NY/T 560-2002小鵝瘟診斷技術(shù)

ICS.11.220B41NY中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T560一2002小鵝癌診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforgoslingplague2002-08-27發(fā)布2002-12-01實施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)小鵝癌診斷技術(shù)NY/T560-2002中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版北京復(fù)興門外三里河北街16號郵政編碼：100045電話：6852394668517548中國標(biāo)準(zhǔn)出版社秦皇島印刷廠印刷新華書店北京發(fā)行所發(fā)行各地新華書店經(jīng)售開本880×12301/16印張1/2字?jǐn)?shù)10干字2002年12月第一版2002年12月第一次印劇印數(shù)1-1500書號：155066·2-14776網(wǎng)址科目624-460版權(quán)專有侵權(quán)必究舉報電話：（01068533533

NY/T560-2002小鵝癌又稱鵝細(xì)小病毒(gooscparvovlrus)病,或又稱德茲西氏病(Derzsy"s?。清F鵝的一種急性敗血性傳染病。我國和世界上所有養(yǎng)鵝的國家均有此病的流行發(fā)生。本病主要侵害三周齡以內(nèi)錐鵝、多呈最急性和急性病病程而迅速致死。三周齡以上的錐鵝僅部分發(fā)病,并呈亞急性病程。本病一旦發(fā)生流行常引起大批維鵝死亡，造成重大經(jīng)濟損失。本病的病原稱為小鵝癌病毒，根據(jù)其病毒分類地位.又稱鵝細(xì)小病毒。應(yīng)用中和試驗、瓊脂擴散試驗等方法證明全國各地分離的毒株具有相同的抗原關(guān)系，即僅有一個抗原型。與匈牙利的Derzsy"s病毒株和番鴨細(xì)小病毒有密切抗原關(guān)系，而與哺乳動物和其他禽類的細(xì)小病毒沒有抗原關(guān)系。據(jù)國內(nèi)外有關(guān)報道，本病病毒分離常用鵝胚和番鴨胚。鵝胚和番鴨胚原代細(xì)胞感染病毒后，用伊紅-蘇木素染色，可見有CowdreyA型核類包涵體和合胞體的形成。用電鏡或特異的鵝細(xì)小病毒抗血清中和試驗?zāi)艽_定感染細(xì)胞內(nèi)病毒的存在。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B均為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜收獸醫(yī)局提出：本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：揚州大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王永坤、嚴(yán)維巍、朱國強、周繼宏、莊國宏

NY/T560—2002小鵝癌診斷技術(shù)1范園本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小鵝癌診斷技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的病毒分離方法適用于小鵝癌病毒分離，瓊脂擴散試驗、中和試驗和酶聯(lián)免疫吸附（ELISA)試驗等血清學(xué)診斷方法適用于病毒分離株的鑒定、鵝群檢疫、流行病學(xué)調(diào)查和免疫鵝群抗體水平的檢測。病毒分離鑒定2.1材料準(zhǔn)備2.1.1以無菌手術(shù)取患病錐鵝或死亡維鵝的肝、胰、牌、腎、腦等內(nèi)臟器官病料放置滅菌的玻瓶凍結(jié)保存，作為病毒分離材料。2.1.2先將病料組織剪碎、磨細(xì)·用滅菌生理鹽水,或滅菌pH7.4磷酸鹽緩沖液（PBS)作（1：5）～(1：10)稀釋，經(jīng)3000r/min離心30min.取上消液加入抗生素，使每毫升組織液含有20001U青霉素和2000g鏈霉素，于37℃溫箱作用30min.作為病毒分離材料。2.1.3將上述離心的上清液按4·1加入分析純?nèi)淄槌浞只旃春蠓胖?7C溫箱作用60min.或4C冰箱過液，經(jīng)3000r/min離心30min.取上清液加人抗生素，使之每毫升含有2000IU青霉家和2000“g鏈莓素，于37C溫箱作用30min,作為病毒分離材料2.2病毒分離2.2.1鵝胚接種將上述病毒分離材料接種5枚12日齡無小鵝癌抗體的鵝胚，每胚尿囊腔接種0.2ml.,置37（38℃孵化箱內(nèi)繼續(xù)孵化，每天照胚2～4次，觀察9d,一般經(jīng)5d～7d大部分胚胎死亡。72h以前死亡的胚胎皮棄，725以后死亡的鵝胚取出放置4（～8C冰箱內(nèi)過夜冷卻收縮血管。用無菌手續(xù)吸取尿型液保存和作無菌檢驗，并觀察胚胎病變。無菌的尿囊液凍結(jié)保存作傳代及檢驗用。2.2.2番鴨胚接種將上述病毒分離材料接種5枚12日齡無小鵝癌抗體的番鴨胚，每胚尿套腔接種0.2ml.,置37C～38℃孵化箱內(nèi)繼續(xù)孵化，每天照胚2～4次，觀察9d，一般經(jīng)5d～7d大部分胚胎死亡。在72h以前死亡的胚胎廢棄,72h以后死亡的番鴨胚取出放置4℃～8℃冰箱內(nèi)過夜冷卻收縮血管。用無菌手續(xù)吸取尿囊液保存和作無菌檢驗，并觀察胚胎病變。無菌的尿囊液凍結(jié)保存作傳代和檢驗用。接種后7d內(nèi)未見死亡的鵝胚或番鴨胚取出后人4（～8C冰箱內(nèi)過夜冷卻收縮血管。用滅菌手續(xù)吸取尿囊液育傳一次。2.2.3病變由本病毒致死的鵝胚和番鴨胚具有相同的大體肉眼病變。絨尿膜增厚，全身皮膚充血，翅尖、趾、胸部毛孔、頸、喙旁均有較嚴(yán)重出血點，胚肝充血及邊緣出血,心臟和后腦出血,頭部皮下及兩肋皮下水腫。接種后7d以上死亡的鵝胚和番鴨胚胚體發(fā)育停頓