準(zhǔn)確性的指標(biāo)靈敏度與特異度等教案資料

腫瘤(zhǒngliú)免疫學(xué)檢驗(yàn)第一頁(yè)，共38頁(yè)。概述腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)主要涉及腫瘤免疫學(xué)診斷(zhěnduàn)和腫瘤患者免疫功能狀態(tài)的評(píng)估。而目前臨床上用于腫瘤免疫學(xué)診斷(zhěnduàn)項(xiàng)目主要是腫瘤標(biāo)記物檢測(cè)，但目前使用腫瘤標(biāo)記物都是腫瘤非特異性標(biāo)記物，不僅由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生，存在腫瘤患者血液和體液中；也可以正常體細(xì)胞產(chǎn)生，健康者血液和體液中也會(huì)存在一定量腫瘤標(biāo)記物，因此，如果將腫瘤標(biāo)記物作為腫瘤診斷(zhěnduàn)指標(biāo)時(shí)，對(duì)臨床上使用的腫瘤標(biāo)記物進(jìn)行生物參考區(qū)間評(píng)價(jià)和診斷(zhěnduàn)性能評(píng)價(jià)就顯得非常重要，本單元主要以AFP和PSA為例以達(dá)到舉一反三作用。第二頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)一

血清AFP參考(cānkǎo)區(qū)間建立實(shí)驗(yàn)第三頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)為檢驗(yàn)項(xiàng)目提供可靠的參考區(qū)間，才能(cáinéng)使臨床對(duì)健康普查者的檢驗(yàn)結(jié)果作出判斷，對(duì)病人檢驗(yàn)結(jié)果有大致的了解，發(fā)揮檢驗(yàn)報(bào)告的作用。因此獲得檢驗(yàn)項(xiàng)目可靠的參考區(qū)間是實(shí)驗(yàn)室的重要任務(wù)。參考區(qū)間的評(píng)價(jià)一般包括參考區(qū)間的建立和參考區(qū)間的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。第四頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)(shíyàn)目的掌握血清AFP參考區(qū)間建立實(shí)驗(yàn)的原理和方法學(xué)，以ModularAnalyticsE170自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析(fēnxī)系統(tǒng)測(cè)定AFP參考區(qū)間的建立流程為例加以說明。第五頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)(shíyàn)原理先確定AFP參考區(qū)間建立時(shí)的納入人群(rénqún)的標(biāo)準(zhǔn)，選擇參考個(gè)體，按該項(xiàng)目的檢測(cè)要求收集標(biāo)本并在檢測(cè)系統(tǒng)性能良好的狀態(tài)下進(jìn)行AFP濃度的檢測(cè)，收集檢測(cè)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)分析，確定化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)AFP測(cè)定的參考區(qū)間。第六頁(yè)，共38頁(yè)。試劑(shìjì)與器材選用與檢測(cè)儀器相配套的試劑、校準(zhǔn)(jiàozhǔn)品及其他輔助試劑。按照納入人群的標(biāo)準(zhǔn)，選擇參考人群的新鮮血清標(biāo)本。第七頁(yè)，共38頁(yè)。操作步驟根據(jù)文獻(xiàn)和實(shí)驗(yàn)研究，總結(jié)對(duì)該項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的生物變異和分析干擾的因素，供選擇參考個(gè)體(gètǐ)時(shí)用。確定參考個(gè)體(gètǐ)的選擇原則（或排除非參考個(gè)體(gètǐ)的原則），編寫與之對(duì)應(yīng)的調(diào)查表。依據(jù)調(diào)查表和其他有關(guān)記錄，挑選候選的參考個(gè)體(gètǐ)。應(yīng)按照項(xiàng)目在臨床使用的要求選擇參考個(gè)體(gètǐ)，在選擇參考個(gè)體(gètǐ)對(duì)象時(shí)，要兼顧各年齡段，同時(shí)應(yīng)考慮是否有分組的必要（最常見的是分年齡組和性別組）。依據(jù)排除原則，剔去不符要求的候選對(duì)象。第八頁(yè)，共38頁(yè)。將采集標(biāo)本前和采集時(shí)對(duì)受檢查的要求，詳細(xì)告訴(ɡàosù)各個(gè)受檢參考個(gè)體，做好準(zhǔn)備，要求予以配合。規(guī)范地采集標(biāo)本，做好分析前的標(biāo)本預(yù)處理。按照相應(yīng)規(guī)程做好標(biāo)本采集、處理、運(yùn)送和保存，此外，還應(yīng)考慮標(biāo)本采集時(shí)的環(huán)境條件，標(biāo)本采集者技術(shù)熟練要求和服務(wù)態(tài)度等。在良好的控制條件下，用事先指定的分析方法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，獲得參考值結(jié)果。分析樣品的檢驗(yàn)方法應(yīng)有方法學(xué)可靠性評(píng)價(jià)，測(cè)定過程有完整質(zhì)量控制措施第九頁(yè)，共38頁(yè)。結(jié)果計(jì)算(jìsuàn)和分析繪制分布圖，了解數(shù)據(jù)的分布特性。若數(shù)據(jù)呈高斯正態(tài)分布，或者數(shù)據(jù)經(jīng)轉(zhuǎn)換后亦呈高斯分布，可按士1.96S表示95％數(shù)據(jù)分布范圍，或者士2.58S表示99％分布范圍等確定參考(cānkǎo)限和參考(cānkǎo)區(qū)間。第十頁(yè)，共38頁(yè)。參考對(duì)象群體值的特定百分?jǐn)?shù)（通常是95％）非參數(shù)和參數(shù)分析：是否正態(tài)分布確定參考范圍的最小樣本量隨機(jī)至少(zhìshǎo)120個(gè)觀察對(duì)象第十一頁(yè)，共38頁(yè)。注意事項(xiàng)

為確保參考(cānkǎo)范圍數(shù)據(jù)的可靠性，建議至少取120個(gè)參考(cānkǎo)值數(shù)據(jù)，若還需分組統(tǒng)計(jì)，則每個(gè)分組應(yīng)有120個(gè)數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)中的疑似離群點(diǎn)的判斷，建議將疑似離群點(diǎn)和其相鄰點(diǎn)的差值D和數(shù)據(jù)全距R相除，D/R若大于等于1/3考慮為離群點(diǎn)。若有2個(gè)或以上疑似離群點(diǎn)，可將最小的疑似離群點(diǎn)作如上處理，若都大于1/3，則所有疑似點(diǎn)都剔去；若都小于1/3，則保留所有數(shù)據(jù)。若有離群點(diǎn)被剔除后，應(yīng)即將其他數(shù)據(jù)補(bǔ)上。若數(shù)據(jù)不呈高斯正態(tài)分布，則可用非參數(shù)法處理。最常見的是以百分位數(shù)法確定2.5％和97.5％位數(shù)的參考(cānkǎo)限，以此確定95％參考(cānkǎo)區(qū)間。第十二頁(yè)，共38頁(yè)。方法(fāngfǎ)評(píng)價(jià)建立參考區(qū)間是實(shí)驗(yàn)室開展新的檢驗(yàn)項(xiàng)目前必然要進(jìn)行(jìnxíng)的一項(xiàng)工作，但由于其需要標(biāo)本例數(shù)多，對(duì)人群的納入標(biāo)準(zhǔn)要求嚴(yán)格；大多實(shí)驗(yàn)室參照試劑說明書、教材、或其它權(quán)威資料轉(zhuǎn)移為本實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間，但需對(duì)此類選用的參考區(qū)間進(jìn)行(jìnxíng)驗(yàn)證評(píng)審。采用簡(jiǎn)單的方法予以證實(shí)，如選取20位健康者，有90%以上的測(cè)定結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)，即說明實(shí)驗(yàn)室選用的參考區(qū)間有效。第十三頁(yè)，共38頁(yè)。思考題

請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)(shèjì)建立AFP參考區(qū)間的抽樣人群的納入標(biāo)準(zhǔn)？溫州醫(yī)學(xué)院陶志華第十四頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)(shíyàn)二

血清PSA診斷前列

腺癌的性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)(shíyàn)第十五頁(yè)，共38頁(yè)。PSA（前列腺特異性抗原）是一個(gè)分子量大約為34000道爾頓的糖蛋白。在正常的、良性肥大的和惡性變的前列腺組織內(nèi)以及前列腺液和精液內(nèi)均可發(fā)現(xiàn)PSA。血清(xuèqīng)PSA作為前列腺癌診斷指標(biāo)時(shí)，具有較好診斷靈敏度，但存在診斷特異度較低問題，目前，不推薦將PSA檢測(cè)作為對(duì)普通人群或?qū)o癥狀患者的癌癥篩查項(xiàng)目，也不應(yīng)當(dāng)作為判斷是否存在惡性疾病的一個(gè)絕對(duì)性依據(jù)。有必要對(duì)臨床使用的血清(xuèqīng)PSA診斷前列腺癌的效能進(jìn)行評(píng)價(jià)。第十六頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)(shíyàn)目的本實(shí)驗(yàn)(shíyàn)項(xiàng)目是如何評(píng)價(jià)定量檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)疾病診斷價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)(shíyàn)以血清PSA定量測(cè)定為例，評(píng)價(jià)血清PSA對(duì)前列腺癌診斷價(jià)值。第十七頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)(shíyàn)原理對(duì)選擇的納入研究對(duì)象的患者采取血液，進(jìn)行PSA定量檢測(cè)；對(duì)納入研究對(duì)象的患者采取前列腺組織穿刺病理檢查(jiǎnchá)，將研究對(duì)象分為前列腺癌組和前列腺增生組。根據(jù)PSA定量檢測(cè)結(jié)果制作ROC曲線，根據(jù)不同cutoff值，評(píng)價(jià)其診斷的的準(zhǔn)確性（靈敏度、特異度、診斷準(zhǔn)確度等）和有效性（陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性似然比、陰性似然比）。第十八頁(yè)，共38頁(yè)。臨床診斷試驗(yàn)結(jié)果與患病情況(qíngkuàng)的關(guān)系診斷試驗(yàn)分定性試驗(yàn)和定量(dìngliàng)試驗(yàn)。定性試驗(yàn)的結(jié)果分為陽(yáng)性和陰性結(jié)果定量(dìngliàng)試驗(yàn)結(jié)果也可根據(jù)臨床診斷截?cái)嘀缔D(zhuǎn)化為陽(yáng)性和陰性結(jié)果。第十九頁(yè)，共38頁(yè)。試驗(yàn)(shìyàn)結(jié)果與疾病的關(guān)系真陽(yáng)性(yángxìng)（truepositiveTP）假陽(yáng)性(yángxìng)（falsepositiveFP）真陰性（truenegativeTN）假陰性（falsenegativeFN）

罹患疾病情況

患病健康試

陽(yáng)性

TP(a)FP(b)驗(yàn)

陰性

FN(c)TN(d)第二十頁(yè)，共38頁(yè)。疾病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)(biāozhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)（goldstandard）：是指通過活檢、尸檢、外科手術(shù)、隨訪等所作出的決定性診斷。診斷試驗(yàn)：是指一般檢查方法，具有(jùyǒu)費(fèi)用低，操作方便，對(duì)病人無損害，快速等優(yōu)點(diǎn)。第二十一頁(yè)，共38頁(yè)。診斷試驗(yàn)性能(xìngnéng)評(píng)價(jià)指標(biāo)包括準(zhǔn)確性和有效性兩方面的指標(biāo)(zhǐbiāo)：準(zhǔn)確性的指標(biāo)(zhǐbiāo)：靈敏度與特異度等。有效性的指標(biāo)(zhǐbiāo)：預(yù)告值和似然比等。第二十二頁(yè)，共38頁(yè)。準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)(píngjià)指標(biāo)1.診斷靈敏度（sensitivity,Se）又稱敏感度、敏感性，指在患病者中，應(yīng)用該診斷試驗(yàn)檢查得到(dédào)陽(yáng)性結(jié)果的百分比。反映診斷試驗(yàn)正確識(shí)別患病者的能力,該值愈大愈好。靈敏度＝×100%

＝×100%

患病

TP(a)FP(b)

FN(c)TN(d)第二十三頁(yè)，共38頁(yè)。2.診斷(zhěnduàn)特異度(specificity,Sp)又稱特異性，指在非某病者中，應(yīng)用(yìngyòng)該試驗(yàn)獲得陰性結(jié)果的百分比。反映正確鑒別非患者的能力，該值愈大愈好。特異度＝×100%

＝×100%

健康TP(a)

FP(b)FN(c)

TN(d)第二十四頁(yè)，共38頁(yè)。3.診斷(zhěnduàn)準(zhǔn)確度（accuracy，AC）是指所有試驗(yàn)個(gè)體中，診斷試驗(yàn)?zāi)軠?zhǔn)確劃分患者(huànzhě)和非患病者的百分比。反映診斷試驗(yàn)正確診斷患者(huànzhě)與非患者(huànzhě)的能力。診斷準(zhǔn)確度＝×100%

＝×100%TP(a)FP(b)FN(c)TN(d)第二十五頁(yè)，共38頁(yè)。試劑(shìjì)與器材用于定量(dìngliàng)PSA檢測(cè)的相應(yīng)儀器與試劑。第二十六頁(yè)，共38頁(yè)。操作步驟確定研究對(duì)象的納人排除標(biāo)準(zhǔn)：納入以前列腺增生為癥狀就診于本院泌尿外科的患者。排除膀胱炎癥和膀胱癌患者。確定金標(biāo)準(zhǔn)：采用前列腺組織穿刺病理檢查，根據(jù)病理結(jié)果將研究對(duì)象分為前列腺癌組和前列腺增生組。確定抽樣方法和樣本含量的確定估計(jì)：采用簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣。根據(jù)檢驗(yàn)(jiǎnyàn)水準(zhǔn)α取值、患病率和允許誤差的要求，計(jì)算試驗(yàn)所需要的病例數(shù)。第二十七頁(yè)，共38頁(yè)。標(biāo)本的采集與檢測(cè)：患者均于前列腺檢查前抽取非抗凝靜脈血，離心5min分離血清，測(cè)定血清PSA含量。測(cè)量采用單盲原則，在未知被測(cè)標(biāo)本所代表患者的確診診斷的前提下完成(wánchéng)所有的檢測(cè)工作。第二十八頁(yè)，共38頁(yè)。結(jié)果(jiēguǒ)計(jì)算將病理檢查結(jié)果和PSA定量檢測(cè)結(jié)果分別輸入SPSS13.0軟件ROCCurve分析的statevaribale應(yīng)變量(二分類變量)和Testvariable自變量(連續(xù)型變量)，Valueofstatevaribale中設(shè)定二分類變量的臨界點(diǎn)。運(yùn)行結(jié)果：（1）ROC曲線,可直觀地看到曲線形狀;（2）areaunderthecurve：曲線下方的面積,包括面積值,顯著性分析,置信區(qū)間;（3）Coordinatesofthecurve：ROC曲線各點(diǎn)對(duì)應(yīng)(duìyìng)的靈敏度和誤判率。制作的ROC曲線。第二十九頁(yè)，共38頁(yè)。計(jì)算診斷效能評(píng)價(jià)指標(biāo)：根據(jù)臨床診斷需求，確定(quèdìng)臨床診斷截?cái)嘀?，再確定(quèdìng):診斷準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)指標(biāo)診斷靈敏度、診斷特異性和診斷特異性等診斷有效性評(píng)價(jià)指標(biāo)陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性似然比和陰性似然比等結(jié)果(jiēguǒ)計(jì)算第三十頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)(shíyàn)結(jié)果根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，正確評(píng)價(jià)在本院使用PSA定量檢測(cè)對(duì)前列腺癌的診斷(zhěnduàn)價(jià)值？第三十一頁(yè)，共38頁(yè)。思考題如何保證實(shí)驗(yàn)過程中血清PSA定量檢測(cè)(jiǎncè)結(jié)果一致性和準(zhǔn)確性？如何制作ROC曲線？溫州醫(yī)學(xué)院陶志華第三十二頁(yè)，共38頁(yè)。病案討論

腫瘤(zhǒngliú)免疫學(xué)檢測(cè)第三十三頁(yè)，共38頁(yè)。某患者(huànzhě)，男，38歲。乙型肝炎病史十年，因急性黃疸收治入院，入院后當(dāng)天就進(jìn)行血漿置換治療。實(shí)驗(yàn)室檢查為：病案(bìngàn)討論一第三十四頁(yè)，共38頁(yè)。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(jiǎncè)結(jié)果檢查時(shí)間血清學(xué)檢查項(xiàng)目AFP（ng/ml）Alb（g/L）T-Bil(μmol/L)D-Bil(μmol/L)I-Bil(μmol/L)ALT（U/L）入院時(shí)28.017.5238.7237.31.41680.4入院第2天47.222.3214.9213.11.81370.9入院第4天68.826.4147.5145.42.1860.9入院第7天112.729.287.484.92.5