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文檔簡介
蛋白質(zhì)測定操作方法
樣品消化蒸餾和吸收滴定一、實(shí)驗(yàn)材料(樣品消化)試劑:硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸(1)樣品消化樣品1g+0.4g硫酸銅+6g硫酸鉀+20ml濃硫酸+玻珠數(shù)粒先小火炭化,無泡沫后,加大火力,液體變藍(lán)綠透明,繼續(xù)加熱微沸30分鐘45度角消化終點(diǎn)瓶口不能對著人蓋上小漏斗YOURSITEHERE
在消化過程中,濃硫酸既可使有機(jī)物脫水后被炭化為碳、氫、氮;又能將有機(jī)物炭化后的碳轉(zhuǎn)化為二氧化碳,而硫酸則被還原成二氧化硫,二氧化硫使氮還原為氨,本身則被氧化為三氧化硫,氨隨之與硫酸作用生成硫酸銨留在酸性溶液中而氨則與硫酸結(jié)合成硫酸銨,留在溶液中。2NH2(CH2)2COOH+13(濃)H2SO4=
消化原理(NH4)2SO4+6CO2↑+12SO2↑+16H2OYOURSITEHERE消化過程中各種試劑發(fā)生的反應(yīng)
濃H2SO4:
A:使有機(jī)物炭化,生成碳,碳將H2SO4還原為SO2B:強(qiáng)氧化劑
C:蛋白質(zhì)與濃H2SO4生成NH3,CO2,SO2,H2OD:NH3與H2SO4生成硫酸銨YOURSITEHERE硫酸鉀作用:
提高溶液的沸點(diǎn),3400C提高到4000C,加快有機(jī)物分解。
K2SO4+H2SO4=2KHSO4
2KHSO4=K2SO4+H2O+SO3原因:隨著消化過程中硫酸不斷地被分解,水分不斷逸出而使硫酸鉀濃度增大,故溶液沸點(diǎn)升高。但硫酸鉀加入量不能太大,否則消化體系溫度過高,又會引起已生成的銨鹽發(fā)生熱分解而造成損失:
NH4)2SO4=NH3↑+(NH4)HSO42(NH4)HSO4=2NH3↑+2SO3↑+2H2O除硫酸鉀外也可加入硫酸鈉,氯化鉀等鹽類來提高沸點(diǎn),但效果不如硫酸鉀YOURSITEHERE硫酸銅的作用:
C+2CuSO4→Cu2SO4
+SO2↑+CO2↑CuSO4
+2H2SO4→2CuSO4+2H2O+SO2↑
A:
催化劑,加速氧化分解
B:
指示消化終點(diǎn):待有機(jī)物全部被消化完后,這時溶液具有清澈的藍(lán)綠色(如果還有硫酸亞銅存在,溶液將是褐色的。)
操作注意事項(xiàng)1.確保凱氏燒瓶的干燥2
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