了模板DNA外，還需要加入特定于豬線(xiàn)粒體DNA或核DNA序列設(shè)計(jì)的引物以及Taq DNA聚合酶等試劑。通過(guò)設(shè)定合適的循環(huán)參數(shù)，在熱循環(huán)儀上完成目標(biāo)片段的擴(kuò)增。如果樣品中含有豬源性成分，則會(huì)在電泳圖譜上觀察到預(yù)期大小的條帶；反之，則不會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物。

此標(biāo)準(zhǔn)還詳細(xì)列出了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意的操作細(xì)節(jié)和技術(shù)參數(shù)，比如PCR反應(yīng)條件的選擇、電泳條件設(shè)置等，并且提供了陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照的建議，用以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的可靠性和準(zhǔn)確性。此外，對(duì)于結(jié)果判定也給出了明確指導(dǎo)，幫助使用者準(zhǔn)確解讀實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。


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  • 2007-10-24 頒布
  • 2008-04-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

犐犆犛６５．１２０

犅４６

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２１１０１—２００７

動(dòng)物源性飼料中豬源性成分定性檢測(cè)

方法犘犆犚方法

犐犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳狆狅狉犮犻狀犲犱犲狉犻狏犲犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犻狀犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犪狋犲犱

犳犲犲犱狊狋狌犳犳狊—犘犆犚犿犲狋犺狅犱

２００７１０２４發(fā)布２００８０４０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書(shū)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

動(dòng)物源性飼料中豬源性成分定性檢測(cè)

方法犘犆犚方法

ＧＢ／Ｔ２１１０１—２００７

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京西城區(qū)復(fù)興門(mén)外三里河北街１６號(hào)

郵政編碼：１０００４５

ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ

ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｂ１６８．ｃｎ

電話(huà)：（０１０）５１２９９０９０、６８５２２００６

２００７年１２月第一版

書(shū)號(hào)：１５５０６６·１３０２８９

版權(quán)專(zhuān)有侵權(quán)必究

舉報(bào)電話(huà)：（０１０）６８５２２００６

書(shū)

犌犅／犜２１１０１—２００７

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中華人民共和國(guó)山東出入境檢驗(yàn)檢疫局、中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院、中華人民共

和國(guó)遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局、中華人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：高宏偉、梁成珠、王巖、于立新、徐寶梁、陳穎、吳亞君、宗卉、溫燕輝、曹際娟。

本標(biāo)準(zhǔn)首次發(fā)布。

Ⅰ

書(shū)

犌犅／犜２１１０１—２００７

動(dòng)物源性飼料中豬源性成分定性檢測(cè)

方法犘犆犚方法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物源性飼料中豬（Ｓｕｉｄａｅ）源性成分檢測(cè)的ＰＣＲ方法，該檢測(cè)方法的檢出限為

０．１％。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物源性飼料中豬源性成分的定性檢測(cè)。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１飼料采樣（ＧＢ／Ｔ１４６９９．１—２００５，ＩＳＯ６４９７：２００２，ＩＤＴ）

ＳＮ／Ｔ１１９３基因檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求

３術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

３．１

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)狆狅犾狔犿犲狉犪狊犲犮犺犪犻狀狉犲犪犮狋犻狅狀；犘犆犚

用于擴(kuò)增位于兩段已知序列之間ＤＮＡ（ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅａａｃｉｄ，脫氧核糖核酸）的方法。模板

ＤＮＡ經(jīng)過(guò)高溫變性成單鏈，在ＤＮＡ聚合酶和適宜的溫度下，兩條互不互補(bǔ)的寡核苷酸片段即引物分

別與模板ＤＮＡ兩條鏈上的一段互補(bǔ)序列發(fā)生退火，接著在ＤＮＡ聚合酶的催化下以４種ｄＮＴＰ（ｄｅ

ｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，脫氧核苷酸三磷酸）為底物，使退火引物得以延伸，如此反復(fù)變性、退火

和ＤＮＡ合成這一循環(huán)，使位于兩段已知序列之間的ＤＮＡ片段呈幾何倍數(shù)擴(kuò)增，經(jīng)２５個(gè)～３０個(gè)擴(kuò)增

循環(huán)，擴(kuò)增

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