獸醫(yī)藥理學(xué)實驗

獸醫(yī)藥理學(xué)實驗第一頁，共五十五頁，2022年，8月28日本課程實驗內(nèi)容實驗一藥理實驗基礎(chǔ)知識實驗二

藥物的劑量與劑型對藥物效應(yīng)的影響實驗三毛果蕓香堿與阿托品對瞳孔及對光反射的影響實驗四藥物急性半數(shù)致死量的測定實驗五肝臟損傷對藥物作用的影響實驗六藥物敏感性實驗實驗七磺胺類藥物內(nèi)服給藥后的血中藥物濃度測定實驗八

藥物對家兔的利尿作用的影響實驗九有機磷酸酯類中毒及解救第二頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗一藥理實驗基礎(chǔ)知識目的掌握基本操作，鍛煉動手、動腦能力；更好地掌握藥理學(xué)基本理論知識；培養(yǎng)科學(xué)思維第三頁，共五十五頁，2022年，8月28日基本要求實驗前：預(yù)習(xí)實驗內(nèi)容并復(fù)習(xí)相關(guān)理論知識；實驗時實驗器材要妥善保管；實驗操作按步驟進行，仔細觀察實驗中出現(xiàn)的現(xiàn)象，實事求是地做好記錄；注意節(jié)約實驗藥品；維持良好的課堂紀(jì)律。

實驗后各組同學(xué)將實驗動物處死，實驗臺擦干凈，將實驗方盤送回準(zhǔn)備室；值日生搞好實驗室衛(wèi)生，將死亡動物送至指定場所；書寫實驗報告。第四頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗報告的書寫題目目的原理材料：實驗動物，器材，藥品方法：用自己的語言簡單扼要描述出來；結(jié)果：要求真實、清楚；討論：將實驗結(jié)果進行比較、分析；實驗中有哪些不足之處；結(jié)果異?；蚴〉脑颍唤Y(jié)論：將實驗結(jié)果進行歸納總結(jié)，應(yīng)帶有提示性質(zhì)。第五頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗設(shè)計基本原則隨機原則使每一實驗對象都有同等的機會抽到實驗組或?qū)φ战M中，除處理因素外其他因素盡可能均衡一致，從而抵消非實驗因素的影響。對照原則組間對照：陰性對照，陽性對照，同因素不同水平對照；自身前后對照重復(fù)原則第六頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗動物動物的選擇小白鼠：適用于需大量動物的實驗，如某些藥物的篩選，半數(shù)致死量的測定。也較適用于避孕藥實驗、抗炎鎮(zhèn)痛藥實驗、中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥實驗、抗腫瘤藥及抗衰老藥實驗等。大白鼠：比較適用于抗炎藥物實驗，血壓測定、利膽、利尿藥實驗，也可用于進行亞急性和慢性毒性實驗。第七頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗動物動物的選擇

豚鼠：因其對組胺敏感，并易于致敏，故常被選用于抗過敏藥、平喘藥和抗組胺藥的實驗。也常用于離體心臟、心房、腸管實驗。又因它對結(jié)核敏感，常用于抗結(jié)核病藥的實驗。家兔：常用于觀察研究腦電生理作用，藥物對小腸的作用。由于家兔體溫變化敏感，也常用于體溫實驗，用于熱原檢查。狗：狗是記錄血壓，呼吸最常用的大動物。還可利用狗做成胃瘺、腸瘺，以觀察藥物對胃腸蠕動和分泌的影響。在進行慢性毒性實驗時，也常采用狗。第八頁，共五十五頁，2022年，8月28日動物捉拿及固定方法小白鼠

右手提起鼠尾,左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚，無名指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。如圖1。單手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、無名指和手掌壓住尾根部，再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠雙耳及頭部皮膚而固定。如圖2。圖2圖1第九頁，共五十五頁，2022年，8月28日動物捉拿及固定方法豚鼠

豚鼠性情溫和不咬人，用手握住軀干即可。家兔

可用一手抓住家兔頸背部皮膚，將兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿勢。在進行仰位手術(shù)操作時，可用繩帶將其四肢仰位捆綁在兔手術(shù)臺上。頭部用兔頭固定夾固定。第十頁，共五十五頁，2022年，8月28日動物的給藥方法小白鼠灌胃法（i.g.）：以左手固定小鼠后，使其腹部朝上，頸部伸直。右手持配有灌胃針頭的注射器，自口角插入口腔，再從舌面沿上腭進入食道。小鼠灌胃容量一般為／10g。第十一頁，共五十五頁，2022年，8月28日動物的給藥方法小白鼠

腹腔注射(i.p.)：以左手固定小鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取30度角將針頭從下腹部向頭端刺入腹腔。進針部位不宜過高，刺入不宜太深，以免傷及內(nèi)臟。小鼠腹腔注射量一般為／l0g。×√

肌肉注射（i.m.）：小鼠因肌肉較少，很少采用肌肉注射，若有需要可注射于股部肌肉，多選后腿上部外側(cè)，一處注射量不超過0.1mL。第十二頁，共五十五頁，2022年，8月28日動物的給藥方法小白鼠

皮下注射(s.c.)：用左手固定小鼠后，右手持注射器于拇指和食指捏起的皮膚處進針即可。

靜脈注射(i.v.)：將小鼠置于特制的固定筒內(nèi)或倒置的大漏斗下，讓其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或?qū)⑹笪苍?0'C熱水中浸泡半分鐘使血管擴張。左手拉尾端，右手持注射器將針頭刺入尾靜脈，推入藥液。第十三頁，共五十五頁，2022年，8月28日動物的給藥方法家兔

灌胃：需兩人合作進行。一人取坐位用兩腿夾持兔身，左手握家兔雙耳，右手抓住兩前肢。另一人將木制開口器橫插家兔口內(nèi)，壓住舌頭并固定之。取8號導(dǎo)尿管從開口器中部小孔插入食道。插管時如誤入氣管會出現(xiàn)動物的掙扎和呼吸困難。也可將導(dǎo)尿管的外端浸入水中，如有氣泡吹出，表示插在氣管內(nèi)，此時應(yīng)拔管重插。當(dāng)判明導(dǎo)尿管在食道以內(nèi)后，用注射器接通導(dǎo)尿管將藥液推入。第十四頁，共五十五頁，2022年，8月28日動物的給藥方法家兔

皮下、肌肉、腹腔注射：給藥方法基本上同小鼠，唯針頭可稍大，給藥量可稍多。皮下與肌內(nèi)為，腹腔為

靜脈注射：將家兔置固定箱內(nèi)，撥去耳殼外緣的毛，選擇一條比較明顯的耳緣靜脈（兔耳外緣的血管為靜脈，中央的血管為動脈，如圖），用酒精棉球涂擦皮膚，使血管顯露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指墊在兔耳注射處的下面，右手持注射器，將針頭從近耳尖處刺入，當(dāng)確認(rèn)針頭在血管中后，將藥液推入。第十五頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗二

藥物的劑量與劑型對藥物效應(yīng)的影響

實驗?zāi)康挠^察不同劑型與劑量對藥物效應(yīng)的影響。實驗材料

l.0ml注射器、針頭、小鼠灌胃針頭、燒杯、普通天平、3.5％硫酸鎂溶液（注射液和口服溶液）第十六頁，共五十五頁，2022年，8月28日

觀察指標(biāo)

動物活動增加情況、呼吸急促、反射亢進、震顫、驚厥及死亡時間、炭末推進率等。實驗方法取禁食12h的昆明種小鼠3只，稱重，分別標(biāo)為對照組、灌胃組和腹腔注射組按以下給藥：

A：對照組：灌胃給生理鹽水0.2ml/10g；

B：灌胃組：灌胃給3.5％硫酸鎂溶液0.2ml/10g；

C：腹腔注射組：腹腔注射給3.5％硫酸鎂溶液0.2ml/10g。第十七頁，共五十五頁，2022年，8月28日

給藥后注意觀察動物的活動情況，是否有肌肉松弛的表現(xiàn)。

15min后每只小鼠均灌胃給予5%炭末阿拉伯膠混懸液0.2ml。

炭末灌胃后15min，將小鼠脫臼處死，剖開腹腔，取出胃腸道。剪去附著在腸管上的腸系膜,將腸管不加牽引地輕輕地平鋪在玻璃板上(玻璃板上滴少許鹽水)。以幽門為起點,測量炭末在腸管內(nèi)的移動距離和小腸(自幽門至回盲部)的全長,計算每只小鼠炭末的移動距離占小腸全長百分率，比較3組動物的活動狀況和胃腸炭末推進率有何不同。第十八頁，共五十五頁，2022年，8月28日

實驗結(jié)果實驗結(jié)果填入下表中

鼠號

體重(g)

藥物及劑量

給藥途徑

動物反應(yīng)

炭末推進率（%）ABC不同劑型對藥物效應(yīng)的影響第十九頁，共五十五頁，2022年，8月28日

思考討論題

灌胃和腹腔注射給硫酸鎂的效應(yīng)有哪些不同？為什么？本次實驗結(jié)果對臨床用藥有何提示？

第二十頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗三毛果蕓香堿與阿托品對瞳孔及對光反射的影響

目的了解毛果蕓香堿的副交感神經(jīng)節(jié)后擬膽堿作用和阿托品的對抗作用。材料兔子１只，0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%鹽酸腎上腺素注液,0.2%硝酸毛果蕓香堿注射液第二十一頁，共五十五頁，2022年，8月28日

方法取兔放于兔固定箱內(nèi)固定，避免陽光直射眼睛，用毛剪剪去兔兩眼睫毛，然后用瞳孔量尺測量瞳孔大小，連續(xù)三次，取平均值。在兔左眼滴入０.2%毛果蕓香堿3滴，滴藥時用姆指和食指將下眼瞼提起,使成囊狀,再用中指壓住鼻淚管開口處,防止藥液流入鼻淚管而不起作用，再用右手滴入藥液。15分鐘后再測量瞳孔大小，連續(xù)三次，取平均值，并進行比較。滴入毛果蕓香堿20分鐘后，分別在兩眼滴入0.1%腎上腺素3滴，15分鐘后測量兩瞳孔大小，連續(xù)3次，取平均值并進行比較。滴入腎上腺素15分鐘后，分別于兩眼滴入0.05%硫酸阿托品注射液3滴，15分鐘后觀察兩眼瞳孔變化，并測量其大小，連續(xù)3次，并取平均值第二十二頁，共五十五頁，2022年，8月28日項目正常毛果蕓香堿腎上腺素阿托品瞳孔大小左眼

右眼

記錄

討論題

從實驗結(jié)果中如何說明藥物的協(xié)同作用和拮抗作用？

第二十三頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗四

藥物急性半數(shù)致死量的測定實驗?zāi)康耐ㄟ^實驗，學(xué)習(xí)測定藥物的半數(shù)致死量的方法、步驟和計算過程，了解測定藥物半數(shù)致死量的意義。實驗要求半數(shù)致死量（LD50）是衡量藥物毒性大小的重要標(biāo)志，LD50表示能使全部實驗動物死亡半數(shù)的藥物劑量，是以動物死亡或存活作為質(zhì)反應(yīng)標(biāo)志。LD50小說明藥物的毒性大，LD50大表明藥物毒性小。第二十四頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗器材與藥物

注射器，乙酰甲喹試驗方法預(yù)備試驗取雛雞20只，以5只為1組，分成4組。分別灌服不同劑量的藥物，連續(xù)觀察24h，出現(xiàn)中毒癥狀并記錄死亡數(shù)。找出引起0%及100%死亡率劑量的所在范圍。預(yù)試驗組中給予雛雞500mg/Kg劑量5只雛雞全部死亡，而給予100mg/Kg劑量組的5只雛雞全部存活。通過預(yù)試驗結(jié)果按照下面公式算出劑量間的等比值（1：r）

r≈0.7第二十五頁，共五十五頁，2022年，8月28日式中N為分組組數(shù)，Dm是估計100%死亡的致死量，Dn是估計0%死亡的致死量，r為比值。計算各組劑量：第一組500mg/kg第二組350mg/kg第三組245mg/kg第四組171.5mg/kg第五組120.05mg/kg第六組空白對照組

第二十六頁，共五十五頁，2022年，8月28日正式試驗一個班分兩大組，每大組用50只雛雞（50-60g）進行急性LD50測定。每大組將雛雞50只分為5組，每組10只，按上述計算的劑量口服灌服給藥，每只給1mL?？瞻捉M不給藥。實驗記錄組別劑量mg/kg動物數(shù)死亡數(shù)死亡率P存活率q第一組第二組第三組第四組第五組第六組第二十七頁，共五十五頁，2022年，8月28日計算1.LD50的計算按綜合計算法公式計算2．計算logLD50的標(biāo)準(zhǔn)誤S3.計算95%置信區(qū)界（FL）上述公式中：Xm為最大死亡率組劑量對數(shù)；i為組距（相鄰兩組劑量比值的對數(shù)）；∑P為各組死亡率總和（用小數(shù)表示）；X50為logLD50；Xi相鄰對數(shù)劑量差。第二十八頁，共五十五頁，2022年，8月28日如果試驗結(jié)果最高死亡率在80～100%之間，最低死亡率在20～0%之間，可用下列公式求得校正值：

LD50=log-1[Xm-i(∑p-(3-Pm-Pn)/4]式中：Pm—最高死亡量組Pn—最低死亡量組第二十九頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗五

肝臟損傷對藥物作用的影響實驗?zāi)康?/p>

通過實驗，觀察肝損傷后對藥物作用的影響。實驗?zāi)康?/p>

肝臟是藥物代謝的主要器官，而藥物的代謝主要靠酶的催化。在肝細胞內(nèi)有專門催化藥物等外源性化學(xué)物質(zhì)代謝的微粒體酶，簡稱藥酶。四氯化碳是一種對肝細胞有嚴(yán)重毒害作用的化學(xué)物質(zhì)，可引起中毒性肝炎，使肝臟對藥物的代謝能力降低。本實驗用四氯化碳損害小白鼠的肝臟，使肝藥酶活性受到抑制，從而減緩對硫噴妥鈉的代謝，使麻醉時間延長。第三十頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗儀器、設(shè)備儀器：注射器，針頭，天平，鼠籠。藥物：四氯化碳、硫噴妥鈉實驗內(nèi)容給健康小白鼠注射四氯化碳（0.1mL/10g)，造成肝損傷，后用0.3%硫噴妥鈉注射(0.15mL/10g)，與健康小白鼠對照，比較它們麻醉出現(xiàn)及維持的時間的不同；解剖所有小白鼠，分別觀察它們肝和腎的病理變化，并與健康小白鼠比較。第三十一頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗記錄

肝臟損傷對藥物作用的影響

鼠號體重（g）硫噴妥鈉劑量（mL）注射時間麻醉開始時間麻醉維持時間健康鼠肝損鼠注意事項“麻醉開始時間“為小鼠從腹腔注射硫噴妥鈉溶液后至翻正反射消失時間；“麻醉消失時間”為從翻正反射消失至翻正反射恢復(fù)的時間。第三十二頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗六藥物敏感性實驗學(xué)習(xí)內(nèi)容藥物敏感實驗——紙片法定量藥敏實驗——試管二倍稀釋法學(xué)習(xí)要求掌握兩種藥物敏感實驗的原理、方法及注意事項。第三十三頁，共五十五頁，2022年，8月28日抗菌藥物敏感性試驗（AST，簡稱藥敏試驗）：用于測試抗菌藥物在體外對病原微生物有無抑制作用。常用最低抑菌濃度（MIC）表示，即體外能夠抑制細菌生長的最低藥物濃度。通常根據(jù)MIC結(jié)合常用劑量時體內(nèi)該藥所能達到的血藥濃度，劃定細菌對各種抗生素敏感或耐藥的界限，給出S（敏感）、I（中介）、R（耐藥）等定性的結(jié)果，方便臨床用藥。檢測病原菌對各種抗生素的敏感性，指導(dǎo)臨床合理用藥。用于流行病學(xué)調(diào)查及院內(nèi)感染的監(jiān)控，控制和預(yù)防耐藥菌株的流行。為經(jīng)驗用藥提供參考依據(jù)。方法：擴散法（紙片法）、稀釋法（有瓊脂稀釋法和液體稀釋法）第三十四頁，共五十五頁，2022年，8月28日藥敏紙片的人工制作定性濾紙用打孔器打成直徑6mm的圓片，每100片放入一小瓶中，160℃干熱滅菌1---2小時，或用高壓滅菌（6.8kg30min）后在60℃條件下烘干。（此應(yīng)提前做好）抗菌藥物的濃度（指有效藥物濃度）

青霉素200U/ml其它抗菌藥物1000ug/ml

磺胺類藥物10mg/ml中草藥制劑1g/ml

慶大霉素4萬單位/ml，稀釋為1000單位/ml。（臨床上可按照藥品使用說明書，如上面標(biāo)明5克本品可拌50千克飼料，其換算方法為l克本品可拌10千克飼料，也就是1克本品拌l0000克飼料，相當(dāng)于藥品濃度為l克本品加l0000毫升蒸餾水。）第三十五頁，共五十五頁，2022年，8月28日用無菌操作法將欲測的抗菌藥物溶液1ml，加入100片紙片中，置冰箱內(nèi)1—2小時，用下列方法烘干：培養(yǎng)皿烘干法：將浸有抗菌藥液的紙片攤平在培養(yǎng)皿中，于37℃的溫箱內(nèi)保持2--3小時即可干燥，或放在無菌室內(nèi)過夜干燥。將制好的各種藥物紙片裝入無菌小瓶中，置冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。并用?biāo)準(zhǔn)敏感菌株做敏感性實驗，記錄抑菌環(huán)的直徑。干燥的藥敏紙片可保存6個月。使用前用標(biāo)準(zhǔn)的敏感菌株做藥物敏感實驗，若抑菌環(huán)比原來小，則表明該紙片已失效。第三十六頁，共五十五頁，2022年，8月28日紙片法每組約7-8個平皿（每人1個），每個平皿約20毫升瓊脂培養(yǎng)基，即約200ml。按照每組500毫升瓊脂培養(yǎng)基、100毫升肉湯培養(yǎng)基準(zhǔn)備。每平皿約4張紙片，每班約240張以上。將瓊脂培養(yǎng)基熔融后，每個平皿倒入約20毫升，晾干后，用玻棒蘸含菌棉球（玻棒、棉球均事先消毒）涂抹均勻后晾干。用鑷子夾紙片，每個平皿貼4張紙片，要使紙片全部緊貼培養(yǎng)基。為保證均勻，可于平皿背部劃出貼紙片點。36攝氏度培養(yǎng)過夜。測量寬度。第三十七頁，共五十五頁，2022年，8月28日試管稀釋法每組2排試管，每排10支。共80支。將慶大霉素用肉湯稀釋液成64微克/毫升。每班20毫升即可。挑選10支無菌試管編號1—10。無菌加入1.0毫升肉湯至第2到10管內(nèi)。將64微克/毫升慶大霉素液體，分別加1.0毫升至第1、2管，將第2管混合后取1.0毫升至第3管，依次至第9管，再從第9管取1.0毫升丟去，第10管不加抗生素作陽性對照。第三十八頁，共五十五頁，2022年，8月28日試管稀釋法另準(zhǔn)備肉湯管不加抗生素、細菌作陰性對照。第1—10管分別加入已增菌6小時的細菌濃度約為105-106cfu/ml菌液1.0毫升（細菌菌齡為16-18小時，McFarlandNo0.5管細菌濃度1.5×108cfu/ml，然后用用肉湯1：200稀釋）。培養(yǎng)和結(jié)果判讀：35℃培養(yǎng)16-24小時，肉眼觀察有無細菌生長。陽性可見混濁生長，陰性可見澄清。最終各試管慶大霉素濃度：321684210.50.250微克/毫升第三十九頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗七磺胺類藥物內(nèi)服給藥后的血中藥物濃度測定

目的了解磺胺嘧啶非血管內(nèi)一次給藥后血藥濃度隨時間變化的規(guī)律。原理已知磺胺嘧啶等磺胺類藥物在酸性環(huán)境下其苯環(huán)上的氨基（—NH2）將被離子化而生成銨類化合物（—NH3+）。后者與亞硝酸鈉反應(yīng)可發(fā)生重氮化反應(yīng)進而生成重氮鹽（—N＝N+—）。該化合物在堿性條件下可與麝香草酚生成橙黃色化合物。在525nm波長下比色，其光密度與磺胺嘧啶的濃度成正比。第四十頁，共五十五頁，2022年，8月28日根據(jù)上述原理,在給受試家兔一次靜脈注射一定劑量的磺胺嘧啶后,于不同時間點采集其靜脈血樣,采用比色法對各樣品中磺胺嘧啶的血藥濃度進行定量分析,并以血藥濃度對相應(yīng)時間作圖,從而獲得磺胺嘧啶的靜脈給藥后的藥時曲。

第四十一頁，共五十五頁，2022年，8月28日動物3kg左右家兔一只藥品20％磺胺嘧啶（sulfadiazine，SD）、7.5％三氯醋酸、0.1％SD標(biāo)準(zhǔn)液、0.5％亞硝酸鈉、0.5％麝香草酚（用20％NaOH配制）、1000u/mL肝素生理鹽水、3％戊巴比妥鈉、蒸餾水。器材721分光光度計、離心機、磅秤、手術(shù)器械、動脈夾、尼龍插管（或玻璃插管、硅膠管）、兔手術(shù)臺、注射器（5mL）及針頭、移液器（0.01～1mL）、吸頭、試管、離心管、試管架、玻璃記號筆、藥棉、紗布、計算機。第四十二頁，共五十五頁，2022年，8月28日方法與步驟血中藥物濃度測定麻醉：全麻或局麻均可。取兔一只（實驗前禁食12小時不禁水），記錄體重和性別，耳緣靜脈注射3％戊巴比妥鈉0.8～1.0mL/kg麻醉，仰位固定于兔手術(shù)臺上。手術(shù)：頸部手術(shù)區(qū)剪毛，切皮約6cm左右，鈍性分離皮下組織和肌肉，氣管插管，分離出頸總動脈約2～3cm左右，在其下穿兩根細線，結(jié)扎遠心端，保留近心端。耳緣靜脈注射1000u/mL肝素1mL/kg。插管：用動脈夾夾住動脈近心端，再于兩線中間的一段動脈上剪一“V”型切口，插入尼龍管，用線結(jié)扎牢固，以備取血用。第四十三頁，共五十五頁，2022年，8月28日方法與步驟血中藥物濃度測定取血：打開動脈夾放取空白血樣0.4mL，分別放入1號管（空白管）和2號管（標(biāo)準(zhǔn)管）各0.2mL搖勻靜置。而后腹腔注射20％SD1.5mL/kg，分別于注射后5、15、30、45、75、120、180、240、300分鐘時由動脈取血0.2mL加到含有7.5％三氯醋酸2.7mL的試管中搖勻。標(biāo)準(zhǔn)管加入0.1％SD標(biāo)準(zhǔn)液0.1mL，其余各管加蒸餾水0.1mL搖勻。顯色：將上述各管離心5分鐘（1500-2000轉(zhuǎn)/分），取上清液1.5mL，加0.5％亞硝酸鈉0.5mL，搖勻后，再加入0.5％麝香草酚1mL后溶液為橙色。測定：于分光光度計在525nm波長下測定各樣品管的光密度值。計算血中藥物濃度：根據(jù)同一種溶液濃度與光密度成正比的原理，可用空白血標(biāo)準(zhǔn)管濃度及其光密度值求算出樣品管的磺胺藥物濃度。第四十四頁，共五十五頁，2022年，8月28日結(jié)果與處理將所得數(shù)據(jù)用計算機軟件繪制藥物的藥時曲線。注意事項每次取血前要先將插管中的殘血放掉。每吸取一個血樣時，必須更換吸量管，若只用一支吸量管時必須將其中的殘液用生理鹽水沖凈。將血樣加到三氯醋酸試管中應(yīng)立即搖勻，否則易出現(xiàn)血凝塊。第四十五頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗八

藥物對家兔的利尿作用的影響實驗?zāi)康母鶕?jù)尿液的多少，了解幾種利尿藥的利尿作用實驗原理尿液的生成過程受多種因素的影響。本實驗通過改變某些影響腎小球濾過或腎小管、集合管重吸收的因素，觀察對尿液的影響。第四十六頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗儀器、設(shè)備器材：兔手術(shù)臺，哺乳動物手術(shù)器械一套，膀胱套管，記滴器，培養(yǎng)皿。藥物：20%烏拉坦，生理鹽水，抗利尿素，50%葡萄糖，20%明膠，速尿。實驗內(nèi)容

兔的麻醉用20%烏拉坦溶液（1g/Kg)沿耳緣靜脈注射麻醉后，將兔仰臥固定于手術(shù)臺上，剪下腹部的毛。第四十七頁，共五十五頁，2022年，8月28日

尿液收集方法從恥骨聯(lián)合向上沿正中線作約4cm長的皮膚切口，再沿腹白線剪開腹壁及腹膜，將膀胱翻至體外（勿使腸管外泄，以免血壓下降）。在膀胱底部找到兩側(cè)輸尿管，認(rèn)清兩側(cè)輸尿管在膀胱的開口部分。小心地在兩側(cè)輸尿管下方穿一棉線，將膀胱上翻，結(jié)扎尿道。再在膀胱頂部血管較少的地方做一荷包縫合，中心作一小切口，插入膀胱插管或塑料管，插管口需對準(zhǔn)兩輸尿管出口，收縮縫線結(jié)扎固定，導(dǎo)管的另一端連至計數(shù)器。輕輕將膀胱連同膀胱導(dǎo)管送入腹腔，腹部切口處用止血鉗輕輕夾住，并用溫生理鹽水紗布覆蓋手術(shù)部位。第四十八頁，共五十五頁，2022年，8月28日觀察項目記錄正常的尿量。靜脈注射10mL/kg生理鹽水，觀察尿量變化，同記錄3分鐘并于2~3分后開始下一步實驗。靜脈注射抗利尿素2單位，觀察尿量變化。靜脈快速注射50%葡萄糖（4mL/kg），觀察尿量變化。靜脈注射預(yù)先加熱的37℃明膠10~15mL，觀察尿量變化靜脈注射速尿0.5mL，觀察尿量變化。靜脈注射1：10000鹽酸腎上腺素0.2~0.3mL，觀察尿量變化。第四十九頁，共五十五頁，2022年，8月28日實驗記錄

記錄用藥前后家兔的泌尿量項目

正常

生理鹽水

抗利尿激素

50%葡萄糖

明膠速尿腎上腺素尿量(滴/min)第五十頁，共五十五頁，2022年，8