標準解讀
《GB/T 31790-2015 馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法》是一項國家標準,主要針對馬鈴薯紡錘塊莖類病毒(PSTVd)的檢測和鑒定提供了技術指導。該標準適用于進出口、國內(nèi)調(diào)運以及生產(chǎn)過程中馬鈴薯及其繁殖材料中PSTVd的檢疫鑒定工作。
標準詳細描述了從樣品采集到最終結(jié)果分析的一系列步驟。首先,在樣品采集方面,明確了不同用途下應選擇的樣本類型及數(shù)量要求,確保能夠代表整體情況的同時減少誤檢率。接著,對于樣品處理,規(guī)定了具體的前處理流程,包括但不限于清洗、切割等操作,目的是為了提高后續(xù)檢測環(huán)節(jié)的效果。
在檢測方法上,《GB/T 31790-2015》推薦使用RT-PCR法作為主要手段來識別PSTVd的存在與否。此方法通過反轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA后進行擴增反應,再利用特定引物對目標片段進行特異性擴增,從而實現(xiàn)病毒核酸的定性檢測。此外,還介紹了其他輔助性或替代性的檢測技術,如電鏡觀察、免疫學檢測等,供實驗室根據(jù)實際情況選用。
最后,標準中也給出了結(jié)果判定的原則與報告編寫的要求。陽性結(jié)果意味著樣品中含有PSTVd,需按照相關法律法規(guī)采取相應措施;陰性則表示未檢出該病毒。同時強調(diào)了實驗記錄的重要性,要求完整準確地記錄每一步驟的信息,以保證數(shù)據(jù)可追溯性。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2015-07-03 頒布
- 2015-11-27 實施




文檔簡介
ICS6502001
B16..
中華人民共和國國家標準
GB/T31790—2015
馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofPotatospindletuberviroid
2015-07-03發(fā)布2015-11-27實施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布
中國國家標準化管理委員會
中華人民共和國
國家標準
馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法
GB/T31790—2015
*
中國標準出版社出版發(fā)行
北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號
2(100029)
北京市西城區(qū)三里河北街號
16(100045)
網(wǎng)址
:
服務熱線
:400-168-0010
年月第一版
20158
*
書號
:155066·1-49510
版權(quán)專有侵權(quán)必究
GB/T31790—2015
前言
本標準按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別這些專利的責任
。。
本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標準起草單位中國檢驗檢疫科學研究院中華人民共和國黑龍江出入境檢驗檢疫局中華人民
:、、
共和國廈門出入境檢驗檢疫局中華人民共和國福建出入境檢驗檢疫局黑龍江省農(nóng)業(yè)科學院植物脫毒
、、
苗木研究所中華人民共和國甘肅出入境檢驗檢疫局中華人民共和國山東出入境檢驗檢疫局
、、。
本標準主要起草人張永江劉洪義劉忠梅辛言言陳慧陳紅運馬潔呂典秋沈建國廖富榮
:、、、、、、、、、、
文朝慧張成標吳興海
、、。
Ⅰ
GB/T31790—2015
馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法
1范圍
本標準規(guī)定了基于寄主植物癥狀及基因組特征的馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法
。
本標準適用于可能攜帶有馬鈴薯紡錘塊莖類病毒的馬鈴薯組織材料的檢疫鑒定
。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法
GB/T6682
馬鈴薯種薯
GB/T18133
進境馬鈴薯種薯檢疫操作規(guī)程
SN/T2481
3儀器設備用具及試劑
、
31儀器設備
.
電子分析天平垂直電泳槽小型離心機臺式冷凍離心機普通儀實時熒光
(0.001g)、、、、PCR、PCR
儀電泳系統(tǒng)計凝膠成像系統(tǒng)冰箱超凈工作臺超低溫冰箱高壓滅菌鍋制冰機
、、pH、、4℃、、-80℃、、、
渦旋振蕩器微波爐等
、。
32用具
.
可調(diào)移液器吸頭離心管及研
(2.5μL、10μL、20μL、100μL、1000μL)、、(0.2mL、0.5mL、1.5mL)
缽等
。
33試劑
.
除有特殊說明外所有試驗用試劑均為分析純或生化試劑
,。
試劑見附錄試劑見附錄實時熒光試劑見附錄
RB;RT-PCRC;RT-PCRD。
4檢測方法
41樣品制備
.
411脫毒苗制樣對脫毒苗要逐株制樣在無菌條件下從脫毒苗上剪下長的莖段放于小研缽
..:,,2cm,
中用于提取核酸并進行后續(xù)檢測把取樣的脫毒苗放回試管中封好管口并編號以便根據(jù)檢測結(jié)果決
,;,,
定取舍
。
412種薯制樣在隔離種植前對種薯塊莖進行癥狀檢查對有明顯癥狀的薯塊直接取癥狀部位
..:,,0.2g~
用于核酸提取并進行后續(xù)檢測對于無明顯癥狀的薯塊進行隔離種植
0.5g;。
413隔離種植植株制樣種薯隔離種植按
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