熒光效率儀使用方法

熒光效率儀使用方法第一頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日一、快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)

1.簡(jiǎn)介

將暗適應(yīng)的綠色植物或含有葉綠素的部分組織突然暴露在可見(jiàn)光下之后就會(huì)觀察到，植物綠色組織發(fā)出一種暗紅色，強(qiáng)度不斷變化的熒光，熒光隨時(shí)間變化的曲線(xiàn)稱(chēng)為葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)。第二頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日O點(diǎn)J點(diǎn)I點(diǎn)P點(diǎn)第三頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日植物發(fā)出的熒光強(qiáng)度隨時(shí)間而變化，在從暗適應(yīng)到暴露在光下時(shí)，熒光強(qiáng)度先上升然后下降。一般情況下，剛暴露在光下時(shí)的最低熒光定義為O點(diǎn)，熒光的最高峰定義為P點(diǎn)，快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)指的就是從O點(diǎn)到P點(diǎn)的熒光變化過(guò)程，主要反映了PSII的原初光化學(xué)反應(yīng)及光合結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)和狀態(tài)等的變化，而下降的第四頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日階段主要反映了光合碳代謝的變化，隨著光合碳代謝速率的上升，熒光強(qiáng)度逐漸下降（Krause和Weis，1991）。連續(xù)激發(fā)式熒光儀（如Handy-PEA

）主要是通過(guò)短時(shí)間照光后熒光信號(hào)的瞬時(shí)變化反映暗反應(yīng)活化前PSII的光化學(xué)變化，它具有相當(dāng)高的分辨率，所以能夠從O-P上升過(guò)程中捕捉到更多的熒光變化信第五頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日息，如O-P變化過(guò)程中的另外兩個(gè)拐點(diǎn)（J點(diǎn)和I點(diǎn)）。從照光后的10μs到5min內(nèi)不同時(shí)間的熒光信號(hào)都能被按時(shí)記錄。在對(duì)快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)作圖時(shí)，為了更好地觀察J點(diǎn)和I點(diǎn)，結(jié)果得到O-J-I-P誘導(dǎo)曲線(xiàn)。植物快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)曲線(xiàn)中包含著大量關(guān)于PSII反應(yīng)中心原初光化學(xué)反應(yīng)第六頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日的信息（Forceetal，2003；Lazár，2006），通過(guò)對(duì)曲線(xiàn)熒光參數(shù)的分析，可以知道植物不同發(fā)育時(shí)期光合結(jié)構(gòu)的變化。為了能更好地反映動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)和被測(cè)樣品材料的關(guān)系，Strasser和Strasser（1995）以生物膜能量流動(dòng)為基礎(chǔ)，通過(guò)計(jì)算能量流和能量比率來(lái)衡量在給定物流狀態(tài)下樣品材料內(nèi)部變化，建立了高度簡(jiǎn)

第七頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日化的能量流動(dòng)模型圖。依照能量流動(dòng)模型，天線(xiàn)色素（Chl）吸收的能量（ABS）的一部分以熱能和熒光（F）的形式耗散掉，另一部分則被反應(yīng)中心（RC，在JIP-test中RC指有活性的反應(yīng)中心）所捕獲（TR），在反應(yīng)中心激發(fā)能被轉(zhuǎn)化為還原能，將QA還原成QA-，后者又可以被重新氧化，從而產(chǎn)生電子傳遞（ET），把傳遞

第八頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日的電子用于固定CO2或其它途徑。在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的數(shù)據(jù)處理稱(chēng)為“JIP-test”。JIP-test為我們提供了被測(cè)樣品材料的大量信息。快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)包含豐富和復(fù)雜的信息。第九頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日二、Handy-PEA使用說(shuō)明第十頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日第十一頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日4.用配備的暗適應(yīng)夾，對(duì)葉片進(jìn)行充分的暗適應(yīng)。將葉片夾入暗適應(yīng)夾中，關(guān)閉適應(yīng)夾上的金屬遮光片，暗適應(yīng)10分鐘以上。第十二頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日5.將探頭置于暗適應(yīng)夾上的圓形槽之中，確保探頭與暗適應(yīng)夾緊密接觸，無(wú)光線(xiàn)進(jìn)入。用手按緊探頭與暗適應(yīng)夾，拉開(kāi)適應(yīng)夾上的金屬遮光片。第十三頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日6.按下探頭一側(cè)的遙控按鈕，或從菜單中選擇測(cè)定功能進(jìn)行測(cè)定。7.待儀器測(cè)定完畢后（大約1秒），記錄測(cè)定數(shù)據(jù)的編號(hào)，然后點(diǎn)擊OK。使用上下光標(biāo)選擇是否保存數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)保存完畢點(diǎn)擊OK即可進(jìn)入下一次測(cè)定。第十四頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日三、數(shù)據(jù)傳輸與保存1.將儀器與計(jì)算機(jī)連接，點(diǎn)擊on/off打開(kāi)儀器。2.雙擊打開(kāi)數(shù)據(jù)傳輸軟件第十五頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日出現(xiàn)下圖第十六頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊圖片進(jìn)入第十七頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日從HPEA中傳出數(shù)據(jù)第十八頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日如果要輸入的數(shù)據(jù)是第100-200個(gè)，應(yīng)在Firstfile中輸入100，在Lastfile中輸入200，然后點(diǎn)擊Transfer。第十九頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日傳輸完畢，點(diǎn)擊“Close”第二十頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日保存數(shù)據(jù)第二十一頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日保存文件，自定義文件名第二十二頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊OK，完成數(shù)據(jù)保存。在對(duì)話(huà)框中輸入描述數(shù)據(jù)的字符，字符不超過(guò)250個(gè)即可。第二十三頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日如何打開(kāi)保存文件？打開(kāi)傳輸軟件，點(diǎn)擊第二十四頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日在文件夾中找到目標(biāo)文件，打開(kāi)即可第二十五頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊OK，即可打開(kāi)文件查看數(shù)據(jù)。第二十六頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日四、BiolyzerHP3使用說(shuō)明雙擊打開(kāi)BiolyzerHP3分析軟件第二十七頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊close第二十八頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊圖片第二十九頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊第三十頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日選擇文件第三十一頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日注意，此處可能出現(xiàn)錯(cuò)誤！正確如下，可點(diǎn)擊“是”第三十二頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日錯(cuò)誤如下，出現(xiàn)原因是：測(cè)定數(shù)據(jù)存在異常數(shù)值，在傳輸軟件HPEA中將異常數(shù)值刪除即可。第三十三頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日用HPEA傳輸軟件打開(kāi)出現(xiàn)錯(cuò)誤的文件，選中異常數(shù)值，右鍵點(diǎn)擊Cutselectedlines即可，然后再次保存數(shù)據(jù)。第三十四頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日打開(kāi)文件后，點(diǎn)擊下圖中的“大腦”圖標(biāo)第三十五頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日工具欄功能增加，變?yōu)榈谌?yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日選中待處理的數(shù)據(jù)第三十七頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日如果要保存數(shù)據(jù)，點(diǎn)擊“Tools”第三十八頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日出現(xiàn)下圖第三十九頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊上圖中的紅圈處的下拉箭頭，選擇“MS-ExcelFile”第四十頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊“YES”第四十一頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日選擇路徑，保存文件。用Excel可打開(kāi)文件第四十二頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日如果想進(jìn)一步看數(shù)據(jù)之間的差異，選擇不同的模式處理你的數(shù)據(jù)，具體可供選擇的有如下紅色圓圈中的模式：第四十三頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊紅圈中的按鈕可看到O-J-I-P圖第四十四頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日第四十五頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日利用右上角“Plotsettings”可設(shè)定一些參數(shù)。第四十六頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日如：X和Y軸范圍第四十七頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日點(diǎn)擊紅圈中的圖標(biāo)第四十八頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日可以做出下圖第四十九頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日并得到大量數(shù)據(jù)第五十頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日五、應(yīng)用實(shí)例李鵬民,高輝遠(yuǎn),RetoJ.Strasser(2005).快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動(dòng)力學(xué)分析在光合作用研究中的應(yīng)用.植物生理學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)報(bào),31(6):559-566(重點(diǎn)參閱此文)許珍,李鵬民,高輝遠(yuǎn),董樹(shù)亭,王空軍,張吉旺(2007).玉米不同朝向葉片原初光化學(xué)反應(yīng)日變化的差異.

作物學(xué)報(bào),33(8):1375-1379孫山,王少敏,王家喜,高輝遠(yuǎn)(2008).黑暗中脫水對(duì)‘金太陽(yáng)’杏離體葉片和功能的影響.園藝學(xué)報(bào),35(1):1-6以上是一些中文應(yīng)用實(shí)例，可用于入門(mén)學(xué)習(xí)。更多應(yīng)用實(shí)例可根據(jù)需要自行查閱。第五十一頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日結(jié)語(yǔ)以上是對(duì)熒光效率儀的簡(jiǎn)單介紹，還有很多功能有待大家在使用過(guò)程中去開(kāi)發(fā)和利用。由于它具有獲得信息量大、操作簡(jiǎn)便、易于重復(fù)等特點(diǎn)，所以是深入研究光合作用原初反應(yīng)的一種有力而便捷的工具。第五十二頁(yè)，共五十三頁(yè)，2022年，8月28日參考文獻(xiàn)ForceL,CritchleyC,vanRensenJJS.2003.Newfluorescenceparametersformonitoringphotosynthesisinplants.PhotosynthRes,78:17~33KrauseGH,WeisE.1991.Chlorophyllfluorescenceandphotosynthesis:thebasics.AnnuRevPlantPhysiolPlantMolBiol,42:313~349LazárD.2006.Thepolyphasicchlorophyllafluorescencerisemeasuredunderhighintensityofexcitinglight.FunctionalPlantBiology,33:9~30StrasserBJ,StrasserRJ