Rh血型鑒定完整

Rh血型鑒定完整第1頁/共24頁二.Rh血型系統(tǒng)Rh血型系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)1937年--1939年

Landsteiner和Wiener用恒河（rhesus）紅細(xì)胞免疫家兔和豚鼠得到的抗血清將人紅細(xì)胞分為Rh陰性和Rh陽性1939年

Levine和Stetsen在一患死胎的孕婦血清中檢測到一種抗體，此為人類發(fā)現(xiàn)的第一例Rh抗體1941--1945年 確定了人體紅細(xì)胞上含有Rh系統(tǒng)的六種抗原，即D、d；E、e；C、c。D和d；E和e；C和c表現(xiàn)為對偶關(guān)系，但d抗原只是推測。第2頁/共24頁Rh血型的定義

根據(jù)紅細(xì)胞上D抗原的有無可將人類紅細(xì)胞分為Rh陽性和Rh陰性，即紅細(xì)胞上缺乏D抗原的人是Rh陰性；紅細(xì)胞有D抗原的人是Rh陽性Rh血型的遺傳學(xué)說及命名Rh--Hr命名法（Wiener學(xué)說）CDE命名法（Fisher--Race學(xué)說）數(shù)字命名法第3頁/共24頁4㈠.Rh抗原①Rh抗原有40多種，②Rh抗原的發(fā)育

Rh抗原是胎兒早期就充分發(fā)育并維持整個一生，臍帶血或新生兒的紅細(xì)胞Rh血型與成人一樣強。③與臨床關(guān)系最密切：D、E、C、c、e5種，D的抗原性最強?？乖瓘娙醮涡驗镈>E>

C>c>e④我國Rh－頻率約占人群中的0.34%二.Rh血型系統(tǒng)醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站

第4頁/共24頁第5頁/共24頁Rh血型的D變異型D變異型的定義：有些含D抗原的紅細(xì)胞與某些抗D血清反應(yīng)，而與另一些抗D血清不反應(yīng)，這些紅細(xì)胞所含的D抗原可能缺少完整D抗原的某些成份或者呈現(xiàn)很弱的抗原活性，這些D抗原統(tǒng)稱為D變異型。

D變異型包括弱D型（Du）和不完全D型（partialD）第6頁/共24頁第7頁/共24頁D變異型抗原的特點

與一些抗D血清發(fā)生凝集反應(yīng)，而與另一些抗D血清不發(fā)生凝集反應(yīng)，要證實這種弱表現(xiàn)的D抗原，需用間接抗球蛋白試驗。

第8頁/共24頁9

㈡.Rh系統(tǒng)抗體

①多是通過外來RBC免疫刺激后產(chǎn)生，即通過輸血或妊娠免疫而產(chǎn)生。這些抗體均為IgG。一般在初次免疫后2~6個月內(nèi)出現(xiàn)，經(jīng)再次免疫后，3周內(nèi)抗體濃度可達(dá)到高峰。大約1/3的Rh陰性的人，經(jīng)Rh陽性抗原免疫后，不產(chǎn)生抗D.非免疫的Rh抗體極為罕見.

②D抗原是非ABO紅細(xì)胞抗原中免疫性最強的抗原，可以引起抗D的產(chǎn)生，抗D與D紅細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重的溶血反應(yīng)。第9頁/共24頁㈢.Rh血型鑒定

常規(guī)情況下，紅細(xì)胞只做Rh（D）定型， 對供血者需鑒定D變異型，只有特殊情況下才檢查其它抗原。例如：家系調(diào)查、父權(quán)鑒定、產(chǎn)前檢查、確定純合子或雜合子以及配血試驗中發(fā)現(xiàn)有不規(guī)則抗體存在等情況下才需做Rh血型全部表現(xiàn)型的定型醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站

第10頁/共24頁111.Rh血型鑒定及方法學(xué)評價：

Rh抗體屬IgG不能在鹽水介質(zhì)中與RBC發(fā)生凝集。

(1).低離子強度鹽水試驗

原理：

降低介質(zhì)的離子強度→可減少RBC外圍的離子云

①促進(jìn)IgG分子在兩個RBC之間搭橋→使之結(jié)合，

②能縮短抗原與抗體的反應(yīng)時間，并提高其靈敏度。第11頁/共24頁12(2).抗人球蛋白法：又稱Coombs試驗直接法：可檢查受檢者的RBC是否已被不完全抗體致敏；間接法：可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。第12頁/共24頁13(3).酶介質(zhì)法：原理：

①木瓜酶或菠蘿酶可以破壞RBC表面的唾液酸，使RBC膜失去電荷，縮小RBC間的距離；

②酶可以部分地改變RBC結(jié)構(gòu)，使某些隱蔽的抗原得以暴露，增強凝集性(4).聚凝胺法：

本法用于臨床配血是切實可行的。

第13頁/共24頁2.Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陽性的原因受檢細(xì)胞直抗陽性高蛋白試劑引起緡錢狀凝集纖維蛋白造成的凝塊定型試劑中存在的其它抗體多凝集細(xì)胞造成的假陽性鑒定器材和試劑血清被污染醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站

第14頁/共24頁3.Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陰性的原因受檢細(xì)胞懸液濃度太高，與試劑血清比例失調(diào)。漏加或錯加定型試劑觀察結(jié)果時搖動用力過度，搖散弱凝集。試劑血清保存不當(dāng)引起變質(zhì)第15頁/共24頁16㈣.RH血型的臨床意義：

1.與輸血關(guān)系：

Rh－第一次接受Rh＋血液→不溶血，產(chǎn)生抗體

Rh－第二次接受Rh＋血液→產(chǎn)生大量的抗體，溶血

2.與新生兒溶血病的關(guān)系：孕婦血漿中如有Rh抗體，妊娠Rh血型不配合胎兒時，其中IgG類的Rh抗體可以通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)。第16頁/共24頁17三、其它紅細(xì)胞血型系統(tǒng)

MNSsU血型系統(tǒng)有40個抗原，基因表達(dá)產(chǎn)物為MN唾液酸糖蛋白、Ss唾液酸糖蛋白P血型系統(tǒng)Kell血型系統(tǒng)Kidd血型系統(tǒng)Lewis血型系統(tǒng)第17頁/共24頁18【原理（principle）】(鹽水法)（五）.交叉配血無凝集無凝集1000-2000rpm

×1-2min觀察。室溫5min后室溫鹽水介質(zhì)天然IgM類血型抗體對應(yīng)的紅細(xì)胞抗原凝集＋獻(xiàn)血員血清

主次

病人血清病人2%RBC獻(xiàn)血員2%RBC病人血清獻(xiàn)血員2%RBC＋病人2%RBC獻(xiàn)血員血清＋第18頁/共24頁19【報告方式】1.如兩管均無凝集，則報告：病人XX（X型）血清＋獻(xiàn)血者XX（X型）紅細(xì)胞有或無凝集溶血病人XX（X型）紅細(xì)胞＋獻(xiàn)血者XX（X型）血清有或無凝集溶血（XX配血法）2.任何一管或兩管有凝集或溶血:

立即復(fù)查血型或查明其他原因如實報告，并與病室聯(lián)系，決不能隨便輸血。第19頁/共24頁20鹽水法評價安全輸血包括檢測ABO相合與否，也包括免疫性抗體的檢測。最初的交叉配血以鹽水介質(zhì)為主，而鹽水介質(zhì)實驗只能發(fā)現(xiàn)ABO不配合，不能檢出IgG抗體，所以血庫《標(biāo)準(zhǔn)》不要求鹽水介質(zhì)實驗的配血

，而要求在血清學(xué)配合實驗中使用能展示ABO不配合和在37℃有活性的、有臨床意義重要抗體的方法。從安全輸血的角度和今后發(fā)展趨勢分析，鹽水介質(zhì)法將會和其他技術(shù)聯(lián)合運用。

第20頁/共24頁21

凝聚胺法

【原理】紅細(xì)胞膜表面的唾液酸帶有的大量的負(fù)電荷，可避免其發(fā)生自發(fā)凝聚，使紅細(xì)胞保持最大的表面面積，增加氧的轉(zhuǎn)移能力和氣體擴散。紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)內(nèi)，陽離子被紅細(xì)胞的負(fù)電荷吸引，紅細(xì)胞被擴散的雙層離子云圍繞，形成zeta電位，它決定紅細(xì)胞之間的排斥作用。

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第21頁/共24頁22凝聚胺法步驟Polybrene技術(shù)首先利用低離子介質(zhì)（LIM），介質(zhì)的離子強度是影響抗體結(jié)合紅細(xì)胞原能力的重要理化條件之一，正負(fù)離子相互作用力--即靜電力顯著影響抗體與紅細(xì)胞的反應(yīng)。減低介質(zhì)的離子強度，減少了紅細(xì)胞周圍的陽離子云，從而促進(jìn)帶正電荷的lgG與帶負(fù)電荷的紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，以促進(jìn)紅細(xì)胞和血清（血漿）中的抗體結(jié)合。

其后，加入凝聚胺（Polybrene）試劑。凝聚胺是一種高價陽離子季胺鹽多聚物，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞膜表面的唾液酸帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞的zeta電位降低，紅細(xì)胞之間距離減少，使紅細(xì)胞發(fā)生凝聚。

最后，加入復(fù)懸液（Re