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PAGEPAGE18磷脂的相變溫度發(fā)布時(shí)間:2012-05-2814:04點(diǎn)擊次數(shù):520

磷脂的相變溫度

磷脂相變溫度是組成磷脂的酰基鏈由晶態(tài)向液態(tài)過(guò)渡時(shí)的溫度。處于相變溫度時(shí),酰基鏈活動(dòng)性增強(qiáng),脂質(zhì)體膜通透性提高。磷脂的相變溫度對(duì)脂質(zhì)體膜穩(wěn)定性有重要參考意義。在制備脂質(zhì)體時(shí),應(yīng)充分考慮脂質(zhì)體的保存條件、體內(nèi)過(guò)程、藥物釋放行為等,選擇具有適宜相變溫度的磷脂。

艾韋特磷脂相變溫度(部分):名稱相變溫度(℃)名稱相變溫度(℃)天然磷脂蛋黃卵磷脂PC-98T約-8蛋黃甘油磷脂PGE約-8膽堿磷脂(PC)DLPC-1MSPC40DMPC23PMPC27DPPC二棕櫚酰磷脂酰膽堿41PSPC49DSPC55SMPC30DOPC-20SPPC44MPPC35SOPC6甘油磷脂(PG)DLPG-Na-3DMPG-Na23DPPG-Na二棕櫚酰磷脂酰甘油,鈉41DSPG-Na55DOPG-Na-18POPG-Na-2乙醇胺磷脂(PE)DMPE50DPPE63DSPE二硬脂酰磷脂酰乙醇胺74DOPE二油酰磷脂酰乙醇胺-16POPE25

絲氨酸磷脂(PS)DMPS-Na35DPPS-Na54DSPS-Na68DOPS-Na-11POPS-Na14

磷脂酸(PA)DMPA-Na50DPPA-Na67DSPA-Na75

常用磷脂溶解性磷脂溶解性蛋黃卵磷脂PL-100M易溶于氯仿、乙醚、正己烷,可溶于乙醇,不溶于水、丙酮蛋黃卵磷脂PC-98T易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚,微溶于正己烷,不溶于水、丙酮?dú)浠蠖孤蚜字琀SPC可溶于氯仿、正己烷:乙醇(9:1)、熱乙醇二棕櫚酰磷脂酰膽堿DPPC易溶于氯仿,難溶于甲醇和乙醇,極微溶解于丙酮二棕櫚酰磷脂酰甘油,鈉DPPG-Na可溶于氯仿:甲醇:水(65:35:8)二油酰磷脂酰乙醇胺DOPE可溶于氯仿、乙醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺DSPE可溶于氯仿:甲醇:水(65:35:8)培化磷脂酰乙醇胺DSPE-MPEG2000易溶于氯仿、甲醇、乙醇和丙酮,可溶于水1-硬脂酰-溶血磷脂酰膽堿

S-lysoPC微溶于甲醇,極微溶于乙醇,不溶于丙酮、氯仿、水高純度膽固醇CHO易溶于乙醚、氯仿,可溶于熱乙醇(2,3-二油?;?丙基)-三甲胺,氯鹽DOTAP可溶于氯仿、乙醇信息來(lái)源于艾韋特網(wǎng)站:磷脂納米載藥系統(tǒng)發(fā)布時(shí)間:2012-11-0115:52點(diǎn)擊次數(shù):87

磷脂納米載藥系統(tǒng)

磷脂:因其具有無(wú)毒、無(wú)刺激、以及優(yōu)良的理化性質(zhì),被廣泛應(yīng)用于各種新型納米載藥系統(tǒng)。脂肪乳:以磷脂為乳化劑的水包油乳劑。以腸外營(yíng)養(yǎng)或藥物輸送為目的,目前有多個(gè)產(chǎn)品上市,技術(shù)成熟。脂質(zhì)體:以磷脂雙分子層為基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)體藥物遞送體系,近年來(lái)被大量用于抗腫瘤藥物和核酸類藥物的載體。有數(shù)個(gè)上市的產(chǎn)品,但技術(shù)難度比較大。磷脂-膽鹽混合膠束:磷脂可降低膽鹽的CMC值,提高載藥量,且工藝簡(jiǎn)單成熟。制劑以注射液或凍干粉為主。磷脂-聚合物膠束:相對(duì)于普通的聚合物膠束,磷脂-聚合物膠束載藥量更高;而相對(duì)于單純的表面活性劑膠束,磷脂-聚合物膠束熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)都更加穩(wěn)定。DSPE-MPEG2000已獲臨床應(yīng)用,其作為膠束使用的藥物制劑處于臨床試驗(yàn)階段。磷脂-藥物復(fù)合物:該體系可使難溶性藥物實(shí)現(xiàn)靜脈給藥,也可用于提高口服給藥的生物利用度,并在一定程度上降低藥物的毒副作用。目前較多的應(yīng)用領(lǐng)域是口服的天然活性成分保健品。

DC-膽固醇中文名稱:3β-[N-(N’,N’-二甲基胺乙基)胺基甲酰基]膽固醇

中文通用名:DC-膽固醇

英文名稱:3?-[N-(N',N'-dimethylaminoethane)-carbamoyl]cholesterolhydrochloride

英文通用名:DC-Cholesterol?HCl

CasNumber:166023-21-8

分子式:C32H57N2O2Cl

分子量:537.26

儲(chǔ)存:-20°C

溶解性:溶劑溶解度DMSO>5mg/ml,40℃超聲甲醇>10mg/ml,室溫乙醇:水(95:5)>10mg/ml,40℃

應(yīng)用:陽(yáng)離子脂質(zhì)體;細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑常用陽(yáng)離子脂質(zhì)縮寫名化學(xué)名DOTMA氯化三甲基-2,3-二油烯氧基丙基銨DOTAP溴化三甲基-2,3-二油酰氧基丙基銨DOSPA三氟乙酸二甲基-2,3-二油烯氧基丙基-2-(2-精胺甲酰氨基)乙基銨DTAB溴化三甲基十二烷基銨TTAB溴化三甲基十四烷基銨CTAB溴化三甲基十六烷基銨DDAB溴化二甲基雙十八烷基銨DORI溴化二甲基-2-羥乙基-2,3-二油酰氧基丙基銨DORIE溴化二甲基-2-羥乙基-2,3-二油烯氧基丙基銨DORIE-HP溴化二甲基-3-羥丙基-2,3-二油烯氧基丙基銨DORIE-HB溴化二甲基-4-羥丁基-2,3-二油烯氧基丙基銨DORIE-HPc溴化二甲基-5-羥戊基-2,3-二油烯氧基丙基銨DPRIE溴化二甲基-2-羥乙基-2,3-雙十六烷氧基丙基銨DSRIE溴化二甲基-2-羥乙基-2,3-雙十八烷氧基丙基銨DMRIE溴化二甲基-2-羥乙基-2,3-雙十四烷氧基丙基銨DOGSN-(2-精胺甲?;?-N’,N’-雙十八烷基甘氨酰胺DOSC1,2-二油酰-3-琥珀酰-sn-甘油膽堿酯DC-Chol3β-[N-(N’,N’-二甲基胺乙基)胺基甲?;鵠膽固醇LPLL脂質(zhì)多聚-L-賴氨酸SA硬脂胺常用輔助脂質(zhì)輔助脂質(zhì)主要有磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰膽堿(PC)、膽固醇(Chol)等。二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)是應(yīng)用最廣的一種輔助脂質(zhì)。

膜脂質(zhì)主要由磷脂、膽固醇和少量糖脂構(gòu)成。在大多數(shù)細(xì)胞的膜脂質(zhì)中,磷脂占總量的70%以上,膽固醇不超過(guò)30%,糖脂不超過(guò)10%。磷脂中含量最多的是磷脂酰膽堿,其次是磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺,含量最少的是磷脂酰肌醇。磷脂、膽固醇和糖脂都是雙嗜性分子。磷脂分子中的磷酸和堿基、膽固醇分子中的羥基以及糖脂分子中的糖鏈等親水性基團(tuán)分別形成各自分子中的親水端,分子的另一端則是疏水的脂肪酸烴鏈。這些分子以脂質(zhì)雙層的形式存在于質(zhì)膜中,親水端朝向細(xì)胞外液或胞質(zhì),疏水的脂肪酸烴鏈則彼此相對(duì),形成膜內(nèi)部的疏水區(qū)。膜脂質(zhì)雙層中的脂質(zhì)構(gòu)成是不對(duì)稱的,含氨基酸的磷脂(磷脂酰絲氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇)主要分布在膜的近胞質(zhì)的內(nèi)層,而磷脂酰膽堿的大部分和全部糖脂都分布在膜的外層。[3]磷脂分子的流動(dòng)性受著一些因素的影響,主要影響因素有:①溫度:在一定溫度下,磷脂分子從液晶態(tài)(能流動(dòng)具有一定形狀和體積的物態(tài))轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀(不流動(dòng))的晶態(tài)。這一能引起物相變化的溫度稱為相變溫度。當(dāng)環(huán)境溫度在相變溫度以上時(shí),細(xì)胞膜磷脂分子處于流動(dòng)的液晶態(tài);而在相變溫度以下時(shí),則處于不流動(dòng)的晶態(tài)。細(xì)胞膜磷脂分子相變溫度越低,細(xì)胞膜磷脂分子流動(dòng)性就越大;反之,相變溫度越高,細(xì)胞膜磷脂分子的流動(dòng)性也就越小。②細(xì)胞膜磷脂分子的脂肪酸鏈:飽和程度高的脂肪酸鏈因緊密有序地排列,因而流動(dòng)性??;而不飽和脂肪酸鏈由于不飽和鍵的存在,使分子間排列疏松而無(wú)序,相變溫度降低,從而增強(qiáng)了膜的流動(dòng)性。所以細(xì)胞膜也具有流動(dòng)性。脂肪酸鏈的長(zhǎng)度對(duì)細(xì)胞膜磷脂分子的流動(dòng)性也有影響:隨著脂肪酸鏈的增長(zhǎng),鏈尾相互作用的機(jī)會(huì)增多,易于凝集(相變溫度增高),流動(dòng)性下降。③膽固醇:膽固醇對(duì)細(xì)胞膜磷脂分子流動(dòng)性的調(diào)節(jié)作用隨溫度的不同而改變。在相變溫度以上,它能使磷脂的脂肪酸鏈的運(yùn)動(dòng)性減弱,從而降低細(xì)胞膜磷脂分子的流動(dòng)性。而在相變溫度以下時(shí),膽固醇可通過(guò)阻止磷脂脂肪酸鏈的相互作用,緩解低溫所引起的細(xì)胞膜磷脂分子流動(dòng)性劇烈下降。④卵磷脂/鞘磷脂比值,比值越高,膜流動(dòng)性越大⑤脂雙層中嵌入的蛋白質(zhì)越多,膜流動(dòng)性越大除以上因素外,細(xì)胞膜磷脂分子與膜蛋白的結(jié)合程度、環(huán)境中的離子強(qiáng)度、pH值等都會(huì)影響細(xì)胞膜磷脂分子的流動(dòng)性。膜脂的流動(dòng)是造成細(xì)胞膜流動(dòng)的主要因素,概括起來(lái),膜脂的運(yùn)動(dòng)方式主要有四種。①側(cè)向擴(kuò)散(lateraldiffusion);②旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)(rotation);③伸縮運(yùn)動(dòng)(flex);④翻轉(zhuǎn)擴(kuò)散(transversediffusion),又稱為翻轉(zhuǎn)(flip-flop)⑤左右擺動(dòng)⑥旋轉(zhuǎn)異構(gòu)運(yùn)動(dòng)膜蛋白的運(yùn)動(dòng)由于膜蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量較大,同時(shí)受到細(xì)胞骨架的影響,它不可能象膜脂那樣運(yùn)動(dòng)。主要有以下幾種運(yùn)動(dòng)形式:①隨機(jī)移動(dòng)有些蛋白質(zhì)能夠在整個(gè)膜上隨機(jī)移動(dòng)。移動(dòng)的速率比用人工脂雙層測(cè)得的要低。②定向移動(dòng)有些蛋白比較特別,在膜中作定向移動(dòng)。例如,有些膜蛋白在膜上可以從細(xì)胞的頭部移向尾部。③局部擴(kuò)散有些蛋白雖然能夠在膜上自由擴(kuò)散,但只能在局部范圍內(nèi)擴(kuò)散。相變性隨著環(huán)境條件的變化,脂質(zhì)分子的晶態(tài)和液晶態(tài)是互變的;

磷脂性狀

磷脂的性狀與來(lái)源、生產(chǎn)工藝、純度及保存條件都有關(guān)系。

純度低的天然磷脂為液體或膏狀,顏色較深,為棕黃色。純度越高,顏色變淺。達(dá)到80%左右純度的卵磷脂為淺黃色,采用凍干工藝的產(chǎn)品為膏狀固體,采用噴干工藝的產(chǎn)品為粉末狀。天然磷脂很難做到非常高的純度,目前,我國(guó)有批文的卵磷脂中以上海艾韋特的蛋黃卵磷脂PC-98T純度最高,PC純度可達(dá)到98%以上,產(chǎn)品為白色粉末。天然磷脂不飽和度高,因此無(wú)論使用或貯存多么小心,多少都會(huì)有氧化發(fā)生,其結(jié)果就是極易吸水,暴露在空氣中迅速變色、變粘。天然磷脂會(huì)有一種特殊的腥味。

合成磷脂純度一般都能達(dá)到90%以上,因此均為白色粉末狀固體,吸水性和氣味都比天然磷脂小的多,甚至無(wú)味。有些試劑級(jí)的磷脂會(huì)以有機(jī)溶液的形式貯存和出售,有利于磷脂保存和使用中的穩(wěn)定性。

使用PresomeACD-1生產(chǎn)阿霉素脂質(zhì)體的方法及產(chǎn)品評(píng)價(jià)

使用PresomeACD-1生產(chǎn)阿霉素脂質(zhì)體的方法及產(chǎn)品評(píng)價(jià)

——一種簡(jiǎn)易和穩(wěn)定的DOXIL生產(chǎn)方法

生產(chǎn)步驟:稱量PresomeACD-1(HSPC:CHO:MPEG2000-DSPE=3:1:1w/w)。PresomeACD-1粉末狀,性狀穩(wěn)定,定量操作精確。稱量好的PresomeACD-1中加入250mM(NH4)2SO4緩沖液,并于60℃水浴下水合,形成粒徑約1μm的寡室脂質(zhì)體。水合過(guò)程只需稍加振蕩或攪拌,15min左右完成水合。水合后的脂質(zhì)體分別用0.2μm、0.1μm、和0.08μm的聚碳酸酯膜擠出5次??傻玫搅郊s100nm的單室脂質(zhì)體。采用高壓均質(zhì)法,過(guò)程將更加簡(jiǎn)單、快速。2-8℃下,采用蔗糖溶液對(duì)整粒后的脂質(zhì)體溶液透析,移除外水相中的(NH4)2SO4。透析后的脂質(zhì)體濃度可以達(dá)到50mg/ml。60℃下,阿霉素與脂質(zhì)體溫孵30min,梯度法載入,最后以0.1NHCl或NaOH調(diào)至6.5。產(chǎn)品評(píng)價(jià):藥物包封率:100%。離心法,取下層脂質(zhì)體采用HPLC法檢測(cè)。粒徑分布:100.9±0.9nmPDI0.048±0.0043Zeta電位:-27.1±0.7mv(9%蔗糖溶液)MalvernNano-ZS產(chǎn)品組成:HPLC法檢測(cè)。成分DOXIL產(chǎn)品HSPC9.58mg/ml9.74mg/mlCHO3.19mg/ml3.27mg/mlMPEG2000-DSPE3.19mg/ml3.33mg/ml阿霉素2.00mg/ml2.00mg/ml藥脂比:DOXIL0.125;產(chǎn)品0.122膜厚度:2.1nm冷凍電鏡:?jiǎn)问抑|(zhì)體,藥物在內(nèi)水相中結(jié)論:采用PresomeACD-1制備的阿霉素脂質(zhì)體與DOXIL質(zhì)量相近,過(guò)程簡(jiǎn)單,不使用有機(jī)溶劑,適合規(guī)?;a(chǎn)。

膽固醇在脂質(zhì)體中的應(yīng)用

膽固醇可調(diào)節(jié)磷脂雙分子層膜的流動(dòng)性,使膜通透性降低,減少藥物滲漏。同時(shí)可使脂膜維持一定柔韌性,增強(qiáng)脂質(zhì)體囊泡抗擊外部條件變化的能力。并對(duì)磷脂的氧化有一定保護(hù)作用,

制備普通載藥脂質(zhì)體,膽固醇是必須的添加物,用量一般為CHO:PC=0.3~1(摩爾比)。因PC和藥物的不同,存在膽固醇的最佳用量。在一定范圍內(nèi),脂質(zhì)體的粒徑、氧化穩(wěn)定性、物理穩(wěn)定性與膽固醇添加量成正相關(guān),超出范圍時(shí),超過(guò)膜負(fù)荷,會(huì)造成部分脂質(zhì)體破裂。另外,膽固醇的添加會(huì)對(duì)膜相變溫度有一定影響,臨界值以內(nèi)使相變溫度降低,臨界值以上,使相變溫度升高。

溫敏脂質(zhì)體有特殊的動(dòng)力學(xué)特征,為了降低相變溫度時(shí)的穩(wěn)定性,迅速釋放藥物,可不添加膽固醇。

卵磷脂是什么

卵磷脂是一種以磷脂酰膽堿為主要成分的多種磷脂的混合物,USPNF將其定義為不溶于丙酮的磷脂混合物。

19世紀(jì)最先發(fā)現(xiàn)存在于蛋黃中,因此命名為卵磷脂(lecithin),后來(lái)發(fā)現(xiàn)這樣的磷脂混合物同樣存在于大豆中。現(xiàn)在為了區(qū)別來(lái)源,通常分為蛋黃卵磷脂(lecithinoregglecithin),和大豆卵磷脂(soybeanlecithin)兩類,但是很多時(shí)候統(tǒng)一稱為卵磷脂,不能區(qū)分,甚至有時(shí)候?qū)⒘字D憠A也簡(jiǎn)稱為卵磷脂。

事實(shí)上,不同來(lái)源、純度的卵磷脂化學(xué)組成、用途差別很大,CAS都不相同。Lecithin的CAS為8002-43-5,定義為所有動(dòng)植物組織中的磷脂酰膽堿,可做潤(rùn)滑劑、乳化劑、食品添加劑;大豆卵磷脂CAS號(hào)為8030-76-0,為大豆中提取的磷脂混合物,主要用于保健品、藥物非注射劑,蛋黃卵磷脂CAS號(hào)為93685-90-6,定義為提取自蛋黃的磷脂混合物,主要用于注射級(jí)藥物輔料。

因此,當(dāng)我們拿到某一卵磷脂時(shí),一定要弄清楚其來(lái)源、純度和組成,再?zèng)Q定如何應(yīng)用。

卵磷脂是什么

卵磷脂是一種以磷脂酰膽堿為主要成分的多種磷脂的混合物,USPNF將其定義為不溶于丙酮的磷脂混合物。

19世紀(jì)最先發(fā)現(xiàn)存在于蛋黃中,因此命名為卵磷脂(lecithin),后來(lái)發(fā)現(xiàn)這樣的磷脂混合物同樣存在于大豆中。現(xiàn)在為了區(qū)別來(lái)源,通常分為蛋黃卵磷脂(lecithinoregglecithin),和大豆卵磷脂(soybeanlecithin)兩類,但是很多時(shí)候統(tǒng)一稱為卵磷脂,不能區(qū)分,甚至有時(shí)候?qū)⒘字D憠A也簡(jiǎn)稱為卵磷脂。

事實(shí)上,不同來(lái)源、純度的卵磷脂化學(xué)組成、用途差別很大,CAS都不相同。Lecithin的CAS為8002-43-5,定義為所有動(dòng)植物組織中的磷脂酰膽堿,可做潤(rùn)滑劑、乳化劑、食品添加劑;大豆卵磷脂CAS號(hào)為8030-76-0,為大豆中提取的磷脂混合物,主要用于保健品、藥物非注射劑,蛋黃卵磷脂CAS號(hào)為93685-90-6,定義為提取自蛋黃的磷脂混合物,主要用于注射級(jí)藥物輔料。

因此,當(dāng)我們拿到某一卵磷脂時(shí),一定要弄清楚其來(lái)源、純度和組成,再?zèng)Q定如何應(yīng)用。相變溫度:脂質(zhì)體的物理性質(zhì)與介質(zhì)溫度有密切關(guān)系,當(dāng)溫度升高時(shí)脂質(zhì)體雙分子層中的疏水鏈可從有序排列變?yōu)闊o(wú)序排列,從而引起一系列變化。如膜厚度減小,流動(dòng)性增加,產(chǎn)生由膠晶態(tài)(固態(tài))向液晶態(tài)的轉(zhuǎn)變等。轉(zhuǎn)變溫度稱為相變溫度,它取決于磷脂的種類。如脂質(zhì)體膜由兩種以上磷脂組成,它們各有特定的相變溫度,在一定條件下它們可以同時(shí)存在不同的相。在相變溫度時(shí),脂質(zhì)體膜的流動(dòng)性增加,被包裹的藥物具有最大的釋放速度。因此膜的流動(dòng)性直接影響脂質(zhì)體的藥物釋放和穩(wěn)定性。膽固醇來(lái)源與質(zhì)量差異

膽固醇是多手性物質(zhì),合成困難,目前還是采取動(dòng)物組織提取及羊毛脂提取兩種方式獲得。

動(dòng)物組織提取法是以新鮮動(dòng)物內(nèi)臟、骨髓及腦為原料,工藝為丙酮提取→乙醇精制→硫酸水解→低溫結(jié)晶→活性炭脫色→多次結(jié)晶。工藝簡(jiǎn)單可行,是目前國(guó)內(nèi)膽固醇的主要生產(chǎn)工藝,然而易受到原料供應(yīng)的限制,且有使產(chǎn)品殘留致病基因的可能。

羊毛油脂中膽固醇含量較高,約10~15%,且成品低廉來(lái)源豐富,國(guó)外大部分膽固醇都是以羊毛脂為原料。但羊毛脂中的膽固醇多與羊毛脂酸結(jié)合以酯的形式存在,所以要通過(guò)皂化工藝使膽固醇游離出來(lái)。皂化得到的膽固醇還含有大量的脫氫膽固醇、二氫膽固醇等類似物,因分子結(jié)構(gòu)相似,性質(zhì)相近,給分離帶來(lái)困難,成為工藝難點(diǎn)和關(guān)鍵點(diǎn)。艾韋特代理的高純度膽固醇CHOHP為日本精細(xì)化工產(chǎn)品,以羊毛脂為原料,經(jīng)提取、氫化、精制等過(guò)程使得最終純度高達(dá)99%以上,并符合注射用要求,2011年取得SFDA進(jìn)口注冊(cè)受理號(hào):JXFL1100010國(guó),是脂質(zhì)體專用輔料。

磷脂藥用輔料的發(fā)展

磷脂類藥用輔料的發(fā)展經(jīng)歷了三代,分別為一代天然磷脂,二代合成磷脂和三代衍生化磷脂。

第一代:天然磷脂。20世紀(jì)60年代,卡比率先將蛋黃卵磷脂用于脂肪乳乳化劑,從而開創(chuàng)了腸外營(yíng)養(yǎng)的脂肪乳時(shí)代,蛋黃卵磷脂也作為藥用輔料開始了規(guī)模化生產(chǎn)和應(yīng)用。而卡比開發(fā)的蛋黃卵磷脂產(chǎn)品成為經(jīng)典,成為各家效仿的對(duì)象,并誕生了PL-100M、Dossan等品牌。隨著脂肪乳在載藥技術(shù)上的應(yīng)用,因前列地爾等藥物的特殊要求,出現(xiàn)了新型的蛋黃卵磷脂PC-98T。與普通的蛋黃卵磷脂不同的是,PC-98T的制取過(guò)程摒棄了乙醇胺磷脂(PE)、甘油磷脂(PG)、絲氨酸磷脂(PS)等所有其他類型的磷脂,僅保留了膽堿磷脂(PC),產(chǎn)品中PC含量高達(dá)98%以上。較高的純度也使得PC-98T成為一種新型的蛋黃卵磷脂,并且應(yīng)用面從脂肪乳擴(kuò)大到了脂質(zhì)體領(lǐng)域。

第二代:合成磷脂。合成磷脂的出現(xiàn)順應(yīng)了脂質(zhì)體等特殊制劑的發(fā)展。這一類制劑的結(jié)構(gòu)復(fù)雜而精密,對(duì)磷脂的要求相應(yīng)提高。而取材自天然的大豆磷脂和蛋黃磷脂成分過(guò)于繁雜,且穩(wěn)定性極差,使得應(yīng)用過(guò)程中不確定性因素過(guò)多,不利于質(zhì)量控制。為了解決這些問(wèn)題,人們通過(guò)人工合成高純度的、具有特定分子結(jié)構(gòu)的磷脂,從而可以獲得所需特性的磷脂。也或者直接將天然磷脂氫化從而提高穩(wěn)定性和減少分子組成來(lái)得到更加廉價(jià),但也能符合應(yīng)用要求的半合成磷脂。雖然合成磷脂價(jià)格昂貴,但隨著脂質(zhì)體技術(shù)日益成熟,其需求量也在日益上漲中。

第三代:衍生化磷脂。靶向技術(shù)一直是制劑發(fā)展的方向,其中分子靶向技術(shù)是研究熱點(diǎn)。在各種分子靶向載體中,PEG衍生化磷脂是目前應(yīng)用成熟度較高的一類。這種磷脂以PE為底物,在乙醇胺頭部連接生物相容性好的線性分子聚乙二醇(PEG),而聚乙二醇末端可進(jìn)一步連接各種配體。PEG衍生化磷脂可賦予制劑長(zhǎng)循環(huán)特性和免疫特性,是微納米載藥體系實(shí)現(xiàn)靶向性的重要材料和手段,已經(jīng)越來(lái)越受到研究者的青睞。

磷脂的發(fā)展與制劑的需求息息相關(guān),隨著新型制劑開發(fā)與應(yīng)用,還會(huì)促進(jìn)新型磷脂的出現(xiàn)。蛋黃卵磷脂與脂肪乳PH穩(wěn)定性

脂肪乳在熱滅菌前后PH會(huì)有1-2個(gè)單位的下降,尤其是添加了油酸的情況,PH更低。為了保持滅菌后中性偏堿,需要在滅菌前用NaOH將PH調(diào)節(jié)至9.0左右。

采用普通的蛋黃卵磷脂制備脂肪乳,滅菌前的PH一般在6.0-6.5之間,如添加油酸則更低,再經(jīng)過(guò)熱壓滅菌,PH會(huì)再次下降約2.0個(gè)單位,因此,必須在滅菌前用NaOH調(diào)節(jié)PH,以保證滅菌后的產(chǎn)品呈弱堿性。

PL-100M是日本進(jìn)口的,具有優(yōu)越乳化性能的蛋黃卵磷脂,進(jìn)口注冊(cè)證號(hào):F20100034。PL-100M特殊的處理過(guò)程使經(jīng)過(guò)高壓均質(zhì)的脂肪乳細(xì)乳偏堿性,PH可達(dá)到8.5-9.0,經(jīng)過(guò)熱滅菌僅下降1.2個(gè)單位。因此,采用PL-100M制備的脂肪乳可以不使用或使用很少量的NaOH,且產(chǎn)品粒徑分布更加均勻,穩(wěn)定性更好,并有利于脂肪乳產(chǎn)品長(zhǎng)期保存的PH穩(wěn)定性。

磷脂的氧化

氧化反應(yīng)易發(fā)生于含不飽和脂肪酸的磷脂,是脂肪酸中的雙鍵被氧化物氧化發(fā)生斷裂的過(guò)程。氧化的最終產(chǎn)物會(huì)使磷脂中的游離脂肪酸含量上升,酸值升高。在氧化反應(yīng)的中間過(guò)程,生成大量過(guò)氧化物和自由基,表現(xiàn)為磷脂的過(guò)氧化值上升。

正常情況下,使磷脂發(fā)生氧化的氧化物為空氣中的氧氣。光照、溫度、金屬離子、未知雜質(zhì)等都可成為氧化反應(yīng)的催化條件,使氧化加劇。天然磷脂含有大量不飽和脂肪酸,雜質(zhì)多,因此非常容易發(fā)生氧化。除避光、低溫以外,為避免磷脂氧化最重要的一點(diǎn)是隔絕氧氣環(huán)境。因?yàn)樵谟醒鯒l件下,即使-20℃,密封保存,天然磷脂也很容易發(fā)生氧化變質(zhì),表現(xiàn)為磷脂顏色加深,氣味加重,過(guò)氧化值超標(biāo)。

艾韋特磷脂進(jìn)口原包裝采用了充氮保護(hù),使包裝袋中空氣被置換,分裝的產(chǎn)品則采用了真空包裝,確保磷脂不能和氧氣接觸,因此可有效保證產(chǎn)品質(zhì)量。

磷脂理化性質(zhì)

一.溶解性

磷脂分子量約500-900之間,是兩親性物質(zhì)。分子中的?;湶糠謽?gòu)成疏水區(qū),磷酸酯部分構(gòu)成親水區(qū),疏水性大于親水性。因此磷脂在氯仿、甲醇等有機(jī)溶劑中溶解性較好,但在極性稍大些的溶劑中溶解性較低,在水中不溶。磷脂在水中的CMC值極低,CMC值以上自發(fā)形成雙分子層囊泡結(jié)構(gòu)。

磷脂的溶解性受?;湶糠钟绊戄^大,天然來(lái)源的磷脂在醇中溶解性一般比合成磷脂好。如PL-100M與PC-98T均可溶解于乙醇,而DPPC則不溶。

二.乳化性

在有脂質(zhì)存在下,磷脂分子以單分子層的形式分布在水/油界面,成為溝通油水兩相的乳化劑。磷脂的HLB值在4~10之間,不同磷脂間差別較大,應(yīng)視脂質(zhì)選擇合適的磷脂為乳化劑。

三.穩(wěn)定性

天然磷脂因含有大量不飽和鍵,接觸空氣極易被氧化,溫度越高接觸時(shí)間越長(zhǎng)氧化越嚴(yán)重。產(chǎn)品氧化后顏色會(huì)變深,生成醛、酮、自由基等物質(zhì),光照可加速氧化過(guò)程。

磷脂分子結(jié)構(gòu)中的酯鍵在水性介質(zhì)中可發(fā)生水解,產(chǎn)物為脂肪酸、溶血磷脂等物質(zhì)。酸、堿條件下水解強(qiáng)烈,高溫情況下反應(yīng)加劇。

dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine(DPPC)二棕櫚酰磷脂酰膽堿,是一種化學(xué)試劑。蛋黃卵磷脂PL-100M天然蛋黃卵磷脂(PC-98T蛋黃卵磷脂PL-100M與PC-98T的區(qū)別

PL-100M與PC-98T均是以新鮮蛋黃為原料,采用先進(jìn)工藝提取的磷脂混合物。PL-100M的進(jìn)口注冊(cè)證號(hào):F20100034,PC-98T進(jìn)口注冊(cè)證號(hào):F20100033。但二者所含有的磷脂種類和純度不同,因此理化性質(zhì)及應(yīng)用范圍有較大差異。

PL-100M的主要成分是磷脂酰膽堿(PC),約含80%,另外還含有磷脂酰乙醇胺(PE)15%左右,及少量的甘油三酯、膽固醇、脂肪酸等其他脂質(zhì),是淡黃色的粉末或小塊狀固體。PC和PE的比例接近蛋黃中天然比例,因此乳化性能較好,適合于各種營(yíng)養(yǎng)型、載藥型脂肪乳的乳化劑。

PC-98T所含有的磷脂種類比較單一,98%以上均為磷脂酰膽堿,因此純度較高,是類白色粉末,但是乳化性能弱于PL-100M,更適合于脂質(zhì)體的制備。但該產(chǎn)品目前是前列地爾脂微球唯一有效的乳化劑。

磷脂相變溫度相關(guān)因素

(一)、磷脂種類。膽堿磷脂與甘油磷脂具有相近的相變溫度,而相應(yīng)的乙醇胺磷脂相變溫度則高出很多。如DPPC與DPPG相變溫度均為41℃,而DPPE則為63℃。

(二)、脂肪酸鏈長(zhǎng)。飽和碳原子個(gè)數(shù)增加會(huì)使磷脂相變溫度上升。如DSPC相變溫度相對(duì)DPPC提高至55℃

(三)、脂肪酸不飽和度。不飽和度提高,相變溫度下降。DOPC相對(duì)DSPC相變溫度降至-20℃。

(四)、磷脂純度。磷脂純度低,會(huì)使相變溫度范圍變寬。合成磷脂純度高具有明確的相變溫度或較窄的相變溫度范圍,天然磷脂相變溫度范圍很寬,甚至沒有明顯的相變溫度。

磷脂的相變溫度請(qǐng)參看磷脂的相變溫度

磷脂相變溫度是組成磷脂的?;溣删B(tài)向液態(tài)過(guò)渡時(shí)的溫度。處于相變溫度時(shí),酰基鏈活動(dòng)性增強(qiáng),脂質(zhì)體膜通透性提高。磷脂的相變溫度對(duì)脂質(zhì)體膜穩(wěn)定性有重要參考意義。在制備脂質(zhì)體時(shí),應(yīng)充分考慮脂質(zhì)體的保存條件、體內(nèi)過(guò)程、藥物釋放行為等,選擇具有適宜相變溫度的磷脂。

制備脂質(zhì)體應(yīng)選擇何種天然磷脂?

相對(duì)合成磷脂,天然磷脂價(jià)格便宜,醇和水中分散性好,因此在研究者選擇脂質(zhì)體膜材時(shí)受到偏愛。為保證脂質(zhì)體質(zhì)量,在選擇天然磷脂時(shí)應(yīng)注意兩方面問(wèn)題。

首先是天然磷脂來(lái)源。蛋黃卵磷脂和大豆卵磷脂穩(wěn)定性都不好,相比較而言,大豆來(lái)源的不飽和脂肪酸含量比蛋黃來(lái)源高20%,因此穩(wěn)定性更差,使用大豆卵磷脂很難獲得質(zhì)量可控的脂質(zhì)體產(chǎn)品。目前上市脂質(zhì)體中凡是使用了天然磷脂的必定是蛋黃卵磷脂。

其次是磷脂的純度。不同磷脂水合后會(huì)產(chǎn)生不同形態(tài),膽堿磷脂最易形成脂質(zhì)體,而溶血磷脂、乙醇胺磷脂等易形成膠束及錐形分子。因此,如果天然磷脂中非膽堿磷脂的含量過(guò)高,會(huì)使脂質(zhì)體膜不穩(wěn)定及出現(xiàn)脂質(zhì)體、膠束等多相混合物。因此,應(yīng)該使用98%以上純度的卵磷脂。綜上,采用天然磷脂作為脂質(zhì)體膜材,應(yīng)選擇純度98%以上的蛋黃卵磷脂。蛋黃卵磷脂與大豆卵磷脂的區(qū)別發(fā)布時(shí)間:2012-02-0815:05點(diǎn)擊次數(shù):1044卵磷脂有廣義和狹義之分,狹義的卵磷脂指的是蛋黃磷脂和大豆磷脂中主要成分磷脂酰膽堿(PC),廣義上的卵磷脂是指包括卵磷脂、腦磷脂、肌醇磷脂、絲氨酸磷脂等在內(nèi)的各種磷脂集合體。磷脂是一種含磷的類脂物質(zhì),根源來(lái)源分為天然和合成磷脂兩大類,其中天然磷脂主要有大豆磷脂和蛋黃磷脂,是藥物制劑中常用的磷脂,其組成為磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、絲氨酸磷脂(PS)和磷脂酸(PA)等。結(jié)構(gòu)式如下圖所示:

蛋黃磷脂與大豆磷脂有很多相似之處,但卻又存在較大的差異。

一、來(lái)源、生產(chǎn)工藝的不同

顧名思義,蛋黃磷脂來(lái)源于禽類卵黃,大豆磷脂來(lái)源于大豆油。來(lái)源的不同造成了生產(chǎn)工藝的不同。

蛋黃磷脂的提取方法為有機(jī)溶劑提純法和超臨界CO2萃取法。單純的有機(jī)溶劑萃取工藝生產(chǎn)出的產(chǎn)品純度較低,膽固醇含量較高,產(chǎn)品中殘留有害的有機(jī)溶劑,而且其工藝較復(fù)雜。超臨界CO2萃取作為一種新型的分離技術(shù),具有工藝簡(jiǎn)單、高效低耗能、環(huán)保、無(wú)溶劑殘留、選擇性高等特點(diǎn),生產(chǎn)出的卵磷脂質(zhì)量高,是制取高純度蛋黃卵磷脂的先進(jìn)工藝。但由于來(lái)源有限,相對(duì)于大豆磷脂生產(chǎn)工藝復(fù)雜,生產(chǎn)成本較高。

大豆磷脂的生產(chǎn)工藝相對(duì)簡(jiǎn)單。目前,大多食用、藥用卵磷脂的生產(chǎn)原料均為大豆。在精煉過(guò)的大豆油中加水,分離水合物再蒸干即可得到毛磷脂。然后經(jīng)過(guò)減壓濃縮制得濃縮磷脂,將大豆?jié)饪s磷脂進(jìn)行脫脂,分離,脫溶,干燥制得去油磷脂,去油磷脂已具有較好的親水性功能,能解決在食品應(yīng)用上的許多問(wèn)題。將去油磷脂進(jìn)一步精制純化可得PC含量較高的卵磷脂,可適用于制藥等。由于來(lái)源廣泛,生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單,價(jià)格低廉,所以目前使用的商品卵磷脂一般是大豆磷脂。二、組成的不同

兩者所含磷脂組分有異。與大豆磷脂相比,蛋黃磷脂最令人矚目的特點(diǎn)是,PC含量較高(可達(dá)到70%~80%),基本不含磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酸(PA)。下表中給出了蛋黃和大豆中磷脂成分的比較。蛋黃與大豆中磷脂成分含量的比較(%)磷脂蛋黃大豆磷脂酰膽堿(PC)7330磷脂酰乙醇胺(PE)1522磷脂酰肌醇(PI)118磷脂酸(PA)-2絲氨酸磷脂(PS)-3-4神經(jīng)鞘磷脂2-3-縮醛磷脂1-

另外,蛋黃磷脂和大豆磷脂配位的脂肪酸不同:在蛋黃磷脂中R1幾乎是飽和脂肪酸,R2通常是不飽和脂肪酸,而大豆卵磷脂R1和R2是飽和酸和不飽和酸混合配位。蛋黃磷脂的脂肪酸組分大多為棕櫚酸、油酸,其次為硬脂酸、亞油酸,并且還含有微量花生四烯酸和二十二碳六烯酸等近年來(lái)備受關(guān)注的多不飽和脂肪酸及奇數(shù)碳脂肪酸(如十七烷酸)等;大豆磷脂中亞油酸約占50%,幾乎不含C20以上的脂肪酸。下表為脂肪酸組成的比較:蛋黃卵磷脂與大豆卵磷脂的脂肪酸組成

%脂肪酸蛋黃卵磷脂大豆卵磷脂內(nèi)豆蔻酸(C14:0)0.380.90棕櫚酸(C16:0)26.2715.35棕櫚油酸(C16:1)2.800.11十七碳酸(C17:0)0.32-十七碳酸-烯酸(C14:1)0.36-硬脂酸(C18:0)9.17-油酸(C18:1)41.5017.86亞油酸(C18:2)16.2454.84亞麻酸(C18:3)0.306.31花生四烯酸(C20:4)1.73-二十二碳四烯酸(C20:6)0.53-二十二碳六烯酸(C22:6)

0.51-其他2.890.86三、性質(zhì)的不同

由于來(lái)源和組成上的不同,性質(zhì)也有所不同。

蛋黃卵磷脂PC含量較高,但其必需脂肪酸卻比較低。由于PC是神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的重要來(lái)源,蛋黃卵磷脂防治老年性癡呆較好;而必需脂肪酸為人體的新陳代謝所必需,故大豆卵磷脂的生理活性較廣。同時(shí),蛋黃卵磷脂來(lái)源于動(dòng)物的胚胎蛋黃,所以有利于人體內(nèi)的吸收,而大豆卵磷脂來(lái)源于植物油,從而在人體內(nèi)吸收。蛋黃卵磷脂含有一定量花生四烯酸,能提供動(dòng)物之所需?;ㄉ南┧釋儆谙盗斜匦柚舅?,與維護(hù)細(xì)胞膜生物學(xué)功能密切相關(guān),是內(nèi)因性細(xì)胞調(diào)節(jié)因子的前體,具有降低血清膽固醇、保護(hù)肝臟等功能。但一般大豆卵磷脂不含有20個(gè)碳以上的脂肪酸,所以降低血清膽固醇、保護(hù)肝臟等功能低于蛋黃卵磷脂

Nara等[1,2]以不飽和度的變化為指標(biāo)。研究比較了大豆、雞蛋中PC的氧化穩(wěn)定性,雞蛋PC>大豆PC,結(jié)果這與不飽和脂肪酸的分布有關(guān).大豆PC分子中主要是1,2-二亞油酸PC,而雞蛋PC的多數(shù)不飽和脂肪酸多在R2位上。研究進(jìn)一步顯示,卵清蛋白和大豆蛋白都具有一定的抵抗PC被自由基進(jìn)攻的作用,可加強(qiáng)穩(wěn)定性;并且卵清蛋白作用于蛋黃PC的效果優(yōu)于大豆PC。

由于磷脂具有兩性分子結(jié)構(gòu),含磷酸根及膽堿基的極性端具有親水性,兩個(gè)較長(zhǎng)的碳?xì)滏湻菢O性端具有親脂性,這種獨(dú)特的理化特性和生理活性在制藥工業(yè)中有十分重要的意義,精制的天然磷脂可用作制備各種藥物制劑的乳化劑和輔料。其中在脂質(zhì)體也有很廣泛的應(yīng)用。脂質(zhì)體是一種人工制備的類脂小球體,以磷脂為主要原料由一個(gè)或多個(gè)類似細(xì)胞膜的類脂雙分子層包裹著水相介質(zhì)組成。脂質(zhì)體的膜材料主要由PC和膽固醇構(gòu)成。脂質(zhì)體是藥物載體,可制備抗癌藥物的新劑型,同時(shí)還表現(xiàn)出低毒性和高效性。如治療癌癥藥物表阿霉素制成脂質(zhì)體,可使毒性降低、療效增強(qiáng)。

胥傳來(lái)等[3]報(bào)道大豆卵磷脂和蛋黃卵磷脂影響脂質(zhì)體的化學(xué)穩(wěn)定性。試驗(yàn)結(jié)果表明,大豆卵磷脂所制脂質(zhì)體在同等條件下比蛋黃卵磷脂所制脂質(zhì)體包封率低;大豆卵磷脂所制脂質(zhì)體包封率較低。在室溫下,大豆卵磷脂所制脂質(zhì)體非常不穩(wěn)定,而且包封率也偏低;從所制脂質(zhì)體外觀形狀來(lái)看,蛋黃卵磷脂所制脂質(zhì)體比較均勻、圓滑,大豆卵磷脂所制脂質(zhì)體有細(xì)微小粒子。

王繼波等[4]研究了脂質(zhì)體載藥性能與卵磷脂的關(guān)系,試驗(yàn)表明蛋黃卵磷脂平均粒徑和包封率均高于大豆卵磷脂脂質(zhì)體。但滲漏速度低于大豆卵磷脂脂質(zhì)體。

磷脂的概念

磷脂是一類含有磷酸的脂類,機(jī)體中主要含有兩大類磷脂,由甘油構(gòu)成的磷脂稱為甘油磷脂(phosphoglyceride);由神經(jīng)鞘氨醇構(gòu)成的磷脂,稱為鞘磷脂(sphingolipid)。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是:具有由磷酸相連的取代基團(tuán)(含氨堿或醇類)構(gòu)成的親水頭(hydrophilichead)和由脂肪酸鏈構(gòu)成的疏水尾(hydrophobictail)。在生物膜中磷脂的親水頭位于膜表面,而疏水尾位于膜內(nèi)側(cè)。磷脂是重要的兩親物質(zhì),它們是生物膜的重要組分、乳化劑和表面活性劑(表面活性劑是能降低液體,通常是水的,表面張力,沿水表面擴(kuò)散的物質(zhì))磷脂的結(jié)構(gòu)甘油的C(1)和C(2)羥基被脂肪酸酯化,C(3)羥基被磷酸酯化,磷酸又與一極性醇X—OH連接,這就構(gòu)成甘油磷脂。分子的非極性尾含有兩個(gè)脂肪酸的長(zhǎng)烴鏈,甘油C(1)連結(jié)的常是含16或18個(gè)碳原子的飽和脂肪酸,其C(2)位則常被16~20個(gè)碳原子的不飽和脂肪酸占據(jù)。磷?!猉組成甘油磷脂的極性頭,故甘油磷脂可根據(jù)極性頭醇(X—OH)的不同分類。X=H構(gòu)成最簡(jiǎn)單的甘油磷脂,叫做磷脂酸,它在生物膜中僅有少量。通常存在于生物膜中的甘油磷脂都有極性頭。重要的甘油磷脂極性頭基舉例如下。極性脂在水溶液表面自然形成厚度為一個(gè)脂質(zhì)分子的脂單層,其烴尾避開水朝向大氣,而親水的極性頭則指向極性的水相。在水系統(tǒng)中,極性脂自然聚在一起形成分子團(tuán)(非極性尾朝內(nèi))或極薄的脂雙層以分開兩個(gè)水性部分。脂雙層脂質(zhì)分子的非極性尾向內(nèi)伸展形成一個(gè)連續(xù)的內(nèi)部碳?xì)浜诵?,而極性頭朝外,伸入水相中。脂雙層較軟,易彎曲流動(dòng),是生物膜的基本結(jié)構(gòu),它們依膜的類型不同,占膜重量的20~80%不等。鞘磷脂的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)見鞘脂。磷脂的分類磷脂根據(jù)骨架的不同可以分為磷酸甘油脂(glycerolphospholiid)和鞘磷脂(sphingolipid)。它們都是極性脂。極性脂由極性部分(叫做極性頭)和非極性部分(叫做非極性尾)組成。其中,甘油磷脂又可以根據(jù)極性頭部集團(tuán)的不同區(qū)分為磷脂酰膽堿(Phosphatidylcholines,PC)、磷脂酰乙醇氨(Phosphatidylethanolamines,PE)、磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserines,PS)、磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositols,PI)、磷脂酰甘油(PG)、甘油磷脂酸(phosphatidicacid,PA)等。依照氨基醇的不同可分以下幾類:各種甘油磷脂的極性頭部和電荷量(1)、磷脂酰膽堿(卵磷脂)(PC),HO—CH2CH2N+(CH3)3(膽堿),分布:,植物:大豆等,動(dòng)物:腦、精液、腎上腺、紅細(xì)胞,蛋卵黃(8-10%)。作用:控制肝脂代謝,防止脂肪肝的形成。(2)、磷脂酰乙醇胺(腦磷脂)(PE),HO—CH2CH2—N+H3(乙醇胺),參與血液凝結(jié)。(3)、磷脂酰絲氨酸(PS),HO—CH2CH—COO-(絲氨酸),N+H3,注:(1)—(3)X均為氨基醇。(4)、磷脂酰肌醇(PI),(5)、磷脂酰甘油(PG)(6)、二磷脂酰甘油(心磷脂)磷脂的結(jié)構(gòu)發(fā)布時(shí)間:2012-02-0814:59點(diǎn)擊次數(shù):108甘油的C(1)和C(2)羥基被脂肪酸酯化,C(3)羥基被磷酸酯化,磷酸又與一極性醇X—OH連接,這就構(gòu)成甘油磷脂。分子的非極性尾含有兩個(gè)脂肪酸的長(zhǎng)烴鏈,甘油C(1)連結(jié)的常是含16或18個(gè)碳原子的飽和脂肪酸,其C(2)位則常被16~20個(gè)碳原子的不飽和脂肪酸占據(jù)。磷?!猉組成甘油磷脂的極性頭,故甘油磷脂可根據(jù)極性頭醇(X—OH)的不同分類。X=H構(gòu)成最簡(jiǎn)單的甘油磷脂,叫做磷脂

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