GB/T 26436-2010禽白血病診斷技術

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T26436—2010

禽白血病診斷技術

Diagnostictechniquesforavianleukosis

2011-01-14發(fā)布2011-07-01實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T26436—2010

前言

本標準的附錄附錄附錄附錄附錄附錄為規(guī)范性附錄附錄附錄為資料性

A、B、C、D、E、F,G、H

附錄

。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標準由全國動物防疫標準化技術委員會歸口

(SC/TC181)。

本標準起草單位山東農(nóng)業(yè)大學中華人民共和國珠海出入境檢驗檢疫局華南農(nóng)業(yè)大學

:、、。

本標準主要起草人崔治中孫淑紅趙鵬楊素沙才華廖明曹偉勝

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T26436—2010

引言

禽白血病病毒為反轉錄病毒科的α反轉錄病毒屬可誘發(fā)雞不同組

(avianleukosisviruses;ALV),

織的良性和惡性腫瘤是雞群中除馬立克氏病病毒和禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒外的又一

,(MDV)(REV)

類重要的致腫瘤病毒

。

禽白血病是一類由相關的反轉錄病毒引起雞的不同組織良性和惡性腫瘤病的總稱隨發(fā)生

ALV。

腫瘤的主要細胞成分不同分別稱之為不同名稱的腫瘤可分為個亞群其中僅亞

,。ALVA~J10,A

群亞群亞群亞群亞群亞群病毒與雞相關亞群亞群亞群亞群亞群屬外

、B、C、D、E、J。A、B、C、D、J

源性與禽白血病的不同類型腫瘤發(fā)病相關亞群病毒基因組可完整地整合進感染雞的染色體

ALV,。E

基因組并穩(wěn)定地遺傳下去也可從中再復制出傳染性病毒顆粒因而稱之為內(nèi)源性病毒此外在一些

,,。,

雞的染色體的不同部位還可能帶有一些的基因組片段亞群的致病性很低或沒有致病

,ALV。EALV

性不屬于凈化對象但很多雞群中包括一些無特定病原雞群都可能帶有亞群內(nèi)源性它

,,(SPF)EALV,

的感染不會給雞群帶來不良影響但會干擾檢測

,。

目前該病對我國養(yǎng)雞業(yè)的危害很大在國際種禽貿(mào)易中外源性白血病病毒感染是最主要的檢測

,。,

對象之一

。

Ⅱ

GB/T26436—2010

禽白血病診斷技術

1范圍

本標準規(guī)定了病料中特異血清抗體和外源性的檢測方法

ALVALV。

本標準適用于判斷雞群或病料中是否有外源性感染

ALV。

2臨床癥狀和病理變化

主要引起感染雞在性成熟前后發(fā)生腫瘤死亡感染率和發(fā)病死亡率高低不等死亡率最高可

ALV,,

達一些雞感染后雖不發(fā)生腫瘤但可造成產(chǎn)蛋性能下降甚至免疫抑制

20%。,。

淋巴樣白血病是最為常見的經(jīng)典型白血病腫瘤腫瘤可見于肝脾法氏囊腎肺性腺心骨髓等

,、、、、、、、

器官組織腫瘤可表現(xiàn)為較大的結節(jié)狀塊狀或米粒狀或彌漫性分布細小結節(jié)腫瘤結節(jié)的大小和數(shù)

,(),。

量差異很大表面平滑切開后呈灰白色至奶酪色但很少有壞死區(qū)在成紅細胞性白血病成髓性細胞

,,,。、

白血病髓細胞白血病中多使肝脾腎呈彌漫性增大亞群感染主要誘發(fā)髓細胞樣腫瘤它最

、,、、。JALV,

常見的特征性變化主要為肝脾腫大或布滿無數(shù)的針尖針頭大小的白色增生性腫瘤結節(jié)在一些病例

、。

中還可能在胸骨和肋骨表面出現(xiàn)腫瘤結節(jié)

,。

單純蘇木精伊紅染色染色的病理組織切片觀察在診斷上有一定參考意義在表現(xiàn)為淋巴

(H.E)。

樣細胞腫瘤結節(jié)時要注意與馬立克氏病病毒和禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒誘發(fā)的腫瘤相

,(MDV)(REV)

區(qū)別在表現(xiàn)為髓樣細胞瘤時既要與誘發(fā)的類似腫瘤細胞相區(qū)別也要與嗜中性白細胞浸潤性

;,REV,

炎癥相區(qū)別如雞戊型肝炎病毒感染引起的肝局部炎癥最終的鑒別診斷以腫瘤組織中的病毒抗原檢

,。

測或病毒分離鑒定為最可靠依據(jù)

。

3病毒的分離培養(yǎng)檢測和鑒定

、

31試劑和儀器

.

311試劑

..

液體培養(yǎng)基胰酶磷酸鹽緩沖液抽提緩沖液

DMEM(pH7.2)、0.25%、(0.01mol/LPBS,pH7.2)、、

青霉素萬鏈霉素萬抗單抗抗單因子雞血清異硫氰酸熒光素

(10U/mL)、(10U/mL)、ALV、ALV、

標記的山羊抗小鼠抗體抗原酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測試劑盒聚合酶鏈

(FITC)IgG、ALV-p27(ELISA)、

反應試劑試劑生理鹽水氯化鈉無水乙醇分析純丙酮分析純甘油分

(PCR)、RT-PCR、(0.9%)、()、()、(

析純酒精碘酒細胞生長液含有胎牛血清或小牛血清的液體培養(yǎng)基細胞維持液

)、75%、、(5%DMEM)、

含有胎牛血清或小牛血清的液體培養(yǎng)基大腸桿菌蛋白酶冷乙醇乙酸

(1%DMEM)、(TG1)、K、70%、

鈉分析純?nèi)燃淄榉治黾儺愇齑挤治黾儺惐挤治黾兗訕泳彌_液瓊