生物樣品成都

生物樣品成都第一頁，共四十七頁，2022年，8月28日概述生物樣品的采集和保存生物樣品檢測方法生物監(jiān)測質(zhì)量保證規(guī)范第二頁，共四十七頁，2022年，8月28日一、概述生物樣品定義

機體的體液、分泌物、排泄物以及臟器組織等，如血液、唾液、乳液、淚液、汗液、糞便、尿液、頭發(fā)、指甲等。第三頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物樣品測定的意義反映人體接觸毒物的水平了解毒物在體內(nèi)的吸收、分布、生物轉(zhuǎn)化和排除情況為職業(yè)病的臨床診斷和藥物療效提供可靠的依據(jù)制定生物樣品中有毒物質(zhì)的生物接觸限值提供科學(xué)依據(jù)第四頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物樣品測定的內(nèi)容測定生物樣品中有毒物質(zhì)的含量測定有毒物質(zhì)的代謝產(chǎn)物測定生物樣品中毒物引起生化指標的改變測定生物樣品中酶學(xué)指標

第五頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物樣品的本底值定義生物樣品的本底值也稱參比值，是指有些生物監(jiān)測指標在不接觸職業(yè)毒物的健康人群，也可檢測到的一定水平。第六頁，共四十七頁，2022年，8月28日制定生物樣品本底值的意義1.是勞動衛(wèi)生檢驗和職業(yè)病防治、診斷研究的基本資料。2.評價環(huán)境污染水平3.了解職業(yè)者接觸有毒物質(zhì)的程度，評價工作場所的污染情況。4.為制定衛(wèi)生標準，制定生物接觸限值提供科學(xué)的依據(jù)。第七頁，共四十七頁，2022年，8月28日制定生物樣品本底值的基本要求1.確定分析方法：首選標準的或統(tǒng)一的分析方法。否則，應(yīng)根據(jù)分析方法制定程序（程序包括測定條件、標準曲線、檢測限、精密度、準確度、干擾實驗、樣品的穩(wěn)定性）選擇分析方法。2.測定對象的選擇：測定對象通常選擇不接觸被測毒物的正常人。（排除了影響測定指標的疾病和因素的人）第八頁，共四十七頁，2022年，8月28日制定生物樣品本底值的基本要求3.確定樣本數(shù)量：樣本數(shù)量的確定應(yīng)根據(jù)測定的目的的要求和被測指標的波動范圍及人力、物力而定，一般不少于100例。4.確定本底值范圍：按統(tǒng)計學(xué)方法對測定結(jié)果進行正態(tài)性檢驗，根據(jù)測定結(jié)果的分布類型，選用相應(yīng)的統(tǒng)計方法。偏態(tài)分布用百分位法計算本底值范圍；測定數(shù)據(jù)成正態(tài)分布，用正態(tài)分布計算本底值范圍。第九頁，共四十七頁，2022年，8月28日二、生物樣品采集和保存

采樣方法采樣時間和間隔測定目的

儲藏存放

采集何種樣品第十頁，共四十七頁，2022年，8月28日采樣時間的選擇具有生物限值的化合物，其生物材料采集具有明確規(guī)定，應(yīng)嚴格執(zhí)行。沒有限值的生物樣品，采集時間應(yīng)根據(jù)毒物代謝動力學(xué)為依據(jù)：半減期短的(幾分鐘～幾小時)化合物，其在各種組織中的水平變化很快，所以采樣時間限制要嚴格；半減期較長的毒物或代謝物，它們在各種組織中的濃度反映了較長時間的接觸程度，所以采樣時間可以不太嚴格。第十一頁，共四十七頁，2022年，8月28日采樣時間的選擇在生物限值或檢測方法中規(guī)定的采樣時間：班前是指工作班前1小時。班中是指開始正常工作后2小時到下班前1小時。班末是指下班前1小時。班后是下班后1小時。下一班班前是指第二個工作班前1小時。工作周末的班末是指一個工作周（通常為5個工作班）的最后一個工作班下班前1小時。第十二頁，共四十七頁，2022年，8月28日采樣環(huán)境

檢測對象應(yīng)離開工作場所，脫去工作服，洗凈手、臉及取樣部位，有條件的要在洗浴后進行。采樣地點應(yīng)清潔，沒有污染；選擇避風(fēng)和上風(fēng)方向的場所進行，同時注意由于通風(fēng)造成的污染。檢測原形化合物時，對環(huán)境的污染要特別注意。

第十三頁，共四十七頁，2022年，8月28日容器的選擇和清洗

一般根據(jù)待測物的化學(xué)性質(zhì)、樣品的性狀和樣品需要保存的條件來選擇容器。

待測物是無機金屬和類金屬化合物，可用高壓聚乙烯塑料、聚丙烯塑料、石英、硬質(zhì)玻璃等容器。待測物為有機化合物，采樣用的容器應(yīng)選用玻璃或聚乙烯等制品。第十四頁，共四十七頁，2022年，8月28日容器的選擇和清洗注意事項：要避免使用橡膠和添加染料的制品。如果樣品需要冷凍保存，則不宜用玻璃容器，以防凍裂。采樣用的容器應(yīng)進行本底值抽檢，空白值要低于方法的檢出限。在采樣容器上必須貼上統(tǒng)一的標簽，標簽上注明采樣日期、樣品編號(與采樣記錄用統(tǒng)一的編號)、加入了什么防腐劑及加入量等項目。第十五頁，共四十七頁，2022年，8月28日頭發(fā)的采集和保存采集頭發(fā)的優(yōu)點采樣時受檢者無疼痛、無創(chuàng)傷樣品容易儲藏和運送樣品可長期保存，必要時可復(fù)檢能夠反映某個時期微量元素的吸收和代謝的歷史。第十六頁，共四十七頁，2022年，8月28日三、生物樣品的檢測方法介紹本部分僅介紹目前常用的生物樣品中化學(xué)物質(zhì)的檢測方法第十七頁，共四十七頁，2022年，8月28日常用檢測技術(shù)分類方法光譜法分子光譜原子光譜色譜法氣相色譜液相色譜離子色譜質(zhì)譜法氣質(zhì)液質(zhì)ICP-MS電化學(xué)法極譜法電位溶出電位分析法電導(dǎo)法容量法酸堿滴定、氧化還原滴定、絡(luò)合滴定、.…..第十八頁，共四十七頁，2022年，8月28日分子光譜（分光光度法）

紫外分光光度法紅外分光光度法可見分光光度法熒光分光光度法用于無機和有機化合物的測定第十九頁，共四十七頁，2022年，8月28日

原子光譜法原子吸收光譜法(AAS)原子熒光光譜法(AFS)原子發(fā)射光譜法(AES)主要用于金屬和類金屬的測定第二十頁，共四十七頁，2022年，8月28日色譜法用于分離和測定多種有機化合物和陰離子等化合物色譜類別分析對象氣相色譜(GC)分子量小于400有機物高效液相色譜(HPLC)分子量400~1000有機物離子色譜(IC)F-、Cl-、SO42-等第二十一頁，共四十七頁，2022年，8月28日電化學(xué)法

用于測定氟及一些金屬化合物，靈敏度高，精密度取決于儀器性能和操作。催化極譜法電位溶出法離子選擇電極法第二十二頁，共四十七頁，2022年，8月28日樣品檢測定量方法校準曲線法標準加入法內(nèi)標法第二十三頁，共四十七頁，2022年，8月28日定量方法：校準曲線法標準曲線法：用標準溶液直接配制標準系列進行測定，樣品基體不干擾測定時使用。工作曲線法：樣品基體對測定有干擾時，在標準系列中加入樣品基體直接進行測定，或同樣品一起處理后再測定。第二十四頁，共四十七頁，2022年，8月28日校準曲線的要求校準曲線濃度點（包括試劑空白）光譜法≥5個色譜法、電化學(xué)法等≥3個相關(guān)性(r)GFAAS≥0.99其它方法≥0.999第二十五頁，共四十七頁，2022年，8月28日定量方法：標準加入法

樣品基體對測定有干擾時，取等量的樣品若干份，其中一份不加標，其它分別加入不同量的標準溶液，制成標準系列，進行樣品處理后測定。各信號值減去試劑空白信號后繪制標準曲線，其延長線與濃度軸的交點為樣品測定值。樣品0加標1加標2加標3樣品測定值C第二十六頁，共四十七頁，2022年，8月28日定量方法：內(nèi)標法

內(nèi)標法是一種間接或相對的校準方法，在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內(nèi)標物質(zhì)以校準和消除由于操作條件的波動而對分析結(jié)果產(chǎn)生的影響，以提高分析結(jié)果的準確度。操作在分析試樣中加入已知量的內(nèi)標物，同時測定內(nèi)標物和待測物的信號，以信號比對濃度比繪制標準曲線，或直接計算，從而得到待測物含量。內(nèi)標物的要求與待測組分性質(zhì)相似，如沸點、極性、化學(xué)結(jié)構(gòu)等；分析試樣中不存在，且不與被測組分起化學(xué)反應(yīng)；與待測組分的出峰時間相近，且又不共溢出；選擇合適的內(nèi)標物加入量，最好接近待測物的量。第二十七頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物監(jiān)測質(zhì)量保證規(guī)范

職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測質(zhì)量保證規(guī)范中華人民共和國國家標準

GB／T16126─1995QuidelinesforqualityassuranceofbiologicalmonitoringGB／T173─2006Specificationsofqualityassuranceforbiologicalmonitoringinoccupationalhealth第二十八頁，共四十七頁，2022年，8月28日職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測質(zhì)量保證規(guī)范職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測實驗室的基本要求生物樣品的采集生物樣品的運輸和保存生物樣品的預(yù)處理生物樣品的測定檢測結(jié)果的報告和評價第二十九頁，共四十七頁，2022年，8月28日職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測實驗室的基本要求

人員從事生物監(jiān)測評價的人員必須熟練掌握生物監(jiān)測指標、職業(yè)接觸生物限值及其檢測結(jié)果評價等方面的知識和技術(shù)。從事職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測的質(zhì)量保證人員必須掌握與生物監(jiān)測指標、職業(yè)接觸生物限值和生物樣品采集和檢測有關(guān)的質(zhì)量保證知識以及實驗室質(zhì)量保證管理技能。第三十頁，共四十七頁，2022年，8月28日職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測實驗室的基本要求

儀器設(shè)備實驗室應(yīng)具備從事生物樣品采集、運輸、保存和檢測所需的儀器設(shè)備,其使用性能應(yīng)滿足要求。實驗室使用的計量儀器要依法定期檢定和校準;不能使用未經(jīng)檢定或檢定不合格的計量儀器。當儀器設(shè)備的檢測性能發(fā)生變化或損壞時,必須維修或校準,并經(jīng)檢定合格后才能使用。第三十一頁，共四十七頁，2022年，8月28日職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測實驗室的基本要求試劑實驗使用的水和試劑要滿足檢測的要求,所含雜質(zhì)不能影響檢測;不能使用過期、變質(zhì)、受污染或無標簽的試劑。第三十二頁，共四十七頁，2022年，8月28日職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測實驗室的基本要求試劑實驗室配制標準溶液時,要使用基準物質(zhì)或分析純以上的試劑,試劑的分析性能應(yīng)與待測物相同或相似;使用的溶劑應(yīng)與樣品溶液相同或相似。應(yīng)有配制記錄。記錄包括試劑名稱、配制濃度、配制方法、配制日期、穩(wěn)定期、配制人等。配制的標準溶液貯備液應(yīng).專人保管,密封低溫保存;在有效期內(nèi)使用。使用前,檢查標準溶液貯備液的性狀和體積等的變化,若有變化,應(yīng)廢棄。低濃度的標準應(yīng)用液宜當日配制和使用。實驗室應(yīng)盡量使用國家認可的標準物質(zhì)或標準溶液,并有檔案記錄,內(nèi)容包括標準號、標準名稱、生產(chǎn)單位、采購日期、有效使用日期、采購人、使用領(lǐng)取人、領(lǐng)用量、領(lǐng)取日期報廢日期等。第三十三頁，共四十七頁，2022年，8月28日職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測實驗室的基本要求實驗室環(huán)境及其他要求實驗室應(yīng)保持清潔、整齊,各種儀器設(shè)備放置合理有序,有利于實驗操作和保證檢測質(zhì)量。第三十四頁，共四十七頁，2022年，8月28日職業(yè)衛(wèi)生生物監(jiān)測實驗室的基本要求實驗室環(huán)境及其他要求分析天平應(yīng)放置在專用的防塵、防震防腐蝕、防潮和防日光直射的天平室內(nèi)；有條件的實驗室保持恒溫恒濕。氣溫、氣壓和濕度對檢測有影響的情況下,實驗室應(yīng)配備氣溫、氣壓和濕度的測量設(shè)備;有條件的實驗室保持恒溫恒濕。產(chǎn)生和使用有害有毒物質(zhì)、易燃易爆物質(zhì)和污水等的實驗室應(yīng)配備通風(fēng)柜、防火和防爆等防護設(shè)備和用品以及污水排放設(shè)施。第三十五頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物樣品的測定分析方法的選定分析方法應(yīng)優(yōu)先采用國家頒布的標準方法。在分析方法（標準方法，推薦方法或本實驗室方法）選擇前應(yīng)對該方法的準確度、精密度、檢測限定量下限進行驗證，符合實驗室要求后，寫出本實驗室的詳細的操作程序。第三十六頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物樣品的測定

方法確認

準確度測定結(jié)果與被測對象的真值接近的程度，用誤差或相對誤差表示.評價準確度的方法有以下三種（按優(yōu)先順序排列）:第三十七頁，共四十七頁，2022年，8月28日a.對照分析:用標準物質(zhì)評價方法準確度。測定基體和濃度相同或相近的標準物質(zhì)，根據(jù)測定結(jié)果與標準品的給定值的符合程度來估計分析方法的準確度；b.比較實驗:與另一分析方法，最好是標準檢驗方法，對同一度樣進行分析，比較所得測定值，根據(jù)其符合程度來估計方法準確度；c.加標回收百分率:在試樣中加入定量被測物的標準溶液，從測定結(jié)果中減去樣中被測物的含量后，計算加入量（預(yù)期值）回收的百分率。加標的量及加標待測物的化學(xué)形式應(yīng)盡量與試樣中被測物的含量相近。加標后的測定值不得超過方法的檢測上限。當測定物含量〉10-8ｇ／ｇ（mL）時，回收率必須在85％～105％之間。第三十八頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物樣品的測定

精密度對試樣進行反復(fù)多次測定所得數(shù)據(jù)之間的離散程度。精密度包括連續(xù)精密度（批內(nèi)精密度），重現(xiàn)性精密度（批間精密度）和再現(xiàn)性精密度（實驗室間的精密度）。連續(xù)精密度、重現(xiàn)性精密度和再現(xiàn)性精密度的定義見附錄Ｄ。精密度的表現(xiàn)方法:精密度用平均值加標準差（Ｘ±Ｓ）或變異系數(shù)（CV＝S／X，％）來表示。在一般的生物監(jiān)測方法中，如被測物的濃度≥10-9g/g（mL）時，變異系數(shù)（包括連續(xù)精密度和重現(xiàn)性精密度）<10％；如測定濃度小于10-9g/g（mL），變異系數(shù)應(yīng)小于平行樣最大允許誤差第三十九頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物樣品的測定

檢測限能測定出并區(qū)別于空白樣的最小濃度或量。a.光譜法:多次測定（十次以上）空白的標準偏差的三倍所相當?shù)臐舛龋籦.比色法:校準曲線上查出吸光度0.02所對應(yīng)的濃度或量或多次測定（十次以上）空白的標準偏差的三倍所相當?shù)臐舛?；c.色譜法和電化學(xué)法:儀器噪聲的三倍信號所對應(yīng)的濃度或量。檢測限要滿足實驗的要求。第四十頁，共四十七頁，2022年，8月28日生物樣品的測定定量下限在給定的置信水平區(qū)間內(nèi)，能報出定量結(jié)果的最低濃度或量。定量下限用空白多次測定的平均值的10倍標準偏差所相當?shù)臐舛然蛄縼肀硎?。第四十一頁，共四十七頁?022年，8月28日生物樣品的測定

質(zhì)量控制校準曲線a.每次分析樣品時必須繪制校準曲線。校準曲線應(yīng)由空白及三～五個已知濃度的標準溶液，按照與樣品相同的測定步驟，包括樣品的前處理操作制成。如已經(jīng)過充分的驗證，確認省略某些操作步驟對校準曲線無顯著影響時，可免除這些步驟。如校準曲線與濃度具有極好的直線關(guān)系，并且有高度的重現(xiàn)性，可在每次分析樣品時只選擇兩個適當濃度的標準物和空白，同時進行測定，以核校原有校準曲線。色譜法宜用內(nèi)標法制做校準曲線。第四十二頁，共四十七頁，2022年，8月28日b.在繪制校準曲線時，以測量信號值為縱坐標，以濃度（或量）為橫坐標，將測定數(shù)據(jù)標在坐標紙上作圖。若測量信號與濃度（或量）相關(guān)系數(shù)大于或等