標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 4789.32-2002 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群的快速檢測(cè)》是中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)之一,專門針對(duì)食品中大腸菌群的快速檢測(cè)方法進(jìn)行了規(guī)定。該標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中的大腸菌群數(shù)量測(cè)定,通過采用特定的培養(yǎng)基和操作流程來實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)細(xì)菌的高效識(shí)別與計(jì)數(shù)。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),檢測(cè)過程主要包括樣品處理、接種培養(yǎng)以及結(jié)果判讀三個(gè)主要步驟。首先,在樣品準(zhǔn)備階段,需要按照不同類型的食品采取相應(yīng)的預(yù)處理措施,確保能夠準(zhǔn)確地從待測(cè)樣品中提取出足夠量的微生物樣本。接著是接種環(huán)節(jié),將經(jīng)過適當(dāng)稀釋后的樣品溶液均勻涂抹于選擇性培養(yǎng)基上,并在指定條件下進(jìn)行培養(yǎng)。這里所使用的培養(yǎng)基具有促進(jìn)大腸菌生長(zhǎng)而抑制其他非目標(biāo)微生物繁殖的特點(diǎn)。最后一步是對(duì)培養(yǎng)后的平板進(jìn)行觀察分析,依據(jù)形成菌落的數(shù)量及特征來判斷樣品中是否含有超標(biāo)的大腸菌群,并據(jù)此估算其大致含量。

整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中需要注意保持無菌操作環(huán)境,避免外來污染影響測(cè)試準(zhǔn)確性;同時(shí)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)給出的具體參數(shù)執(zhí)行每一步驟,比如溫度控制、時(shí)間設(shè)定等都是保證結(jié)果可靠性的關(guān)鍵因素。此外,對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照的設(shè)置也是必不可少的,它們可以幫助驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的有效性和重復(fù)性。


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  • 2002-06-13 頒布
  • 2002-10-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

IcS.07.100.30C53中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789.32-2002食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群的快速檢測(cè)Microbiologicalexaminationforfoodhygieneidetectionofcoliformbacteriarapid2002-06-13發(fā)布2002-10-01實(shí)施中華人民共和發(fā)布國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T4789.32-2002目次前言·····范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語(yǔ)和定義4原理………5試劑和培養(yǎng)基6設(shè)設(shè)備和器材7檢驗(yàn)程序…8樣品的制備9大腸菌群的MPN計(jì)數(shù)10大腸菌群的菌落計(jì)數(shù)……附錄A(規(guī)范性附錄)大腸菌群最可能數(shù)(MPN)檢索表

GB/T4789.32-2002本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中大腸菌群的快速檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定使用的培養(yǎng)基MUGal肉湯中的4-甲基傘形酮-P-D-半乳糖替與美國(guó)聯(lián)邦法規(guī)40,第141節(jié).21款(CodeofFederalRegulations40,Part141·21)規(guī)定的檢驗(yàn)大腸菌群所用的MI瓊脂的主要成分(4-甲基傘形酮-B-D-半乳糖苷)是同一物質(zhì):本標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于大腸菌群的菌落計(jì)數(shù),參考了ISO4832:1991(E)《微生物學(xué)-大腸菌群菌落計(jì)數(shù)法通則》(Microbiology-Generalguidancefortheenumerationofcoliforms-colonycounttechnique)。本標(biāo)準(zhǔn)中的附錄A是規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位:鎮(zhèn)江出入境檢驗(yàn)檢疫局、中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)、鎮(zhèn)江質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:甄宏太、李平、張秀春、閔繼福。

GB/T4789.32-2002大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸或醛,并產(chǎn)生β半乳糖苷酶需氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。該菌主要來源于人畜糞便·故以此作為糞便污染指標(biāo)來評(píng)價(jià)食品的衛(wèi)生質(zhì)量.推斷食品中有否污染腸道致病苗的可能。如果大腸菌群存在于食品中·表明未作有效的消毒處理、加工后保存條件不良或消毒后又受到污染。快速檢驗(yàn)這些細(xì)菌,有助于食品的衛(wèi)生管理,維護(hù)消費(fèi)者的食用安全。

GB/T4789.32-2002食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群的快速檢測(cè)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中大腸菌群的快速檢驗(yàn)和計(jì)數(shù)方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中大腸菌群的快速檢驗(yàn)和計(jì)數(shù)規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)·然而,鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件.其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB4789.3食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定GB4789.28食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑ISO4832:1991(E)微生物學(xué)——-大腸菌群菌落計(jì)數(shù)法通則術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)3.1大腸菌群Coliformbacteria大腸菌群是革蘭氏陰性、無芽孢、氧化酶陰性的桿狀細(xì)菌,為需氧和兼性氏氧,可在有膽鹽(或具有其他抑制生長(zhǎng)的表面活性劑)存在的情況下生長(zhǎng),通常可在36C±2C發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸和醛。具有B-半乳糖苷酶。在本標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定的條件下,大腸菌群為能分解β-半乳糖苷、使培養(yǎng)基發(fā)出熒光或生成紫色(或紅色)菌落的一群革蘭氏陰性無芽孢桿菌原理4.1最可能數(shù)(MPN)法大腸菌群可產(chǎn)生β半乳糖苷酶·分解液體培養(yǎng)基中的酶底物4-甲基傘形酮--D-半乳糖音(以下簡(jiǎn)稱MUGal).使4-甲基傘形酮游離·因而,在波長(zhǎng)366nm的紫外光燈照射下呈現(xiàn)藍(lán)色熒光。4.2平板法大腸菌群可產(chǎn)生B半乳糖音酶,分解培養(yǎng)基中的酶底物-素B-D-半乳糖苷(以下簡(jiǎn)稱AIizgal)使茜素游離并與固體培養(yǎng)基中的鋁、鉀、鐵、銨離子結(jié)合形成紫色

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