實驗三-果蠅的性狀生活史觀察及飼養(yǎng)

一、試驗?zāi)康?.了解果蠅生活史中各個不同階段的形態(tài)特點；2.區(qū)分雌雄果蠅以及幾種常見突變類型的主要性狀特征；3.駕馭試驗果蠅的飼養(yǎng)、管理及試驗處理方法和技術(shù)。二、試驗原理果蠅的優(yōu)點：

1.生活史短，20-25℃條件下完成一個世代需12-15天。

2.繁殖率高，一對果蠅可產(chǎn)卵400-500只。

3.個體小，飼養(yǎng)便利，培育費用低廉。

4.突變率高。

5.形態(tài)簡潔辨別。6.染色體數(shù)目少，只有4對，且具有較大的唾腺染色體。因此，果蠅是遺傳學(xué)、細(xì)胞學(xué)、發(fā)育生物學(xué)等探討中最好的模式動物。三、試驗材料、用具及試劑果蠅種類：野生型(18#)、殘翅(2#)、白眼(22#)、黑檀體(e#)、三隱性(6#)。雙目解剖鏡、放大鏡、小鑷子、麻醉瓶、白瓷板或白紙、毛筆、乙醚、酒精。四、試驗內(nèi)容1.果蠅的生活史果蠅（Drosophilamelanogaster2n=8）

中文名：黑腹果蠅果蠅屬于節(jié)肢動物門、昆蟲綱、雙翅目、果蠅科、果蠅屬，與家蠅是不同的種。果蠅的生活周期長短與溫度關(guān)系很親密。30℃以上的溫度能使果蠅不育和死亡，15℃以下則使它的生活周期延長，同時生活力也降低，果蠅培育的最適溫度為20-25℃。從表中可以看出，25℃時，從卵到成蟲約10天；在25℃時成蟲約活20~30天。生活史：屬于完全變態(tài)。最適溫度：20-25℃生活史周期：12-15day(20-25℃)10day(26℃)57day(10℃)羽化后：8-12h后交配兩天后產(chǎn)卵成蟲存活：20-30day(25℃)卵：羽化后的雌蠅一般在12小時后起先交配，兩天后才能產(chǎn)卵。卵長0.5mm，為橢圓形，腹面稍扁平，被絨毛膜，在背面的前端伸出一對觸絲（filament），它能使卵附著在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。三齡幼蟲4.5mm，在培育基上作溝穿孔。幼蟲：從卵孵化出來后，經(jīng)過兩次蛻皮，發(fā)育成三齡幼蟲，此時體長可達(dá)4-5mm。肉眼可見其前端稍尖部分為頭部，上有一黑色斑點即為口器?？谄骱竺嬗幸粚ν噶恋耐僖合伲高^體壁可見到一對生殖腺位于軀體后半部上方的兩側(cè)，精巢較大，外觀上是一明顯的黑點，而卵巢則較小，可以此作為鑒別。幼蟲活動力強而貪食，它們在培育基上爬行時，留下很多條溝，溝多而且寬時，表明幼蟲生長良好。蛹：幼蟲生活7-8天準(zhǔn)備化蛹，化蛹前從培育基上爬出，附著在瓶壁上，漸漸形成一梭形的蛹。在蛹前部有兩個呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹?xì)ゎ伾S而松軟，以后漸漸硬化，變?yōu)樯詈稚?，表明即將羽化了。成蟲：幼蟲在蛹?xì)?nèi)完成成蟲體型和器官的分化，最終從蛹?xì)で岸伺莱?。剛從蛹?xì)だ镉鸹鰜淼墓壪x體比較長，翅膀尚未綻開，體表尚未完全幾丁質(zhì)化，故呈半透亮的乳白色。透過腹部體壁，可以看到黑色的消化系統(tǒng)。不久，變?yōu)槎檀謭A形，雙翅綻開，體色加深。如野生型初為淺灰色，然后呈灰褐色。2.形態(tài)構(gòu)造頭部：有一對復(fù)眼，三個單眼和一對觸角。胸部：有三對足，一對翅和一對平衡棒。腹部：背面有黑色環(huán)紋，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有很多體毛和剛毛。3.成蟲雌雄的鑒別果蠅♀♂識別果蠅♀♂識別果蠅♀♂識別雄果蠅雌果蠅果蠅♀♂識別果蠅♀♂識別雄果蠅雌果蠅4.果蠅常見的幾種突變類型身體顏色野生型：灰色，符號為+突變型：黑檀體色，符號為e眼睛顏色野生型：磚紅色，符號為+突變型：白色，符號為w翅膀形狀野生型：圓卵型，長度約為腹部的2倍，符號+殘翅型：翅膀退化殘缺不全，符號vg白眼w，小翅m,X染色體剛毛形狀野生型：剛毛長粗、黑硬、平直，先端略彎，符號+焦剛毛：剛毛先端分叉彎曲，符號sn3白眼w、小翅m、焦剛毛sn(剛毛卷曲如燒焦?fàn)?（全在X染色體）性狀、染色體和基因型紅眼（+）白眼（w）第一連鎖群長翅（+）殘翅（vg）其次連鎖群灰身（+）黑檀體（e）其次連鎖群第三連鎖群長翅（+）小翅（m）第一連鎖群直剛毛（+）卷剛毛（sn）第一連鎖群灰身（+）黑體（b）其次連鎖群5.果蠅的飼養(yǎng)1）培育基的配制果蠅以酵母菌為食，常接受發(fā)酵的培育基繁殖酵母菌來飼養(yǎng)果蠅。培育基常用玉米粉、米粉或香蕉配制，本試驗接受玉米粉紅糖培育基，其配方如下：果蠅培育基成分配制方法配制時先將水分成兩份：一份用于加熱溶解瓊脂和糖，另一份煮玉米粉，玉米粉要先用冷水?dāng)嚢?，再加到煮沸瓊脂紅糖溶液中，邊倒邊攪拌。接著煮15-20分鐘，關(guān)掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶)，要充分?jǐn)嚢韬笤俜盅b培育瓶。每瓶培育基厚度在2-3cm，置121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。待培育基冷卻后，在培育基的表面滴加簇新酵母液，插上一塊經(jīng)滅菌后的濾紙片做為幼蟲化蛹的干燥場所。2）果蠅繼代培育將果蠅轉(zhuǎn)移到新配制的培育基中繁殖。轉(zhuǎn)移時要留意轉(zhuǎn)移的手法，不要使果蠅從兩個瓶口的接縫處飛出。一般用黑紙包住帶有親本果蠅的培育瓶，使其飛入帶有新培育基的培育瓶準(zhǔn)備轉(zhuǎn)移果蠅的親本及培育基果蠅的轉(zhuǎn)移幼蟲化蛹時爬到瓶璧或濾紙上。6果蠅性狀的視察1）果蠅的麻醉處理在果蠅的性狀視察、性別鑒定以及雜交親本接種等操作中，應(yīng)先將果蠅麻醉，使其保持安靜狀態(tài)。麻醉方法如下：（1）準(zhǔn)備一只與培育瓶口徑相同的空瓶作為麻醉瓶，并配以脫脂棉塞。（2）去掉培育瓶棉塞，立刻與麻醉瓶口相對，培育瓶在上，一手穩(wěn)住兩瓶，另一手輕輕震拍培育瓶，使果蠅落入麻醉瓶中。（3）滴數(shù)滴乙醚于麻醉瓶棉塞內(nèi)，快速將兩瓶塞住，約30s，麻醉瓶內(nèi)的果蠅即處于麻醉狀態(tài)。留意：不能麻醉過度。若蠅翅與蠅體呈45o角翹起，表明麻醉過度，不能復(fù)蘇而死亡。2）視察選取一張10x10cm白紙，在白紙中心畫一個半徑為0.5cm小圓圈及圓心，在體視鏡下找到圓圈后將白紙固定好，將麻醉后的果蠅放在白紙小圓圈內(nèi)，用毛筆移動果蠅進(jìn)行視察，視察完畢的果蠅務(wù)必倒入死蠅盛留器中剛好處死，防止品系間混雜。轉(zhuǎn)移到麻醉瓶中視察結(jié)果麻醉時轉(zhuǎn)移果蠅手法果蠅的麻醉

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