免疫試驗(yàn)課-間接凝集抑制反應(yīng)

間接凝集抑制反應(yīng)間接凝集反應(yīng)的分類(lèi)1（正向）間接凝集反應(yīng)

抗原致敏載體檢測(cè)抗體2反向間接凝集反應(yīng)

抗體致敏載體檢測(cè)抗原3間接凝集抑制試驗(yàn)

抗原(抗體)致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體（抗原），檢測(cè)標(biāo)本中是否存在與致敏抗原（抗體）相同的抗原（

抗體）4協(xié)同凝集反應(yīng)

載體為金葡菌A蛋白（反向）

實(shí)驗(yàn)原理將含有可溶性抗原的待檢樣品先與已知抗體混合，充分作用后再加入抗原致敏的膠乳顆粒，因抗體已與樣品中的可溶性抗原結(jié)合，膠乳顆粒不再出現(xiàn)可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象，稱(chēng)膠乳凝集抑制試驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)以檢測(cè)絨毛膜促性腺激素(HCG)的免疫妊娠試驗(yàn)為例。試劑和器材1.樣品待檢尿液。2.膠乳抗原(HCG致敏的膠乳顆粒)、診斷血清(用HCG免疫動(dòng)物得到的抗血清)、正常尿(或生理鹽水)、孕婦尿。3.反應(yīng)板、滴管、牙簽等。2類(lèi)風(fēng)濕因子陽(yáng)性血清和陰性血清。3加樣槍?zhuān)谏礁穹磻?yīng)板，牙簽等。操作方法1.在反應(yīng)板上選擇三個(gè)凹孔，中間凹孔加待檢尿液1滴(約50μl)，左側(cè)凹孔加孕婦尿1滴(約50μl)，右側(cè)凹孔加正常尿(或生理鹽水)1滴(約50μl)，然后向三個(gè)凹孔內(nèi)各滴加診斷血清1滴(約50μl)，分別用牙簽混勻，在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上輕輕搖動(dòng)1min。2.上述三個(gè)凹孔內(nèi)各滴加膠乳抗原1滴(約50μl)，混勻，再輕輕搖動(dòng)2～3min，觀察結(jié)果。結(jié)果判斷陰性對(duì)照(右側(cè)凹孔)應(yīng)出現(xiàn)明顯的均勻一致的凝集顆粒，液體澄清，否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效；陽(yáng)性對(duì)照(左側(cè)凹孔)應(yīng)呈均勻一致的膠乳狀；待檢樣品(中間凹孔)如出現(xiàn)明顯凝集為HCG陰性，如不出現(xiàn)凝集，呈均勻膠乳狀為HCG陽(yáng)性。注意事項(xiàng)1.待檢尿液以晨尿?yàn)楹?，若不及時(shí)檢測(cè)，應(yīng)將樣品置4。C冰箱保存；若超過(guò)24h才測(cè)定應(yīng)置-20oC保存。用前先置37oC水浴融化并充分混勻。樣品中若含血細(xì)胞或較多蛋白質(zhì)和細(xì)菌污染則不宜使用。2.試劑應(yīng)4。C保存，切勿凍存。使用前使試劑接近室溫并搖勻。3.試驗(yàn)同時(shí)設(shè)立陽(yáng)性、陰性對(duì)照，以排除