薄層色譜分離偶氮苯

薄層色譜薄層色譜分離偶氮苯一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)薄層色譜的一般原理和方法二、實(shí)驗(yàn)原理

色譜法是分離、提純和鑒定有機(jī)化合物的重要方法，有著極其廣泛的用途。

色譜法的基本原理是利用混合物中各組分在某一物質(zhì)中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它親和作用性能的差異，使混合物的溶液流經(jīng)該物質(zhì)時(shí)進(jìn)行反復(fù)的吸附或分配等作用，從而將各組分分開(kāi)。流動(dòng)的混合物溶液稱(chēng)為流動(dòng)相；固定的物質(zhì)稱(chēng)為固定相（可以是固體或液體）。

根據(jù)組分在固定相中的作用原理不同，可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、排阻色譜等；根據(jù)操作條件不同，可分為柱色譜、紙色譜、薄層色譜、氣相色譜及高效液相色譜等類(lèi)型。

本次實(shí)驗(yàn)主要介紹薄層色譜。

薄層色譜(ThinLayerChromatography)常用TLC表示，又稱(chēng)薄層層析，屬于固－液吸附色譜。是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種微量、快速而簡(jiǎn)單的色譜法，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)。

薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板（10×3cm左右）上均勻的涂一層吸附劑（如硅膠），待干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細(xì)管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點(diǎn)線(xiàn)上，涼干或吹干后置薄層板于盛有展開(kāi)劑的展開(kāi)槽內(nèi)，浸入深度為0.5cm。展開(kāi)劑由下往上展開(kāi)過(guò)程中，溶質(zhì)在固定相（硅膠）和流動(dòng)相（展開(kāi)劑）交換分配，溶質(zhì)也隨著展開(kāi)劑由下向上展開(kāi)，溶質(zhì)的極性大小決定了它被固定相（硅膠）吸附的大小。極性越大，被吸附越大，上升就慢，極性越小，隨展開(kāi)劑上升就越快，從而極性不同的化合物得以分開(kāi)。

當(dāng)展開(kāi)劑前沿離頂端約1cm附近時(shí)，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。記下原點(diǎn)至主斑點(diǎn)中心及展開(kāi)劑前沿的距離，計(jì)算比移值（Rf）：在相同條件下，特定的化合物具有特定的比移值。偶氮苯具有順?lè)串悩?gòu)體反式內(nèi)能低于順式，經(jīng)光照后轉(zhuǎn)變?yōu)轫樖疆悩?gòu)體反式極性低于順式，在薄層中被硅膠吸附小，隨展開(kāi)劑上升快，順式極性大，被硅膠吸附大，隨展開(kāi)劑上升慢。故展開(kāi)一段時(shí)間后，順?lè)串悩?gòu)體得以分開(kāi)。

Rf

(順式)＜Rf(反式)三、操作步驟1、薄板制備與活化2、點(diǎn)樣

先用鉛筆在距薄層板一端1cm處輕輕劃一橫線(xiàn)作為起始線(xiàn)，然后用毛細(xì)管吸取樣品(偶氮苯)，在起始線(xiàn)上小心點(diǎn)樣（兩樣點(diǎn)相距1.5ｃｍ），斑點(diǎn)直徑一般不超過(guò)2mm。3、展開(kāi)：

薄層色譜的展開(kāi)，需要在密閉容器中進(jìn)行。為使溶劑蒸氣迅速達(dá)到平衡，可在展開(kāi)槽內(nèi)襯一濾紙。常用的展開(kāi)槽有：長(zhǎng)方形盒式和廣口瓶式。

本實(shí)驗(yàn)選用環(huán)己烷—苯（體積比3:1）作展開(kāi)劑，加入層析缸中，液層高度約0.5cm。當(dāng)展開(kāi)劑展開(kāi)至其前沿距板頂5~10mm處