標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 27537-2011 動物流感檢測 A型流感病毒分型基因芯片檢測操作規(guī)程》是中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會發(fā)布的一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn),主要針對A型流感病毒的檢測方法進(jìn)行了規(guī)范。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了使用基因芯片技術(shù)對A型流感病毒進(jìn)行快速準(zhǔn)確鑒定的操作流程。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容,整個檢測過程包括樣品采集、核酸提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增以及最終的基因芯片雜交分析等多個步驟。首先,在樣品處理階段,需要從疑似感染動物體內(nèi)獲取樣本,并通過適當(dāng)?shù)姆椒兓玫礁哔|(zhì)量的病毒RNA。接下來是將提取到的RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,并利用特異性引物對其進(jìn)行PCR擴(kuò)增以富集目標(biāo)序列。隨后,將擴(kuò)增產(chǎn)物與預(yù)設(shè)好的基因芯片進(jìn)行雜交反應(yīng),通過熒光掃描等手段讀取信號強(qiáng)度來判斷是否存在特定類型的A型流感病毒及其亞型信息。
此外,《GB/T 27537-2011》還規(guī)定了一系列質(zhì)量控制措施和技術(shù)參數(shù)要求,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。比如對于所使用的試劑盒、儀器設(shè)備以及實(shí)驗(yàn)室環(huán)境都有明確的規(guī)定;同時強(qiáng)調(diào)了在實(shí)際操作過程中需要注意的安全防護(hù)事項(xiàng),防止生物污染和交叉感染等問題的發(fā)生。
該標(biāo)準(zhǔn)適用于各類從事動物流感監(jiān)測工作的機(jī)構(gòu)和個人參考執(zhí)行,旨在提高我國對A型流感病毒感染狀況的監(jiān)控能力,為及時采取防控措施提供科學(xué)依據(jù)。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2011-11-21 頒布
- 2012-03-01 實(shí)施
文檔簡介
ICS11220
B41.
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T27537—2011
動物流感檢測A型流感病毒分型基因
芯片檢測操作規(guī)程
Animalinfluenzadetection—ProtocolofDNAmicroarrayexamination
forinfluenzaAvirussubtypes
2011-11-21發(fā)布2012-03-01實(shí)施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
GB/T27537—2011
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出
。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口
(SAC/TC181)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國獸醫(yī)藥品監(jiān)
:、、
察所
。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人韓雪清劉伯華李建林祥梅王慧煜劉建陳茹侯義宏劉業(yè)兵賈廣樂
:、、、、、、、、、、
吳紹強(qiáng)梁成珠秦智鋒寧宜寶薄清如王伊琴
、、、、、。
Ⅰ
GB/T27537—2011
動物流感檢測A型流感病毒分型基因
芯片檢測操作規(guī)程
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了型流感病毒分型基因芯片檢測的操作規(guī)程
A。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于口岸樣品中型流感病毒全部亞型的篩查
A(H1~H16,N1~N9)。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
GB/T6682
3縮略語
下列縮略語適用于本文件
。
和質(zhì)控探針和
ctr1、ctr2ctr3:1、23(control1、control2andcontrol3)
焦碳酸二乙酯
DEPC:(diethylpyrocarbonate)
脫氧核苷酸三磷酸
dNTP:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)
磷酸鹽緩沖鹽水
PBS:(phosphatebuffersolution)
核糖核酸
RNA:(ribonucleicacid)
反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)
RT-PCR:(reversetranscriptionpolymerasechainreaction)
十二烷基磺酸鈉
SDS:(sodiumdodecylsulfate)
氯化鈉檸檬酸鈉緩沖液
SSC:/(sodiumchloride-sodiumcitratebuffer)
羧基四甲基若丹明
TAMRA:(carboxytetramethylrhodamine)
4主要試劑和儀器
41主要試劑
.
411試驗(yàn)用水
..
蒸餾水按照三級用水除另有規(guī)定外所用生化試劑均為分析純
,GB/T6682,,,。
412提取試劑
..
試劑等或商品化的病毒提取試劑
TrizolRNA。
413A型流感病毒多重不對稱RT-PCR擴(kuò)增引物和探針的合成
..
特異性引物和探針參見附錄探針和引物合成后采用無酶的水參見附錄分別溶解
(A)。
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