GB/T 27521-2011豬流感病毒核酸RT-PCR檢測(cè)方法

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T27521—2011

豬流感病毒核酸RT-PCR檢測(cè)方法

RT-PCRassayforswineinfluenzavirusnucleicacid

2011-11-21發(fā)布2012-03-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T27521—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)

:,,

察所

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人喬傳玲韓雪清楊煥良劉業(yè)兵陳艷吳紹強(qiáng)陳化蘭林祥梅辛?xí)怨庵熘形?/p>

:、、、、、、、、、、

王慧煜劉建李建梅琳王伊琴徐彪阮周曦寧宜寶薄清如秦智鋒林志雄

、、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T27521—2011

豬流感病毒核酸RT-PCR檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬流感病毒核酸檢測(cè)方法的技術(shù)要求

RT-PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢測(cè)方法適用于檢測(cè)豬肺臟組織鼻腔及氣管分泌物和這些采集樣品培養(yǎng)

RT-PCR、

物中的豬流感病毒核酸

。

2縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethypyrocarbonate)

脫氧核苷酸三磷酸

dNTP:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙錠

EB:(ethidiumbromide)

莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶

M-MLVRT:(moloneymurineleukemiavirusreversetran-

scriptase)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

酶抑制劑

RNAaseinhibitor:RNA

反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

RT-PCR:-(reverse-transcriptionpolymerasechainreaction)

無(wú)特定病原體

SPF:(specificpathogenfree)

TaqTaq聚合酶

DNApolymerase:DNA

3儀器

31儀

.PCR。

32臺(tái)式低溫高速離心機(jī)

.。

33電泳儀

.。

34電泳槽

.。

35冰箱

.。

36凝膠成像系統(tǒng)

.。

37微量移液器

.。

38水浴鍋

.。

4試劑

41提取試劑或其他商品化的提取試劑

.LSTRIzolRNARNA。

42氯仿異丙醇無(wú)水乙醇

.、、。

43瓊脂糖凝膠見(jiàn)附錄中

.1.2%,A