《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課件》word版

/第一章實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)概述一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的概念和研究范疇二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的誕生三、中國(guó)現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的誕生四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)應(yīng)用范疇五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的優(yōu)越性和欠缺一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的概念和研究范疇（一）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的基本概念1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)（LaboratoryAnimalScience)是一門研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其培育和應(yīng)用的學(xué)科，是生命科學(xué)的一個(gè)分支。它是現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的重要組成部分，是生命科學(xué)研究的基礎(chǔ)條件，是衡量一個(gè)國(guó)家或一個(gè)地區(qū)科研水平的重要標(biāo)志。2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：指經(jīng)人工飼育的，對(duì)其攜帶的微生物和寄生蟲(chóng)實(shí)行控制，遺傳背景明確或來(lái)源清楚的，用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定的動(dòng)物。特點(diǎn)：生物學(xué)特性明確、遺傳背景清楚、表型均一、對(duì)刺激敏感和反應(yīng)一致等3、實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物：指能夠用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的所有動(dòng)物。（哺乳類、魚(yú)類、兩棲類、爬行類的蛇、昆蟲(chóng)類的果蠅等。它們不具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特點(diǎn)、又達(dá)不到生產(chǎn)和檢定所要求的那樣精良。）二）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)研究的范疇1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物育種學(xué)：主要研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳改良、遺傳控制、新型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的開(kāi)發(fā)和野生動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化。2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物醫(yī)學(xué)：研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疾病診斷、治療和預(yù)防。3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生態(tài)學(xué)：研究如何為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供適于生存的環(huán)境條件，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康無(wú)病，生理指標(biāo)穩(wěn)定。4、比較醫(yī)學(xué)：研究包括人體在內(nèi)的所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本生命現(xiàn)象，并將各種正常構(gòu)造和生理機(jī)能，以及疾病的發(fā)生發(fā)展的規(guī)律進(jìn)行比較，研究人與其他動(dòng)物的相同點(diǎn)與不同點(diǎn)，從而揭示生命的奧秘。5、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)：研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)、選擇試驗(yàn)方法、選擇恰當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)動(dòng)物等，也包括胚胎工程學(xué)、細(xì)胞工程學(xué)等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的誕生1、公元前4世紀(jì)至公元3世紀(jì)公元前4世紀(jì)，杰出的生物學(xué)奠基人Aristotle首先開(kāi)展了多種動(dòng)物解剖，但都是在死亡的動(dòng)物和人尸體上進(jìn)行的。Erasistratus可能是進(jìn)行活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)始人，他在豬體內(nèi)確定了氣管是吐納空氣的通道，肺是呼吸空氣的器官。之后，Galen對(duì)豬、猴及其他多種動(dòng)物都施行了活體解剖檢查，以此推論人體的生理功能。2、公元3世紀(jì)至16世紀(jì)初從Galen之后，直到16世紀(jì)初，科學(xué)發(fā)展被教條主義所取代。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展受到的影響尤為嚴(yán)重。當(dāng)時(shí)即使是對(duì)死亡的動(dòng)物和人的尸體施行解剖，也會(huì)被基督教會(huì)所禁止。他們阻止人們獲取有關(guān)認(rèn)識(shí)世界的知識(shí)，否則就被認(rèn)為褻瀆神明的行為。3、16世紀(jì)初至19世紀(jì)末這一時(shí)期是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法發(fā)展得輝煌時(shí)期。1538年，現(xiàn)代解剖學(xué)奠基人AndreasVesal利用犬和豬進(jìn)行了公開(kāi)的解剖學(xué)示范教學(xué)。1682年，WilliamHarvey采用20多種動(dòng)物進(jìn)行解剖與生理研究，揭開(kāi)了血液循環(huán)的秘密，使生理學(xué)成為了一門學(xué)科。1796年，EdwardJenner研究牛痘疫苗，征服了天花，并開(kāi)辟了免疫療法。1859年，CDarwin發(fā)表了《動(dòng)物起源》奠定了進(jìn)化論和比較醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)，從而為通過(guò)動(dòng)物來(lái)研究人提供給了理論基礎(chǔ)。1865年，ClandBernard做了大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，在其發(fā)表的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物序說(shuō)》中詳細(xì)闡述了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的理論。1882年，RobertCoch對(duì)牛羊等動(dòng)物研究，發(fā)現(xiàn)了結(jié)核菌和結(jié)核菌素，并研制了狂犬疫苗，奠定了微生物學(xué)和傳染病學(xué)基礎(chǔ)。后來(lái)Lister受到Coch啟發(fā)，創(chuàng)立了無(wú)菌手術(shù)理論。1885年，Nuttall培育了無(wú)菌豚鼠。1890年，Behring用豚鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，研制出白喉抗毒素。1897年，Baflof用狗做了大量實(shí)驗(yàn)，在消化生理和高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)的研究中取得了巨大成就。4、20世紀(jì)初至今20世紀(jì)初，孟德?tīng)栠z傳學(xué)定律發(fā)現(xiàn)以后，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法的發(fā)展進(jìn)入了突飛猛進(jìn)的時(shí)期。1909年，Little培育出第一株近交小鼠。1910年，Morgan用果蠅發(fā)現(xiàn)了染色體在遺傳上的作用。1914年，山極和市川用瀝青抹兔耳，誘發(fā)出皮膚癌。1929年，F(xiàn)leming通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了青霉素。1937年，Krebs發(fā)現(xiàn)了三羧酸循環(huán)。1944年，美國(guó)紐約科學(xué)院召開(kāi)會(huì)議，專門討論實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與醫(yī)學(xué)發(fā)展的關(guān)系，提出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化勢(shì)在必行。1947年，英國(guó)成立了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理署。1950年，美國(guó)成立了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理小組。1952年，日本成立了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中央研究所。1953年，Crick提出DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)。1956年，聯(lián)合國(guó)創(chuàng)立國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)委員會(huì)（InternationalCouncilLaboratoryAnimalScienceICLAS)ICLAS的成立是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)成為獨(dú)立學(xué)科的標(biāo)志，也是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物走向現(xiàn)代化的起點(diǎn)。故一般認(rèn)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)是20世紀(jì)50年代誕生的。上個(gè)世紀(jì)80年代以來(lái)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究獲得三次諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：（1）、1980年度諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：GeorgeSnell的組織相容性基因的發(fā)現(xiàn)；（2）、1984年度諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：G.Kohler和C.Milstein單克隆抗體的發(fā)現(xiàn)；（3）、1996年度諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：Koherty和ZinkermagelT淋巴細(xì)胞識(shí)別微生物的發(fā)現(xiàn)三、中國(guó)現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的誕生1918年，中央防疫處從國(guó)外引進(jìn)小鼠、豚鼠進(jìn)行飼養(yǎng)、并進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。1919年，謝恩增醫(yī)師等撲捉野生地鼠（后來(lái)公認(rèn)為中國(guó)地鼠）作肺炎雙球菌檢定。1946年，從印度引進(jìn)小白鼠，后繁育成昆明小鼠。1948年，藍(lán)春霖教授從美國(guó)引進(jìn)金黃地鼠。1949年，新中國(guó)成立，北京、上海、長(zhǎng)春、蘭州、成都成立了生物制品研究所，從此開(kāi)始了大量飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。1966年—1977年，文化大革命動(dòng)亂使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物事業(yè)遭受嚴(yán)重的摧殘。1982年，文革結(jié)束后，確立了改革開(kāi)放的方針，經(jīng)學(xué)者到國(guó)外考察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物情況，發(fā)現(xiàn)我國(guó)已落后20~30年。國(guó)家科委在云南西雙版納召開(kāi)了第一次實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作會(huì)議，我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物現(xiàn)代化研究拉開(kāi)了序幕。1983年，鐘品仁主編的《哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物》出版，為我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)第一部專著。1985年，京滬兩地實(shí)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證制度，推動(dòng)了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)化。1985年，國(guó)際小鼠命名委員會(huì)正式承認(rèn)我國(guó)培育的TA1、TA2、615近交系小鼠。1988年，我國(guó)加入國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)委員會(huì)并出版了《中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)雜志》。1988年，國(guó)家科委發(fā)布2號(hào)令即《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，為我國(guó)第一部有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的法律。四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)應(yīng)用范疇1、生命科學(xué)方面基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)理論，疾病的病因、治療和預(yù)防的研究；新的治療方法、新的檢查和治療儀器的研制；分子生物學(xué)研究；基因工程研究；老年學(xué)研究；生育控制研究等。2、藥學(xué)方面藥理學(xué)的研究；新藥開(kāi)發(fā)研究；診斷用血清、疫苗、免疫血清的整理；藥品的安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)；藥效試驗(yàn)等。3、化工業(yè)和環(huán)境保護(hù)方面職業(yè)性中毒的預(yù)防研究；食品及食品添加劑的安全性評(píng)價(jià)；服裝、面料、皮毛、化纖的安全性評(píng)價(jià)；化妝品、衛(wèi)生紙等的安全性評(píng)價(jià)；環(huán)境條件的檢測(cè)和評(píng)價(jià)等。4、重工業(yè)方面廢水、廢物、廢氣等公害的鑒定和防治；光輻射、噪聲的有害性的鑒定和污染的防治等。5、農(nóng)業(yè)科學(xué)方面化學(xué)肥料、農(nóng)藥的殘毒的檢測(cè)；新品種安全性檢測(cè)等。6、畜牧科學(xué)方面家畜疾病的病因?qū)W診斷、治療和預(yù)防研究；疫苗的制造和鑒定；新品種的培育研究；SPF蛋的生產(chǎn)和使用研究；飼料的營(yíng)養(yǎng)學(xué)、安全性分析和鑒定。7、軍事科學(xué)方面如武器殺傷效果、化學(xué)、輻射、生物激光等武器的防護(hù)研究等。8、航天科學(xué)方面如宇宙射線、失重狀態(tài)等對(duì)生物的影響及航天醫(yī)學(xué)的研究等。9、國(guó)際貿(mào)易方面如瘋牛病、口蹄疫等不合格肉類及食品的化學(xué)殘毒等都需實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢疫和檢測(cè)。10、行為科學(xué)方面如災(zāi)難事故的處理、汽車撞擊的耐受度、建筑物耐受震動(dòng)的允許度的檢測(cè)等。五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)（一）、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的現(xiàn)狀1、國(guó)外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面的現(xiàn)狀在美國(guó)，每年用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物、犬、豚鼠、兔、地鼠和其他動(dòng)物（大、小鼠和禽鳥(niǎo)類除外）約150~200萬(wàn)只。大鼠、小鼠和禽鳥(niǎo)類，估計(jì)每年用1700萬(wàn)只動(dòng)物。非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的使用基本上保持恒定，貓和犬的使用數(shù)量正在下降，逐漸被豬、小牛和其他家畜所取代。在加拿大，所使用的動(dòng)物數(shù)量每年月200萬(wàn)只左右徘徊。在許多領(lǐng)域，特別是毒理學(xué)方面，魚(yú)已取代哺乳動(dòng)物。在英國(guó)，醫(yī)學(xué)上每年使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量約263萬(wàn)只。在荷蘭，每年使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物約100萬(wàn)只左右。2、我國(guó)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究方面的概況（1）、80年代前的情況：80年代前，我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理水平很低，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)展水平也較低，沒(méi)有法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)。（2）、80年代的情況：1982年國(guó)務(wù)院責(zé)成國(guó)家科委負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技工作，啟動(dòng)了我國(guó)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)科技領(lǐng)域現(xiàn)代化工作進(jìn)程。1988年11月14日經(jīng)國(guó)務(wù)院批準(zhǔn)由原國(guó)家科委頒布第2號(hào)令，即《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，條例對(duì)推動(dòng)我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)事業(yè)的發(fā)展，確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量起了重要作用。（3）、90年代的情況：1994年1月由國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布施行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，為我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化工作開(kāi)創(chuàng)了新局面。隨著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量逐步標(biāo)準(zhǔn)化，科學(xué)研究水平明顯提高。（4）、目前的現(xiàn)狀：據(jù)國(guó)家科技部統(tǒng)計(jì)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)使用單位有2100多家，工作人員近9500余人，其中專業(yè)技術(shù)人員占39.5%，已形成地區(qū)性生產(chǎn)基地。年生產(chǎn)各類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物約1321萬(wàn)余只，并已開(kāi)始向生產(chǎn)規(guī)模化、供應(yīng)社會(huì)化方向發(fā)展。年使用動(dòng)物1045萬(wàn)余只，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也在向技術(shù)服務(wù)社會(huì)化方向邁進(jìn)。3、我國(guó)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究方面存在的問(wèn)題（1）、研究人員缺乏必要的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)知識(shí)和訓(xùn)練。（2）、用于實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物種系少。（3）、用于實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物質(zhì)量和籠器具質(zhì)量差。（4）、動(dòng)物使用率低。（5）、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面技術(shù)人員缺乏，國(guó)際交流少，信息不靈。二）、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的發(fā)展趨勢(shì)1、使用動(dòng)物的數(shù)量不斷下降2、使用動(dòng)物的質(zhì)量在不斷的提高3、使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種系不斷增加4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型走向商品化5、動(dòng)物替代物和替代方法不斷的應(yīng)用六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的優(yōu)越性和欠缺（一）、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的優(yōu)越性1、可以把臨床研究中的復(fù)雜問(wèn)題簡(jiǎn)單化，對(duì)各種因素可以進(jìn)行細(xì)微的探討。2、動(dòng)物的各種條件可以進(jìn)行嚴(yán)格控制，便于得出科學(xué)的結(jié)論。動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，可以在同一時(shí)間選擇年齡、性別、環(huán)境條件、營(yíng)養(yǎng)狀況、遺傳特點(diǎn)、微生物等條件相同的若干動(dòng)物，而以人為研究對(duì)象是辦不到的。3、可以縮短實(shí)驗(yàn)周期，短期內(nèi)可觀察多次。動(dòng)物的壽命短，一個(gè)研究者可觀察動(dòng)物幾十代、甚至幾百代，而以人為研究對(duì)象是辦不到的。4、可以在動(dòng)物身上進(jìn)行在人體上不能進(jìn)行的高危險(xiǎn)度的試驗(yàn)。從法律和道德上看，凡對(duì)人身安全構(gòu)成威脅的試驗(yàn)在人身上都不能做（如燒傷、致癌等試驗(yàn)）。5、可按研究者的設(shè)計(jì)要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，可按時(shí)、按量、按次數(shù)、按種類、按方式施加任何條件，而人則不會(huì)給以配合。6、可隨時(shí)取材，取任何材料，甚至處死后取材。（二）、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的欠缺1、動(dòng)物在遺傳特性、生理、解剖特性上即使與人有相似之處，但畢竟不同于人，所以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)只能用作參考，不能直接應(yīng)用于人。2、動(dòng)物模型與臨床疾病相比在病因、病理、外在表現(xiàn)等方面不完全相同，只能相似，所以復(fù)制的動(dòng)物模型必須進(jìn)行科學(xué)的分析和討論。3、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)多在麻醉狀態(tài)下進(jìn)行，與人在清醒狀態(tài)下的反應(yīng)是不一樣的。4、離體器官（或組織）實(shí)驗(yàn)與整體實(shí)驗(yàn)的情況是不一樣的。5、動(dòng)物缺少思維和語(yǔ)言，不能訴說(shuō)內(nèi)心感受，有些實(shí)驗(yàn)無(wú)法在動(dòng)物身上進(jìn)行。（一）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的概念及內(nèi)涵1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的概念實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利是在其整個(gè)生命過(guò)程中對(duì)其實(shí)施保護(hù)的具體體現(xiàn)，其實(shí)質(zhì)和基本原則是為了保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的康樂(lè)（Welfare),通俗地說(shuō)，就是讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在康樂(lè)的狀態(tài)下生活，在無(wú)痛苦狀態(tài)下死亡，內(nèi)容包括無(wú)任何疾病，行為無(wú)異常、無(wú)心理緊張、壓抑和痛苦等。2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的內(nèi)涵（1）、提供適當(dāng)清潔飲水和保持身體健康需要的食物，使動(dòng)物免受饑渴之苦（享受不受饑渴的自由）；（2）、提供適當(dāng)?shù)臈?chǎng)所，能舒適的休息，使動(dòng)物免受困頓勞累之苦（享受生活舒適的自由）；（3）、做好衛(wèi)生防疫、預(yù)防疾病和給患病的動(dòng)物及時(shí)診治，使動(dòng)物免受病痛之苦（享受不受痛苦傷害和疾病威脅的自由）；3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)過(guò)程中的福利要求1）、對(duì)飼養(yǎng)設(shè)施、設(shè)備和飼育生活環(huán)境的要求；（2）、對(duì)待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的態(tài)度和飼養(yǎng)管理的要求；（3）、對(duì)飼料和飲水的要求；（4）、特殊情況下對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的照料。4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用過(guò)程中的福利要求（1）、對(duì)科研人員素質(zhì)的要求；（2）、對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備和手術(shù)器械的要求；（3）、對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求；（4）、對(duì)保定和麻醉技術(shù)的要求；（5）、對(duì)術(shù)后護(hù)理的要求；（6）、對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理。1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工整理和研究者應(yīng)樹(shù)立愛(ài)護(hù)動(dòng)物的觀念。2、研究者應(yīng)懂得正確的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法。3、試驗(yàn)中不許恐嚇動(dòng)物，不許造成動(dòng)物肉體的痛苦，故進(jìn)行使動(dòng)物痛苦實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須實(shí)施麻醉，處死動(dòng)物時(shí)要施行安樂(lè)死、尸體要焚燒。4、要給犧牲的動(dòng)物樹(shù)立“慰靈碑”，表示對(duì)動(dòng)物的感謝，喚起人們對(duì)動(dòng)物的愛(ài)護(hù)和尊重。5、建立健全法規(guī)、用法律約束人們的行為。6、遵守3R原則、既代替（Replacement）減少（Reduction）優(yōu)化（Refinement）。7、為動(dòng)物設(shè)計(jì)舒適、有利于動(dòng)物生存的環(huán)境。三）重視實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的意義1、有助于培養(yǎng)人類熱愛(ài)自然、熱愛(ài)生命、保護(hù)動(dòng)物的意識(shí)。2、有利于從動(dòng)物的身體上獲得更加準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。3、有利于非動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（代替法）的研究推廣。4、有利于人類社會(huì)及人類社會(huì)和動(dòng)物界的和諧，從而有利于科學(xué)的進(jìn)步和社會(huì)的進(jìn)步。四）、3R原則的內(nèi)涵1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的代替（Replacement)（1）、生命系統(tǒng)包括離體培養(yǎng)的器官、組織、細(xì)胞等。在單克隆抗體生產(chǎn)、病毒疫苗研制、效力安全試驗(yàn)等研究項(xiàng)目中廣泛應(yīng)用。（2）、非生命系統(tǒng)包括物理、化學(xué)方法代替動(dòng)物。醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)教學(xué)已有用物理學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械系統(tǒng)者（如心肺復(fù)蘇等病理過(guò)程）。免疫化學(xué)可用結(jié)合力很高的抗體來(lái)搜尋抗原或鑒定毒素存在。減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用量（Reduction（1）、合用動(dòng)物；（2）、改進(jìn)統(tǒng)計(jì)學(xué)設(shè)計(jì)；（3）、使用低等動(dòng)物代替高等的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；（4）、使用高質(zhì)量動(dòng)物。3、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的優(yōu)化（Refinement（1）、改良儀器設(shè)備；（2）、減少對(duì)動(dòng)物的侵?jǐn)_。改善實(shí)驗(yàn)室條件，提高實(shí)驗(yàn)質(zhì)量；（3）、進(jìn)一步控制痛苦；（4）、改進(jìn)動(dòng)物保定技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的法規(guī)（一）、管理機(jī)構(gòu)與社會(huì)團(tuán)體國(guó)家科技部：主管全國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)：負(fù)責(zé)學(xué)術(shù)交流、技術(shù)咨詢、人員培訓(xùn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)：由科技部門出領(lǐng)導(dǎo)、學(xué)會(huì)出專家組成，負(fù)責(zé)各行業(yè)、各系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理工作、法規(guī)落實(shí)、業(yè)務(wù)指導(dǎo)和業(yè)務(wù)協(xié)調(diào)。（二）、政策和法規(guī)第一部法規(guī)：1988年科委報(bào)請(qǐng)國(guó)務(wù)院批準(zhǔn)頒布的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》國(guó)家科委2號(hào)令1997年又頒布了多項(xiàng)法規(guī)：《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法》〈實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)家種子中心管理辦法〉〈國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量檢測(cè)機(jī)構(gòu)技術(shù)〉現(xiàn)執(zhí)行的是2001年國(guó)家科技部聯(lián)合六部委頒布的〈實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法〉（四）、質(zhì)量保證體系1、檢測(cè)網(wǎng)絡(luò)：國(guó)家的、系統(tǒng)的、地方的。負(fù)責(zé)檢測(cè)方法、技術(shù)、試劑的研究人員培訓(xùn)和仲裁。2、種子中心：國(guó)家有嚙齒類中心和上海分中心，云南靈長(zhǎng)類中心，哈爾濱SPF雞中心。3、生產(chǎn)、繁殖、供應(yīng)中心：由各行業(yè)、各地區(qū)、各單位設(shè)施合格技術(shù)較好的單位負(fù)責(zé)生產(chǎn)和供應(yīng)。五）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員1、從業(yè)人員：是指從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的科技人員、專業(yè)管理人員和技術(shù)工人，以及利用動(dòng)物進(jìn)行教學(xué)、研究、藥品和生物制品生產(chǎn)及檢定等人員。國(guó)家規(guī)定從業(yè)人員實(shí)行崗位資格認(rèn)可制度，所有人員必須持證上崗。2、人員素質(zhì)要求：⑴遵守法律、法規(guī)、遵守生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)要求。⑵了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物知識(shí)、科學(xué)管理和操作。⑶有飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作技能。⑷善待動(dòng)物。六）、科學(xué)教育：1、普及教育（相關(guān)人員培訓(xùn)上崗）2、大學(xué)教育（生物、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)等大學(xué)授課）3、碩士和博士學(xué)位的專業(yè)教育（一）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種、品系1、種:動(dòng)物“種”(species)是生物學(xué)分類的最基本單位,而在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中,種是指可以相互交配且后代有繁殖能力的同一種類的動(dòng)物。2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種(stockbreed):一般指具有一些容易識(shí)別和人們所需要的性狀，而且是可以穩(wěn)定遺傳的動(dòng)物群體。通常把封閉群動(dòng)物稱為品種,如新西蘭白兔、KM小鼠等。3、品系(strain):實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)上把基因高度純合的動(dòng)物稱為品系動(dòng)物,通常指近交系、突變系動(dòng)物。vv二）、作為一個(gè)品種、品系應(yīng)具備的條件1、相似的外貌特征：例如小鼠C57BL/6品系的毛色是黑色的,DBA/2品系的毛色是灰色的,KM品種的毛色是白色的。當(dāng)然,相似的外貌特征只是品系、品種應(yīng)具備的條件之一。不同品系、品種的動(dòng)物也有外貌相似的,例如A、KM等十幾個(gè)品種、品系動(dòng)物的毛色都是白色，但它們?cè)谄渌臈l件上是有區(qū)別的。2、獨(dú)特的生物學(xué)特性3、穩(wěn)定的遺傳性能：一個(gè)品種或品系有一定的育種價(jià)值，雜交F1代繁殖后代時(shí)，性狀發(fā)生分離不能成為一個(gè)品系。4、具有共同的遺傳來(lái)源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)按培育的程度分為廣義和狹義實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1、廣義實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：泛指用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的各種動(dòng)物2、狹義實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：指經(jīng)人工飼育的，對(duì)其攜帶的微生物和寄生蟲(chóng)實(shí)行控制，遺傳背景明確或來(lái)源清楚的，用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定以及其它科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。遠(yuǎn)交種的命名：（1）、一般用2~4個(gè)大寫(xiě)字母表示，如ICR、NIH小鼠。（2）、習(xí)慣用法，如Wistar大鼠、NewZealandWhite兔。（3）、在大寫(xiě)字母之前加上一個(gè)大寫(xiě)字母和幾個(gè)小寫(xiě)字母構(gòu)成的培養(yǎng)者或保留者的符號(hào)，并且與品系名稱用冒號(hào)隔開(kāi)，如Lac:LACA是由英國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心保持的LACA小鼠，N:NIH是由美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院保存的NIH小鼠。一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的概念和研究范疇二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的誕生三、中國(guó)現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的誕生四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)應(yīng)用范疇五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的優(yōu)越性和欠缺1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物育種學(xué)：主要研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳改良、遺傳控制、新型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的開(kāi)發(fā)和野生動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化。2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物醫(yī)學(xué)：研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疾病診斷、治療和預(yù)防。3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生態(tài)學(xué)：研究如何為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供適于生存的環(huán)境條件，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康無(wú)病，生理指標(biāo)穩(wěn)定。1、公元前4世紀(jì)至公元3世紀(jì)公元前4世紀(jì)，杰出的生物學(xué)奠基人Aristotle首先開(kāi)展了多種動(dòng)物解剖，但都是在死亡的動(dòng)物和人尸體上進(jìn)行的。Erasistratus可能是進(jìn)行活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)始人，他在豬體內(nèi)確定了氣管是吐納空氣的通道，肺是呼吸空氣的器官。之后，Galen對(duì)豬、猴及其他多種動(dòng)物都施行了活體解剖檢查，以此推論人體的生理功能。4、20世紀(jì)初至今上個(gè)世紀(jì)80年代以來(lái)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究獲得三次諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：（1）、1980年度諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：GeorgeSnell的組織相容性基因的發(fā)現(xiàn)；（2）、1984年度諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：G.Kohler和C.Milstein單克隆抗體的發(fā)現(xiàn)；（3）、1996年度諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：Koherty和ZinkermagelT淋巴細(xì)胞識(shí)別微生物的發(fā)現(xiàn)三、中國(guó)現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的誕生四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)應(yīng)用范疇1、生命科學(xué)方面基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)理論，疾病的病因、治療和預(yù)防的研究；新的治療方法、新的檢查和治療儀器的研制；分子生物學(xué)研究；基因工程研究；老年學(xué)研究；生育控制研究等。2、藥學(xué)方面藥理學(xué)的研究；新藥開(kāi)發(fā)研究；診斷用血清、疫苗、免疫血清的整理；藥品的安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)；藥效試驗(yàn)等。五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)3、我國(guó)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究方面存在的問(wèn)題（二）、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的發(fā)展趨勢(shì)六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的優(yōu)越性和欠缺（二）、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的欠缺第二章實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的法規(guī)和倫理一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的內(nèi)涵3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)過(guò)程中的福利要求4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用過(guò)程中的福利要求（二）、正確對(duì)待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利（三）重視實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的意義（四）、3R原則的內(nèi)涵2、減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用量（Reduction)3、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的優(yōu)化（Refinement)二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的法規(guī)（一）、管理機(jī)構(gòu)與社會(huì)團(tuán)體國(guó)家科技部：主管全國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)：負(fù)責(zé)學(xué)術(shù)交流、技術(shù)咨詢、人員培訓(xùn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)：由科技部門出領(lǐng)導(dǎo)、學(xué)會(huì)出專家組成，負(fù)責(zé)各行業(yè)、各系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理工作、法規(guī)落實(shí)、業(yè)務(wù)指導(dǎo)和業(yè)務(wù)協(xié)調(diào)。（二）、政策和法規(guī)第一部法規(guī)：1988年科委報(bào)請(qǐng)國(guó)務(wù)院批準(zhǔn)頒布的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》國(guó)家科委2號(hào)令1997年又頒布了多項(xiàng)法規(guī)：《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法》〈實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)家種子中心管理辦法〉〈國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量檢測(cè)機(jī)構(gòu)技術(shù)〉現(xiàn)執(zhí)行的是2001年國(guó)家科技部聯(lián)合六部委頒布的〈實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法〉（三）許可證內(nèi)容1、不同等級(jí)、不同種動(dòng)物的生產(chǎn)、繁殖、供應(yīng)合格證。2、不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)設(shè)施許可證。3、從業(yè)人員許可證。（四）、質(zhì)量保證體系1、檢測(cè)網(wǎng)絡(luò)：國(guó)家的、系統(tǒng)的、地方的。負(fù)責(zé)檢測(cè)方法、技術(shù)、試劑的研究人員培訓(xùn)和仲裁。2、種子中心：國(guó)家有嚙齒類中心和上海分中心，云南靈長(zhǎng)類中心，哈爾濱SPF雞中心。3、生產(chǎn)、繁殖、供應(yīng)中心：由各行業(yè)、各地區(qū)、各單位設(shè)施合格技術(shù)較好的單位負(fù)責(zé)生產(chǎn)和供應(yīng)。（五）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員1、從業(yè)人員：是指從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的科技人員、專業(yè)管理人員和技術(shù)工人，以及利用動(dòng)物進(jìn)行教學(xué)、研究、藥品和生物制品生產(chǎn)及檢定等人員。國(guó)家規(guī)定從業(yè)人員實(shí)行崗位資格認(rèn)可制度，所有人員必須持證上崗。2、人員素質(zhì)要求：⑴遵守法律、法規(guī)、遵守生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)要求。⑵了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物知識(shí)、科學(xué)管理和操作。⑶有飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作技能。⑷善待動(dòng)物。（六）、科學(xué)教育：1、普及教育（相關(guān)人員培訓(xùn)上崗）2、大學(xué)教育（生物、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)等大學(xué)授課）3、碩士和博士學(xué)位的專業(yè)教育第三章實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分類一、自然分類法分類（二）、作為一個(gè)品種、品系應(yīng)具備的條件)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生物學(xué)分類中的位置二、按培育的程度分類按培育的程度分為廣義和狹義實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1、廣義實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：泛指用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的各種動(dòng)物2、狹義實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：指經(jīng)人工飼育的，對(duì)其攜帶的微生物和寄生蟲(chóng)實(shí)行控制，遺傳背景明確或來(lái)源清楚的，用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定以及其它科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。（一）、封閉群普通近交系（二）、近交系——→重組近交系同源近交系（三）、雜交一代動(dòng)物同源導(dǎo)入系（四）、突變系分離近交系1、定義：一個(gè)有效群體在固定場(chǎng)所，五年以上不從外部引入新個(gè)體、以非近親交配方式繁育生產(chǎn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體稱為封閉群，亦稱遠(yuǎn)交群。（1）、遠(yuǎn)交種：一個(gè)長(zhǎng)時(shí)期于外界隔離，雌雄個(gè)體之間能夠隨機(jī)交配的動(dòng)物群。其遺傳組成比較接近于自然狀態(tài)下的動(dòng)物群體結(jié)構(gòu)。常見(jiàn)的遠(yuǎn)交種動(dòng)物有KM、ICR、NIH小鼠、SD大鼠、新西蘭兔、Wistar大鼠等。（2）、突變種：攜帶個(gè)別突變基因的封閉群，這些突變可能以純合或雜合形式存在于封閉群中。2、封閉群的命名3、封閉群動(dòng)物的特點(diǎn)及應(yīng)用1、普通近交系（Inbredstrain)概念：是通過(guò)至少（或相當(dāng)）連續(xù)20代以上兄妹或親子交配培育而成，品系內(nèi)所有個(gè)體都可以追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對(duì)共同祖先，近交系數(shù)大于98.6%的動(dòng)物群體。近交系特點(diǎn)：基因高度純合；表現(xiàn)型一致；對(duì)外界刺激敏感而反應(yīng)一致；生命力差、抗病力低。普通近交系的命名近交系動(dòng)物的應(yīng)用2、重組近交系3、同源突變、同源導(dǎo)入、分離近交系1、概念：雜交群動(dòng)物（HybridAnimals）指兩個(gè)近交系之間進(jìn)行有計(jì)劃交配所獲得的第一代動(dòng)物（也叫F1代動(dòng)物）。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所說(shuō)的雜交群通常指雜交F1代動(dòng)物。1、定義：遺傳基因發(fā)生突變具有某種特殊表型的動(dòng)物，稱為突變系動(dòng)物。2、特點(diǎn)：多為病態(tài)，生活能力差，對(duì)飼養(yǎng)管理要求嚴(yán)格，繁殖保種較為困難。3、應(yīng)用：作為人類疾病動(dòng)物模型如：糖尿病鼠（diabetesmice)、肥胖癥鼠（obesemice）、自發(fā)性高血壓大鼠（spontaneoushypertension）（SHR）、裸鼠（nudemice或rats）、聯(lián)合免疫缺陷小鼠（SCID）等。按照微生物控制程度，目前我國(guó)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四個(gè)等級(jí)：普通級(jí)動(dòng)物（Ⅰ級(jí)）清潔級(jí)動(dòng)物（Ⅱ級(jí)）無(wú)特定病原體動(dòng)物（Ⅲ級(jí)或SPF級(jí)）無(wú)菌動(dòng)物和悉生動(dòng)物（Ⅳ級(jí)）1、普通級(jí)動(dòng)物（Conventionalanimal，CV也叫一級(jí)動(dòng)物）定義：未經(jīng)嚴(yán)格的微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)控制，飼養(yǎng)在開(kāi)放的環(huán)境中的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病病原。特點(diǎn)：敏感性、一致性差，只能用于教學(xué)示教或科研預(yù)實(shí)驗(yàn)。國(guó)外沒(méi)有這個(gè)等級(jí)的嚙齒類動(dòng)物。2、清潔級(jí)動(dòng)物（Cleananimal，CL也叫二級(jí)動(dòng)物）定義：除普通動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，還不許攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原體，肉眼觀察無(wú)病外，尸體解剖時(shí)主要臟器、組織無(wú)論是宏觀還是病理組織切片均不應(yīng)有病變。種子來(lái)源于剖腹產(chǎn)或SPF動(dòng)物、飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)內(nèi)。特點(diǎn)：可靠性、重復(fù)性好，適用于大多數(shù)科研和教學(xué)實(shí)驗(yàn)。3、無(wú)特定病原體動(dòng)物（Specificpathogenfreeanimal，SPF也叫三級(jí)動(dòng)物）定義：除清潔級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病病原和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原。種子來(lái)源于剖腹產(chǎn)或無(wú)菌動(dòng)物，飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)內(nèi)。特點(diǎn)：國(guó)際通用的標(biāo)準(zhǔn)科研用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。4、無(wú)菌動(dòng)物（Germfreeanimal，GF）和悉生動(dòng)物（Gnotobilticanimal，GN也叫四級(jí)動(dòng)物）定義：用現(xiàn)有的科學(xué)知識(shí)和檢測(cè)手段，在動(dòng)物體內(nèi)外不能檢出一切外來(lái)生命的動(dòng)物稱為無(wú)菌動(dòng)物；悉生動(dòng)物是指在無(wú)菌動(dòng)物體內(nèi)植入已知微生物的動(dòng)物。根據(jù)體內(nèi)植入菌落種類不同，又可以分為單菌動(dòng)物、雙菌動(dòng)物和三菌動(dòng)物。種子來(lái)源于剖腹產(chǎn)，飼養(yǎng)在隔離器內(nèi)。無(wú)菌動(dòng)物的特點(diǎn)：盲腸薄，腸粘膜絨毛增多；肝臟重量下降，心臟、脾臟、腎臟縮??；白細(xì)胞增多，數(shù)值恒定；免疫功能低下；代謝周期和壽命延長(zhǎng)；無(wú)菌豚鼠和家兔繁殖和生長(zhǎng)機(jī)能下降。多用于特殊實(shí)驗(yàn)。第四章人類疾病的動(dòng)物模型第一節(jié)人類疾病動(dòng)物模型的概念、意義及分類一、人類疾病動(dòng)物模型的概念人類疾病的動(dòng)物模型（animalmodelofhumandisease）是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。動(dòng)物模型主要用于實(shí)驗(yàn)生理、實(shí)驗(yàn)病理和實(shí)驗(yàn)治療學(xué)（包括新藥篩選）研究。二、人類疾病動(dòng)物模型在生物醫(yī)學(xué)研究中的意義1、可復(fù)制臨床上一些不常見(jiàn)的疾病，如放射病、毒氣中毒、烈性傳染病、外傷、腫瘤等2、可按需要選擇動(dòng)物模型作為人類疾病的“復(fù)制品”，可按研究者的需要隨時(shí)采集各種樣品或分批處死動(dòng)物收集標(biāo)本，以了解疾病的全過(guò)程，這是臨床難以辦到的。3、可比性一般疾病多為零散發(fā)生，在同一時(shí)期內(nèi)，很難獲得一定數(shù)量的定性材料，而動(dòng)物模型不僅在群體數(shù)量上容易得到滿足，而且可以在方法學(xué)上嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，從而提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性和重復(fù)性，使所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確更深入。4、有助于全面認(rèn)識(shí)疾病的本質(zhì)在臨床上研究疾病的本質(zhì)難免帶有一定的局限性。許多病原體除人以外也能引起多種動(dòng)物的感染，其癥狀體征表現(xiàn)可能不完全相同。但是通過(guò)對(duì)人畜共患病的比較，則可以充分認(rèn)識(shí)同一病原體給不同的機(jī)體帶來(lái)的各種危害，使研究工作上升到立體的水平來(lái)揭示某種疾病的本質(zhì)。三、好的人類疾病動(dòng)物模型應(yīng)具有的特點(diǎn)1、再現(xiàn)性好：應(yīng)能再現(xiàn)所要研究的人類疾病，動(dòng)物疾病的表現(xiàn)應(yīng)與人類疾病相似；2、動(dòng)物背景資料完整，生命周期滿足實(shí)驗(yàn)要求，復(fù)制率高；3、專一性好：即一種方法只能復(fù)制出一種模型。四、人類疾病動(dòng)物模型的分類1、自發(fā)性動(dòng)物模型（naturallyoccurringorspontaneousanimalmodels）是取自動(dòng)物自然發(fā)生的疾病，或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過(guò)定向培育而保留下來(lái)的疾病模型。2、誘發(fā)性動(dòng)物模型（experimentalartificialorinducedanimalmodels）是通過(guò)物理、生物、化學(xué)等致病因素的作用，人為誘發(fā)出的具有類似人類疾病特征的動(dòng)物模型。第二節(jié)常見(jiàn)自發(fā)性人類疾病的動(dòng)物模型2、神經(jīng)系統(tǒng)疾病3、循環(huán)系統(tǒng)疾病4、呼吸系統(tǒng)疾病5、消化系統(tǒng)疾病6、泌尿系統(tǒng)疾病7、血液與造血系統(tǒng)疾病8、新陳代謝疾病9、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病第三節(jié)誘發(fā)性動(dòng)物模型的復(fù)制方法簡(jiǎn)介1、神經(jīng)系統(tǒng)疾病2、循環(huán)系統(tǒng)疾病3、呼吸系統(tǒng)疾病4、消化系統(tǒng)疾病5、泌尿系統(tǒng)疾病6、血液與造血系統(tǒng)疾病7、新陳代謝疾病8、寄生蟲(chóng)2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)三、分類：1.按機(jī)體水平：整體實(shí)驗(yàn)和離體實(shí)驗(yàn)。具體分為亞細(xì)胞、細(xì)胞、組織、器官、整體動(dòng)物和無(wú)損傷動(dòng)物等水平的實(shí)驗(yàn)。2.時(shí)間：急性實(shí)驗(yàn)（2天以內(nèi)）、亞急性實(shí)驗(yàn)（1~4周）、慢性實(shí)驗(yàn)（2~6個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間甚至整個(gè)生命期）四、方法：生理學(xué)、病理生理學(xué)、藥理學(xué)、病理解剖學(xué)、組織學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法等等。第二節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備（二）實(shí)驗(yàn)單位隨機(jī)分為三組分組情況（二）耳緣剪孔法：是在動(dòng)物的耳邊緣剪出不同的缺口或打成不同的小孔進(jìn)行標(biāo)記的方法。為防止孔、口愈合，一般在打孔后用消毒的滑石粉涂抹在孔、口局部。由打孔或剪切的位置和孔數(shù)代表編號(hào)，一般在耳內(nèi)按上、中、下打孔，分別代表1、2、3，在相應(yīng)位置剪缺口代表4、5、6，剪兩個(gè)缺口代表7、8、9，無(wú)孔或缺口為10。本法規(guī)定右耳代表個(gè)位數(shù)、左耳代表十位數(shù)。（三）烙印法：用烙印鉗將號(hào)碼烙印在犬等大中型動(dòng)物無(wú)體毛或明顯部位。大、小鼠等小動(dòng)物可用刺針在動(dòng)物耳上刺號(hào)，然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在針刺處涂抹。烙印前,最好對(duì)烙印的部位預(yù)先用酒精消毒，操作時(shí)要注意防止感染。（四）號(hào)牌法：用特制的金屬號(hào)牌固定在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳上，大動(dòng)物可系于頸項(xiàng)部，固定號(hào)牌時(shí)要注意避開(kāi)血管。（五）籠子編號(hào)法：不在動(dòng)物身體上作標(biāo)記而把裝動(dòng)物的籠子進(jìn)行編號(hào)，也叫替代法。第三節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本操作一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛去除法三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑與方法五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血和采液方法3、手術(shù)固定法：用乙醚等麻醉藥品麻醉后，用長(zhǎng)20~30cm的線繩分別系在四肢上，再把系在四肢的線繩分別系在固定板四角的釘子上，并且在頭部上顎切齒的地方牽一根線繩達(dá)到完全固定。4、在尾靜脈給藥時(shí)，先根據(jù)小鼠的大小選擇合適的固定器，打開(kāi)鼠筒蓋，把小鼠放在里面，只露出尾巴；或者用倒放的燒杯將鼠扣住，尾巴自燒杯凹口處露出，并壓住，即可進(jìn)行操作。（二）、大鼠的抓取與固定1、抓取方法：4~5周齡以內(nèi)的大鼠同小鼠；周齡較大的大鼠其尾部皮膚容易被剝脫，所以用左手從背部中央到胸部捏起來(lái)抓住。抓取時(shí)最好帶防護(hù)手套，但手套不宜過(guò)厚。2、手固定法：抓取大鼠的方法類似小鼠，即用左手的拇指、食指和中指抓住頸背部皮膚，小指和無(wú)名指挾住尾部牢牢固定；或左手按住抓起大鼠的時(shí)候，把食指放在頸背部，拇指及其他三指放在肋部，食指和中指挾住左前肢，分開(kāi)兩前肢帶起來(lái)，右手按住后肢固定；還有一種方法，張開(kāi)虎口，迅速將拇指、食指插入腹下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身體中段，并保持仰臥體位，然后調(diào)整左手拇指位置，緊抵在下頜骨上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。3、手術(shù)固定法：同小鼠。4、尾靜脈給藥或采血時(shí)同小鼠。（三）、豚鼠的抓取與固定1、抓取方法：抓取幼小豚鼠時(shí)，用手捧起來(lái)；成熟的大豚鼠，用手大把抓起胸肋部即可。注意不能粗野，更不能抓取腰腹部，這樣容易造成肝破裂而死亡。2、手固定法：⑴將左手的食指和中指放在豚鼠頸背部?jī)蓚?cè)，拇指和無(wú)名指放在肋部，分別用手指夾住左右前肢抓起來(lái)。⑵反轉(zhuǎn)左手，用右手的拇指和食指夾住右后肢，用中指和無(wú)名指夾住左后肢是豚鼠整體伸直成一條直線。⑶一個(gè)人固定操作時(shí)，坐在椅子上，用右手拿著豚鼠的后肢夾在兩腿之間，用大腿代替右手夾住。3、手術(shù)固定法：同大、小鼠。（四）、家兔的抓取與固定1、抓取方法：用一只手大把抓住頸背部皮膚提起來(lái)，另一只手托住其臀部，讓其重心落在托其臀部的手上，運(yùn)送時(shí)，可抓住頸肩部皮膚抱著兔子運(yùn)送。2、手固定法：在灌胃給藥時(shí)，人坐在椅子上，用一只手抓住頸背部皮膚，另一只手抓住兩后肢放在兩腿之間，大腿夾住兔子的下半身，用空著的手抓住兩前肢固定之，抓住頸背部的手同時(shí)捏著兩只耳朵，不讓頭部轉(zhuǎn)動(dòng)。3、固定器固定法：耳靜脈給藥或采血時(shí)用盒式固定法；從頸動(dòng)脈采血或手術(shù)實(shí)驗(yàn)時(shí)用此固定法。（1）盒式固定法：把兔子放在盒子里，只露出頭部，用轉(zhuǎn)扭擰固定器固定家兔。（2）臺(tái)式固定法：將麻醉的兔子仰臥，用紗布條依次將四肢捆綁固定于固定臺(tái)的兩側(cè)，然后把頭部放在金屬制的首枷和咀環(huán)上固定。（五）、犬的抓取與固定1、抓取方法：先給犬帶上系有鐵鏈條的脖套，對(duì)于性情兇猛的犬，要用特制的鉗式長(zhǎng)柄犬夾夾住犬頸部將犬按倒后，再系脖套和鏈條。2、手固定法：首先綁住犬嘴，方法是飼養(yǎng)員或犬主人從側(cè)面靠近并輕輕撫摸其頸部皮毛，然后迅速用布帶綁住犬嘴，布帶從下頜繞到上頜打一個(gè)結(jié)，再繞到下頜打一個(gè)結(jié)，然后將布帶繞到頭后頸，在頸后部再打一個(gè)結(jié)，最后打一個(gè)活結(jié)，對(duì)于未經(jīng)馴服的犬，可用長(zhǎng)柄犬夾夾住犬頸部按倒后強(qiáng)制綁嘴。3、手術(shù)臺(tái)固定法：麻醉后，松開(kāi)布帶，將犬仰臥在手術(shù)臺(tái)上，先固定四肢，再固定頭部。（六）、貓的抓取與固定1、抓取方法：先輕聲呼喚，慢慢將手伸入貓籠，輕輕撫摸貓頭、頸及背部，然后一只手抓住其背部皮毛，另一只手抓其腰背部。如遇兇暴的貓不讓接觸時(shí)，可用網(wǎng)套抓取。2、固定方法：同兔臺(tái)式固定法。貓頭可用一根粗棉繩，一端拉住貓的兩只門齒，另一端捆綁在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的鐵柱上。（七）、蛙的抓取與固定1、抓取方法：左手將動(dòng)物背部貼緊手掌固定，以中指、無(wú)名指、小指壓住其左腹側(cè)和后肢，拇指和食指分別壓住左、右前肢，右手操作。注意：不要擠壓其耳部?jī)蓚?cè)突起的毒腺，以免毒液射進(jìn)眼中。2、固定方法：用探針破壞其腦脊髓或麻醉后用大頭針固定在蛙板上。（八）、雞的抓取與固定1、抓取方法：一只手從雞的前方，另一只手繞到雞的背后悄悄接近，兩只手迅速將雞抓住。2、手固定法：把雞朝向持者方向，以右手的食指與中指夾住雞的兩腳，以左手掌緊握從腹部到翼部的位置。3、手術(shù)臺(tái)固定法：用毛巾將動(dòng)物裹住固定，放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。（九）、羊的抓取與固定1、抓取方法：通常只需在羊脖子上帶上項(xiàng)圈，用繩牽著，便可抓取。2、固定方法：將羊蹄捆綁，使其側(cè)臥在地，以手固定其頭部防止掙扎翻滾；也可以采用特制的羊固定架固定。此種方法常應(yīng)用于采血。（十）、豬的抓取與固定1、抓取方法：小豬常采用雙手提起后肢，兩膝夾住豬背倒立固定；成豬可采用站立固定。2、固定方法：可將豬仰放在“V”字型槽內(nèi)固定，也可用木制三角固定架和帆布吊兜固定（挖四個(gè)孔使其四肢下伸）。如沒(méi)有三腳架，也可以用犬固定臺(tái)。（十一）、猴的抓取與固定1、抓取方法：從籠內(nèi)抓取時(shí)，飼養(yǎng)人員應(yīng)右手持短柄網(wǎng)罩，左臂緊靠門側(cè)，以防止籠門敞開(kāi)時(shí)猴逃出。右手將網(wǎng)罩塞入籠內(nèi)，由上而下罩捕。當(dāng)猴被罩住后，應(yīng)立即將網(wǎng)罩翻轉(zhuǎn)取出籠外，罩猴在地，由罩外抓住猴的頸部，清掀網(wǎng)罩，再提取猴的手臂反背握住。2、固定方法：（1）徒手固定：將猴兩前肢反背其背后，操整理用一只手握著，用另一只手將猴兩后肢捉住即可固定。（2）固定架固定：使用“猴限制椅”或“猴固定架”進(jìn)行固定。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛去除法1.拔毛法：在各種動(dòng)物做后肢皮下靜脈注射或采血，特別是兔耳緣靜脈注射或采血時(shí)常用。動(dòng)物固定→拇指和食指拔去所需部位毛→涂一層凡士林。2.剪毛法：動(dòng)物固定→水濕潤(rùn)剪毛部位→將局部皮膚繃緊→用彎頭手術(shù)剪緊貼皮膚剪毛。3.剃毛法：動(dòng)物固定→肥皂水浸潤(rùn)剃毛部位→順被毛方向剃毛（若用電動(dòng)剃刀則逆被毛方向剃毛）。4.化學(xué)脫毛法：常用于大動(dòng)物無(wú)菌手術(shù)、局部皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)、觀察動(dòng)物局部血液循環(huán)或其它各種病理變化。⑴方法：動(dòng)物固定→剪短脫毛部位被毛→用棉球或紗布沾取脫毛劑→在脫毛部位涂成薄層→2~3分鐘后用溫水洗滌脫下的被毛→干紗布擦干→涂一層油脂。⑵常用脫毛劑：硫化堿、硫化鈉、硫化鈣、硫化鍶、硫化鋇、三硫化二砷。⑶配方：Ⅰ、硫化鈉:肥皂粉:淀粉=3:1:7加水適量調(diào)成膏狀。Ⅱ、硫化鈉:淀粉:糖:甘油;硼砂:水=8:7:4:5:1:75調(diào)成糊狀。Ⅲ、8%的硫化鈉溶液以上脫毛劑配方適用于家兔、大鼠、小鼠等小動(dòng)物脫毛。Ⅳ、硫化堿10g、生石灰15g，加水至100ml，溶解即可。此配方適用于犬等大動(dòng)物的脫毛。三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉（一）、常用的麻醉劑1、揮發(fā)性麻醉劑包括乙醚、氯仿等。2、非揮發(fā)性麻醉劑包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙脂、水合氯醛。3、中藥麻醉劑包括洋金花、氫溴酸東莨菪堿等。（二）、動(dòng)物的麻醉方法

1、全身麻醉（1）、吸入麻醉：多采用乙醚做麻醉藥。把帶有乙醚的棉球放入玻璃容器內(nèi)，揮發(fā)后將動(dòng)物放入容器內(nèi)4~6分鐘，動(dòng)物失去運(yùn)動(dòng)力后立即取出動(dòng)物以避免麻醉過(guò)深致死。此法多用于短期操作性實(shí)驗(yàn)，乙醚麻醉的優(yōu)點(diǎn)是蘇醒快，但是對(duì)呼吸道刺激性大，長(zhǎng)時(shí)間容易窒息死亡。（2）、注射麻醉：大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法進(jìn)行全身麻醉，犬、貓、兔等既可腹腔注射也可靜脈注射給藥。注射時(shí)，先用麻醉藥總量的2/3，密切觀察動(dòng)物生命體征的變化，如已經(jīng)達(dá)到所需麻醉的程度，余下的麻醉藥則不用，避免麻醉過(guò)深抑制大腦呼吸中樞導(dǎo)致動(dòng)物死亡。各種動(dòng)物常用的全身麻醉劑的劑量及途徑注:i.p指腹腔注射,i.m指肌肉注射,s.c指皮下注射,i.v指靜脈注射2、局部麻醉（1）、表面麻醉:利用局部麻醉藥的組織穿透作用，透過(guò)粘膜，阻滯淺表的神經(jīng)末梢，稱為表面麻醉。常用利多卡因，眼部用藥點(diǎn)滴、鼻內(nèi)用藥涂敷、咽喉氣管用藥噴霧、尿道灌注給藥。（2）、區(qū)域阻滯麻醉：在手術(shù)區(qū)內(nèi)四周和底部注射麻醉藥阻斷疼痛的向心傳導(dǎo)，稱為區(qū)域阻滯麻醉。常用普魯卡因。（3）、神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉：在神經(jīng)干(叢)的四周注射麻醉藥，阻滯其傳導(dǎo)，使其所支配的區(qū)域疼痛感覺(jué)消失，稱為神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉。常用利多卡因。（4）、局部浸潤(rùn)麻醉：沿手術(shù)切口逐層注射局部麻醉藥，阻滯組織中的神經(jīng)末梢，稱為局部浸潤(rùn)麻醉。常用普魯卡因。3、麻醉注意事項(xiàng)（1）有些麻醉藥，如乙醚揮發(fā)性很強(qiáng)，易燃，使用時(shí)應(yīng)遠(yuǎn)離火源，平時(shí)應(yīng)妥善保存。（2）應(yīng)特別注意各種麻醉藥的劑量和給藥途徑，切莫因藥量過(guò)大而引起中毒或死亡。（3）注射時(shí)，一般要求緩慢注入，并隨時(shí)觀察動(dòng)物肌肉的緊張性、角膜反射、呼吸頻率、疼痛反射等指標(biāo)。（4）注意保溫，采取實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈、電褥、臺(tái)燈照射等。（5）萬(wàn)一麻醉過(guò)量，根據(jù)不同情況采取措施，如施行人工呼吸、給予蘇醒劑或注射強(qiáng)心劑、咖啡因、腎上腺素、可拉明等，也可以靜脈注射5%溫?zé)岬钠咸烟侨芤?。四、?shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑與方法（一）、注射法給藥3.肌肉注射：一般選擇肌肉發(fā)達(dá)而且無(wú)大血管經(jīng)過(guò)的部位，犬、貓、兔多選臀部，大、小鼠多選股部。注射時(shí)針尖穿過(guò)皮膚后，再往深部刺入肌肉，此時(shí)針尖不能自由活動(dòng)，回抽注射器無(wú)回血，即可注射。一般小動(dòng)物選擇5或5.5號(hào)針頭，大動(dòng)物選用6或6.5號(hào)針頭。注意，注射時(shí)針頭與肌肉成60。角，一次性刺入，小鼠每次注入量不超過(guò)0.1ml。4.腹腔注射：將動(dòng)物固定，然后在左或右下腹皮下，將針頭向前推0.5~1.0cm，再以45。角斜穿腹肌，緩慢注入藥液。注藥之前有落空感，回抽無(wú)腸液、尿液后方可注藥。小鼠一次注射量為0.1~0.2ml/10g(體重)，大鼠為1~2ml/100(體重)。5.靜脈注射：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不同所選靜脈注射部位也不同。大、小鼠一般選用尾靜脈，兔選用耳緣靜脈，犬選用后肢小隱靜脈或前肢內(nèi)側(cè)皮下靜脈注射。一般只限于液體藥物，若是懸濁液，可能引起血管栓塞。⑴大、小鼠尾靜脈注射：尾靜脈有3條，左右兩側(cè)和背側(cè)各有1條，由于兩側(cè)靜脈比較容易固定，所以常被采用。操作時(shí)，先將動(dòng)物固定在暴露尾部的固定器內(nèi)（燒杯等），除毛后，將尾部置于45℃~50℃的溫水中浸泡1~2分鐘或用75%酒精棉反復(fù)擦拭使血管擴(kuò)張，以左手拇指和食指捏住尾兩側(cè)，使靜脈充盈，注射時(shí)針頭盡量采取與尾部平行的角度進(jìn)針，完畢后把尾部向注射側(cè)彎曲止血。一次注射量為0.05~0.1mg/10g(體重)⑵兔耳緣靜脈注射：兔耳緣靜脈表淺易固定而常被采用。操作時(shí)，先固定兔子，而后用75%酒精棉球反復(fù)擦拭使血管充盈，左手食指、中指夾住靜脈近心端，拇指繃緊靜脈遠(yuǎn)心端，無(wú)名指和小指墊在耳下邊，針從靜脈末端刺入并順血管方向平行刺入1cm左右，回抽有血后再用拇指固定針頭，放開(kāi)食指和中指將藥液注入，拔針后用酒精棉球壓迫幾分鐘，防止流血和消毒。⑶犬的靜脈注射：多采用前肢內(nèi)側(cè)皮下靜脈或后肢小隱靜脈，在靜脈血管近心端用橡皮帶扎緊，使血管充盈，從靜脈的遠(yuǎn)心端平行進(jìn)針，回抽有血后松開(kāi)橡皮帶，將藥液緩慢注入。⑷豚鼠的靜脈注射：同犬的靜脈注射方法，也可以象兔一樣采用耳緣靜脈注射。6.淋巴囊注射：主要用于蛙類。腹部淋巴囊和頭背部淋巴囊常作為蛙類給藥途徑。采用腹部淋巴囊給藥時(shí)，將針頭從蛙大腿上端刺入，經(jīng)大腿肌層入腹壁肌層，再進(jìn)入腹壁皮下，然后注入藥物；采用胸淋巴囊給藥時(shí)，將針頭刺入口腔，使穿過(guò)下頜肌層入胸淋巴囊內(nèi)注射藥物，一次最大給藥劑量為1ml。蛙全身分布為咽、胸、背、腹側(cè)、腹、大腿和腳等七個(gè)淋巴囊。

（二）、經(jīng)口給藥法1.自動(dòng)口服法：將藥物放入飼料或飲水中，讓動(dòng)物自動(dòng)攝入，方法簡(jiǎn)單不費(fèi)工夫，也不會(huì)給動(dòng)物造成損傷。但很難掌握給藥量，有時(shí)藥物在常溫下還會(huì)分解。這種方法一般適用于動(dòng)物疾病的防治、藥物的毒性觀察、某些與食物有關(guān)的人類疾病動(dòng)物模型的復(fù)制等。2.強(qiáng)制灌胃給藥：就是用灌胃器將藥品直接強(qiáng)制灌入胃內(nèi)。這種方法能準(zhǔn)確掌握給藥量、給藥時(shí)間，并能發(fā)現(xiàn)和記錄癥狀出現(xiàn)的時(shí)間及經(jīng)過(guò)。缺點(diǎn)是費(fèi)時(shí)、同時(shí)給動(dòng)物帶來(lái)一定的損傷和心理影響。因此，如果操作技術(shù)熟練對(duì)動(dòng)物的不良影響就可以減少一些。⑴大、小鼠、豚鼠的灌胃法：左手抓住鼠背頸部皮毛將動(dòng)物固定，右手持灌胃器，將灌胃針從口腔插入，沿咽后壁插入食道，使其前端達(dá)到膈肌水平，為防止插入氣管，應(yīng)回抽注射器針?biāo)?，如無(wú)空氣被抽回，即可將藥液注入。小鼠進(jìn)針約3~4cm、大鼠、豚鼠為4~6cm，常用灌胃量小鼠為0.2~1.0ml、大鼠為1~4ml、豚鼠為1~5ml。⑵兔、犬、貓的灌胃法：先固定動(dòng)物，然后將開(kāi)口器固定在動(dòng)物口中，壓住舌頭，然后將灌胃管從開(kāi)口器小孔插入食道，將另一端浸入水中，如有氣泡逸出，說(shuō)明誤入氣管需拔出重插，插好后將藥液推入，為避免藥液殘留需再注入5ml生理鹽水。兔、貓插入為15cm左右，犬為20cm左右。一次耐受量兔為80~150ml，犬為200~500ml。各種動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積（三）、其他途徑給藥法⒈直腸給藥：多用于家兔，將藥物通過(guò)肛門直接注入動(dòng)物直腸內(nèi)，經(jīng)直腸壁吸收，注意不要誤入陰道。⒉呼吸道給藥：以粉塵、氣體、蒸汽、霧等狀態(tài)存在的藥物或毒氣，均通過(guò)動(dòng)物呼吸道給藥。⒊皮膚給藥：為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等，均采用皮膚給藥。⒋脊髓腔內(nèi)給藥：此法主要用于椎管麻醉或抽取腦脊液。⒌關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥：主要用于大中型動(dòng)物，給兔子注射時(shí)首先將兔仰臥固定，在臏韌帶附著點(diǎn)外上方約0.5cm處進(jìn)針，針頭從前上方向下后方傾斜刺入，直至針頭遇到阻力變小為止，然后針頭稍后退，以垂直方向推進(jìn)關(guān)節(jié)腔中。當(dāng)有刺破薄膜的感覺(jué)時(shí)即可注入藥液。⒍腦內(nèi)給藥：常用于微生物學(xué)試驗(yàn)。將病原體接種于被檢動(dòng)物腦內(nèi)，然后觀察接種后的變化。⒎小腦延髓池給藥：此種給藥方法都是在動(dòng)物麻醉情況下進(jìn)行，而且常用于大動(dòng)物如犬等，小動(dòng)物很少采用。四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用藥量及計(jì)算方法㈠給藥劑量的確定⒈先用小鼠粗略地摸索中毒劑量或致死劑量，然后用小于中毒的劑量，或取致死量的若干分之一為應(yīng)用劑量，一般取1/10~1/5。⒉植物藥粗制劑的劑量多按生藥量折算。⒊化學(xué)藥品可參考化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用都相似的藥物劑量。⒋一般情況下，在適宜的劑量范圍內(nèi)，藥物的作用常隨劑量的加大而增強(qiáng)。所以有條件時(shí)，最好同時(shí)用幾個(gè)劑量作實(shí)驗(yàn)，以便迅速獲得關(guān)于藥物作用的較完整的資料。如實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)劑量與作用強(qiáng)度之間毫無(wú)規(guī)律時(shí)，則更應(yīng)慎重分析。⒌用大動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，開(kāi)始的劑量可采用用于鼠類劑量的2/5~1/2，以后可以根據(jù)動(dòng)物的反應(yīng)調(diào)整劑量。⒍根據(jù)動(dòng)物的年齡大小和體質(zhì)強(qiáng)弱確定給藥劑量，一般說(shuō)確定的給藥劑量是指成年動(dòng)物的；如幼小動(dòng)物，劑量應(yīng)減少。如以狗為例：6個(gè)月以上的給藥量為1份時(shí)，3~6個(gè)月的狗給1/2份，45~89日齡給1/4份，20~44日齡給1/8份，10~19日齡給1/16份。⒎根據(jù)給藥途徑不同確定給藥劑量，如以口服量為100ml時(shí)，灌腸給藥量為100~200ml，皮下注射為30~50ml，肌肉注射為25~30ml，靜脈注射為25ml。㈡實(shí)驗(yàn)動(dòng)物間用藥量的計(jì)算方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所用的藥物劑量，一般按mg/kg體重或g/kg體重計(jì)算，應(yīng)用時(shí)須用已知藥液的濃度換算出相當(dāng)于每kg體重應(yīng)注射的藥液量(ml)，以便給藥。㈢人與動(dòng)物及各類動(dòng)物間藥物劑量的換算方法dB=dA×ＲＢ/ＲA×(WA/WB)1/3公式中:dA、dB是AB兩種動(dòng)物kg體重的劑量(mg/kg)ＲA、ＲＢ是動(dòng)物的體形系數(shù)。R可由表查到。WA、WB是動(dòng)物體重五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血和采液方法（一）、采血（3）眼眶靜脈叢采血：左手拇指、食指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部（防止動(dòng)物窒息），輕輕壓迫動(dòng)物頸部?jī)蓚?cè)，使眶后靜脈叢充血。右手持接7號(hào)針頭的1ml注射器或長(zhǎng)頸（3~4cm）硬質(zhì)玻璃滴管（毛細(xì)管內(nèi)徑0.5~1.0mm），使采血器與鼠面成45°夾角，由眼內(nèi)角刺入，針頭斜面先向眼球，刺入后再轉(zhuǎn)180°使斜面對(duì)著眼眶后界。刺入深度小鼠約2~3mm，大鼠約4~5mm。當(dāng)有阻力時(shí)即停止推進(jìn)，同時(shí)將針退出約0.1~0.5mm，邊退邊抽。若穿刺適當(dāng)血液能自然流入毛細(xì)管內(nèi)，當(dāng)?shù)玫剿璧难亢螅闯ゼ佑陬i部的壓力，同時(shí)將采血器拔出，防止術(shù)后穿刺口出血。體重20~25g的小鼠每次可采血0.2~0.3ml；體重200~300g大鼠每次可以采血0.5~1.0ml。（4）心臟采血：小鼠心臟小、心率快，采血困難；大鼠可以采用此法，仰臥固定，選擇心跳最明顯的部位，通常在胸骨左緣的正中作穿刺。（5）斷頭采血：左手拇指和食指以背部較緊地握住鼠頸部皮膚，并使動(dòng)物頭朝下傾的姿勢(shì)。右手用剪刀猛剪鼠頸，約1/2~4/5的頸部全剪斷，讓血液自由滴入盛器。小鼠可采約0.8~1.2ml；大鼠約5~10ml。（6）頸動(dòng)、靜脈采血：動(dòng)物仰臥固定，切開(kāi)頸部皮膚，分離皮下結(jié)締組織，充分暴露頸動(dòng)、靜脈用注射器吸出血液。（7）腹主動(dòng)脈采血：動(dòng)物麻醉、仰臥固定，腹正中線切開(kāi)腹腔，清晰暴露腹主動(dòng)脈，用注射器吸出血液?；蛴脽o(wú)齒鑷子剝離結(jié)締組織，夾住動(dòng)脈近心端，用尖頭手術(shù)剪刀剪斷動(dòng)脈，使血液噴入盛器。（8）股動(dòng)（靜）脈采血：由助手握住動(dòng)物，采血者左手拉直動(dòng)物下肢，使靜脈充盈；或者以搏動(dòng)為指標(biāo)，右手用注射器刺入血管。體重15~20g小鼠采血約0.2~0.8ml，大鼠約0.4~0.6ml。2、豚鼠采血法（1）耳緣剪口采血:用銳器割破耳緣，在切口邊緣涂抹20%檸檬酸鈉溶液以阻止血凝，血可自切口自動(dòng)流出?？刹裳?.5ml左右。（2）心臟采血：選擇心跳最明顯的部位，通常在胸骨左緣的正中作穿刺。在第三、四肋間左緣3mm處垂直進(jìn)針刺入心臟，血液即流入針管。成年豚鼠每周采血不超過(guò)10ml。（3）股動(dòng)脈采血：動(dòng)物仰臥固定，剪去腹股溝區(qū)的毛，麻醉后，局部碘酒消毒。切開(kāi)長(zhǎng)約2~3cm的皮膚暴露股動(dòng)脈。用鑷子提起股動(dòng)脈，遠(yuǎn)端結(jié)扎，近端用止血鉗夾住，在動(dòng)脈中央剪一個(gè)小孔。用無(wú)菌玻璃小導(dǎo)管或塑料管插入，放開(kāi)止血鉗，血液由導(dǎo)管口流出。一次可采血10~20ml。（4）背中足靜脈采血：固定動(dòng)物，將膝關(guān)節(jié)伸直，動(dòng)物腳背面酒精消毒，找到背中足靜脈，以左手的拇指和食指拉住其趾端，右手刺入靜脈采血。3、兔采血法（1）耳靜脈采血：常用采血法之一，可反復(fù)取血。方法同耳靜脈給藥，但需逆血流方向進(jìn)針，最多一次采血5~10ml。（2）耳中央動(dòng)脈采血：盒式固定，左手固定兔耳，右手持注射器，在動(dòng)脈的末端，沿動(dòng)脈平行向心方向刺入，取血完畢后注意止血。一次可達(dá)15ml。（3）心臟采血：仰臥固定，在第三、四肋間左緣3mm處垂直進(jìn)針刺入心臟，血液即流入針管。一次取血20~25ml。（4）后肢脛部皮下靜脈采血：仰臥固定，拔去脛部被毛，在脛部上端股部扎橡皮管，左手固定好靜脈，右手持注射器與皮下靜脈平行方向刺入血管，回抽有血后即可取血。一次可以取2~5ml。（5）股靜脈、頸靜脈采血：先作股靜脈和頸靜脈暴露分離手術(shù)，再采血。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液采集采血部位及采血量（二）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體液采集1.尿液的采集⑴代謝籠法：此法較常用，適用于大、小鼠、沙鼠、豚鼠、兔等中小動(dòng)物。將動(dòng)物放在特制的籠內(nèi)，動(dòng)物排便時(shí)，可以通過(guò)籠底的大小便分離漏斗將尿液與糞便分開(kāi)，達(dá)到采集尿液的目的。有的代謝籠除可以采集尿液外，還可以收集糞便及二氧化碳。⑵導(dǎo)尿管法：此法適用于雄性兔、犬。動(dòng)物輕度麻醉后，固定于手術(shù)臺(tái)上，用導(dǎo)尿管（頂端用液體石蠟涂抹）經(jīng)尿道插入膀胱，可采到無(wú)污染的尿液。⑶壓迫膀胱法：將動(dòng)物輕度麻醉后，用手在動(dòng)物下腹部加壓，手要輕柔而有力。當(dāng)外加的壓力足以使動(dòng)物膀胱括約肌松弛時(shí)，尿液會(huì)自動(dòng)由尿道排出。此法適用于貓、犬、兔等較大動(dòng)物。⑷膀胱穿刺法：將動(dòng)物麻醉后固定在手術(shù)臺(tái)上，在恥骨聯(lián)合上腹正中線剪毛，消毒后進(jìn)行穿刺，入皮后針頭應(yīng)稍改變角度，以避免穿刺后漏尿。⑸反射排尿法：此法適用于小鼠，因小鼠被人抓住尾巴提起時(shí)排便反射比較明顯，故需要采集少量尿液時(shí)，可采用此法。操整理應(yīng)在提起動(dòng)物的同時(shí)，迅速用容器接住尿液。⑹剖腹采尿法：剖腹暴露膀胱，用左手持小平鑷夾住小部分膀胱壁，右手持針在該部位直接穿刺抽取尿液。2.胸、腹水的采集⑴胸水的采集：主要采用胸膜腔穿刺術(shù)。動(dòng)物立位或側(cè)臥固定→術(shù)部剪毛、消毒、局部浸潤(rùn)麻醉→左手將術(shù)部皮膚向側(cè)方移動(dòng)→右手持穿刺套管針沿緊靠肋骨前緣處皮膚垂直慢慢刺入→阻力消失或有落空感→抽取胸水⑵腹水的采集：主要采用腹膜腔穿刺術(shù)。動(dòng)物自然站立固定→術(shù)部（恥骨前緣與臍之間，腹中線兩側(cè)）剪毛、消毒、局部浸潤(rùn)麻醉→左手拇指、食指緊繃穿刺部位的皮膚→右手控制穿刺深度做垂直穿刺→腹水流出→立即固定針頭及注射器的位置連續(xù)抽吸注意：抽吸速度不要太快，腹水多時(shí)不要一次大量抽出，以免因腹壓突然下降導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)循環(huán)功能障礙等問(wèn)題。3.唾液的采集⑴直接抽吸法：在急性實(shí)驗(yàn)中，可用吸管直接插入動(dòng)物口腔或唾液腺導(dǎo)管抽吸唾液，不足在于從口腔抽吸的唾液會(huì)混入雜質(zhì)。⑵制備腮腺瘺法：用手術(shù)方法將腮腺導(dǎo)管開(kāi)口移向體外，即以腮腺導(dǎo)管開(kāi)口為中心，切成一直徑2~3cm的圓形粘膜片，將此粘膜片與周圍組織分開(kāi)，穿過(guò)皮膚切口引到頰外，將帶有導(dǎo)管開(kāi)口的粘膜片與周圍的皮膚縫合，腮腺分泌的唾液就流出頰外，這種方法可以收集到比較純凈的唾液。四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的急救及處死方法（一）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的急救措施（二）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法（一）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的急救措施當(dāng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中因麻醉過(guò)量、大失血、過(guò)強(qiáng)的創(chuàng)傷、窒息等各種原因，而使動(dòng)物血壓下降甚至測(cè)不到。呼吸極慢或無(wú)規(guī)則甚至呼吸停止、角膜反射消失等臨床死亡癥狀時(shí)，應(yīng)立即急救，急救的方法可根據(jù)動(dòng)物的情況而定，對(duì)狗、兔、貓常用的急救措施有以下幾種。1、針刺針刺人中穴對(duì)挽救家兔效果較好；對(duì)狗用每分鐘幾百次頻率的脈沖電刺激膈神經(jīng)效果較好。2、注射強(qiáng)心劑可以靜脈注射0.1%腎上腺素1ml（增強(qiáng)心肌收縮力），必要時(shí)可直接心臟注射。當(dāng)動(dòng)物注射腎上腺素后，若心臟已經(jīng)搏動(dòng)但極為無(wú)力時(shí)，可靜脈或心腔內(nèi)注射1%氯化鈣5ml(興奮心肌緊張力）。3、注射呼吸中樞興奮藥可靜脈注射尼可剎米(興奮延髓呼吸中心）或山梗菜堿（頸動(dòng)脈化學(xué)感應(yīng)器)。每只動(dòng)物一次注25%尼可剎米1ml或1%山梗菜堿0.5ml。4、動(dòng)脈快速注射高滲葡萄糖液一般常采用動(dòng)物股動(dòng)脈逆血流加壓、快速、沖擊式注入40%葡萄糖液。注射量根據(jù)動(dòng)物而定，如狗可按2~3ml/kg體重計(jì)算。這樣可刺激動(dòng)物血管內(nèi)感受器，反射性地引起血壓呼吸的改善。5、動(dòng)脈快速輸血、輸液在作失血性休克或死亡復(fù)活等實(shí)驗(yàn)時(shí)采用?？稍趧?dòng)物的股動(dòng)脈插一軟塑料套管，連接加壓輸液裝置。當(dāng)動(dòng)物發(fā)生臨床死亡時(shí)，即可加（180~200mmHg），快速?gòu)墓蓜?dòng)脈輸血和輸入低分子右旋糖酐。如實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物曾用肝素抗凝，由于微循環(huán)血管中始終保持暢通，不出現(xiàn)血管中血液凝固現(xiàn)象，因此就是動(dòng)物出現(xiàn)臨床死亡后數(shù)分鐘，采用此種急救措施仍易救活。6、人工呼吸可采用雙手壓迫動(dòng)物胸廓進(jìn)行人工呼吸，如有電動(dòng)人工呼吸器，可行氣管分離插管后，再接人工呼吸器進(jìn)行人工呼吸。一旦見(jiàn)到動(dòng)物自主呼吸恢復(fù)，即可停止人工呼吸。有條件時(shí)，當(dāng)動(dòng)物呼吸停止，而心搏極弱或剛停止時(shí)，可用5%CO2和60%O2的混合氣體進(jìn)行人工呼吸，效果更好。采用人工呼吸器時(shí)，應(yīng)調(diào)整其容量：大鼠為50次/分鐘，每次8ml/kg（即400ml/kg/分鐘）；兔和貓為30次/分鐘，每次10ml/kg（即300ml/kg/分鐘）；犬為20次/分鐘，每次100ml/kg（即2000ml/kg/分鐘）（二）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)遵循動(dòng)物安樂(lè)死的基本原則，即盡可能縮短動(dòng)物死亡時(shí)間，盡量減少其疼痛、痛苦。1、化學(xué)致死法此法適用于各種動(dòng)物，可吸入二氧化碳、乙醚、氯仿等致死。因乙醚易引起火災(zāi)，氯仿對(duì)人有較大毒性。而二氧化碳對(duì)人很安全，處死動(dòng)物效果確切，故最好使用二氧化碳。也可靜脈注射一定量的氯化鉀溶液（心肌失去收縮力）、福爾馬林溶液（蛋白凝固）、士的寧、DDT致死。2、脊椎脫臼法大、小鼠常用。將動(dòng)物放在鼠籠蓋或粗糙的表面上，用左手拇指與食指用力按住鼠頭，右手抓住鼠用力向后上方拉，使頸椎脫臼，鼠立即死亡。3、空氣栓塞法此法適用于犬、貓、兔、豚鼠等較大動(dòng)物。向動(dòng)物靜脈內(nèi)注入一定量的空氣，使之發(fā)生栓塞而死。一般兔、貓等靜脈內(nèi)注入20~40ml空氣即可致死。每條犬由前肢或后肢皮下靜脈注入80~150ml空氣，可很快致死。此法常出現(xiàn)動(dòng)物長(zhǎng)時(shí)間掙扎，從動(dòng)物保護(hù)的角度出發(fā)，不提倡使用。4、急性失血法小鼠等小動(dòng)物可采用頸總動(dòng)脈大量失血而致死的方法。犬等大型動(dòng)物先麻醉后放血，要使放血的切口保持通暢，一般在股三角區(qū)橫切約10cm的切口，切斷股靜、動(dòng)脈，使之大量失血而死亡。采用此方法，動(dòng)物十分安靜，對(duì)臟器無(wú)損傷，對(duì)活殺采集病理切片標(biāo)本是一種較好的方法。5、擊打法此法適用于大鼠、家兔等。抓住動(dòng)物尾部，提起，用力摔擊其頭部，或用小木錘用力擊打后腦部也可致死。6、斷頭法此法適用于大、小鼠等小型動(dòng)物，具體方法與斷頭采血法相同。7、破壞腦脊髓法此法適用于蛙類。8、其他方法其他處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的方法還有破壞延腦法、開(kāi)放性氣胸法等。第四節(jié)影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的因素實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)處理的反應(yīng)可用如下的公式表示：R=（A+B+C）×D±E其中：R為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的總反應(yīng)或演出型；A為動(dòng)物種間的共同反應(yīng)；B為動(dòng)物品種、品系特有的反應(yīng)；C為動(dòng)物個(gè)體反應(yīng)；D為環(huán)境因素（包括實(shí)驗(yàn)處理）；E為實(shí)驗(yàn)誤差?？梢钥闯鯝、B、C是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的本身反應(yīng)，是由遺傳因素起決定性作用，被選擇的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，在嚴(yán)格控制環(huán)境因素D或改變其中某一條件后就可能得到一個(gè)理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果R。一、生物因素對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響生物因素涉及同種生物因素和異種生物因素等。1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物也存在社會(huì)地位和勢(shì)力范圍；2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要有一定的活動(dòng)面積和空間，要有合理的飼養(yǎng)密度。3、異種動(dòng)物之間可產(chǎn)生相互影響，因此不同種、品系的動(dòng)物應(yīng)分室飼養(yǎng)。4、病原微生物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響是明顯的。普通動(dòng)物、SPF動(dòng)物和無(wú)菌動(dòng)物特點(diǎn)的比較二、遺傳因素對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響1、不同種屬的哺乳動(dòng)物，其生命過(guò)程有一定的共性，這是科學(xué)實(shí)驗(yàn)中可以應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基礎(chǔ)。但另一方面不同種屬的動(dòng)物在解剖、生理生化特征和各種反應(yīng)上又有個(gè)性。如犬、貓、猴對(duì)嘔吐反應(yīng)敏感，兔、豚鼠不敏感，大小鼠無(wú)反應(yīng)。2、同種屬不同品系的動(dòng)物對(duì)同一刺激的反應(yīng)有很大的差異。C3H小鼠乳腺癌97%，NOD易發(fā)糖尿病，C57BL低癌系。3、動(dòng)物的解剖生理特征和反應(yīng)性隨年齡而明顯變化，老年動(dòng)物代謝能力低下，反應(yīng)不靈敏，一般動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)選成年動(dòng)物進(jìn)行。慢性實(shí)驗(yàn)或觀察動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育，應(yīng)選擇幼齡動(dòng)物。在老年醫(yī)學(xué)研究中，應(yīng)選用老齡動(dòng)物。論文設(shè)計(jì)要保證在動(dòng)物生命周期內(nèi)完成。4、不同品種和品系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命各不相同，所以選用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)應(yīng)注意到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之間年齡的對(duì)應(yīng)，以便進(jìn)行分析比較。犬與人的年齡對(duì)應(yīng)（年）5、不同性別的動(dòng)物對(duì)同一藥物的敏感性不同，對(duì)同一刺激的反應(yīng)也不一致。雌性動(dòng)物在性周期的不同時(shí)期，懷孕和授乳時(shí)，機(jī)體的反應(yīng)性差異很大。因此科研工作中一般選雄性動(dòng)物或雌雄各半作實(shí)驗(yàn)。三、環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的環(huán)境因素很多，主要有溫度、濕度、通風(fēng)、光照、噪音、有害氣體、籠具和墊料等，按國(guó)家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)加以控制。1、應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。特別在進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)時(shí)，室溫應(yīng)設(shè)定在22~24℃。用大、小鼠所作的急性毒性實(shí)驗(yàn)中，在不同的溫度下所作的LD50有所不同，見(jiàn)下表：不同室溫下幾種藥物對(duì)小鼠的半數(shù)致死量2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明麻醉或固定后動(dòng)物體溫將下降，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中應(yīng)特別注意動(dòng)物正常體溫的維持。3、動(dòng)物的許多機(jī)能，如體溫、血糖、基礎(chǔ)代謝率、各種內(nèi)分泌激素的水平都呈晝夜性的節(jié)律性變化，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意動(dòng)物的這些節(jié)律性變化，應(yīng)選擇在同樣的季節(jié)，每日在同樣的時(shí)間進(jìn)行，才能得到正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。四、實(shí)驗(yàn)操作對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)要求按照實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范（GLP）和標(biāo)準(zhǔn)的操作程序（SOP）嚴(yán)格執(zhí)行。這些法規(guī)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)室條件、工作人員素質(zhì)、技術(shù)水平和操作方法都有明確的要求。2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的精神、神經(jīng)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)研究有影響。當(dāng)動(dòng)物遭受虐待、創(chuàng)傷、粗暴對(duì)待等外部刺激時(shí)，其內(nèi)分泌系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、機(jī)體代謝都與正常時(shí)不同。應(yīng)養(yǎng)成日常善待動(dòng)物，并熟練掌握捉拿、固定、注射、給藥、手術(shù)等技能，減少對(duì)動(dòng)物的不良刺激。3、給藥途徑也是影響實(shí)驗(yàn)的重要問(wèn)題。如有些藥品在胃內(nèi)被破壞或在肝內(nèi)分解，經(jīng)口服給藥就會(huì)影響其效果。有些中藥制劑經(jīng)靜脈注射和口服其療效相差很大。有些藥的效果與給藥次數(shù)和濃度關(guān)系很大，動(dòng)物和人的用藥劑量的換算也應(yīng)準(zhǔn)確。4、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后對(duì)動(dòng)物的管理也非常重要，應(yīng)特別保證動(dòng)物的有足夠量的營(yíng)養(yǎng)供給。營(yíng)養(yǎng)缺乏或過(guò)剩都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5、在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中對(duì)照問(wèn)題也很重要，對(duì)照的方法很多，有空白對(duì)照、實(shí)驗(yàn)對(duì)照、有效對(duì)照、配對(duì)對(duì)照等。6、肯定一個(gè)結(jié)果最好采用兩種以上的動(dòng)物進(jìn)行比較觀察，其中之一不應(yīng)是嚙齒類動(dòng)物。常用選擇順序是小鼠、大鼠、犬、猴或小型豬。猴、犬、大鼠與人在藥物代謝方面的相似性比較五、實(shí)驗(yàn)技術(shù)環(huán)節(jié)對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響1、動(dòng)物選擇選擇好適合研究需要的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是獲得正確實(shí)驗(yàn)結(jié)果和實(shí)驗(yàn)成功的重要環(huán)節(jié)。按照不同的實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。2、實(shí)驗(yàn)季節(jié)生物體的許多功能隨著季節(jié)產(chǎn)生規(guī)律性的變動(dòng)。不同的實(shí)驗(yàn)季節(jié)，動(dòng)物的機(jī)體反應(yīng)性有一定的改變。3、晝夜過(guò)程機(jī)體的有些功能有晝夜規(guī)律形變動(dòng)。4、麻醉深度動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中往往需要將動(dòng)物麻醉后才能進(jìn)行各種操作。要求麻醉深度要適度，而且在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要保持始終恒定。5、手術(shù)技巧動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中除了注意選擇合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，高純度的試劑，靈敏的儀器，方法準(zhǔn)確外，還必須注意手術(shù)技巧，即操作技術(shù)的熟練。手術(shù)熟練可以減少對(duì)動(dòng)物的刺激，將會(huì)提高實(shí)驗(yàn)的成功率和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。6、實(shí)驗(yàn)藥物（1）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常常需要給動(dòng)物體內(nèi)注入各種藥物以觀察其作用和變化。因此給藥的途徑、劑量是影響實(shí)驗(yàn)中很重要的問(wèn)題。（2）給藥次數(shù)對(duì)一些藥物的藥效也有影響。（3）藥物的濃度和劑量也是一個(gè)重要的問(wèn)題，太高的濃度，太大的劑量都會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。（4）在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常遇到的問(wèn)題是動(dòng)物和人用藥劑量的換算。動(dòng)物和人用藥的劑量的換算以體表面積計(jì)算比以體重?fù)Q算好一些，但仍需慎重處理。7、對(duì)照問(wèn)題動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中對(duì)照問(wèn)題也是非常重要的，常有忽視或錯(cuò)誤地應(yīng)用對(duì)照的情況，從而造成實(shí)驗(yàn)失敗。一般對(duì)照的原則“齊同對(duì)比”。對(duì)照的方法很多，有空白對(duì)照、實(shí)驗(yàn)對(duì)照、有效（或標(biāo)準(zhǔn)）對(duì)照、配對(duì)對(duì)照、組間對(duì)照、歷史對(duì)照以及正常值對(duì)照等。（1）空白對(duì)照是指在不給任何處理情況下觀察動(dòng)物的自發(fā)變化的規(guī)律。（2）實(shí)驗(yàn)對(duì)照是采用與實(shí)驗(yàn)相同操作條件的對(duì)照，如給藥實(shí)驗(yàn)中的藥物溶劑、手術(shù)以及觀察撫摸等都可以對(duì)動(dòng)物發(fā)生影響。（3）有效（或標(biāo)準(zhǔn)）對(duì)照常用于藥物研究。對(duì)一新藥的療效可用一已知的有效藥或能引起標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)的藥物作對(duì)照，這樣既可考核實(shí)驗(yàn)方法的可靠性，又可通過(guò)比較來(lái)了解新藥的療效和特點(diǎn)。(4)配對(duì)對(duì)照是同一個(gè)體在前后不同時(shí)間內(nèi)比較對(duì)照期和實(shí)驗(yàn)期的差異，或同一個(gè)體的左右兩部分作對(duì)照處理和實(shí)驗(yàn)處理的差異，這樣可大大減少抽樣誤差。（5）組間對(duì)照是將實(shí)驗(yàn)對(duì)象分成兩組或幾組比較差異。這種對(duì)照個(gè)體差異和抽樣誤差比較大。組間可用交叉對(duì)照法以減少誤差。如觀察某藥物的療效可用兩組犬分別做一次實(shí)驗(yàn)和對(duì)照，再互相交換，以原實(shí)驗(yàn)作為對(duì)照組，原對(duì)照組作為實(shí)驗(yàn)組重復(fù)第一次實(shí)驗(yàn)所觀察的療效或影響，而且檢查的指標(biāo)和條件要等同。（6）歷史對(duì)照和正常值對(duì)照，這種對(duì)照要十分謹(jǐn)慎，必須要條件、背景、指標(biāo)、技術(shù)方法相同才可以進(jìn)行對(duì)比，否則將會(huì)得出不恰當(dāng)?shù)纳踔铃e(cuò)誤的結(jié)論。（7）實(shí)驗(yàn)的重復(fù)和肯定選用動(dòng)物一方面要數(shù)量合適，不造成浪費(fèi)，另一方面也應(yīng)做必要的重復(fù)實(shí)驗(yàn)。有些實(shí)驗(yàn)單做一種動(dòng)物還不夠，應(yīng)當(dāng)重復(fù)幾種動(dòng)物。這不僅可以比較不同動(dòng)物的差異，而且可以在不同的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)新問(wèn)題，提供使用不同指標(biāo)的線索。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)三、分類：1.按機(jī)體水平：整體實(shí)驗(yàn)和離體實(shí)驗(yàn)。具體分為亞細(xì)胞、細(xì)胞、組織、器官、整體動(dòng)物和無(wú)損傷動(dòng)物等水平的實(shí)驗(yàn)。2.時(shí)間：急性實(shí)驗(yàn)（2天以內(nèi)）、亞急性實(shí)驗(yàn)（1~4周）、慢性實(shí)驗(yàn)（2~6個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間甚至整個(gè)生命期）四、方法：生理學(xué)、病理生理學(xué)、藥理學(xué)、病理解剖學(xué)、組織學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法等等。第二節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備（二）實(shí)驗(yàn)單位隨機(jī)分為三組分組情況（二）耳緣剪孔法：是在動(dòng)物的耳邊緣剪出不同的缺口或打成不同的小孔進(jìn)行標(biāo)記的方法。為防止孔、口愈合，一般在打孔后用消毒的滑石粉涂抹在孔、口局部。由打孔或剪切的位置和孔數(shù)代表編號(hào)，一般在耳內(nèi)按上、中、下打孔，分別代表1、2、3，在相應(yīng)位置剪缺口代表4、5、6，剪兩個(gè)缺口代表7、8、9，無(wú)孔或缺口為10。本法規(guī)定右耳代表個(gè)位數(shù)、左耳代表十位數(shù)。（三）烙印法：用烙印鉗將號(hào)碼烙印在犬等大中型動(dòng)物無(wú)體毛或明顯部位。大、小鼠等小動(dòng)物可用刺針在動(dòng)物耳上刺號(hào)，然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在針刺處涂抹。烙印前,最好對(duì)烙印的部位預(yù)先用酒精消毒，操作時(shí)要注意防止感染。（四）號(hào)牌法：用特制的金屬號(hào)牌固定在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳上，大動(dòng)物可系于頸項(xiàng)部，固定號(hào)牌時(shí)要注意避開(kāi)血管。（五）籠子編號(hào)法：不在動(dòng)物身體上作標(biāo)記而把裝動(dòng)物的籠子進(jìn)行編號(hào)，也叫替代法。第三節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本操作一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛去除法三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑與方法五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血和采液方法3、手術(shù)固定法：用乙醚等麻醉藥品麻醉后，用長(zhǎng)20~30cm的線繩分別系在四肢上，再把系在四肢的線繩分別系在固定板四角的釘子上，并且在頭部上顎切齒的地方牽一根線繩達(dá)到完全固定。4、在尾靜脈給藥時(shí)，先根據(jù)小鼠的大小選擇合適的固定器，打開(kāi)鼠筒蓋，把小鼠放在里面，只露出尾巴；或者用倒放的燒杯將鼠扣住，尾巴自燒杯凹口處露出，并壓住，即可進(jìn)行操作。（二）、大鼠的抓取與固定1、抓取方法：4~5周齡以內(nèi)的大鼠同小鼠；周齡較大的大鼠其尾部皮膚容易被剝脫，所以用左手從背部中央到胸部捏起來(lái)抓住。抓取時(shí)最好帶防護(hù)手套，但手套不宜過(guò)厚。2、手固定法：抓取大鼠的方法類似小鼠，即用左手的拇指、食指和中指抓住頸背部皮膚，小指和無(wú)名指挾住尾部牢牢固定；或左手按住抓起大鼠的時(shí)候，把食指放在頸背部，拇指及其他三指放在肋部，食指和中指挾住左前肢，分開(kāi)兩前肢帶起來(lái)，右手按住后肢固定；還有一種方法，張開(kāi)虎口，迅速將拇指、食指插入腹下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身體中段，并保持仰臥體位，然后調(diào)整左手拇指位置，緊抵在下頜骨上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。3、手術(shù)固定法：同小鼠。4、尾靜脈給藥或采血時(shí)同小鼠。（三）、豚鼠的抓取與固定1、抓取方法：抓取幼小豚鼠時(shí)，用手捧起來(lái)；成熟的大豚鼠，用手大把抓起胸肋部即可。注意不能粗野，更不能抓取腰腹部，這樣容易造成肝破裂而死亡。2、手固定法：⑴將左手的食指和中指放在豚鼠頸背部?jī)蓚?cè)，拇指和無(wú)名指放在肋部，分別用手指夾住左右前肢抓起來(lái)。⑵反轉(zhuǎn)左手，用右手的拇指和食指夾住右后肢，用中指和無(wú)名指夾住左后肢是豚鼠整體伸直成一條直線。⑶一個(gè)人固定操作時(shí)，坐在椅子上，用右手拿著豚鼠的后肢夾在兩腿之間，用大腿代替右手夾住。3、手術(shù)固定法：同大、小鼠。（四）、家兔的抓取與固定1、抓取方法：用一只手大把抓住頸背部皮膚提起來(lái)，另一只手托住其臀部，讓其重心落在托其臀部的手上，運(yùn)送時(shí)，可抓住頸肩部皮膚抱著兔子運(yùn)送。2、手固定法：在灌胃給藥時(shí)，人坐在椅子上，用一只手抓住頸背部皮膚，另一只手抓住兩后肢放在兩腿之間，大腿夾住兔子的下半身，用空著的手抓住兩前肢固定之，抓住頸背部的手同時(shí)捏著兩只耳朵，不讓頭部轉(zhuǎn)動(dòng)。3、固定器固定法：耳靜脈給藥或采血時(shí)用盒式固定法；從頸動(dòng)脈采血或手術(shù)實(shí)驗(yàn)時(shí)用此固定法。（1）盒式固定法：把兔子放在盒子里，只露出頭部，用轉(zhuǎn)扭擰固定器固定家兔。（2）臺(tái)式固定法：將麻醉的兔子仰臥，用紗布條依次將四肢捆綁固定于固定臺(tái)的兩側(cè)，然后把頭部放在金屬制的首枷和咀環(huán)上固定。（五）、犬的抓取與固定1、抓取方法：先給犬帶上系有鐵鏈條的脖套，對(duì)于性情兇猛的犬，要用特制的鉗式長(zhǎng)柄犬夾夾住犬頸部將犬按倒后，再系脖套和鏈條。2、手固定法：首先綁住犬嘴，方法是飼養(yǎng)員或犬主人從側(cè)面靠近并輕輕撫摸其頸部皮毛，然后迅速用布帶綁住犬嘴，布帶從下頜繞到上頜打一個(gè)結(jié)，再繞到下頜打一個(gè)結(jié)，然后將布帶繞到頭后頸，在頸后部再打一個(gè)結(jié)，最后打一個(gè)活結(jié)，對(duì)于未經(jīng)馴服的犬，可用長(zhǎng)柄犬夾夾住犬頸部按倒后強(qiáng)制綁嘴。3、手術(shù)臺(tái)固定法：麻醉后，松開(kāi)布帶，將犬仰臥在手術(shù)臺(tái)上，先固定四肢，再固定頭部。（六）、貓的抓取與固定1、抓取方法：先輕聲呼喚，慢慢將手伸入貓籠，輕輕撫摸貓頭、頸及背部，然后一只手抓住其背部皮毛，另一只手抓其腰背部。如遇兇暴的貓不讓接觸時(shí)，可用網(wǎng)套抓取。2、固定方法：同兔臺(tái)式固定法。貓頭可用一根粗棉繩，一端拉住貓的兩只門齒