《蛋白質(zhì)與酶工程實(shí)驗(yàn)》實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱

第頁(yè)《蛋白質(zhì)與酶工程實(shí)驗(yàn)》實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱課程名稱：蛋白質(zhì)與酶工程實(shí)驗(yàn)

課程類別：專業(yè)主干課適用專業(yè)：生物技術(shù)

所屬實(shí)驗(yàn)室：生化與蛋白質(zhì)工程實(shí)驗(yàn)室

實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)、學(xué)分：

32

學(xué)時(shí)

1

學(xué)分一、實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的通過(guò)系列綜合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與實(shí)踐操作，使學(xué)生能自主綜合運(yùn)用所學(xué)基本理論與基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行綜合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作，從而更加系統(tǒng)深入的理解蛋白質(zhì)與酶工程的基礎(chǔ)理論與相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，培養(yǎng)學(xué)生綜合運(yùn)用知識(shí)與分析、解決問(wèn)題的能力，為學(xué)生進(jìn)一步獨(dú)立開(kāi)展科研課題奠定基礎(chǔ)。二、實(shí)驗(yàn)教學(xué)要求蛋白質(zhì)與酶工程實(shí)驗(yàn)以設(shè)計(jì)性和綜合性實(shí)驗(yàn)為主，學(xué)生分組進(jìn)行，每組約20～25人。授課教師通過(guò)發(fā)放微課視頻與實(shí)驗(yàn)題目，并結(jié)合講解和演示，使學(xué)生明白實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c任務(wù)，掌握實(shí)驗(yàn)儀器原理和操作使用過(guò)程，提前撰寫思維導(dǎo)圖式實(shí)驗(yàn)方案與流程，經(jīng)教師審核通過(guò)后，方可進(jìn)生化與蛋白質(zhì)工程實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并要求在規(guī)定時(shí)間內(nèi)熟悉、學(xué)習(xí)儀器設(shè)備的使用與操作，并完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)任務(wù)。三、對(duì)學(xué)生的指導(dǎo)和要求（一）實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)要求：教師通過(guò)網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)上學(xué)生的實(shí)驗(yàn)記錄，定期檢查學(xué)生的實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，并對(duì)學(xué)生所出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行線上與線下指導(dǎo)，引導(dǎo)學(xué)生獨(dú)立分析并解決問(wèn)題，鼓勵(lì)學(xué)生積極創(chuàng)新。（二）實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求：采用山西師范大學(xué)設(shè)備處統(tǒng)一印制的實(shí)驗(yàn)紙，以思維導(dǎo)圖模式撰寫實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)材料與方法、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析?；蛞钥蒲姓撐男问阶珜戨娮影妗Ｒ陨蟽煞N形式均需上傳到網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)。教師進(jìn)行線上評(píng)閱。四、實(shí)驗(yàn)考核方式主要包括四個(gè)方面：思維導(dǎo)圖式實(shí)驗(yàn)方案與流程、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范、網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)實(shí)驗(yàn)進(jìn)度與過(guò)程性結(jié)果撰寫、實(shí)驗(yàn)報(bào)告，每項(xiàng)各占25%。五、實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(一)：抑制條件下Km和Vmax的測(cè)定及抑制類型的判定（5學(xué)時(shí)）（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性■（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握米氏方程基本理論；2.掌握抑制條件下Km和Vmax的測(cè)定方法；3.掌握酶的抑制類型。（4）主要儀器：移液器、錐形瓶、恒溫水浴鍋、分光光度計(jì)。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(二)：固定化酵母細(xì)胞及蔗糖酶的檢測(cè)（3學(xué)時(shí)）（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□

驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握固定化細(xì)胞的原理與方法；2.掌握蔗糖酶酶活檢測(cè)原理與方法。（4）主要儀器：注射器、燒杯等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(三)：大蒜細(xì)胞SOD的提取和分離（6學(xué)時(shí)）（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□

驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握SOD的提取原理；2.掌握酶的分離純化方法。（4）主要儀器：離心機(jī)、分光光度計(jì)、移液器、錐形瓶等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(四)：堿性蛋白酶高產(chǎn)菌株的選育（6學(xué)時(shí)）（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□

驗(yàn)證性□

設(shè)計(jì)性■

綜合性■（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握高通量篩選產(chǎn)酶微生物的方法；2.掌握快速檢測(cè)堿性蛋白酶的酶活方法。（4）主要儀器：超凈工作臺(tái)、高壓滅菌鍋、移液器等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(五)：自主設(shè)計(jì)酶分子修飾實(shí)驗(yàn)（6學(xué)時(shí)）（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□

驗(yàn)證性□

設(shè)計(jì)性■

綜合性■（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握酶分子修飾原理；2.掌握酶分子修飾技術(shù)。（4）主要儀器：移液器、錐形瓶、分光光度計(jì)、離心機(jī)。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(六)：基于易錯(cuò)PCR原理自主設(shè)計(jì)酶的定向進(jìn)化實(shí)驗(yàn)（6學(xué)時(shí)）（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□

驗(yàn)證性□

設(shè)計(jì)性■

綜合性■（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握易錯(cuò)PCR原理；2.掌握酶的定向進(jìn)化基本理論與知識(shí)；3.掌握易錯(cuò)PCR操作方法。（4）主要儀器：PCR擴(kuò)增儀、移液器、分光光度計(jì)、離心機(jī)。六、實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)分配序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目學(xué)時(shí)1抑制條件下Km和Vmax的測(cè)定及抑制類型的判定52固定化酵母細(xì)胞及蔗糖酶的檢測(cè)33大蒜細(xì)胞SOD的提取和分離64堿性蛋白酶高產(chǎn)菌株的選育65自主設(shè)計(jì)酶分子修飾實(shí)驗(yàn)66基于易錯(cuò)PCR原理自主設(shè)計(jì)酶的定向進(jìn)化實(shí)驗(yàn)6合計(jì)

32七、推薦教材與輔助教學(xué)資料［1］《生物工程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》（第一版），王祎玲、段江燕編，科學(xué)出版社，2018年；［2］《酶工程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》（第一版），王君編，化學(xué)工業(yè)出版社，2018年；［