實(shí)驗(yàn)細(xì)菌的人工培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)細(xì)菌的人工培養(yǎng)第一頁，共二十四頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馊斯づ囵B(yǎng)基的制作。了解細(xì)菌的接種方法分離培養(yǎng)方法——平板劃線法（混合菌液）了解細(xì)菌的生長(zhǎng)現(xiàn)象與代謝產(chǎn)物液體、固體、半固體培養(yǎng)基乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)硫化氫實(shí)驗(yàn)第二頁，共二十四頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)內(nèi)容瓊脂平板的制作

紫外線殺菌實(shí)驗(yàn)咽拭實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)皮膚消毒實(shí)驗(yàn)空氣中細(xì)菌計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)藥敏實(shí)驗(yàn)

常用消毒器械的介紹

第三頁，共二十四頁，2022年，8月28日

一、人工培養(yǎng)基的制備和種類1.制備原則2.制備程序3.常用培養(yǎng)基的分類

第四頁，共二十四頁，2022年，8月28日1.制備原則（1）適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)成分；（2）合適的酸堿度；（3）配制后經(jīng)滅菌使之無菌，方可應(yīng)用。第五頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.制備程序配料→熔化→測(cè)定及矯正PH→濾過→分裝→滅菌→備用第六頁，共二十四頁，2022年，8月28日3.常用培養(yǎng)基的分類（一）按物理性狀分：液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基:1.5～2.5%瓊脂

半固體培養(yǎng)基:0.3～0.5%瓊脂（二）按用途不同可分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基；營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基；選擇培養(yǎng)基；鑒別培養(yǎng)基；厭氧培養(yǎng)基。第七頁，共二十四頁，2022年，8月28日二.細(xì)菌接種法1.平板培養(yǎng)基接種法（操作）

2.斜面培養(yǎng)基接種法（示教）

3.液體培養(yǎng)基接種法（示教）

4.半固體培養(yǎng)基接種法（示教）

第八頁，共二十四頁，2022年，8月28日

1.平板培養(yǎng)基接種法（操作）密集劃線法分區(qū)劃線法

第九頁，共二十四頁，2022年，8月28日接種大腸桿菌接種枯草桿菌班級(jí)、姓名/學(xué)號(hào)、大腸枯草uv30’培養(yǎng)箱第十頁，共二十四頁，2022年，8月28日第十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日培養(yǎng)基的用途菌落

液體：增菌、純培養(yǎng)半固體：動(dòng)力、保存菌種固體平板：用于分離培養(yǎng)第十二頁，共二十四頁，2022年，8月28日三.細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象及代謝產(chǎn)物觀察（示教）1.細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象（1）液體培養(yǎng)基：混濁、菌膜和沉淀。（2）固體培養(yǎng)基：菌落和菌苔。（3）半固體培養(yǎng)基：沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線清晰，周圍培養(yǎng)基仍為透明，動(dòng)力陰性；穿刺線向周圍擴(kuò)散生長(zhǎng)，穿刺線模糊，整個(gè)培養(yǎng)基變成混濁，動(dòng)力陽性。2.細(xì)菌的代謝產(chǎn)物觀察（1）細(xì)菌對(duì)糖分解產(chǎn)物觀察（2）細(xì)菌對(duì)氨基酸分解產(chǎn)物觀察第十三頁，共二十四頁，2022年，8月28日（1）液體培養(yǎng)基均勻混濁生長(zhǎng)（葡萄球菌）菌膜形成（枯草芽孢桿菌）沉淀生長(zhǎng)（鏈球菌）第十四頁，共二十四頁，2022年，8月28日（2）固體培養(yǎng)基形成菌落和菌苔。觀察菌落的大小、形態(tài)、透明度、顏色、表面和邊緣情況及菌落周圍有無溶血環(huán)等。第十五頁，共二十四頁，2022年，8月28日（3）半固體培養(yǎng)基可用于觀察細(xì)菌有無動(dòng)力。痢疾志賀菌沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線清晰，周圍培養(yǎng)基仍為透明，動(dòng)力陰性；大腸埃希菌沿穿刺線向周圍擴(kuò)散生長(zhǎng)，穿刺線模糊，整個(gè)培養(yǎng)基變成混濁，動(dòng)力陽性。第十六頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細(xì)菌的代謝產(chǎn)物觀察（1）細(xì)菌對(duì)糖分解產(chǎn)物觀察

方法：將大腸埃希菌和傷寒沙門菌分別接種于葡萄糖、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，置37度24小時(shí)培養(yǎng)后觀察結(jié)果。結(jié)果：大腸埃希菌分解葡萄糖、乳糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣；傷寒沙門菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖。第十七頁，共二十四頁，2022年，8月28日糖發(fā)酵試驗(yàn)第十八頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細(xì)菌的代謝產(chǎn)物觀察（2）細(xì)菌對(duì)氨基酸分解產(chǎn)物觀察

靛基質(zhì)試驗(yàn)：分別接種大腸埃希菌和傷寒沙門菌于蛋白胨水培養(yǎng)基（含色氨酸）內(nèi)，置37度24小時(shí)培養(yǎng)后，然后沿管壁徐徐加入靛基質(zhì)試劑（對(duì)二甲基醛）數(shù)滴，靜置片刻，在兩液界面出現(xiàn)紅色環(huán)者為靛基質(zhì)試驗(yàn)陽性（大腸埃希菌），無紅色環(huán)者為陰性（傷寒沙門菌）。第十九頁，共二十四頁，2022年，8月28日Indol實(shí)驗(yàn)生化反應(yīng)——Indol實(shí)驗(yàn)第二十頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細(xì)菌的代謝產(chǎn)物觀察（2）細(xì)菌對(duì)氨基酸分解產(chǎn)物觀察硫化氫試驗(yàn)：將細(xì)菌接種于含有硫酸亞鐵或醋酸鉛的培養(yǎng)基（如雙糖培養(yǎng)基）中，若細(xì)菌分解培養(yǎng)基中含硫的氨基酸產(chǎn)生硫化氫，硫化氫可與硫酸亞鐵或醋酸鉛反應(yīng)，生成黑色的硫化鐵或硫化鉛沉淀，為硫化氫試驗(yàn)陽性（乙型副傷寒沙門菌），若細(xì)菌不能分解含硫的氨基酸則無黑色沉淀形成，為硫化氫試驗(yàn)陰（大腸埃希菌）。第二十一