藥學(xué)畢業(yè)論文超高壓技術(shù)在現(xiàn)代殺菌領(lǐng)域的應(yīng)用

XX大學(xué)

畢業(yè)論文

超高壓技術(shù)在現(xiàn)代殺菌領(lǐng)域的應(yīng)用姓名： 2014年6月25日超高壓技術(shù)在現(xiàn)代殺菌領(lǐng)域的應(yīng)用作者：王存林，張翠英，張瑛，王盛民【摘要】論述了超高壓技術(shù)在現(xiàn)代殺菌領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀，對(duì)超高靜壓殺菌和超高壓均質(zhì)殺菌進(jìn)行了比較，并介紹了一種新型的瞬時(shí)高壓殺菌方法——超高壓水射流滅菌方法，經(jīng)初步實(shí)驗(yàn)研究取得了較好的效果，表明有著廣闊的發(fā)展前景?！娟P(guān)鍵詞】超高壓技術(shù)；超高靜壓；超高壓均質(zhì)；超高壓水射流Abstract：Thepaperdescribestheresearchfulactualityoftheultra-highpressuretechnologyinthemodernsterilizationfield,comparesthediscriminationbetweentheultra-highstaticpressureandtheultra-highpressurehomogen,andintroducesakindofnewinstantaneoushighpressuresterilizationmethod—theultra-highpressurewaterjetsterilizationmethod,whichhasobtainedwellresultbyinitialexperimentresearch,indicatingawidedevelopmentprospect.Keywords：Theultra-highpressuretechnology；Theultra-highstaticpressure；Theultra-highpressurehomogen；Theultra-highpressurewaterjetsterilization殺菌技術(shù)是人類發(fā)明的一項(xiàng)重要的應(yīng)用技術(shù)，它廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、工業(yè)和農(nóng)業(yè)等行業(yè)，在減少人類遭受病菌折磨、防止食品腐敗、延長(zhǎng)物品使用和保存期限等方面起著巨大的作用。超高壓殺菌技術(shù)作為一種新型的冷殺菌技術(shù)，在我國(guó)的研究起步較晚。該技術(shù)屬于物理殺菌技術(shù)，包括靜態(tài)殺菌和動(dòng)態(tài)殺菌，靜態(tài)殺菌即超高靜壓殺菌，動(dòng)態(tài)殺菌也稱瞬時(shí)高壓殺菌，目前研究較多的是超高壓均質(zhì)殺菌技術(shù)。本文論述了超高壓技術(shù)在現(xiàn)代殺菌領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀，對(duì)超高靜壓殺菌和超高壓均質(zhì)殺菌作了比較，并介紹了一種新型的瞬時(shí)高壓殺菌方法——超高壓水射流滅菌方法，旨在推進(jìn)我國(guó)超高壓技術(shù)在現(xiàn)代殺菌領(lǐng)域的研究應(yīng)用。超高靜壓殺菌技術(shù)超高靜壓殺菌的基本原理及特點(diǎn)超高靜壓殺菌是將100～1000MPa的靜態(tài)液體壓力施加于食品、生物制品等物料上并保持一定的時(shí)間，起到殺菌、破壞酶等作用。處理過(guò)程中的物料可以是包裝的或未包裝的，通常采用能夠傳遞壓力的柔性材料密封包裝，一般在常溫下進(jìn)行。超高靜壓可改變微生物的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)，使微生物體積減小，影響細(xì)胞的形態(tài)，使分化減慢；超高靜壓破壞了微生物細(xì)胞膜和細(xì)胞壁，使受壓的細(xì)胞膜表現(xiàn)出通透性的變化，發(fā)生功能障礙，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物流失，可使細(xì)胞壁遭到不同程度的破壞；超高靜壓抑制了微生物的生化反應(yīng)，壓力改變了細(xì)胞內(nèi)的物理化學(xué)平衡，阻遏了細(xì)胞的新陳代謝過(guò)程，細(xì)胞分裂減慢，導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)滯后，甚至停止；超高靜壓影響DNA復(fù)制，壓力直接影響著微生物的遺傳與變異，影響基因表達(dá)和蛋白質(zhì)的合成；超高靜壓鈍化酶的活性，破壞酶分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)，使活性部位上的構(gòu)象發(fā)生變化，致使主要酶類變性失活［1］。超高靜壓殺菌的研究現(xiàn)狀在乳制產(chǎn)品中的研究鮑志英研究了超高壓對(duì)牛乳的殺菌效果，結(jié)果表明，500MPa處理20min，大腸埃希氏菌致死率為99.9981%，豬霍亂沙門氏菌豬霍亂亞種致死率為99.9994%（2004年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文集）。田曉琴等［2］研究鮮牛奶時(shí)發(fā)現(xiàn)，在200～500MPa時(shí)，隨著壓力的升高，殺菌效果直線上升；在500～600MPa時(shí)，壓力升高，殺菌效果增幅不明顯。超高壓處理鮮牛奶的最優(yōu)工藝是500MPa下處理30min。多數(shù)對(duì)牛乳的研究證實(shí)，100～600MPa作用5～10min可殺滅一般細(xì)菌和酵母菌，但孢子有一定耐受性，當(dāng)壓力達(dá)600MPa并結(jié)合一定的溫度處理15～20min可完全殺菌［3］。在果類制品中的研究趙玉生等［4］對(duì)獼猴桃汁的超高壓殺菌效果研究表明，在100～400MPa時(shí)，保壓的前5min大腸菌群的殺滅效果十分顯著，但保壓5min后大腸菌群的滅亡速率，在200MPa與300MPa時(shí)變得平緩，而400MPa時(shí)依然強(qiáng)勢(shì)，在保壓10min后大腸菌群的死亡率達(dá)到理想值。Bull等［5］研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)超高壓處理過(guò)的ValenciaandNavel橙汁在600MPa能夠?qū)⑽⑸锝档偷嚼硐氲乃剑稽S麗等［6］研究發(fā)現(xiàn)，超高壓處理對(duì)荔枝果汁中的細(xì)菌有明顯的殺滅作用，400MPa以上壓力處理后可達(dá)到商業(yè)無(wú)菌的要求；吳萬(wàn)貴等［7］研究了超高壓對(duì)哈密瓜汁的殺菌作用，發(fā)現(xiàn)哈密瓜汁滅菌壓力達(dá)400～450MPa后尚不能達(dá)到商業(yè)無(wú)菌要求。在肉制產(chǎn)品中的研究高壓配合中等溫度處理碎豬肉，414MPa，50℃處理6min可使單核細(xì)胞增多性李斯特菌的數(shù)量減少1010cfu/g。高壓對(duì)鮮肉中沙門氏菌和單核細(xì)胞增多性李斯特菌也有良好的滅活作用［8］；Hugas等［9］研究了醋漬牛肉、煮制火腿和干腌火腿經(jīng)600MPa，31℃，6min高壓處理后的結(jié)果顯示，降低水分活度可提高微生物對(duì)高壓的抵抗能力在酒類產(chǎn)品中的研究超高壓對(duì)米酒進(jìn)行處理后可使酵母菌和乳酸菌得到有效抑制。對(duì)啤酒在350MPa，20℃下處理3～5min，對(duì)酒中酵母菌、乳酸菌等細(xì)菌的殺滅作用顯著［10］。在水產(chǎn)品中的研究Cruz-Romero［11］研究表明，在207～345MPa對(duì)生牡蠣加壓2min能夠消除S形霍亂菌，高壓處理過(guò)的牡蠣在2℃下可穩(wěn)定保藏41d，未經(jīng)高壓處理的樣品只能保存13d。對(duì)章魚的超高壓研究表明：200MPa，7℃能殺死大腸桿菌和金黃色葡萄球菌，而對(duì)乳酸桿菌基本不影響。在7℃和40℃下，用400MPa連續(xù)處理15min后發(fā)現(xiàn)，在7℃時(shí)章魚肉中所含的微生物數(shù)量大大低于對(duì)照組［12］。在生物制品中的研究超高壓對(duì)病毒的滅活作用可用于制備疫苗，加壓處理后病毒所產(chǎn)生的抗體同未加壓的病毒產(chǎn)生的抗體是一樣有效的［ 13］。超高壓能殺死血漿中包括突變株在內(nèi)的所有病毒，而且不影響血漿主要成分的生物活性。血漿中的HIV經(jīng)400MPa，25℃，10min處理后，對(duì)CD4+-T細(xì)胞的感染性降低5個(gè)數(shù)量級(jí)單位，因子Ⅸ100%恢復(fù)，γ-球蛋白100%恢復(fù)［14］。其他研究高瑀瓏等［15］研究發(fā)現(xiàn)，超高壓處理時(shí)隨著大豆分離蛋白濃度的增加或蔗糖濃度的增加枯草芽孢桿菌死亡數(shù)量級(jí)降低，而豆油濃度的變化對(duì)枯草芽孢桿菌死亡數(shù)量變化不明顯。國(guó)外科研人員通過(guò)電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)高壓處理過(guò)的酵母細(xì)胞，細(xì)胞核膜、溶菌體、液泡發(fā)生了嚴(yán)重的分裂，而細(xì)胞膜、細(xì)胞壁只受到輕微的損壞［ 16］。1.3影響超高靜壓殺菌效果的因素超高靜壓殺菌的影響因素包括微生物的種類、壓力大小和加壓時(shí)間、施壓方式、處理溫度、pH值、介質(zhì)成分等。革蘭陽(yáng)性菌比革蘭陰性菌對(duì)壓力更具對(duì)抗性，芽孢菌的芽孢耐壓性強(qiáng)于非芽孢類細(xì)菌；在一定范圍內(nèi)壓力越高滅菌效果越好，在相同壓力下滅菌時(shí)間越長(zhǎng)滅菌效果也有一定程度的提高；超高靜壓的滅菌方式中，對(duì)于芽孢菌，間歇式循環(huán)加壓滅菌效果好于連續(xù)式加壓；溫度是微生物生長(zhǎng)代謝最重要的外部條件，不同溫度與超高靜壓的協(xié)同滅菌有利于殺滅細(xì)菌芽孢；壓力會(huì)改變介質(zhì)的pH值，影響微生物的生命活動(dòng)；超高靜壓殺菌時(shí)，物料的化學(xué)成分對(duì)滅菌效果有顯著影響［ 1］超高壓均質(zhì)殺菌技術(shù)超高壓均質(zhì)殺菌的作用機(jī)理及特點(diǎn)超高壓均質(zhì)殺菌是一種用物理方法動(dòng)態(tài)連續(xù)進(jìn)行的液態(tài)物料破碎的冷殺菌技術(shù)。在動(dòng)力殺菌中，液態(tài)物料中的微生物受到壓力瞬間釋放產(chǎn)生的強(qiáng)烈剪切、高速撞擊等動(dòng)力作用，盡管這些作用產(chǎn)生的基本條件仍為高壓，但形式已遠(yuǎn)不止超高靜水壓殺菌中單純的擠壓作用。超高壓均質(zhì)的殺菌機(jī)理是：利用超高壓產(chǎn)生對(duì)液態(tài)物料的擠壓，以及壓力釋放時(shí)強(qiáng)烈剪切和高速撞擊等聯(lián)合作用，使其中細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞和改變，從而失去或鈍化其生物活性，達(dá)到殺菌目的［17］。超高壓均質(zhì)殺菌的研究現(xiàn)狀在乳制產(chǎn)品中的研究杜軍等［17］應(yīng)用超高壓均質(zhì)處理牛乳后發(fā)現(xiàn)，在所采用的實(shí)驗(yàn)條件下，大腸菌群菌落數(shù)可以達(dá)到小于10ml-1以下；即使是在殺菌效果較差的條件下，細(xì)菌總數(shù)最大也可以降低3個(gè)對(duì)數(shù)單位。在果類制品中的研究李菁等［18］應(yīng)用超高壓均質(zhì)處理西瓜汁后發(fā)現(xiàn)，采用150MPa壓力處理3次，并控制料溫不高于40～45℃，菌落總數(shù)和霉菌及酵母菌數(shù)均可達(dá)到要求。NeilH.Mermelstein等［19］研究了超高壓(45000Psi，約310MPa)均質(zhì)處理的鮮橙汁，貨架期可達(dá)6個(gè)月。其它研究劉成梅等［20］在牛奶、桔囊溶液、胡蘿卜溶液中添加大腸桿菌后的超高壓均質(zhì)處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在14000Psi(96.5MPa)、流速350～400ml/min時(shí)，牛奶處理3次后大腸桿菌下降率為99.997%，桔囊溶液處理4次后下降率為99.992%，胡蘿卜溶液處理4次后下降率為99.998%。鐘業(yè)俊等［21］研究發(fā)現(xiàn)，在120MPa，25℃下對(duì)枯草桿菌瞬時(shí)高壓處理1次，致死率為93.82%；酸性和堿性條件下較中性下更有利于瞬時(shí)高壓殺菌，酸性條件下殺菌效果最好。代元忠等［22］對(duì)大腸桿菌和酵母菌進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)破碎，以103～117MPa處理一次可使大部分大腸桿菌中的細(xì)胞破裂；用60MPa進(jìn)行均質(zhì)，使酵母菌微粒粒徑2～5μm，再用超高壓均質(zhì)機(jī)調(diào)壓至135MPa循環(huán)處理3次，最小粒徑0.01～0.05μ。m影響超高壓均質(zhì)殺菌效果的因素殺菌效果影響因素基本同超高靜壓，但超高壓均質(zhì)殺菌的處理次數(shù)對(duì)殺菌效果影響較大。超高靜壓殺菌與超高壓均質(zhì)殺菌比較[23]承受壓力不同兩者殺菌時(shí)的壓力都很高，超高靜壓范圍為 100～1000MPa，超高壓均質(zhì)壓力一般為40～60MPa，最高可達(dá)100～200MPa[24]，超高壓均質(zhì)殺菌的常用壓力小于超高靜水壓常用處理壓力。作用機(jī)理不同超高靜水壓殺菌的原理主要是高壓對(duì)微生物的擠壓致死作用，導(dǎo)致微生物原有功能破壞或發(fā)生不可逆的變化；超高壓均質(zhì)殺菌是利用超高壓對(duì)液體物料的擠壓，以及壓力釋放產(chǎn)生的強(qiáng)烈剪切和高速撞擊等動(dòng)力作用，使細(xì)菌的結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞和改變。處理工藝不同超高靜水壓殺菌是在一定溫度下，把物料裝入柔性材料中密封后放于水中對(duì)水進(jìn)行高壓處理的過(guò)程，處理量較小，難以實(shí)現(xiàn)工業(yè)上的連續(xù)化。而超高壓均質(zhì)殺菌是呈流動(dòng)狀態(tài)，可以實(shí)現(xiàn)工業(yè)上的連續(xù)化操作。選用的設(shè)備不同超高靜水壓殺菌由專門的高壓殺菌設(shè)備來(lái)完成，高壓容器是整個(gè)加壓裝置的核心；超高壓均質(zhì)殺菌由超高壓均質(zhì)機(jī)同時(shí)完成了物料的均質(zhì)乳化和殺菌作用。處理時(shí)間不同超高靜水壓的殺菌效果遵循施加壓力越高，處理時(shí)間越短的規(guī)律，一般處理時(shí)間為5～30min。超高壓均質(zhì)殺菌由于連續(xù)化操作，處理時(shí)間極其短暫，整個(gè)過(guò)程只需1～5s。并且處理次數(shù)是一個(gè)關(guān)鍵因素，一般處理2～3次的效果較理想。前景展望超高壓技術(shù)作為一種新型的冷殺菌技術(shù)，已引起越來(lái)越多的關(guān)注。除上述超高靜壓殺菌與超高壓均質(zhì)殺菌外，另有一種新的瞬時(shí)滅菌方法——超高壓水射流滅菌方法(西南交通大學(xué)藥學(xué)院王盛民教授的發(fā)明專利，專利申請(qǐng)?zhí)枺?00410040040.5)，該方法是一種利用超高壓水射流瞬態(tài)卸壓的膨化作用而使微生物破碎的滅菌方法，在研究的壓力范圍100～350MPa內(nèi)的殺菌效果隨著壓力的升高而提高，取得了較好的效果，顯示了該滅菌方法的可行性，為殺菌領(lǐng)域增添了一項(xiàng)新的殺菌技術(shù)。鑒于超高壓技術(shù)在食品和醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域中消毒殺菌的研究應(yīng)用，超高壓產(chǎn)品存在著巨大的潛在市場(chǎng)和廣闊的發(fā)展空間。隨著現(xiàn)代高科技的發(fā)展，研究的不斷深入，超高壓技術(shù)的應(yīng)用必定會(huì)越來(lái)越高效、成本越來(lái)越低，應(yīng)用的領(lǐng)域也會(huì)越來(lái)越廣?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】[1]李汴生,阮征.非熱殺菌技術(shù)與應(yīng)用,第1版[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2004:124．[2]田曉琴,宋社果.超高壓對(duì)鮮牛奶殺菌效果研究[ 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