第二章白細(xì)胞檢驗(yàn)

學(xué)習(xí)目標(biāo)1.敘述白細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)法的原理、試劑組成、注意事項(xiàng)2.學(xué)會白細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)法的操作方法3.準(zhǔn)確識別外周血常見正常和異常白細(xì)胞形態(tài)4.學(xué)會白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方法返回上一頁下一頁當(dāng)前1頁，總共166頁。外周血常見白細(xì)胞的種類與功能

(一)外周血常見白細(xì)胞的種類1.白細(xì)胞的形態(tài)：無色有核，球形，直徑7μm～25μm。2.白細(xì)胞的種類（形態(tài)分類）：三類五種--------返回上一頁下一頁當(dāng)前2頁，總共166頁。中性粒細(xì)胞（N）粒細(xì)胞嗜酸粒細(xì)胞（E）嗜堿粒細(xì)胞（B）白細(xì)胞淋巴細(xì)胞（L）單核細(xì)胞（M）返回上一頁下一頁當(dāng)前3頁，總共166頁。白細(xì)胞的發(fā)育起源于骨髓多能造血干細(xì)胞。返回上一頁下一頁當(dāng)前4頁，總共166頁。白細(xì)胞的功能中性粒細(xì)胞：具有較強(qiáng)的運(yùn)動能力和吞噬活性。胞內(nèi)酶有復(fù)雜的殺菌系統(tǒng)。嗜酸粒細(xì)胞：可作變形運(yùn)動，吞噬抗原抗體復(fù)合物，滅活組織胺減輕過敏反應(yīng)。嗜堿粒細(xì)胞：與IgE具有較強(qiáng)的結(jié)合力，脫粒釋放組胺導(dǎo)致速發(fā)性變態(tài)反應(yīng)。淋巴細(xì)胞：參與體液免疫和細(xì)胞免疫。單核細(xì)胞：有強(qiáng)大的吞噬功能，傳遞抗原信息。返回上一頁下一頁當(dāng)前5頁，總共166頁。白細(xì)胞的壽命粒細(xì)胞：10～15天淋巴細(xì)胞：數(shù)天～20余年單核細(xì)胞：數(shù)月返回上一頁下一頁當(dāng)前6頁，總共166頁。白細(xì)胞的歸宿

衰老的粒細(xì)胞被單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)清除，也有一部分從口腔、氣管、消化道和泌尿生殖道排出。B淋巴細(xì)胞經(jīng)抗原刺激后分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生特異性抗體，參與體液免疫。T淋巴細(xì)胞經(jīng)抗原致敏后，可產(chǎn)生多種免疫活性物質(zhì)，參與細(xì)胞免疫。粒-單核系祖細(xì)胞在骨髓經(jīng)分化成原始單核細(xì)胞后發(fā)育為成熟單核細(xì)胞，釋放入血液。

返回上一頁下一頁當(dāng)前7頁，總共166頁。返回上一頁下一頁當(dāng)前8頁，總共166頁。學(xué)習(xí)目標(biāo)

1.敘述白細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)法的原理、試劑組成、注意事項(xiàng)。2.學(xué)會白細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)法的操作方法3.準(zhǔn)確識別外周血常見正常和異常白細(xì)胞形態(tài)。4.學(xué)會白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方法。返回上一頁下一頁當(dāng)前9頁，總共166頁。顯微鏡計(jì)數(shù)法【原理】用白細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋液，將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細(xì)胞后，混勻充入計(jì)數(shù)池中，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算即可求得每升血液中白細(xì)胞的總數(shù)。返回上一頁下一頁當(dāng)前10頁，總共166頁。顯微鏡計(jì)數(shù)法【器材】1.顯微鏡（目鏡10×；物鏡10×）2.微量吸管（Hb吸管）傳統(tǒng)的Hb吸管玻璃上有10μl和20μl（誤差＜±1%）兩個(gè)刻度。使用前應(yīng)經(jīng)嚴(yán)格校正。橡膠乳頭提供負(fù)壓

返回上一頁下一頁當(dāng)前11頁，總共166頁。Hb吸管的消毒清洗

每次使用后，應(yīng)經(jīng)2ｇ/Ｌ過氧乙酸浸泡2ｈ消毒。然后依次用蒸餾水沖洗，→0.95Ｌ/Ｌ乙醇除脂脫水，→乙醚干燥后，才能再次使用。注意清洗的順序不可顛倒。返回上一頁下一頁當(dāng)前12頁，總共166頁。顯微鏡計(jì)數(shù)法3.計(jì)數(shù)池返回上一頁下一頁當(dāng)前13頁，總共166頁。顯微鏡計(jì)數(shù)法

3.計(jì)數(shù)池各池刻劃有9ｍｍ2面積的刻度，分為9個(gè)大方格，每格長、寬各1ｍｍ，面積1ｍｍ2，體積為0.1ｍｍ３，容量0.1μl。返回上一頁下一頁當(dāng)前14頁，總共166頁。計(jì)數(shù)白細(xì)胞的四個(gè)大方格

四個(gè)角的大方格都用單線劃分為16個(gè)中方格，為計(jì)數(shù)密度小的（白）細(xì)胞用。容量：0.1μl/大方格返回上一頁下一頁當(dāng)前15頁，總共166頁。計(jì)數(shù)紅細(xì)胞的五個(gè)中方格中央的一個(gè)大方格，用雙線劃分為25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又被單線劃分為16個(gè)小方格，共有400個(gè)小方格，供計(jì)數(shù)密度大的（紅）細(xì)胞用。容量：0.1μl/大方格0.004μl/中方格返回上一頁下一頁當(dāng)前16頁，總共166頁。

４.蓋玻片

特制的計(jì)數(shù)池專用蓋片，要求玻璃表面平整光滑，有一定重量，不被細(xì)胞懸液所抬浮，厚度應(yīng)為0.4ｍｍ～0.7ｍｍ。蓋玻片兩面的平整度是：0.002ｍｍ以內(nèi)，大小:24mm×20mm×0.6mm。返回上一頁下一頁當(dāng)前17頁，總共166頁。顯微鏡計(jì)數(shù)法【試劑】白細(xì)胞稀釋液

冰乙酸2.0ｍｌ

10g／Ｌ亞甲藍(lán)（或結(jié)晶紫）數(shù)滴

蒸餾水加至100ｍｌ

返回上一頁下一頁當(dāng)前18頁，總共166頁。稀釋液中各組分的作用蒸餾水—低滲溶解紅細(xì)胞，乙酸—可加速紅細(xì)胞溶解，同時(shí)乙酸能固定核蛋白，使白細(xì)胞核顯現(xiàn)，便于辨認(rèn)。染料—使核略著色，且易與紅細(xì)胞稀釋液區(qū)別。

返回上一頁下一頁當(dāng)前19頁，總共166頁。顯微鏡計(jì)數(shù)法【操作】１．取小試管１支，加入白細(xì)胞稀釋液0.38ｍｌ。２．用微量吸管準(zhǔn)確吸取外周血20ul。３．擦去管尖外部余血，立即將吸管插入盛有稀釋液的試管底部，輕輕將血放出，并吸取上清液漱洗吸管２次～３次，注意每次不能沖渾稀釋液，最后用手振搖試管混勻。返回上一頁下一頁當(dāng)前20頁，總共166頁。操作

４.充液將計(jì)數(shù)板和蓋玻片擦凈，蓋片蓋在計(jì)數(shù)池上，用毛細(xì)滴管或玻璃棒取已混勻的細(xì)胞懸液1滴，充入計(jì)數(shù)池與蓋玻片間的縫隙中，靜置2min～3min，待白細(xì)胞下沉。返回上一頁下一頁當(dāng)前21頁，總共166頁。鏡下白細(xì)胞形態(tài)

似成熟蠶卵，中央核深染，胞質(zhì)色淡。

返回上一頁下一頁當(dāng)前22頁，總共166頁。顯微鏡計(jì)數(shù)法5.計(jì)數(shù)方法用低倍鏡依次計(jì)數(shù)四角的四個(gè)大格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。對于壓線的白細(xì)胞，應(yīng)采取數(shù)上不數(shù)下；數(shù)左不數(shù)右（左、上計(jì)入，右、下棄去）的原則，保證計(jì)數(shù)域的一致性，使計(jì)數(shù)準(zhǔn)確。返回上一頁下一頁當(dāng)前23頁，總共166頁。讓我們共同計(jì)數(shù)下列大格的細(xì)胞返回上一頁下一頁當(dāng)前24頁，總共166頁。讓我們再試一次：返回上一頁下一頁當(dāng)前25頁，總共166頁。顯微鏡計(jì)數(shù)法

【計(jì)算

】四個(gè)大格白細(xì)胞數(shù)

白細(xì)胞數(shù)／Ｌ＝————————×10×20×1064

式中：÷４得每個(gè)大格（即0.1μl）內(nèi)白細(xì)胞平均數(shù)

×10因一大格容積為0.1μl，換算為1μl

×20血液稀釋倍數(shù)。

×106將1μl換算為1Ｌ。返回上一頁下一頁當(dāng)前26頁，總共166頁。稀釋倍數(shù)的確認(rèn)稀釋倍數(shù)＝（溶質(zhì)＋溶劑）/溶質(zhì)注意：體積單位需一致后方能運(yùn)算。返回上一頁下一頁當(dāng)前27頁，總共166頁。請您練習(xí)求以下操作的稀釋倍數(shù)：稀釋液（ml）＋血液（μl）稀釋倍數(shù)0.38200.48200.39102.0010202540201返回上一頁下一頁當(dāng)前28頁，總共166頁。請您練習(xí)按常規(guī)取血稀釋后數(shù)得4個(gè)大格共有白細(xì)胞280個(gè)，求白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果？解：WBC＝280/4×10×20×106＝14×109/L返回上一頁下一頁當(dāng)前29頁，總共166頁。請您練習(xí)

取血40ul加入稀釋液0.36ml，鏡下計(jì)數(shù)了8個(gè)大格共有白細(xì)胞320個(gè)，求其白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果？答案：稀釋倍數(shù)＝（360＋40）／40WBC＝320／8×10×10×106

＝10＝4×109/L返回上一頁下一頁當(dāng)前30頁，總共166頁。白細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)誤差1.技術(shù)誤差:由于操作不正確和儀器不精確造成的誤差。

2.固有誤差:因每次白細(xì)胞分布不可能完全相同所造成的偏差屬固有誤差，也稱計(jì)數(shù)域誤差。

返回上一頁下一頁當(dāng)前31頁，總共166頁。常見技術(shù)誤差：血液凝固稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)充液不當(dāng)識別錯(cuò)誤器材不符合要求返回上一頁下一頁當(dāng)前32頁，總共166頁。固有誤差(計(jì)數(shù)域誤差)根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)研究，白細(xì)胞在計(jì)數(shù)池內(nèi)的隨機(jī)分布符合泊森分布。從計(jì)算公式中可以看出計(jì)數(shù)范圍越大，計(jì)數(shù)的細(xì)胞越多，計(jì)數(shù)域誤差越小。返回上一頁下一頁當(dāng)前33頁，總共166頁。注意事項(xiàng)

1、稀釋液要過濾使用，試管、計(jì)數(shù)板等均須清潔。2、計(jì)數(shù)池內(nèi)細(xì)胞分布要均勻?？倲?shù)在參考范圍內(nèi)，每個(gè)大方格間白細(xì)胞數(shù)不得相差8個(gè)以上，兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過10%，否則要重新充液計(jì)數(shù)。3、遇白細(xì)胞數(shù)太低者、白細(xì)胞數(shù)太高者稀釋倍數(shù)應(yīng)靈活掌握。4、當(dāng)外周血出現(xiàn)大量有核紅細(xì)胞時(shí)應(yīng)予以校正除去。返回上一頁下一頁當(dāng)前34頁，總共166頁?？偨Y(jié)1.白細(xì)胞的種類按形態(tài)分類包括：三類五種

2.顯微鏡法計(jì)數(shù)原理：

用稀乙酸溶液將血液稀釋并破壞紅細(xì)胞后，混勻充入計(jì)數(shù)池中，在鏡下計(jì)數(shù)一定容積中的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液中的白細(xì)胞總數(shù)。返回上一頁下一頁當(dāng)前35頁，總共166頁。總結(jié)3.計(jì)數(shù)池的結(jié)構(gòu)：分為9個(gè)大方格，每個(gè)大方格長、寬各1ｍｍ，面積ｌｍｍ2，體積為0.1ｍｍ３，容量0.1μl。

4.稀釋液中各組分的作用為：蒸餾水低滲溶解紅細(xì)胞；乙酸加速紅細(xì)胞溶解同時(shí)固定核蛋白，使白細(xì)胞核顯現(xiàn)，便于辨認(rèn)；染料使核略著色，且易與紅細(xì)胞稀釋液區(qū)別。返回上一頁下一頁當(dāng)前36頁，總共166頁。總結(jié)5.Hb吸管的清洗順序是：蒸餾水沖洗→95%乙醇脫水除脂→乙醚干燥6.鏡下計(jì)數(shù)時(shí)要遵循一定順序，對于壓線的白細(xì)胞，應(yīng)采取:數(shù)上不數(shù)下；數(shù)左不數(shù)右（左、上計(jì)入，右、下棄去）的原則計(jì)數(shù)。返回上一頁下一頁當(dāng)前37頁，總共166頁?？偨Y(jié)計(jì)算公式

四個(gè)大格白細(xì)胞數(shù)

白細(xì)胞數(shù)／Ｌ＝————————×10×20×106

4返回上一頁下一頁當(dāng)前38頁，總共166頁。第三節(jié)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)一、外周血常見白細(xì)胞的形態(tài)二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)返回上一頁下一頁當(dāng)前39頁，總共166頁。學(xué)習(xí)目標(biāo)1.敘述外周血常見白細(xì)胞的形態(tài)２.分析白細(xì)胞在血涂片上的分布，正確選擇分類計(jì)數(shù)區(qū)域３.述說顯微鏡白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)法返回上一頁下一頁當(dāng)前40頁，總共166頁。一、外周血常見白細(xì)胞的形態(tài)經(jīng)瑞特染色后外周血中常見各種成熟白細(xì)胞形態(tài)如下：細(xì)胞大小、形態(tài)細(xì)胞核形態(tài)、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)細(xì)胞漿、特異性顆粒返回上一頁下一頁當(dāng)前41頁，總共166頁。（一）中性粒細(xì)胞返回上一頁下一頁胞體呈圓形，直徑10μｍ～15μｍ，約為紅細(xì)胞的２倍。胞質(zhì)量豐富染粉紅色，含大量細(xì)小均勻的紫紅色中性顆粒。細(xì)胞核染色質(zhì)粗糙不勻，排列緊密成小塊狀．染深紫紅色。根據(jù)核的形狀分為中性桿狀（帶狀）核粒細(xì)胞和中性分葉核（多節(jié)核）粒細(xì)胞兩種。

當(dāng)前42頁，總共166頁。（一）中性粒細(xì)胞

中性分葉核粒細(xì)胞的核分２葉～５葉或更多葉，以３葉～４葉為常見．葉間以核絲或核橋相連。分葉的大小、形狀和排列各不相同。返回上一頁下一頁當(dāng)前43頁，總共166頁。中性分葉核粒細(xì)胞的核返回上一頁下一頁當(dāng)前44頁，總共166頁。桿狀核和分葉核的劃分標(biāo)準(zhǔn)胞核完全分離或核間以絲狀相連，或核葉重疊，使核的輪廓看不清，劃分為分葉核粒細(xì)胞。胞核細(xì)長多樣，彎曲盤繞，可呈C型、S型、V型或不規(guī)則型，劃分為桿狀核粒細(xì)胞。為不完全成熟細(xì)胞。返回上一頁下一頁當(dāng)前45頁，總共166頁。桿狀核粒細(xì)胞的核形返回上一頁下一頁當(dāng)前46頁，總共166頁。（二）嗜酸粒細(xì)胞

圓形，直徑13μm～15μm，略大于中性粒細(xì)胞。胞核常分兩葉，似眼鏡形。也可見３葉～４葉者。核染色質(zhì)粗。染紫紅色。胞質(zhì)中充滿粗大、均勻、整齊、緊密排列的橘紅色嗜酸性顆粒。偶見少許淡藍(lán)或無色胞質(zhì)。嗜酸粒細(xì)胞較易碎，破碎后顆粒多散在胞核附近。返回上一頁下一頁當(dāng)前47頁，總共166頁。（三）嗜堿粒細(xì)胞圓形，直徑10μm～1２μm，較其他粒細(xì)胞小。胞核常被顆粒遮蓋，核染色質(zhì)粗著色較淺，分葉常不明顯．形態(tài)不規(guī)則，清楚時(shí)可見２葉～４葉。胞質(zhì)量較少，常呈淡紅或淡紫紅色，含少量粗大，但大小不均、排列不規(guī)則的紫黑色嗜堿性顆粒，常蓋于核上。嗜堿性顆粒易溶于水，故染色時(shí)易被溶解消失，而呈淡紅色空穴狀。返回上一頁下一頁當(dāng)前48頁，總共166頁。（四）單核細(xì)胞

呈不規(guī)則的圓或橢圓形，為外周血中最大的細(xì)胞．直徑15μm～25μm。細(xì)胞核大呈不規(guī)則圓形、腎形、馬蹄形，或不規(guī)則分葉有時(shí)折疊卷曲。染色質(zhì)細(xì)致疏松如網(wǎng)狀，染淡紫紅色。胞質(zhì)量豐富．染淡藍(lán)、灰藍(lán)色不等，常呈毛玻璃樣半透明。胞質(zhì)內(nèi)含有大量細(xì)小灰塵樣紫紅色嗜天青顆粒。核凹陷處胞質(zhì)染色較淡．偶見無顆粒胞質(zhì)是偽足樣伸出。返回上一頁下一頁當(dāng)前49頁，總共166頁。

（五）淋巴細(xì)胞

按其個(gè)體可有大小之分。小淋巴細(xì)胞：呈圓形，直徑6μm～10μm。胞核圓形。偶見凹陷，染色質(zhì)粗糙緊密，排列均勻，無空隙。常有隱約成塊現(xiàn)象，核周常有染色質(zhì)濃集，核膜明顯，有時(shí)可見潛在核仁。胞質(zhì)量極少，僅在核的一側(cè)出現(xiàn)一線天藍(lán)或深藍(lán)色，有的甚至完全不見。胞質(zhì)中一般無顆粒存在，偶見幾顆大小不等的紫紅色嗜天青顆粒。返回上一頁下一頁當(dāng)前50頁，總共166頁。大淋巴細(xì)胞：

體積較大直徑10μm～15μm，胞核染色質(zhì)比小淋巴細(xì)胞疏松，胞質(zhì)量豐富，呈透明的淡藍(lán)色，常有少量大小不等的嗜天青顆粒。返回上一頁下一頁當(dāng)前51頁，總共166頁。五種白細(xì)胞鑒別要點(diǎn)返回上一頁下一頁當(dāng)前52頁，總共166頁。點(diǎn)評三種粒細(xì)胞主要依據(jù)胞質(zhì)中顆粒形態(tài)和染色性質(zhì)去相互鑒別；淋巴細(xì)胞與單核細(xì)胞則重點(diǎn)根據(jù)細(xì)胞核的特征去區(qū)別。返回上一頁下一頁當(dāng)前53頁，總共166頁。嗜中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞返回上一頁下一頁當(dāng)前54頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

步驟

1．制備血涂片2．血涂片染色3．白細(xì)胞分類4．計(jì)算百分率返回上一頁下一頁當(dāng)前55頁，總共166頁。

白細(xì)胞總數(shù)與分類白細(xì)胞數(shù)的關(guān)系白細(xì)胞總數(shù)（×109/L）應(yīng)分類白細(xì)胞個(gè)數(shù)＜450～1004～1010010～2020020～30300＞30400返回上一頁下一頁當(dāng)前56頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)法

由于各種白細(xì)胞大小不同在血片中分布不很均勻。一般體積較小的淋巴細(xì)胞在頭、體部較多．而尾部和兩側(cè)以中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞較多特別是異常大的細(xì)胞常常在片尾末端出現(xiàn)。返回上一頁下一頁當(dāng)前57頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)分類最好是在血膜體尾交界處．由血膜邊緣向中央依次上下呈曲線向血膜中間移動，計(jì)數(shù)不同區(qū)域的白細(xì)胞，以免重復(fù)計(jì)數(shù)．縮小因細(xì)胞分布不勻的誤差。返回上一頁下一頁當(dāng)前58頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

3.白細(xì)胞分類記錄方法（1）分類計(jì)數(shù)器法（2）完全記錄法返回上一頁下一頁當(dāng)前59頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

4.各類細(xì)胞所占百分率乘以白細(xì)胞總數(shù)/Ｌ．即得每升血液中各類白細(xì)胞的濃度數(shù)（習(xí)慣稱絕對值）。某種白細(xì)胞數(shù)／Ｌ＝某種白細(xì)胞％×白細(xì)總數(shù)／Ｌ

返回上一頁下一頁當(dāng)前60頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

5.血片中如有幼紅細(xì)胞．也應(yīng)逐個(gè)計(jì)數(shù)，不列入白細(xì)胞總數(shù)，而是報(bào)告分類計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞的過程中見到的幼紅細(xì)胞數(shù)，并應(yīng)注明其所屬階段。返回上一頁下一頁當(dāng)前61頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

6.如發(fā)現(xiàn)幼稚或異常白細(xì)胞應(yīng)分類鑒定，包括在白細(xì)胞分類百分率中。此外還應(yīng)注意血涂片中有無異常紅、白細(xì)胞及血小板的大體數(shù)量分布情況及寄生蟲等。返回上一頁下一頁當(dāng)前62頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)注意事項(xiàng)

1.在血涂片選擇適宜的分類部位進(jìn)行細(xì)胞分類。2.移動血涂片的順序一定要有規(guī)律。3.分類時(shí)不能人為地拋棄個(gè)別細(xì)胞，不能確認(rèn)者應(yīng)單獨(dú)記錄比例并用文字描述其形態(tài)特征。返回上一頁下一頁當(dāng)前63頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)注意事項(xiàng)4.法線幼稚白細(xì)胞應(yīng)包括在%內(nèi)，若細(xì)胞形態(tài)異常也應(yīng)加以說明。5.發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞（幼紅細(xì)胞）不計(jì)入白細(xì)胞%內(nèi)，而報(bào)告“計(jì)數(shù)×××個(gè)白細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)幼紅細(xì)胞××個(gè)，同時(shí)要對白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行校正。返回上一頁下一頁當(dāng)前64頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)注意事項(xiàng)6.如患者WBC少，一張血涂片上分類計(jì)數(shù)不足100個(gè)細(xì)胞時(shí)可在兩張涂片上連續(xù)完成。實(shí)在有困難時(shí)可按“××/50個(gè)白細(xì)胞”報(bào)告（但本法誤差大）。返回上一頁下一頁當(dāng)前65頁，總共166頁。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)鏡檢中，對細(xì)胞形態(tài)力求掌握最根本點(diǎn)，如核形、核染質(zhì)結(jié)構(gòu)、胞質(zhì)色澤、顆粒等反復(fù)對比。由于染色條件不可能使每一張涂片完全一致，因此細(xì)胞大小，染色深淺，色調(diào)等變化不是絕對不變的，要學(xué)會“具體問題，具體分析”，抓主要矛盾。在注意細(xì)胞比例關(guān)系變化的同時(shí)，更要注意細(xì)胞形態(tài)有無異常改變。發(fā)現(xiàn)特殊變化要及時(shí)報(bào)告。返回上一頁下一頁當(dāng)前66頁，總共166頁。作業(yè)1.瑞特染色白細(xì)胞核不著色或僅呈極淺藍(lán)色是何原因？怎樣校正？2.下列細(xì)胞組應(yīng)重點(diǎn)從哪方面區(qū)分：（1）中性粒細(xì)胞------嗜酸粒細(xì)胞（2）中性粒細(xì)胞------單核細(xì)胞（3）單核細(xì)胞------大淋巴細(xì)胞返回上一頁下一頁當(dāng)前67頁，總共166頁。返回上一頁下一頁當(dāng)前68頁，總共166頁。學(xué)習(xí)目標(biāo)1.白細(xì)胞總數(shù)和各類白細(xì)胞分?jǐn)?shù)的參考區(qū)間2.白細(xì)胞總數(shù)和各類白細(xì)胞分?jǐn)?shù)的生理變化和病理變化3.中性粒細(xì)胞核象變化的意義4.白細(xì)胞變化與疾病預(yù)后的關(guān)系返回上一頁下一頁當(dāng)前69頁，總共166頁。第四節(jié)中性粒細(xì)胞常見的形態(tài)變化一、核象變化二、毒性變化三、退行性變化返回上一頁下一頁當(dāng)前70頁，總共166頁。一、中性粒細(xì)胞核象變化外周血中中性粒細(xì)胞核象---指粒細(xì)胞的成熟程度，核象變化反映疾病的病情發(fā)展和預(yù)后。中性粒細(xì)胞的核象變化分為核象左移與核象右移兩種。左、右移的區(qū)分線在桿狀與分葉核之間。返回上一頁下一頁當(dāng)前71頁，總共166頁。一、中性粒細(xì)胞核象變化返回上一頁下一頁當(dāng)前72頁，總共166頁。一、中性粒細(xì)胞核象變化

１.中性粒細(xì)胞核象左移外周血中桿狀核粒細(xì)胞增多和桿狀核階段以前的幼稚細(xì)胞出現(xiàn)稱為核象左移。返回上一頁下一頁當(dāng)前73頁，總共166頁。一、中性粒細(xì)胞核象變化

(1)再生性左移--核象左移伴有白細(xì)胞總數(shù)增多者。表示機(jī)體迫切需要．骨髓能釋放大量粒細(xì)胞至外周血。常見于急性化膿性感染、急性中毒、急性大出血等。返回上一頁下一頁當(dāng)前74頁，總共166頁。一、核象變化

(2)退行性左移或變質(zhì)性左移--核象左移，但白細(xì)胞總數(shù)不增加或降低者。表示骨髓釋放功能受抑制。常見于嚴(yán)重感染，機(jī)體抵抗力低下時(shí)，加傷寒、敗血癥等。返回上一頁下一頁當(dāng)前75頁，總共166頁。一、核象變化

核象左移根據(jù)其程度可分為：

（1）輕度核象左移：僅見于桿狀核粒細(xì)胞增多，＞6％(２)中度核象左移：桿狀核粒細(xì)胞＞10％，伴少數(shù)晚幼粒、中幼粒細(xì)胞。(３)重度核象左移（類白血病反應(yīng)）：桿狀核粒細(xì)胞＞25％，出現(xiàn)更幼稚的粒細(xì)胞并常伴有明顯的中毒顆粒、空泡變性、核變性等質(zhì)的改變。

返回上一頁下一頁當(dāng)前76頁，總共166頁。一、核象變化２．中性粒細(xì)胞核象右移核右移--外周血中中性分葉核粒細(xì)胞增多，同時(shí)分5葉核以上的細(xì)胞＞3％時(shí)（正常時(shí)多為3葉核）。這是造血功能衰退或造血物質(zhì)缺乏的表現(xiàn)，核象右移常伴白細(xì)胞總數(shù)的減少。主要見于營養(yǎng)性巨幼細(xì)胞性貧血，惡性貧血和用抗代謝藥物，炎癥恢復(fù)期可出現(xiàn)一過性右移。在疾病進(jìn)行期，突然出現(xiàn)右移，提示預(yù)后不良。返回上一頁下一頁當(dāng)前77頁，總共166頁。二、毒性變化在重癥傳染病、各種化膿性感染、惡性腫瘤、中毒、大面積燒傷、放射性治療等病理情況下，中性粒細(xì)胞可發(fā)生毒性變化。具體表現(xiàn)為中毒顆粒、細(xì)胞大小不均、空泡、杜氏小體、核棘突。返回上一頁下一頁當(dāng)前78頁，總共166頁。二、毒性變化1.細(xì)胞大小不等：指中性粒細(xì)胞體積大小懸殊的情況而言。常見于炎癥。其發(fā)生機(jī)理可能是在內(nèi)毒素的作用下，骨髓內(nèi)幼稚中性粒細(xì)胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。返回上一頁下一頁當(dāng)前79頁，總共166頁。二、毒性變化

２.中毒顆粒瑞特染色后，中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)深紫藍(lán)色或紫黑色的粗大而分布不均勻的顆粒．有時(shí)也較小或稀疏散在于中性顆粒中。常見于嚴(yán)重的化膿性感染及大面積燒傷等。返回上一頁下一頁當(dāng)前80頁，總共166頁。二、毒性變化3.空泡細(xì)胞受損后胞質(zhì)發(fā)生脂肪變性，染色后脂質(zhì)溶解后的結(jié)果?？沙霈F(xiàn)在核上或胞質(zhì)中。

返回上一頁下一頁當(dāng)前81頁，總共166頁。二、毒性變化

4.杜氏小體細(xì)胞嚴(yán)重毒性變時(shí)胞質(zhì)中保留的局部嗜堿性區(qū)域。返回上一頁下一頁當(dāng)前82頁，總共166頁。二、毒性變化

5.核變性包括核固縮、核溶解、核破碎等。核固縮指細(xì)胞核固縮為均勻而深紫色的塊狀；核溶解則可見細(xì)胞核膨脹，著色淺淡，伴核破碎的則核的輪廓不清。臨床意義同空泡變性等。返回上一頁下一頁當(dāng)前83頁，總共166頁。二、中性粒細(xì)胞毒性變化

6.核棘突中性粒細(xì)胞核有各種形態(tài)的芽狀突起，稱為核棘突。正常人白細(xì)胞如大量出現(xiàn)此種現(xiàn)象，則預(yù)示有嚴(yán)重中毒或感染存在，如轉(zhuǎn)移癌、晚期結(jié)核病、嚴(yán)重放射線損傷等。返回上一頁下一頁當(dāng)前84頁，總共166頁。與代表性染色體的核鼓錘狀突出物區(qū)別。

鼓錘狀突出物為一直徑約1.5μm的圓形物突出，并有細(xì)絲與核相連接，形同鼓錘。返回上一頁下一頁當(dāng)前85頁，總共166頁。三、退行性變化

表現(xiàn)為胞體腫大、結(jié)構(gòu)模糊、邊緣不清晰；核固縮、核腫脹和核溶解、染色質(zhì)模糊、疏松。如胞質(zhì)破裂后消失，只剩失去結(jié)構(gòu)的腫脹的胞核，則成裸核或藍(lán)狀細(xì)胞。返回上一頁下一頁當(dāng)前86頁，總共166頁。一、參考區(qū)間二、生理變化三、病理變化四、白細(xì)胞變化和疾病預(yù)后的關(guān)系返回上一頁下一頁當(dāng)前87頁，總共166頁。課前復(fù)習(xí)1.作白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)應(yīng)注意哪些問題？答案：1.選擇好分類的部位2.移動血涂片的順序一定要有規(guī)律，3.分類時(shí)不能人為地拋棄個(gè)別細(xì)胞，4.發(fā)現(xiàn)幼稚白細(xì)胞應(yīng)包括在%內(nèi)，5.細(xì)胞形態(tài)異常也應(yīng)加以說明。6.發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞（幼紅細(xì)胞）不計(jì)入白細(xì)胞%內(nèi)，同時(shí)要對白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行校正。返回上一頁下一頁當(dāng)前88頁，總共166頁。課前復(fù)習(xí)2.瑞特染色后見部分分葉核粒細(xì)胞胞質(zhì)中顆粒呈紫黑色，問此類細(xì)胞有可能是哪幾種細(xì)胞！答案：（1）嗜堿粒細(xì)胞（2）中性粒細(xì)胞染色偏堿（3）嗜酸粒細(xì)胞顆粒染色偏堿返回上一頁下一頁當(dāng)前89頁，總共166頁。一、參考值（參考區(qū)間）

白細(xì)胞計(jì)數(shù)：成人：4×109/L～10×109/L；

兒童：5×109/L～12×109/L初生兒：15×109/L～20×109/L。返回上一頁下一頁當(dāng)前90頁，總共166頁。白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的參考值百分率（%）濃度數(shù)（×109/L）中性桿狀核粒細(xì)胞1～50.04～0.5中性分葉核粒細(xì)胞50～702～7嗜酸性粒細(xì)胞0.5～50.05～0.5嗜堿性粒細(xì)胞0～10～0.1淋巴細(xì)胞20～400.8～4單核細(xì)胞3～80.12～0.8返回上一頁下一頁當(dāng)前91頁，總共166頁。絕對值的計(jì)算方法某種細(xì)胞絕對值＝白細(xì)胞總數(shù)×該種細(xì)胞%例：某患者WBC為4×109/L；D.C中Nc為60%，求該患者中性粒細(xì)胞濃度數(shù)（絕對值）？解：絕對值＝4×109×60%＝2.4×109/L返回上一頁下一頁當(dāng)前92頁，總共166頁。二、生理變化

年齡日間變化運(yùn)動、疼痛和情緒影響妊娠與分娩返回上一頁下一頁當(dāng)前93頁，總共166頁。二、生理變化年齡因素形成中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞變化曲線的二次交叉。

返回上一頁下一頁當(dāng)前94頁，總共166頁。二、生理變化日間變化

活動進(jìn)食后較高下午高于上午運(yùn)動、疼痛和情緒影響

當(dāng)劇烈運(yùn)動、劇痛和情緒激動時(shí)，可引起白細(xì)胞顯著增加。妊娠與分娩

妊娠期白細(xì)胞常輕度增加。產(chǎn)后2周左右恢復(fù)正常、此后如再次升高，就有產(chǎn)后感染的可能。返回上一頁下一頁當(dāng)前95頁，總共166頁。三、病理性變化（一）中性粒細(xì)胞與白細(xì)胞總數(shù)的增多與減少

1．中性粒細(xì)胞增多2．中性粒細(xì)胞減少（二）嗜酸性粒細(xì)胞增多與減少（三）嗜堿性粒細(xì)胞增多（四）淋巴細(xì)胞增多與減少（五）單核細(xì)胞增多

返回上一頁下一頁當(dāng)前96頁，總共166頁。三、病理性變化中性粒細(xì)胞病理增多急性感染急性中毒急性大出血嚴(yán)重的組織損傷白血病及惡性腫瘤

返回上一頁下一頁當(dāng)前97頁，總共166頁。三、病理性變化中性粒細(xì)胞增多的病理變化

急性細(xì)菌性感染和化膿性炎癥

金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌感染等、其白細(xì)胞總數(shù)的增高視感染范圍，嚴(yán)重程度及機(jī)體反應(yīng)性如何而有所不同。

常見疾病有肺炎、丹毒、猩紅熱、敗血癥、白喉、蘭尾炎等。返回上一頁下一頁當(dāng)前98頁，總共166頁。三、病理性變化中性粒細(xì)胞增多的病理變化急性中毒急性藥物及農(nóng)藥中毒如安眠藥、有機(jī)磷等中毒；代謝性中毒如糖尿病酮癥酸中毒、尿毒癥及汞、鉛中毒等。返回上一頁下一頁當(dāng)前99頁，總共166頁。三、病理性變化中性粒細(xì)胞增多的病理變化急性大出血內(nèi)臟（肝、脾等）破裂或?qū)m外孕破裂所致大出血、大量血細(xì)胞破壞、此時(shí)白細(xì)胞可迅速增高，達(dá)20×109／Ｌ，且出現(xiàn)于血紅蛋白降低之前。返回上一頁下一頁當(dāng)前100頁，總共166頁。三、病理性變化中性粒細(xì)胞增多的病理變化嚴(yán)重的組織損傷

如嚴(yán)重?zé)齻?、較大手術(shù)后、心肌梗死等均可見白細(xì)胞增多，并可借此來區(qū)別心肌梗死與心絞痛。返回上一頁下一頁當(dāng)前101頁，總共166頁。三、病理性變化中性粒細(xì)胞增多的病理變化

白血病及惡性腫瘤常見于急性、慢性粒細(xì)胞性白血病。

返回上一頁下一頁當(dāng)前102頁，總共166頁。中性粒細(xì)胞減少的病理變化傳染病理化損傷血液病脾功能亢進(jìn)自身免疫性疾病返回上一頁下一頁當(dāng)前103頁，總共166頁。中性粒細(xì)胞減少的病理變化傳染病某些革蘭陰性桿菌如傷寒、副傷寒感染和某些病毒感染如流感。乙肝、麻疹等，無并發(fā)癥時(shí)均可見白細(xì)胞減少。返回上一頁下一頁當(dāng)前104頁，總共166頁。中性粒細(xì)胞減少的病理變化某些理化損傷長期接觸電離輻射如Ｘ線、鐳照射等；或應(yīng)用、接觸某些化學(xué)藥物、抗癌藥物、有毒物質(zhì)，如晚期或嚴(yán)重的苯、鉛、砷、汞等中毒。

返回上一頁下一頁當(dāng)前105頁，總共166頁。中性粒細(xì)胞減少的病理變化某些血液病如再生障礙性貧血、非白血性白血病、粒細(xì)胞缺乏癥，白細(xì)胞可＜1×10９／Ｌ。分類時(shí)呈淋巴細(xì)胞相對增多。返回上一頁下一頁當(dāng)前106頁，總共166頁。中性粒細(xì)胞減少的病理變化脾功能亢進(jìn)腫大的脾臟中單核—巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬破壞過多的白細(xì)胞及分泌過多的脾素滅活了促進(jìn)粒細(xì)胞生成的某些因子。返回上一頁下一頁當(dāng)前107頁，總共166頁。中性粒細(xì)胞減少的病理變化自身免疫性疾?。?/p>

如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等因自身免疫性抗核抗體導(dǎo)致粒細(xì)胞破壞增多。返回上一頁下一頁當(dāng)前108頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞增多與減少1.嗜酸性粒細(xì)胞增多2.嗜酸性粒細(xì)胞減少返回上一頁下一頁當(dāng)前109頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞增多與減少１.嗜酸粒細(xì)胞增多過敏性疾病寄生蟲病皮膚病傳染病腫瘤血液病返回上一頁下一頁當(dāng)前110頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞增多與減少２.嗜酸粒細(xì)胞減少由于嗜酸粒細(xì)胞在白細(xì)胞中所占百分率較低，故其減少意義不大，在長期應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素時(shí)由于它抑制組胺合成可間接導(dǎo)致嗜酸粒細(xì)胞減少。急性傳染病的早期亦常見減少。返回上一頁下一頁當(dāng)前111頁，總共166頁。嗜堿粒細(xì)胞增多

１.慢性粒細(xì)胞性白血病：嗜堿粒細(xì)胞增多可達(dá)10％以上。２.嗜堿粒細(xì)胞性白血病：此病罕見嗜堿粒細(xì)胞增多,多為稚型３.其他：如淋巴網(wǎng)細(xì)胞瘤，脾切除術(shù)后和某些轉(zhuǎn)移癌等可見嗜堿粒細(xì)胞增多。返回上一頁下一頁當(dāng)前112頁，總共166頁。淋巴細(xì)胞增多與減少１.淋巴細(xì)胞增多２.淋巴細(xì)胞減少返回上一頁下一頁當(dāng)前113頁，總共166頁。淋巴細(xì)胞增多與減少１.淋巴細(xì)胞增多（＞40％）

（1）相對增多：即每升血液中淋巴細(xì)胞濃度數(shù)不增加，因中性粒細(xì)胞顯著減少使淋巴細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分率相對增高。如再生障礙性貧血、粒細(xì)胞缺乏癥等返回上一頁下一頁當(dāng)前114頁，總共166頁。淋巴細(xì)胞增多與減少１.淋巴細(xì)胞增多（＞40％）

（２）絕對增多是指淋巴細(xì)胞濃度數(shù)和分?jǐn)?shù)數(shù)都增多，可見于：

①某些傳染病②某些傳染病的恢復(fù)期和腎移植術(shù)后發(fā)生排異反應(yīng)時(shí)。③急、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、白血病性淋巴肉瘤時(shí)淋巴細(xì)胞均增高。返回上一頁下一頁當(dāng)前115頁，總共166頁。淋巴細(xì)胞增多與減少

２.淋巴細(xì)胞減少（＜20％）多見于傳染病的急性期、長期接觸放射線、細(xì)胞免疫缺陷病等。此外，各種引起中性粒細(xì)胞增多的原因均可導(dǎo)致淋巴細(xì)胞相對減少。返回上一頁下一頁當(dāng)前116頁，總共166頁。單核細(xì)胞增多

１.某些感染如結(jié)核、傷寒、亞急性感染性心內(nèi)膜炎及某些急性感染的恢復(fù)期。

２.某些寄生蟲病如瘧疾、黑熱病等。

３.某些血液病單核細(xì)胞性白血病、惡性組織細(xì)胞病及骨髓增生異常綜合征（ＭＤＳ）等單核細(xì)胞均可增高。返回上一頁下一頁當(dāng)前117頁，總共166頁。四、白細(xì)胞變化和疾病預(yù)后的關(guān)系

預(yù)后良好征兆病情較重征兆病情險(xiǎn)惡的征兆感染已被清除征兆

返回上一頁下一頁當(dāng)前118頁，總共166頁。預(yù)后良好征兆白細(xì)胞總數(shù)正?；蛏愿咧行粤＜?xì)胞略有增高核象輕度左移表示感染程度較輕，機(jī)體抵抗力強(qiáng)，預(yù)后良好。

返回上一頁下一頁當(dāng)前119頁，總共166頁。病情較重征兆中性粒細(xì)胞＞10×109/L核象出現(xiàn)中度左移及毒性變化嗜酸性粒細(xì)胞消失表示病情較重返回上一頁下一頁當(dāng)前120頁，總共166頁。病情險(xiǎn)惡的征兆白細(xì)胞總數(shù)與中性粒細(xì)胞比值明顯增高分別＞20×109/L及＞80%；感染嚴(yán)重時(shí)白細(xì)胞不增高反而降低；中性粒細(xì)胞有嚴(yán)重核象左移；嗜酸性粒細(xì)胞消失表示病情險(xiǎn)惡的征兆。返回上一頁下一頁當(dāng)前121頁，總共166頁。感染已被清除征兆單核細(xì)胞逐漸增多；嗜酸性粒細(xì)胞重新出現(xiàn)或上升；中性粒細(xì)胞核象左移減輕；中性粒細(xì)胞毒性變化消失表示感染已被清除。返回上一頁下一頁當(dāng)前122頁，總共166頁。總結(jié)返回上一頁下一頁當(dāng)前123頁，總共166頁。目標(biāo)形成檢測

返回上一頁下一頁當(dāng)前124頁，總共166頁。請您練習(xí)某患者WBC為8×109/L；DC中Nc為80%，Lc為10%。求中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞濃度數(shù)？答案：Nc＝6.4×109/LLc＝0.8×109/L返回上一頁下一頁當(dāng)前125頁，總共166頁。病例討論

患者、男、45歲、全身酸痛乏力咳嗽二天、體溫37.8℃。血常規(guī)檢驗(yàn)：白細(xì)胞12×109/L、中性粒細(xì)胞80%、中性粒細(xì)胞桿狀核15%、嗜酸粒細(xì)胞0%、見中毒顆粒、其它未見異常問：有患上呼吸道感染的可能，病情是初期？病情比較嚴(yán)重？為什么？返回上一頁下一頁當(dāng)前126頁，總共166頁。請您練習(xí)某患者WBC為6×109/L，D.CNc90%問該患者中性粒細(xì)胞是否正常？解：Nc＝6×109/L×90%＝5.4×109/L答：檢查結(jié)果正常返回上一頁下一頁當(dāng)前127頁，總共166頁。請您練習(xí)出生后Nc和Lc變化曲線的兩次交叉發(fā)生在什么時(shí)候？答案：笫一次交叉：出生后的第6～9日；第二次交叉：4歲～5歲。返回上一頁下一頁當(dāng)前128頁，總共166頁。請您練習(xí)中性粒細(xì)胞有哪些病理變化？返回上一頁下一頁答案：（1）數(shù)量增加和減少（2）核象左移和右移（3）形態(tài)毒性變和退行性變當(dāng)前129頁，總共166頁。重慶藥劑學(xué)校臨床檢驗(yàn)教研室須建制作多媒體教學(xué)中心張曉輝返回上一頁下一頁當(dāng)前130頁，總共166頁。學(xué)習(xí)目標(biāo)1.解釋嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)的原理2.分析稀釋液成分與計(jì)數(shù)結(jié)果的關(guān)系3.闡述嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)的臨床意義4.進(jìn)行嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)返回上一頁下一頁當(dāng)前131頁，總共166頁。復(fù)習(xí)前課嗜酸粒細(xì)胞的參考值是多少？哪些情況會升高？返回上一頁下一頁答案：參考值：0.5%～5%；（0.05～0.5）×109/L增多：（1）過敏性疾?。?）寄生蟲?。?）某些皮膚?。ㄈ鐫裾睿?）某些傳染病及傳染病恢復(fù)期（5）某些惡性腫瘤和血液病（如Ec白血?。┊?dāng)前132頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)

為什么要直接計(jì)數(shù)（目的意義）?返回上一頁下一頁測定每升血液中嗜酸粒細(xì)胞濃度數(shù)，雖然可從白細(xì)胞濃度數(shù)和嗜酸粒細(xì)胞%的乘積得知，但由于嗜酸粒細(xì)胞所占百分率低，加之在血片上細(xì)胞分布不十分均勻．誤差很大，所以，在臨床上需要準(zhǔn)確了解嗜酸粒細(xì)胞的變化時(shí)，多采用直接計(jì)數(shù)法。當(dāng)前133頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)【原理】用嗜酸粒細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)破壞其紅細(xì)胞和部分其他白細(xì)胞，將嗜酸粒細(xì)胞顆粒染色，充入計(jì)數(shù)池內(nèi)，計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)嗜酸粒細(xì)胞，經(jīng)換算得出每升血液中嗜酸粒細(xì)胞數(shù)。返回上一頁下一頁當(dāng)前134頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)【稀釋液】１.乙醇-伊紅稀釋液

0.95Ｌ／Ｌ乙醇30.0ｍl

甘油10.0ｍl

碳酸鉀1.0ｇ

檸檬酸鈉0.5ｇ

20g/Ｌ伊紅10.0ml

蒸餾水加至100.0ｍl返回上一頁下一頁當(dāng)前135頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)試劑成分的作用1.乙醇為嗜酸粒細(xì)胞保護(hù)劑．其濃度以30％～35％較為合適。2.甘油可防止乙醇揮發(fā)。3.碳酸鉀可促進(jìn)紅細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等溶解并增加嗜酸粒細(xì)胞對染料的著色力。4.枸椽酸三鈉可防止血液凝固。5.伊紅可使嗜酸性顆粒染橘紅色。返回上一頁下一頁當(dāng)前136頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)乙醇-伊紅稀釋液的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：試劑穩(wěn)定，視野清晰、無沉渣。在室溫下可保持６個(gè)月。缺點(diǎn)：稀釋液內(nèi)含甘油，比較粘稠，細(xì)胞不易搖勻和下沉。返回上一頁下一頁當(dāng)前137頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)2.Hinkelman氏液伊紅0.2g

95％苯酚0.5ml

40％甲醛0.5ml

蒸餾水加至100ml返回上一頁下一頁當(dāng)前138頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)【操作】１.取稀釋液0.38ml于小試管內(nèi)，吸血20μl，立即輕輕混合均勻待紅細(xì)胞溶解。２．充分混勻充入雙側(cè)計(jì)數(shù)池內(nèi)。靜置2min～5min。３．低倍鏡下計(jì)數(shù)10個(gè)大方格（兩側(cè)計(jì)數(shù)池的中央和四角的大方格）內(nèi)嗜酸粒細(xì)胞數(shù)。返回上一頁下一頁當(dāng)前139頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)４.計(jì)算嗜酸粒細(xì)胞數(shù)／Ｌ＝10個(gè)大方格內(nèi)嗜酸粒細(xì)胞數(shù)×20×106注意：稀釋倍數(shù)與計(jì)數(shù)域發(fā)生改變后應(yīng)按實(shí)際操作換算成每升血液中的細(xì)胞數(shù)。返回上一頁下一頁當(dāng)前140頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)【注意事項(xiàng)】１.本試驗(yàn)應(yīng)在30min內(nèi)計(jì)數(shù)完畢。否則嗜酸粒細(xì)胞逐漸破壞，使結(jié)果偏低。２．血液加入稀釋液中，要及時(shí)混勻，以免細(xì)胞聚集，但又不宜過分振搖,以免嗜酸粒細(xì)胞破碎。返回上一頁下一頁當(dāng)前141頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)【注意事項(xiàng)】３.住院患者作用酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)應(yīng)固定時(shí)間，以免受日間生理變化的影響。４.注意與未破壞的中性粒細(xì)胞區(qū)別，中性粒細(xì)胞顆粒一般不受色或受色極淺，且其顆粒較小。５．若出現(xiàn)嗜酸粒細(xì)胞被破壞，可適當(dāng)增加乙醇的劑量。

返回上一頁下一頁當(dāng)前142頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)臨床意義1.參考區(qū)間：0.05×109／Ｌ～0.5×109／Ｌ（50／μl～500／μl）。返回上一頁下一頁當(dāng)前143頁，總共166頁。嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)２．臨床應(yīng)用（１）觀察急性傳染病的預(yù)后。（2）觀察大手術(shù)和燒傷病人的預(yù)后。（３）腎上腺皮質(zhì)功能和腦垂體前葉功能測定(減數(shù)試驗(yàn))。

返回上一頁下一頁當(dāng)前144頁，總共166頁。減數(shù)試驗(yàn)原理注射腎上腺素（間接刺激）垂體前葉釋放促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）腎上腺皮質(zhì)嗜酸粒細(xì)胞減少注射ACTH（直接刺激）返回上一頁下一頁當(dāng)前145頁，總共166頁。減數(shù)試驗(yàn)結(jié)果判斷

１．在正常情況下，注射ACTH（促腎上腺皮質(zhì)激素）或腎上腺素后，嗜酸粒細(xì)胞比注射前應(yīng)減少50％以上。

２．腎上腺皮質(zhì)功能正常，但垂體前葉功能不良時(shí)，注射ACTH直接刺激后，嗜酸粒細(xì)胞下降50％以上，而注射腎上腺素，間接刺激后則不下降。

３．垂體功能亢進(jìn)時(shí)，注射ACTH和腎上腺素，都可使嗜酸粒細(xì)胞降低80％～100％。

４．垂體前葉功能正常，腎上腺皮質(zhì)功能不良時(shí)，則注射ACTH和腎上腺素后，嗜酸粒細(xì)胞下降均不到50％。

返回上一頁下一頁當(dāng)前146頁，總共166頁。減數(shù)試驗(yàn)結(jié)果判斷——————————————————

注射促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH注射腎上腺素（Adrendin）（直接刺激）（間接刺激）—————————————————————————————1.正常下降＞50%下降＞50%2.垂體功能亢進(jìn)下降80%～100%下降80%～100%3.垂體功能正常下降＜50%下降＜50%腎上腺皮質(zhì)功能不良4.垂體功能不良下降＞50%不下降腎上腺皮質(zhì)功能正常返回上一頁下一頁當(dāng)前147頁，總共166頁。減數(shù)試驗(yàn)原理示意圖返回上一頁下一頁當(dāng)前148頁，總共166頁。總結(jié)

嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)的目的是準(zhǔn)確了解嗜酸粒細(xì)胞的變化，以觀察急性傳染病、燒傷和手術(shù)的預(yù)后，特別是了解腎上腺皮質(zhì)功能和腦垂體前葉功能。返回上一頁下一頁當(dāng)前149