GB/T 31790-2015馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T31790—2015

馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPotatospindletuberviroid

2015-07-03發(fā)布2015-11-27實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

GB/T31790—2015

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20158

*

書號

:155066·1-49510

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T31790—2015

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任

。。

本標準由全國植物檢疫標準化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中國檢驗檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國黑龍江出入境檢驗檢疫局中華人民

:、、

共和國廈門出入境檢驗檢疫局中華人民共和國福建出入境檢驗檢疫局黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物脫毒

、、

苗木研究所中華人民共和國甘肅出入境檢驗檢疫局中華人民共和國山東出入境檢驗檢疫局

、、。

本標準主要起草人張永江劉洪義劉忠梅辛言言陳慧陳紅運馬潔呂典秋沈建國廖富榮

:、、、、、、、、、、

文朝慧張成標吳興海

、、。

Ⅰ

GB/T31790—2015

馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規(guī)定了基于寄主植物癥狀及基因組特征的馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

。

本標準適用于可能攜帶有馬鈴薯紡錘塊莖類病毒的馬鈴薯組織材料的檢疫鑒定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

馬鈴薯種薯

GB/T18133

進境馬鈴薯種薯檢疫操作規(guī)程

SN/T2481

3儀器設(shè)備用具及試劑

、

31儀器設(shè)備

.

電子分析天平垂直電泳槽小型離心機臺式冷凍離心機普通儀實時熒光

(0.001g)、、、、PCR、PCR

儀電泳系統(tǒng)計凝膠成像系統(tǒng)冰箱超凈工作臺超低溫冰箱高壓滅菌鍋制冰機

、、pH、、4℃、、-80℃、、、

渦旋振蕩器微波爐等

、。

32用具

.

可調(diào)移液器吸頭離心管及研

(2.5μL、10μL、20μL、100μL、1000μL)、、(0.2mL、0.5mL、1.5mL)

缽等

。

33試劑

.

除有特殊說明外所有試驗用試劑均為分析純或生化試劑

,。

試劑見附錄試劑見附錄實時熒光試劑見附錄

RB;RT-PCRC;RT-PCRD。

4檢測方法

41樣品制備

.

411脫毒苗制樣對脫毒苗要逐株制樣在無菌條件下從脫毒苗上剪下長的莖段放于小研缽

..:,,2cm,

中用于提取核酸并進行后續(xù)檢測把取樣的脫毒苗放回試管中封好管口并編號以便根據(jù)檢測結(jié)果決

,;,,

定取舍

。

412種薯制樣在隔離種植前對種薯塊莖進行癥狀檢查對有明顯癥狀的薯塊直接取癥狀部位

..:,,0.2g~

用于核酸提取并進行后續(xù)檢測對于無明顯癥狀的薯塊進行隔離種植

0.5g;。

413隔離種植植株制樣種薯隔離種植按