標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 30990-2014 溶菌酶活性檢測(cè)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),旨在提供一種科學(xué)、準(zhǔn)確的方法來(lái)測(cè)定溶菌酶的活性。該標(biāo)準(zhǔn)適用于食品工業(yè)、醫(yī)藥領(lǐng)域以及其他需要對(duì)溶菌酶活性進(jìn)行定量分析的情況。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),溶菌酶活性的測(cè)定基于其能夠分解微球菌細(xì)胞壁中的肽聚糖特性,通過(guò)測(cè)量在一定條件下單位時(shí)間內(nèi)溶液濁度的變化來(lái)間接反映溶菌酶的活性大小。具體操作步驟包括樣品處理、酶液制備、反應(yīng)體系建立以及吸光度測(cè)定等幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。其中,選擇合適的底物(如微球菌懸液)對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要;同時(shí),在設(shè)定的溫度和pH值下進(jìn)行反應(yīng)也是保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性不可或缺的一環(huán)。

此外,《GB/T 30990-2014》還詳細(xì)規(guī)定了如何計(jì)算溶菌酶活性單位(U),即每分鐘內(nèi)使底物溶液吸光度下降特定值所需的酶量定義為一個(gè)單位。為了確保測(cè)試結(jié)果具有良好的重復(fù)性和可比性,該文件還提出了關(guān)于試劑純度、儀器校準(zhǔn)等方面的要求,并建議實(shí)驗(yàn)室間定期開(kāi)展比對(duì)試驗(yàn)以驗(yàn)證各自方法的有效性。


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  • 2014-07-24 頒布
  • 2015-03-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS07080

G60.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T30990—2014

溶菌酶活性檢測(cè)方法

Determinationoftheactivityoflysozyme

2014-07-24發(fā)布2015-03-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

溶菌酶活性檢測(cè)方法

GB/T30990—2014

*

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽(yáng)區(qū)和平里西街甲號(hào)

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線(xiàn)

:400-168-0010

年月第一版

201412

*

書(shū)號(hào)

:155066·1-50531

版權(quán)專(zhuān)有侵權(quán)必究

GB/T30990—2014

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)生化檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位深圳市計(jì)量質(zhì)量檢測(cè)研究院中國(guó)測(cè)試技術(shù)研究院珠海出入境檢驗(yàn)檢疫局

:、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人賴(lài)曉芳譚和平林霖孫登峰賴(lài)心田蘭全學(xué)楊國(guó)武李意李淅潘蘭芳

:、、、、、、、、、、

楊澤莫秋華

、。

GB/T30990—2014

溶菌酶活性檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了溶菌酶活性檢測(cè)方法

本標(biāo)準(zhǔn)適用于生化試劑不同工業(yè)產(chǎn)品及其原料中溶菌酶活性的測(cè)定

、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

31

.

溶菌酶lysozyme

一種葡萄糖苷酶通過(guò)其肽鏈中的和殘基構(gòu)成的活性部位催化水解細(xì)菌細(xì)胞壁中的

,Glu35Asp52

乙酰胞壁酸的與乙酰氨基葡糖的之間的糖苷鍵從而迅速溶解細(xì)菌細(xì)胞壁中的多糖

N-C1N-C4β-,

成分

。

注又名球蛋白胞壁質(zhì)酶乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶

:G、、N-。

32

.

溶菌酶活性lysozymeactivity

在磷酸鹽緩沖液中以溶壁微球菌為底物于處每分鐘使吸光

25℃,0.1mol/L(pH6.2),,450nm

度值下降時(shí)所需的酶量活性單位為或或

0.001。U/mgU/gU/mL。

4原理

本檢測(cè)方法以溶壁微球菌Micrococcuslsodeikticus為反應(yīng)底物使用溶菌酶催化水解其細(xì)胞

(y),

壁細(xì)菌因失去細(xì)胞壁的保護(hù)無(wú)法維持細(xì)胞內(nèi)滲透壓平衡而裂解死亡導(dǎo)致菌懸液的濁度降低通過(guò)紫

,,,

外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定在處的吸光光度值的變化并換算出樣品酶活性單位

—450nm。

5儀器設(shè)備及器具

51生物安全柜

.。

52滅菌鍋

.。

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