《微生物學與免疫學》8王瑩抗生素

一、現(xiàn)代微生物藥物研究的新特點

1.重視新的篩選模型和方法的設計；2.擴大微生物代謝產(chǎn)物的研究范圍；

設計到酶抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、降血脂藥物、抗寄生蟲藥物等等。3.重視新菌種的資源開發(fā)；

重視稀有放線菌、海洋微生物和極端微生物的開發(fā)。4.新技術的大量應用。

主要有分離技術、光譜分析、高通量篩選和計算機檢索等。當前1頁，總共30頁。目前的醫(yī)藥生產(chǎn)中已廣泛利用微生物發(fā)酵來制造各種藥物。在工業(yè)微生物學領域，發(fā)酵是指用培養(yǎng)微生物制造工業(yè)產(chǎn)品的過程。廣泛的發(fā)酵概念是指用培養(yǎng)生物細胞（或一些酶類）制得產(chǎn)物的過程。發(fā)酵過程包括了生物細胞的培養(yǎng)和產(chǎn)物合成的過程。二、工業(yè)發(fā)酵的菌種和發(fā)酵方式當前2頁，總共30頁。樣品三角瓶懸液試管稀釋平板分離挑選單菌落液體發(fā)酵從自然環(huán)境篩選菌種的流程發(fā)酵產(chǎn)量分析誘變平板分離放大和生產(chǎn)多次重復當前3頁，總共30頁。I.抗生素

1929年，F(xiàn)leming首先從青霉菌中發(fā)現(xiàn)青霉素。青霉素的誕生有著劃時代的意義

當前4頁，總共30頁。青霉菌青霉菌常造成食物發(fā)霉生長在培養(yǎng)基上的青霉菌菌落顯微鏡下的青霉菌菌絲當前5頁，總共30頁。開發(fā)青霉素的功臣SirAlexanderFlemingErnstChainHowardFlorey當前6頁，總共30頁?？股匕l(fā)展大事記1929年，F(xiàn)leming首先從青霉菌中發(fā)現(xiàn)青霉素；1940年，F(xiàn)lorey和Chain采用溶媒萃取法獲得青霉素。1944年，Waksman在鏈霉菌中發(fā)現(xiàn)鏈霉素；自本世紀40年代以來，已找到上萬種新抗生素，合成了近10萬種半合成抗生素，但其中在臨床上常用的僅100余種，連同其衍生物約300余種。當前7頁，總共30頁。I.抗生素Antibiotics:是生物（包括微生物、植物和動物）在生命活動過程中產(chǎn)生的（或其他方法獲得），能在低微濃度下有選擇性地抑制或影響它種生物機能的有機物質(zhì)。當前8頁，總共30頁。根據(jù)生物來源分細菌產(chǎn)生：綠膿菌藍素、多粘菌素、桿菌肽真菌產(chǎn)生：頭孢菌素放線菌產(chǎn)生：鏈霉素、四環(huán)素、紅霉素高等植物產(chǎn)生：蒜素、地衣酸動物產(chǎn)生：紅細胞素根據(jù)作用對象分抗G+—Pen等抗G-—鏈霉素等廣譜—四環(huán)素、紅霉素、卡那霉素、頭孢菌素等?？拐婢獌尚悦顾谺、制霉菌素、灰黃霉素等。抗腫瘤—阿霉素、絲裂霉素、柔紅霉素等。一、抗生素分類當前9頁，總共30頁。由于不同微生物之間的細胞化學結(jié)構(gòu)和代謝的差異，不同的抗生素的抗菌譜各異。當前10頁，總共30頁。根據(jù)化學結(jié)構(gòu)分-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、多烯類、多肽類、苯烴基胺類、蒽環(huán)類、其他根據(jù)作用機制分根據(jù)生物合成途徑分當前11頁，總共30頁。二、抗生素傳統(tǒng)分離方法土壤標本涂布于平板培養(yǎng)基培養(yǎng)無菌水稀釋挑取單菌落擴增培養(yǎng)培養(yǎng)觀察抑菌圈鑒定精制臨床前研究濾紙片法篩選臨床研究當前12頁，總共30頁。抑制細菌細胞壁合成、破壞細胞質(zhì)膜、作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化、抑制蛋白質(zhì)和核酸合成等

抑制微生物的生長或殺死它們?nèi)⒖股刈饔脵C制當前13頁，總共30頁。主要抗生素的作用模型當前14頁，總共30頁。-內(nèi)酰胺類抗生素——抑制細胞壁合成注意：只對生長繁殖中的細胞有作用，對靜息細胞無作用細胞壁肽聚糖合成第三階段：肽聚糖鏈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)肽酶催化交聯(lián)-內(nèi)酰胺類抗生素競爭性結(jié)合細胞壁合成受抑制轉(zhuǎn)肽酶無法催化交聯(lián)當前15頁，總共30頁。四、抗藥性一、細菌抗藥性的基本概念獲得抗藥性（通過遺傳變異獲得）天然抗藥性（微生物天然對藥物不敏感）二、細菌抗藥性產(chǎn)生的遺傳機制1、微生物的染色體或質(zhì)粒上有編碼抗生素耐藥性的遺傳信息2、自發(fā)突變加藥物選擇3、細菌間抗藥基因的轉(zhuǎn)移三、細菌抗藥性產(chǎn)生的生化機制1、產(chǎn)生使抗生素結(jié)構(gòu)改變的酶即鈍化酶；2、抗生素作用靶位的改變；3、細胞膜通透性改變。當前16頁，總共30頁。

避免耐藥菌傳播（醫(yī)院）合理用藥（1）抗生素可不用盡量不用，使用時應足量。（2）合理聯(lián)合用藥抗耐藥菌新抗的尋找，如酶抑制劑抗生素等。耐藥機制的研究—耐藥規(guī)律尋找，有助于合理用藥。耐受性的控制當前17頁，總共30頁。五、抗生素效價和效價單位檢品的抗菌活性標準品的抗菌活性100%效價(potency)=檢品的實際單位數(shù)檢品的標示量100%=當前18頁，總共30頁?？股匦r單位(unit,U)重量單位（生物活性部分重量）：1μg≌1U類似重量單位（特定抗生素鹽純品重量）

1μg≌1U重量折算單位（原始活性單位相當?shù)募兤分亓繛?U）

ex:Pen0.5988μg≌1U,1mg≌1670U特定單位（特定樣品的某一重量為一定單位）Ex:一批特定桿菌肽1mg≌55U當前19頁，總共30頁。抗生素效價測定方法管碟法，二劑量法當前20頁，總共30頁。II.藥物體外抗菌試驗瓊脂擴散法濾紙片法打洞法（挖孔法）管碟法挖溝法連續(xù)稀釋法液體稀釋法斜面稀釋法平板稀釋法當前21頁，總共30頁。管碟法濾紙片法打洞法當前22頁，總共30頁。III.藥物制劑的微生物學檢查無菌制劑的無菌檢查一般藥品：直接檢查需氧菌檢查厭氧菌檢查霉菌檢查陰性對照：空白培養(yǎng)基陽性對照：培養(yǎng)基+待檢藥品+陽性對照菌特殊藥品：先處理后作檢查檢查項目培養(yǎng)時間陽性對照菌陰性對照需氧菌30-35℃，14天金葡菌空白培養(yǎng)基厭氧菌30-35℃，14天生孢梭狀芽胞桿菌真菌20-25℃，14天白色念珠菌當前23頁，總共30頁。全封閉集菌器當前24頁，總共30頁。非滅菌制劑的微生物限度檢查細菌總數(shù)測定：小于300CFU/板有效真菌總數(shù)測定：小于100CFU/板有效質(zhì)控菌檢查活螨檢查當前25頁，總共30頁。平板菌落計數(shù)當前26頁，總共30頁。當前27頁，總共30頁。質(zhì)控菌檢測方法

藥物預處理增菌液增菌培養(yǎng)分離、純培養(yǎng)菌落等培養(yǎng)特征觀察鏡檢形態(tài)學檢查（如革蘭氏染色）生理生化反應檢查