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§3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)1978年7月25日世界首例試管嬰兒第一個(gè)試管嬰兒于1978年7月25日在英國(guó)的奧爾德姆市醫(yī)院誕生,她的名字叫路易絲.布朗。路易絲.布朗的母親梅.布朗因輸卵管阻塞而不能生育。
醫(yī)生從梅.布朗(時(shí)年31歲)體內(nèi)提取卵子,再取她丈夫(時(shí)年38歲)的精液,經(jīng)處理在體外使卵子受精,受精卵分裂形成16細(xì)胞胚后重新植入梅.布朗的子宮內(nèi)。9個(gè)多月后就生下了路易絲.布朗。1988年3月10日我國(guó)首例試管嬰兒誕生著名婦產(chǎn)科專家張麗珠教授與中國(guó)首例試管嬰兒根據(jù)資料回答下列問(wèn)題:1.試管嬰兒技術(shù)包括哪些操作步驟?(體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植)2.試管嬰兒培育和母親正常懷孕的過(guò)程有何異同?相同之處:都通過(guò)有性生殖產(chǎn)生;都要在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成胎兒。不同之處:受精作用在體外,并在體外發(fā)育成早期胚胎進(jìn)行胚胎移植。一、從試管牛說(shuō)起牛的生育率雖然很低,但是牛的卵母細(xì)胞卻相當(dāng)?shù)亩?,其卵巢中卵母?xì)胞數(shù)目要比一生中排卵數(shù)多1000倍左右公牛產(chǎn)生的精子數(shù)目就更多了偉大設(shè)想誕生了試管動(dòng)物技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。精子卵子受精卵早期胚胎移植子宮個(gè)體試管動(dòng)物技術(shù)過(guò)程:第一步:體外受精
第二步:胚胎的早期培養(yǎng)第三步:胚胎移植快速繁殖動(dòng)物優(yōu)良品種目的:試管動(dòng)物技術(shù)1982年世界首例試管牛犢問(wèn)世實(shí)現(xiàn)良種??焖俅罅糠敝呈紫纫龅氖?/p>
和
的培養(yǎng)。體外受精早期胚胎主要包括
、
和
等幾個(gè)主要步驟。概念:采取雌性動(dòng)物的
和雄性動(dòng)物的
,使其在
受精。二、體外受精卵母細(xì)胞精子體外卵母細(xì)胞的采集精子的獲取受精a.如何使雌性動(dòng)物排出更多的卵子?b.對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠、兔和小家畜豬、羊如何采集卵子?c.對(duì)于大家畜或大型動(dòng)物如何采集卵子?d.采集的卵子是否馬上可以受精?閱讀P69、70思考以下問(wèn)題:1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)采用的主要方法是給供體注射
,使其排出更多的卵子,之后從
中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。促性腺激素輸卵管a.如何使雌性動(dòng)物排出更多的卵子?超數(shù)排卵處理b.對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠、兔和小家畜豬、羊如何采集卵子?對(duì)不同動(dòng)物,采集卵母細(xì)胞的方法不同。1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)大家畜或大型動(dòng)物,如牛,卵細(xì)胞的采集:從屠宰場(chǎng)已屠宰母畜的
中采集卵母細(xì)胞,也可以借助
、
或
等工具,直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。卵巢超聲波(B超)探測(cè)儀內(nèi)窺鏡腹腔鏡1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)c.對(duì)于大家畜或大型動(dòng)物如何采集卵子?d.采集的卵子是否馬上可以受精?采集的卵母細(xì)胞,都要在體外經(jīng)
后,才能與
精子結(jié)合完成受精。人工培養(yǎng)成熟獲能閱讀P70、71思考以下問(wèn)題:a.精子的采集有哪些方法?b.體外受精需要哪些前處理?2、精子細(xì)胞的采集和獲能2、精子細(xì)胞的采集和獲能(1)采集方法:假陰道法手握法電刺激法a.精子的采集有哪些方法?
大家畜或大型動(dòng)物豬、犬等體型較小,易于控制的動(dòng)物野生或經(jīng)濟(jì)動(dòng)物此外,嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可在處死后從附睪尾收集精液。2、精子細(xì)胞的采集和獲能(2)體外精子獲能的方法:培養(yǎng)法:化學(xué)誘導(dǎo)法:如:嚙齒動(dòng)物、家兔和豬等如:牛、羊等放入人工配制的獲能液中放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中b.體外受精需要哪些前處理?3.受精獲能溶液專用受精溶液獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子,一般情況下在或中完成受精過(guò)程。CO2培養(yǎng)箱三、胚胎的早期培養(yǎng)復(fù)習(xí):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件是什么?糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、血清等動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液成分?精子和卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分:有機(jī)鹽、無(wú)機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等三、胚胎的早期培養(yǎng)動(dòng)物胚胎培養(yǎng)液成分與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液成分比較項(xiàng)目動(dòng)物胚胎培養(yǎng)液動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液鹽類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)調(diào)節(jié)物質(zhì)特有物質(zhì)無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽氨基酸、核苷酸維生素、激素血清無(wú)機(jī)鹽、微量元素促生長(zhǎng)因子糖、氨基酸血清、血漿三、胚胎的早期培養(yǎng)培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時(shí),可將其取出向受體移植或冷動(dòng)保存三、胚胎的早期培養(yǎng)不同動(dòng)物胚胎移植時(shí)間不同牛、羊:小鼠、家兔:試管嬰兒:桑椹胚或囊胚階段可在更早的階段移植8~16個(gè)細(xì)胞階段注:胚胎發(fā)育的主要場(chǎng)所是母體為充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母細(xì)胞,不妨將屠宰場(chǎng)和“胚胎工廠”合建。這樣屠宰場(chǎng)的產(chǎn)品就不僅是鮮肉,還會(huì)生產(chǎn)出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料,你看這個(gè)想法可行嗎?奇思妙想目前,從屠宰場(chǎng)廢棄的卵巢中,每個(gè)卵巢平均可采集10枚左右可用卵母細(xì)胞,經(jīng)體外培養(yǎng)成熟和受精后約可獲4枚可用的胚胎,經(jīng)過(guò)移植給受體母牛,最終可得到1~2頭犢牛。牛體外受精胚胎的工廠化生產(chǎn)已經(jīng)成為可能。存放條件?采集良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場(chǎng)采集卵巢中的卵母細(xì)胞“試管?!惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖思考:試管牛的產(chǎn)生屬于克隆嗎?早期胚胎胚胎移植C代孕母體D新個(gè)體(與B遺傳物質(zhì)相同)克隆動(dòng)物的培育過(guò)程A雌性動(dòng)物卵子去核細(xì)胞質(zhì)取核B動(dòng)物體細(xì)胞核移植顯微注射重組細(xì)胞有性生殖
無(wú)性生殖核移植技術(shù)、胚胎移植遵循
不遵循體外受精胚胎移植試管動(dòng)物克隆動(dòng)物發(fā)育起點(diǎn)生殖方式技術(shù)手段遺傳物質(zhì)遺傳規(guī)律比較試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物來(lái)自2個(gè)個(gè)體主要來(lái)自核供體
受精卵重組細(xì)胞胚胎移植采集卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)受體牛小結(jié)(時(shí)期:)
1)超數(shù)排卵(試劑)
2)活體取卵(儀器)
3)從屠宰的卵巢取卵方法①②③(方法,試劑)(試劑)(培養(yǎng)條件、目的階段)成熟的卵子獲能的精子MII中期方法1、關(guān)于牛體外受精及胚胎的工廠化生產(chǎn)的敘述,正確的是A.精子和卵細(xì)胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宮B.采集的卵母細(xì)胞應(yīng)立即與精子共同放入培養(yǎng)液才能形成受精卵C.成熟的卵細(xì)胞與收集來(lái)的精子相遇形成受精卵,需培養(yǎng)到一定階段才可移植D.體外受精胚胎的工廠化生產(chǎn)即胚胎發(fā)育和受精過(guò)程只需在體外進(jìn)行2、下列現(xiàn)代生物技術(shù)成果獲得必須通過(guò)胚胎移植的是
A.轉(zhuǎn)基因良種雞B.重組酵母乙肝疫苗
C.單克隆抗體D.試管嬰兒C
D
鞏固練習(xí)3、采集的卵母細(xì)胞,在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后,才能與獲能的精子受精,以下原因不正確的是A.卵子從輸卵管中沖出也要經(jīng)歷類似精子獲能的過(guò)程B.動(dòng)物排出的卵子成熟程度不同C.體外人工培養(yǎng)至減數(shù)分裂第二次分裂中期時(shí)才成熟D.沖出的卵子還需要培養(yǎng)一段時(shí)間由小變大D
4、下列關(guān)于滋養(yǎng)層細(xì)胞的敘述,不正確的是 A.囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎盤和胎膜B.可以用滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析性別鑒定C.囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞就是將來(lái)原腸胚的外胚層D.滋養(yǎng)層細(xì)胞沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列C
5、下列有關(guān)胚胎工程的敘述,正確的是
A.“試管動(dòng)物”的生殖方式屬于無(wú)性生殖
B.卵裂球時(shí)期每一個(gè)細(xì)胞的體積比受精卵大
C.通過(guò)胚胎移植技術(shù)可充分發(fā)揮良種母畜的繁殖潛力
D.對(duì)某一胚胎的干細(xì)胞移植,產(chǎn)生的動(dòng)物中雄性和雌性的概率各占1/2C
6、下列關(guān)于胚胎工程的敘述,正確的是( )
A.通過(guò)胚胎體外培養(yǎng)可直接獲得新生兒
B.超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定的激素
C.胚胎移植中的受體與供體必須都為優(yōu)良品種
D.受體母畜需要遺傳性狀優(yōu)良的品種,供體母畜可用遺傳性狀一般的品種B
7、“試管嬰兒”技術(shù)是通過(guò)將不孕夫婦的精子和卵細(xì)胞取出在試管中完成受精,并在試管中培養(yǎng)受精卵使其發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段,再將胚胎移入女性子宮內(nèi)發(fā)育成胎兒。它不僅使一部分不能生育的男女重新獲得了生育的機(jī)會(huì),也為人類的優(yōu)生開辟了新的途徑。據(jù)此回答:(1)“試管嬰兒”技術(shù)在生物學(xué)上所依據(jù)的原理是
A.有性生殖 B.組織培養(yǎng)
C.克隆技術(shù) D.基因工程(2)“試管嬰兒”的形成用到下列哪些技術(shù)?
(填序號(hào))①體外培養(yǎng)②人工授精 ③胚胎移植④核移植A①②③8、下圖是培育能產(chǎn)生凝血因子牛的過(guò)程示意圖,回答相關(guān)問(wèn)題:(1)為能從良種母牛體內(nèi)一次取得多枚卵子,可以采用
的方法。據(jù)報(bào)道,這種技術(shù)已經(jīng)被濫用于人類生育中,從而出現(xiàn)許多人工“多胞胎”,這種技術(shù)帶來(lái)的危害之一是
。(2)在過(guò)程③中,當(dāng)一個(gè)精子進(jìn)入卵細(xì)胞后會(huì)激發(fā)卵子發(fā)生反應(yīng),如透明帶反應(yīng)等,其意義是
。過(guò)程⑥涉及的技術(shù)是
。注射促性腺激素影響胎兒的健康發(fā)育、對(duì)孕婦的身體不利等防止多精入卵胚胎移植1)進(jìn)行小鼠胚胎工程時(shí),首先在光控周期下飼養(yǎng)成年雌鼠,并注射促性腺激素,目的是
。然后從雌鼠輸卵管中取出卵子,在一定條件下培養(yǎng)成熟;并從雄鼠附睪中取出精子,在一定條件下培養(yǎng)一段時(shí)間,目的是
。再在37℃,5%CO2條件下,精卵共同作用4h,沖洗后繼續(xù)培養(yǎng)。定時(shí)在顯微鏡下觀察胚胎的變化,第5天可以看到胚胎發(fā)生收縮,細(xì)胞間隙擴(kuò)大,接著胚胎內(nèi)部出現(xiàn)裂隙,這時(shí)胚胎已經(jīng)進(jìn)入_____期。促進(jìn)超數(shù)排卵使精子獲能囊胚9.回答下列問(wèn)題2)如果體外受精后,在精原
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