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藥品性狀鑒別主講人:XXX操作步驟5.顯微測(cè)量:顯微鑒定時(shí)應(yīng)用測(cè)量方法以測(cè)定細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的大小,應(yīng)用最多的是長(zhǎng)度測(cè)定。常用的量具是目鏡測(cè)微尺與載物臺(tái)微尺。操作步驟5.顯微測(cè)量:
(1)目鏡測(cè)微尺,又稱(chēng)目鏡量尺或目微尺。它是放在目鏡內(nèi)的一種標(biāo)尺,是一個(gè)直徑18-20mm的圓形玻璃片,中央刻有精確等距離的平行線(xiàn)刻度,常為50或100條,目鏡測(cè)微尺是用以直接測(cè)量物體用的,但其刻度所代表的長(zhǎng)度是根據(jù)顯微鏡放大倍數(shù)不同而改變,故使用前必須用載物臺(tái)測(cè)微尺來(lái)標(biāo)化。操作步驟5.顯微測(cè)量:
(2)載物臺(tái)測(cè)微尺,又稱(chēng)鏡臺(tái)測(cè)微尺或臺(tái)微尺。它是一種特制的載玻片,中央粘有一小圓形玻片,上刻有將1mm(或2mm)精確等分為100(或200)小格的細(xì)線(xiàn),每小格長(zhǎng)為10μm,它是用以標(biāo)化目鏡測(cè)微尺的。(3)目鏡測(cè)微尺的標(biāo)化,以確定使用同一顯微鏡及特定信數(shù)的物鏡、目鏡和鏡筒長(zhǎng)度時(shí),目鏡測(cè)微尺上每一格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度。操作步驟5.顯微測(cè)量:
標(biāo)化方法:將載物臺(tái)測(cè)微尺置于顯微鏡鏡臺(tái)上,按常規(guī)對(duì)光調(diào)焦,并移動(dòng)測(cè)微尺物象于視野中央,從鏡筒中取下目鏡,旋下接目鏡的目鏡蓋,將目鏡測(cè)微尺放入目鏡筒中部的光欄上(應(yīng)正面向上),旋上目鏡蓋后返置鏡筒上,此時(shí)在視野中,除鏡臺(tái)測(cè)微尺的象外,還同時(shí)可觀察到目鏡測(cè)微尺的分度小格,移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺和旋轉(zhuǎn)目鏡,使兩種量尺的刻度平行。左邊的“0”刻度重合,尋找第二條重合刻度記錄兩刻度的讀數(shù),并根據(jù)比值計(jì)算出目鏡測(cè)微尺每小格在該物鏡條件下所相當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度(μm)。
操作步驟5.顯微測(cè)量:
標(biāo)化方法:例如:接目鏡頭為10×,接物鏡頭為40×?xí)r,目鏡測(cè)微尺每17小格相當(dāng)于載物臺(tái)量尺4小格,則目鏡測(cè)微尺每1小格的長(zhǎng)度為4×10μm÷17=2.35μm。操作步驟5.顯微測(cè)量:
(4)測(cè)量細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物的方法:將載物臺(tái)測(cè)微尺取下,換以裝有待測(cè)的標(biāo)本載片。對(duì)光,調(diào)焦,移動(dòng)載片,使需測(cè)量的目的物置于目鏡量尺范圍內(nèi),調(diào)清物象,計(jì)數(shù)出目的物占測(cè)微尺的小格數(shù),乘以目鏡尺每1小格的長(zhǎng)度值,即得。操作步驟5.顯微測(cè)量:
例如:測(cè)得淀粉粒長(zhǎng)經(jīng)為20小格,每小格長(zhǎng)2.35μm,20×2.35μm=47μm。測(cè)量通常是在高倍鏡下進(jìn)行,因目鏡量尺的每一小格的長(zhǎng)度值較小,結(jié)果較為準(zhǔn)確,但如測(cè)量較長(zhǎng)的物體,如纖維、非腺毛等的長(zhǎng)度時(shí),則在低倍鏡下測(cè)量為較為方便。每次測(cè)量記下數(shù)據(jù),并分析數(shù)據(jù)最小量值、最大量值和多見(jiàn)量值(μm)。如浙貝母淀粉粒直徑為6-56μm,表示最小量值和最大量值。如為6-40-56μm,中間的數(shù)值表示多見(jiàn)量值。測(cè)量直徑時(shí),應(yīng)以物體中部為準(zhǔn)。
操作步驟5.顯微測(cè)量:
目鏡測(cè)微尺所代表的長(zhǎng)度值隨不同目鏡與物鏡配合而異,因此在實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)將專(zhuān)用的目鏡測(cè)微尺,在所用顯微鏡不同的倍數(shù)的目鏡與物鏡組合后,進(jìn)行測(cè)量其長(zhǎng)度值,全部測(cè)定后記載于實(shí)驗(yàn)記錄本或?qū)?shù)值表貼在顯微鏡座上,備用。測(cè)量時(shí),如大小與規(guī)定有差異時(shí),允許有少量略高于或低于規(guī)定的數(shù)值。操作過(guò)程的記錄
1.組織特征的記錄,應(yīng)從外至內(nèi)的次序進(jìn)行,對(duì)有鑒別意義的特征需詳細(xì)的描述,并要繪制簡(jiǎn)圖。2.粉末顯微鑒別時(shí),先記錄原粉末的色澤、氣味,然后邊觀察,邊記錄,注意觀察應(yīng)找的特征,將每一特征一一描述及繪圖,在觀察與描述時(shí),即應(yīng)測(cè)定其長(zhǎng)度,一一作記錄,分析統(tǒng)計(jì)其長(zhǎng)度。操作過(guò)程的記錄
描述特征時(shí),應(yīng)根據(jù)先多數(shù)后少數(shù)的順序,將易見(jiàn)、多見(jiàn)的特征先加以描述,順次而為少見(jiàn)的,最后再描述偶見(jiàn)的,并在特征項(xiàng)下加注“多見(jiàn)”、“少見(jiàn)”等字樣。描述應(yīng)先著重描述特殊的組織、細(xì)胞和含有物。對(duì)于各類(lèi)藥材均具有的一些基本組織,如葉類(lèi)藥材有柵欄細(xì)胞、海綿細(xì)胞、細(xì)小導(dǎo)管等可不作重點(diǎn)描述。操作過(guò)程的記錄
3.繪圖時(shí)應(yīng)注意特征明確、線(xiàn)條清晰,徒手繪圖時(shí),一邊用左眼向顯微鏡內(nèi)觀察,一邊睜開(kāi)右眼將視野中特征圖象用鉛筆(HB畫(huà)粗線(xiàn)、4H畫(huà)中線(xiàn)、6H畫(huà)細(xì)線(xiàn))轉(zhuǎn)繪于記錄紙上。顯微鑒別法注意事項(xiàng)
1.粉碎用具用完后,必須處理干凈,干燥后方能使用另一種藥材。2.所用的載玻片和蓋玻片應(yīng)絕對(duì)干凈,新片要用洗液浸泡或用肥皂水煮半小時(shí),用水沖洗,再用蒸餾水沖洗1-2次,置于70%-90%乙醇中,取出,烘干。3.進(jìn)行顯微鑒別實(shí)驗(yàn)時(shí)有一定的步驟,一般先進(jìn)行甘油醋酸片的觀察后進(jìn)行水合氯醛片的觀察,最后再進(jìn)行滴加試劑或結(jié)合其他理化試劑的顯微觀察,所以在實(shí)驗(yàn)中,首先觀察淀粉粒,不論其多少、大小,首先描述,其次是它的顯微特征。
顯微鑒別法注意事項(xiàng)
4.為提高顯微鑒別的正確性,可與對(duì)照藥材或已經(jīng)鑒定品種的藥材對(duì)照觀察。5.成方制劑鑒別前,應(yīng)了解處方組成,分析處方中各
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