實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)筆記

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)緒論實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)教學(xué)要求1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的三大特點(diǎn)2.概念：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化、3R、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)安死術(shù)、人道終止點(diǎn)3.動(dòng)物福利的五個(gè)基本原則和倫理基本原則4.哪些情況下不予通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查的關(guān)系6.我國(guó)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)施許可證管理制度、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理涉及的3證的名稱及意義7.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物危害的三大總要因素；實(shí)驗(yàn)廢棄物類別、處理原則、AAALAC的含義一、基本概念（一）★實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)（LaboratoryAnimalScience，LAS）:是以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為對(duì)象，并將培育的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用于生命科學(xué)等研究的一門研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的綜合學(xué)科?！种W(xué)科：①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳育種學(xué)：是利用遺傳調(diào)控的原理，控制動(dòng)物的遺傳特性，培育新的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種、品系和各種動(dòng)物模型，達(dá)到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化目的的科學(xué)。②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)：是研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和寄生蟲的分類學(xué)、生物學(xué)特性以及與人類和動(dòng)物之間相互關(guān)系的科學(xué)。③實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境生態(tài)學(xué)：是研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與外界環(huán)境相互關(guān)系的科學(xué)。主要研究理化因素、營(yíng)養(yǎng)因素、生物因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響。④實(shí)驗(yàn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)：研究各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、不同等級(jí)、各個(gè)發(fā)育時(shí)期的營(yíng)養(yǎng)要求，制定營(yíng)養(yǎng)配方，生產(chǎn)各種飼料，進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)監(jiān)測(cè)。⑤實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理：對(duì)各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化和法制化飼養(yǎng)管理。⑥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物醫(yī)學(xué)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病的診斷、預(yù)防、治療和在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。⑦比較醫(yī)學(xué)：研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疾病和人類的基本生命現(xiàn)象，與人類疾病進(jìn)行類比研究、建立動(dòng)物模型，研究人類相應(yīng)疾病。生物醫(yī)學(xué)比較醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：工具生物醫(yī)學(xué)比較醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：手段⑧動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)，研究實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)技術(shù)、技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。⑨實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理學(xué)：在保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果科學(xué)、可靠的前提下，針對(duì)人們的活動(dòng)對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生的影響，從倫理方面提出保護(hù)動(dòng)物的必要性（二）★實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（LaboratoryAnimal，LA）:是指經(jīng)人工培育，來源清楚，遺傳背景明確，對(duì)其攜帶的微生物和寄生蟲實(shí)行監(jiān)控，用于科學(xué)研究、教學(xué)、檢定、藥品和生物制品生產(chǎn)的動(dòng)物。1.分類★（1）按實(shí)際用途分①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：如前②經(jīng)濟(jì)動(dòng)物：是指作為人類社會(huì)生活需要而馴養(yǎng)、培育、繁殖的動(dòng)物。包括產(chǎn)業(yè)家畜和社會(huì)家畜。③野生動(dòng)物：是指為人類需要，從自然界捕獲的動(dòng)物，沒有進(jìn)行人工繁殖、飼養(yǎng)的動(dòng)物。④觀賞動(dòng)物：是指作為人類玩賞和公園里供游人觀賞而飼養(yǎng)的動(dòng)物。（2）按遺傳學(xué)要求分①近交系（inbredstrain）動(dòng)物：又叫純系動(dòng)物。是采用同胞兄妹或親子交配，連續(xù)繁殖20代以上所培育出來的遺傳上達(dá)到高度一致的動(dòng)物群。基因純合度可達(dá)98.6%。②突變系動(dòng)物：具有特殊突變基因的品系動(dòng)物。正常染色體基因發(fā)生突變，并具有各種遺傳缺陷的動(dòng)物。在長(zhǎng)期繁殖過程中，動(dòng)物的子代突然發(fā)生變異，變異的基因位點(diǎn)又可遺傳下去，或者即使沒有明確的基因位點(diǎn)，經(jīng)淘汰和選育后，仍能維持其穩(wěn)定的遺傳性狀。這種變異并能繼續(xù)保持遺傳基因特性的品系動(dòng)物，稱為突變系動(dòng)物。③雜交群(hybtids)動(dòng)物：兩個(gè)近交品系動(dòng)物之間進(jìn)行有計(jì)劃交配所獲得的第一代動(dòng)物。④封閉群(closedcolonyoroutbredstock)動(dòng)物：以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個(gè)種群，在不從外部引入新的血緣條件下，至少連續(xù)繁殖四代以上稱封閉群。一個(gè)動(dòng)物種群，在5年以上未從外部引進(jìn)其他任何新血緣品種品系，是由同一血緣品系進(jìn)行隨意交配，并在固定場(chǎng)所保存繁殖的動(dòng)物群，封閉群又稱遠(yuǎn)交群。（3）按微生物和寄生蟲監(jiān)控要求分①無菌動(dòng)物(germfreeanimal,GF)：體內(nèi)外無任何可檢測(cè)出得活的微生物和寄生蟲的動(dòng)物。來源于無菌手術(shù)剖腹取胎，飼養(yǎng)在無菌隔離器內(nèi)，人工喂乳或保姆代養(yǎng)培育而成。無菌動(dòng)物包括悉生動(dòng)物。悉生動(dòng)物是體內(nèi)攜帶有已知微生物的動(dòng)物。②無特定病原體動(dòng)物(specificpathogenfreeanmal,SPF)：體內(nèi)不存在特定病原微生物和寄生蟲的動(dòng)物，簡(jiǎn)稱SPF動(dòng)物。是指無傳染病的健康動(dòng)物。③清潔動(dòng)物(cleananimal,CL)：又稱最低限度疾病動(dòng)物，體內(nèi)外不攜帶人獸共患的病原體或動(dòng)物傳染病病原的動(dòng)物，不能帶有體外寄生蟲和大部分體內(nèi)寄生蟲。④普通動(dòng)物(conventionalanimal,CV)：未經(jīng)積極的微生物學(xué)控制，飼養(yǎng)在開放衛(wèi)生環(huán)境里的動(dòng)物。所謂普通動(dòng)物也并不是對(duì)微生物沒有一定控制的一般動(dòng)物，而是要求不帶能夠感染人的微生物和體外寄生蟲。這種動(dòng)物只能供教學(xué)和一般實(shí)驗(yàn)用。2.特點(diǎn)：①遺傳學(xué)要求；②微生物和寄生蟲的監(jiān)控要求；③應(yīng)用要求——主要應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)(實(shí)驗(yàn)動(dòng)物需凈化人畜共患疾病，以供實(shí)驗(yàn))3.常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：①小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬、猴7類動(dòng)物是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；②SPF雞；③樹鼩是云南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物④小型豬在一些省份有地方標(biāo)準(zhǔn)⑤其他屬于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(三)實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物（animalforresearch）：所有用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物統(tǒng)稱為實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物。包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、野生動(dòng)物、經(jīng)濟(jì)動(dòng)物和觀賞動(dòng)物等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物中的一個(gè)特殊群體。動(dòng)物人工培育繁殖遺傳背景物種來源微生物寄生蟲用途舉例實(shí)驗(yàn)動(dòng)物嚴(yán)格人工明確明確人工選擇科學(xué)實(shí)驗(yàn)DBA/2、Wisterrats野生動(dòng)物未經(jīng)自然不明確不明確自然選擇生態(tài)保護(hù)蛙、蛇（通常不包括珍稀野生動(dòng)物，需特許）經(jīng)濟(jì)動(dòng)物一定程度人工一般一般一般發(fā)展經(jīng)濟(jì)豬、牛觀賞動(dòng)物一定程度人工一般一般一般觀賞貓、鳥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的來源：野生動(dòng)物捕獲、人工繁殖、馴化經(jīng)濟(jì)動(dòng)物、觀賞動(dòng)物選擇、培育實(shí)驗(yàn)動(dòng)物★實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化（laboratoryAnimalization）:將野生動(dòng)物或經(jīng)濟(jì)/觀賞動(dòng)物馴化、培育成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的過程。（四）★動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（animalexperiment）：為了可接受的目的而使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，這一過程可能造成動(dòng)物的疼痛、痛苦、苦惱、持久性損傷、受孕、生育等，實(shí)驗(yàn)過程包括實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)中、試驗(yàn)后過程。不包括執(zhí)業(yè)獸師的臨床醫(yī)療行為，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆蠂?guó)家法律、法規(guī)要求和國(guó)際通行原則?！鷮?shí)驗(yàn)動(dòng)物在生物醫(yī)學(xué)研究中的意義：1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生物醫(yī)學(xué)研究中的意義人類的替難者；“活”的試劑2.AEIR要素：在生命科學(xué)領(lǐng)域里進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究有四個(gè)支撐條件，即AEIR要素。即A：Animal（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物）；E：Equipment（儀器設(shè)備）；I：Information（情報(bào)信息）；R：Reagent（化學(xué)試劑）二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利（labwelfare）：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利屬于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理的范圍。指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一種康樂狀態(tài)。在此狀態(tài)下，其基本需求得到滿足，而痛苦被減至最小。其實(shí)質(zhì)是保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不受虐待，并得到合理照料。PS:“動(dòng)物福利”(AnimalWelfare)最初由休斯于1976年提出,是指飼養(yǎng)農(nóng)場(chǎng)中的動(dòng)物與其環(huán)境協(xié)調(diào)一致的精神和生理完全健康的狀態(tài)（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的五項(xiàng)基本福利——“五大自由”★不受饑渴之苦（生理福利）——提供適當(dāng)?shù)那鍧嶏嬎捅３纸】岛途λ枰氖澄?；生活舒適（環(huán)境福利）——提供適當(dāng)?shù)臈?chǎng)所，能夠舒適地休息和睡眠；不受疼痛、傷病之苦（衛(wèi)生福利）——做好防疫，預(yù)防疾病和給患病動(dòng)物及時(shí)診治；生活無恐懼和悲傷感（心理福利）——保證擁有良好的條件和處置（包括安樂死）；表達(dá)天性（行為福利）——提供足夠的空間、適當(dāng)?shù)脑O(shè)施以及與同類動(dòng)物伙伴在一起；（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)過程中的福利要求1.飼養(yǎng)設(shè)備；2.飼養(yǎng)環(huán)境；3.飼養(yǎng)管理：飼養(yǎng)密度、飼料、飲水、墊料（三）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前的福利要求1.科技人員素質(zhì)要求：注重醫(yī)學(xué)科研和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利協(xié)調(diào)發(fā)展2.對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備要求：手術(shù)臺(tái)應(yīng)設(shè)計(jì)科學(xué)、合理，符合動(dòng)物體型及解剖特性，使用方便3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循“3R”原則★“3R”即替代（Replacement）、減少（Reduction）和優(yōu)化（Refinement）（1）替代：是指使用沒有知覺的實(shí)驗(yàn)材料代替活體動(dòng)物，或使用低等動(dòng)物替代高等動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)，并獲得相同實(shí)驗(yàn)效果的科學(xué)方法。（2）減少：是指在科學(xué)研究中，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，使用較少量的動(dòng)物獲取同樣多的試驗(yàn)數(shù)據(jù)或使用一定數(shù)量的動(dòng)物能獲得更多的試驗(yàn)數(shù)據(jù)的科學(xué)方法。（3）優(yōu)化：是指在必須使用動(dòng)物進(jìn)行有關(guān)實(shí)驗(yàn)時(shí)，要盡量減少非人道程序?qū)?dòng)物的影響范圍和程度，可通過改進(jìn)和完善實(shí)驗(yàn)程序，避免減少或減輕給動(dòng)物造成的疼痛和不安，或?yàn)閯?dòng)物提供適宜的生活條件，已保證動(dòng)物的健康和康樂，保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性和提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的科學(xué)方法。（四）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中的福利要求1.科學(xué)的麻醉技術(shù):麻醉藥物、麻醉途徑、麻醉深度的科學(xué)性2.對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安慰：心理安慰，如撫摸、音樂、照明度3.科技人員的實(shí)驗(yàn)技術(shù)：動(dòng)作溫和、減少手術(shù)創(chuàng)面等(五)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后的福利要求1.對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的護(hù)理:注意觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的反應(yīng)，出現(xiàn)問題要及時(shí)處理2.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理：采用安樂死，減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物因死亡時(shí)疼痛而造成的折磨，將其尸體送至焚燒爐燒毀（六）倫理審查：是指參照國(guó)際上通行的倫理基本原則，結(jié)合我國(guó)醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展的現(xiàn)狀與趨勢(shì)，對(duì)醫(yī)學(xué)科學(xué)研究項(xiàng)目中涉及動(dòng)物的課題進(jìn)行審查，并作出結(jié)論性意見。1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理基本原則★①尊重動(dòng)物生命原則；②保證人員安全原則；③遵守人類道德標(biāo)準(zhǔn)原則；④利益平衡原則；⑤動(dòng)物與人法律地位不平等；⑥分類分步實(shí)施原則；2.昆醫(yī)大動(dòng)物倫理審查★①動(dòng)物倫理審查申請(qǐng)；②動(dòng)物質(zhì)量合格證；③設(shè)施許可證復(fù)印件及使用證明；④從業(yè)人員考核合格證書；3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查指南（審查內(nèi)容）①該實(shí)驗(yàn)是否有必要做？②實(shí)驗(yàn)是需要的，取得實(shí)驗(yàn)結(jié)果一定要通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)嗎？③動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是必須的，用什么動(dòng)物？需要用多少動(dòng)物？④動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？實(shí)驗(yàn)操作是否符合倫理要求？⑤實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，動(dòng)物去向？處死動(dòng)物的方法是否符合倫理要求？★安死術(shù)（euthanasia）:以迅速造成動(dòng)物意識(shí)喪失而致身體、心理最小痛苦的處死動(dòng)物的方法。具體要求依據(jù)動(dòng)物品種和實(shí)驗(yàn)類型決定?！锶说澜K止點(diǎn)（humanendponit）:考慮到對(duì)待動(dòng)物的要求和實(shí)驗(yàn)要求，合理終止動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)的時(shí)間。4.不予通過審查的理由★①抵觸、逃避，迫不得已；②描述不清、證據(jù)不足、材料不全；③無道理的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，不必要的動(dòng)物傷害；④人員未經(jīng)培訓(xùn)、無證上崗，有嚴(yán)重違反動(dòng)物倫理要求的人員；⑤設(shè)施不達(dá)標(biāo)，飼料、墊料、飲水不符合要求的；⑥無操作規(guī)程，或不按操作規(guī)程辦理，虐待動(dòng)物；⑦動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不合理；⑧實(shí)驗(yàn)室不能體現(xiàn)善待動(dòng)物、關(guān)注生命；⑨活體解剖不麻醉等極端操作；（七）動(dòng)物福利與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查的關(guān)系★1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利并不意味著就絕對(duì)的保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不受到任何傷害，而是在兼顧科學(xué)問題探索和在可能的基礎(chǔ)上最大限度的滿足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物維持生命、維持健康和提高舒適程度的需要兩方面。2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利貫穿實(shí)驗(yàn)動(dòng)物整個(gè)過程，科技人員應(yīng)時(shí)刻考慮到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的需要，尤其心理需要。3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為生命科學(xué)做出貢獻(xiàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查局限于涉及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的課題，科技人員應(yīng)該善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，具體體現(xiàn)在飼養(yǎng)管理過程以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)整個(gè)過程。（八）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生產(chǎn)安全1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全危害：在動(dòng)物生產(chǎn)、使用過程中，存在感染、繁殖病原體的可能及向周圍壞境擴(kuò)散病原微生物的危害，對(duì)人類和環(huán)境造成生物安全危害。★動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物危害的三大重要因素：動(dòng)物口氣凝膠、人獸共患病和實(shí)驗(yàn)室相關(guān)疾病感染2.★實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全：對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可能產(chǎn)生的潛在風(fēng)險(xiǎn)或顯示危害的防范控制3.防護(hù)生物安全措施——實(shí)驗(yàn)室規(guī)程的制定①實(shí)驗(yàn)設(shè)備的設(shè)置（一次隔離）②實(shí)驗(yàn)設(shè)施的規(guī)劃（二次隔離）③個(gè)人防護(hù)用品的準(zhǔn)備④感染動(dòng)物的飼養(yǎng)和管理以及生物危害的評(píng)估等4.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)廢棄物的處理（1）分類★①感染性廢棄物：如被動(dòng)物體液、血液污染的物品、墊料、污水等②化學(xué)性廢棄物：如毒性、腐蝕性、易燃易爆化學(xué)物品③藥物性廢棄物：如變質(zhì)或污染的藥物④創(chuàng)傷性廢棄物：如注射針頭、手術(shù)刀片等物品⑤病理性廢棄物：如動(dòng)物尸體、組織、器官等（2）處理原則：★按《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境與設(shè)施》處理①無害化、分類處理、專用包裝②動(dòng)物尸體需要集中放存冰柜、有資質(zhì)的醫(yī)療廢物處理機(jī)構(gòu)處理③感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的廢棄物先高壓滅菌、再處理三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行政許可從2002年推行行政許可制度，規(guī)范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理的市場(chǎng)準(zhǔn)入制度實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證辦理程序：《中華人民共和國(guó)行政許可法》、《云南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》、《云南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法》受理現(xiàn)場(chǎng)檢查驗(yàn)收行政許可（有效期5年）四、國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的現(xiàn)狀發(fā)與展趨勢(shì)（一）國(guó)外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)展趨勢(shì)與現(xiàn)狀1.質(zhì)量管理主要依靠市場(chǎng)機(jī)制和行也自律2.資源建設(shè)與共享列入長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展戰(zhàn)略性工作3.疾病模型和動(dòng)物替代研究越來越受歡迎4.支撐體系完善。業(yè)務(wù)呈現(xiàn)全球化5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員實(shí)行分類分級(jí)管理（二）國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)展趨勢(shì)與現(xiàn)狀1.形成了具有我國(guó)特色的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物法制化、規(guī)范化管理體制和發(fā)展模式2.建成了嚙齒類、實(shí)驗(yàn)犬、兔、禽類、小型豬和實(shí)驗(yàn)靈長(zhǎng)類的國(guó)家動(dòng)物種子中心和種植資源基地網(wǎng)絡(luò)3.科技投入的增長(zhǎng)及國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源的建設(shè)為科技創(chuàng)新提供了有力的保障；網(wǎng)絡(luò)信息技術(shù)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源和信息共享方面已廣泛應(yīng)用4.支撐實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)發(fā)展的支撐體系逐步得到建立和完善5.形成了專業(yè)技術(shù)配套、工作相對(duì)穩(wěn)定，高、中、初各類人才結(jié)構(gòu)基本合理的科技隊(duì)伍（三）我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作存在的問題1.行政許可管理和質(zhì)量監(jiān)督制度依據(jù)的法律體系尚不夠完善；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的保護(hù)、福利和倫理審查法缺失；很多用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物待制定、控制、標(biāo)記2.國(guó)家層面缺少監(jiān)管機(jī)構(gòu)，且法制化管理基金未落實(shí)3.缺乏保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源共享的有效機(jī)制4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物現(xiàn)有品種資源不足，自主創(chuàng)新能力薄弱5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保障體系建設(shè)滯后（檢測(cè)機(jī)構(gòu)、必要的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)等、飼料、墊料、相關(guān)的尖端設(shè)備等）6.從業(yè)人員資格認(rèn)可制度尚待建立，高級(jí)管理人員短缺五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物網(wǎng)站1.中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息網(wǎng)：2.北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息網(wǎng)：3.上海市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源信息網(wǎng)：4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物咨詢網(wǎng)（臺(tái)灣）：.tw/index./htw5.▲國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理認(rèn)證評(píng)估協(xié)會(huì)（AAALAC）:/6.國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)協(xié)會(huì)：/7.英國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)協(xié)會(huì)：http://www.lasa.co.uk/AAALACaccreditsyourentire“program”whichincludes:AAALACaccreditsyourentire“program”whichincludes:1.animalcareandusepoliciesandresponsibilities2.animalenvironment,housingandmanagement3.veterinarymedicalcare4.yourphysicalplant（設(shè)施設(shè)備條件）第一章實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制教學(xué)要求1.概念：inbredstrain、outbredstock/closedcolony；conventionalanimals，CV；cleananimal,CL；specilpathogenfreeanimals,SPF；ConventionalEnvironment；BarrierEnvironment；2.近交系和封閉群動(dòng)物特點(diǎn)3.掌握常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大小鼠、兔、豚鼠、犬、猴的微生物學(xué)的等級(jí)，了解流行性出血熱、狂犬病等主要人獸共患病4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群進(jìn)行微生物質(zhì)量檢測(cè)的頻次和樣本量5.不同環(huán)境飼養(yǎng)動(dòng)物的級(jí)別，普通和屏障動(dòng)物實(shí)驗(yàn)環(huán)境參數(shù)差別6.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施環(huán)境、動(dòng)態(tài)檢測(cè)哪兩類指標(biāo)，具體參數(shù)7.動(dòng)物進(jìn)入屏障設(shè)施的要求和合格的運(yùn)輸包裝要求8.單走道和雙走道屏障設(shè)施空氣壓力布局9.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料質(zhì)量控制環(huán)節(jié)10.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)非營(yíng)養(yǎng)因素研究的影響的表現(xiàn)11.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制的內(nèi)容（包括對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳質(zhì)量、微生物寄生蟲質(zhì)量、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)學(xué)質(zhì)量的控制）一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)遺傳質(zhì)量控制（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳類別1.★近交系（inbredstrain）：又叫純系動(dòng)物。是采用全同胞兄妹或親子交配，連續(xù)繁殖20代以上所培育出來的遺傳上達(dá)到高度純合和穩(wěn)定的品系動(dòng)物?；蚣兒隙瓤蛇_(dá)98.6%（F20=98.6%）。（1）原理：通過連續(xù)近親交配，雜合子逐帶分離，提高群體的基因純合比率（2）近交系的亞系：一個(gè)近交系內(nèi)各個(gè)分支間，存在遺傳差異→發(fā)現(xiàn)一個(gè)分支與其他分支的差異，原因是殘留雜合、突變或者是遺傳污染（3）優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)★優(yōu)點(diǎn)：①遺傳性狀和表現(xiàn)性狀具一致性；②品系特殊性③性狀穩(wěn)定，國(guó)際流通性佳近交系的名稱縮寫近交系名稱縮寫名稱C57BL/6→近交系的名稱縮寫近交系名稱縮寫名稱C57BL/6→B6BALB/c→CDBA/2→D2C3H→C3AKR→AKHRS/J→HRC57BR→BRC57BL→BC57L→L②本品系的特征；③昂貴（4）分類：①普通近交系（commoninbredstrain）②雜交一代（F1）：（C57BL/6XDBA/2）F1=B6D2F1③同源突變近交系：BABLB/c-nu（品系/突變基因）④同源導(dǎo)入近交系：B10.129-H-12b(接受者.供體-導(dǎo)入基因)⑤重組近交系：如CXB1到CXB71.重組近交系（RecombinantInbredStrain)簡(jiǎn)稱RI定義：由兩個(gè)近交系雜交后，經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配育成的近交系。命名：1.重組近交系（RecombinantInbredStrain)簡(jiǎn)稱RI定義：由兩個(gè)近交系雜交后，經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配育成的近交系。命名：由兩個(gè)親代近交系的縮寫名稱中間加大寫英文字母X。2.重組同類系（RecombinantCongenicStrain)簡(jiǎn)稱RC定義：由兩個(gè)近交系雜交后，子代與兩個(gè)親代中的一個(gè)進(jìn)行數(shù)次回交（通常2次），通過不對(duì)特殊基因進(jìn)行選擇的近親交配而育成的近交系。命名：兩個(gè)親代近交系縮寫名稱中間加小寫字母c。3.同源突變系（CoisogenicInbredstrain)定義：兩個(gè)近交系，除了一個(gè)指明位點(diǎn)等位基因不同外，其遺傳基因全部相同的品系。命名：由發(fā)生突變的近交系名稱后加突變基因符號(hào)（用英文斜體印刷體），二者之間以連接號(hào)分開。如：DBA/Ha-D4.同源導(dǎo)入系（CongenicInbredStrain)定義：通過雜交、互交或回交等方式將一個(gè)基因?qū)氲浇幌抵?，所形成的新的近交系只在一個(gè)很小的染色體片段上的基因不同，也稱同類系。命名：由以下三部分組成：a.接受導(dǎo)入近交系縮寫名稱；b.提供導(dǎo)入基因的近交系縮寫名稱并與a之間用英文句號(hào)分開；c.導(dǎo)入基因符號(hào)（英文斜體），與b之間用連字符分開。如：B10.129-H-12b，表示該同類系背景為C57BL/10,導(dǎo)入基因?yàn)镠-12b,基因提供者為129。2.★封閉群(closedcolonyoroutbredstock)：又稱遠(yuǎn)交系，以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個(gè)種群，在不從外部引入新個(gè)體條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上稱封閉群?！攸c(diǎn)★①相對(duì)穩(wěn)定性：群體內(nèi)基因頻率穩(wěn)定，保證群體相對(duì)穩(wěn)定的遺傳特征②具有類似人類的遺傳異質(zhì)性的遺傳組成：在遺傳研究，藥物篩選和毒性研究中具有不可替代的作用③繁殖力、抵抗力強(qiáng)，生產(chǎn)成本低，廣泛應(yīng)用④動(dòng)物遺傳組成有很高雜合性，個(gè)體間反應(yīng)性有差異，重復(fù)性和一致性不如近交系（二）遺傳質(zhì)量控制的內(nèi)容（GB14923-2010）1.生產(chǎn)過程監(jiān)控：①科學(xué)引種是保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量的源頭（國(guó)家嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種子中心）②科學(xué)繁殖和生產(chǎn)，獲得遺傳上高限定和高穩(wěn)定的動(dòng)物品系2.定期遺傳學(xué)質(zhì)量監(jiān)控目的：檢測(cè)基因的純合性基因多態(tài)性和雜合性，基因雜合率10%即可成一個(gè)封閉群→國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種子中心：①嚙齒類（北京）；②嚙齒類分中心；③國(guó)家兔類（上海）；④國(guó)家禽類（哈爾濱）；⑤國(guó)家犬類（廣州）3.生產(chǎn)方法與繁殖（1）近交系基礎(chǔ)群：全同胞交配--詳細(xì)個(gè)體記錄和繁殖系譜、生育記錄不超過5-7代血緣擴(kuò)大群：全同胞交配--個(gè)體繁殖記錄卡生產(chǎn)群：隨機(jī)交配，繁殖代數(shù)不超過4代/提供實(shí)驗(yàn)用近交動(dòng)物（2）封閉群①引種：數(shù)量足夠/小型嚙齒類不少于25對(duì)，以保證遺傳異質(zhì)性及基因多態(tài)性；②繁殖：非近親交配以保證基因庫(kù)穩(wěn)定、每代近交系數(shù)上不超過15%二、微生物寄生蟲學(xué)質(zhì)量控制感染危害實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體表、粘膜和消化道內(nèi)容物中微生物共生微生物病原體對(duì)宿主有益條件致病烈性傳染病對(duì)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生不良影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群全部毀滅影響人類?。ㄒ唬?shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物寄生蟲學(xué)分級(jí)★1.★普通級(jí)動(dòng)物(conventionalanimal,CV)：病原學(xué)控制級(jí)別最低，要求不攜帶所規(guī)定的人畜共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病病原。2.★清潔級(jí)動(dòng)物（cleananimal,CL）：除普通級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原體。PS：是我國(guó)特設(shè)的等級(jí)，適宜作短期和部分科研實(shí)驗(yàn)。飼養(yǎng)于屏障環(huán)境，物品需要滅菌。工作人員需穿無菌服進(jìn)入。常來自屏障環(huán)境的SPF動(dòng)物的后代或降級(jí)。3.★無特定病原體動(dòng)物(specificpathogenfreeanmal,SPF)：除清潔級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶有潛在感染或條件治病的病原體及對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原。PS：①目前國(guó)際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，必須飼養(yǎng)于屏障動(dòng)物，保護(hù)動(dòng)物最好飼養(yǎng)于隔離器中；②SPF動(dòng)物的培育，一般是先培育出無菌動(dòng)物，然后再將其后代轉(zhuǎn)到屏障環(huán)境中進(jìn)行繁育建群；4.★無菌動(dòng)物(germfreeanimal,GF)和悉生動(dòng)物（gnotobioticanimals,GN）:來源于無菌手術(shù)剖腹取胎或無菌卵的孵化，要求飼養(yǎng)于凈化級(jí)別100級(jí)的隔離環(huán)境中，一切用品經(jīng)過嚴(yán)格包裝滅菌后，通過傳遞倉(cāng)庫(kù)送入隔離器，人則通過手套進(jìn)行間接實(shí)驗(yàn)操作。無菌動(dòng)物包括悉生動(dòng)物，悉生動(dòng)物是體內(nèi)攜帶有已知微生物的動(dòng)物。（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物、寄生蟲檢測(cè)1.我國(guó)常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物、寄生蟲級(jí)別（1）大鼠/小鼠：3個(gè)級(jí)別（清潔級(jí)、SPF級(jí)、無菌級(jí)）(2)豚鼠/地鼠/兔：4個(gè)級(jí)別（3）犬/猴：2個(gè)級(jí)別普通級(jí)、S平、SPF級(jí)（4）SPF級(jí)雞蛋實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物、寄生蟲國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)具體規(guī)定以上動(dòng)物應(yīng)排除的具體病原名稱2.國(guó)家規(guī)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物、寄生蟲檢測(cè)頻率★（1）檢測(cè)頻率：①普通級(jí)、清潔級(jí)、SPF級(jí)動(dòng)物每三個(gè)月檢測(cè)1次；②無菌動(dòng)物每年檢測(cè)1次；（2）取樣要求：①群體<100只，取5只；②群體100-500只，取10只；③群體>500只，取20只；3.主要的人獸共患?。?）流行性出血熱（HFRS）：漢坦病毒引起，主要發(fā)生在大鼠的烈性傳染病。人類主要特征：高熱、出血性腎損傷、廣泛性充出血。主要的傳染源為家鼠、田鼠和倉(cāng)鼠等?！A(yù)防措施：定期檢查，杜絕外來傳染源（2）狂犬?。≧V）：狂犬病毒引起。主要特征：侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)，呈現(xiàn)狂躁不安、意識(shí)紊亂、最后麻痹死亡，幾乎所有溫血?jiǎng)游锒家赘?，潛伏?-8周，最短4天，最長(zhǎng)可達(dá)數(shù)10年?！A(yù)防措施：對(duì)犬接種疫苗，加強(qiáng)管理（3）猴B病毒?。河砂捳畈《疽稹：锸亲匀凰拗?，多數(shù)呈良性經(jīng)過。人類感染主要表現(xiàn)在腦脊髓癥狀，多數(shù)發(fā)生死亡。家兔對(duì)B病毒易感，口腔黏膜有小皰疹、潰瘍等。研究工作必須在P3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行?！A(yù)防措施：被猴抓傷后立即進(jìn)行清創(chuàng)處理，定期檢測(cè)（4）弓形蟲（Toxoplasmagondii）?。盒∈?、大鼠、地鼠、豚鼠、家兔和非人靈長(zhǎng)類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及貓、豬等為中間宿主。貓為終端宿主，引起腸粘膜和腸系膜淋巴結(jié)、心、眼、腎上腺、脾、腦、肺、肝、胎盤及肌肉組織的壞死和損傷。（5）兔螨蟲?。和寐云つw病，一般稱身癬、耳癬。三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的控制外環(huán)境：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施應(yīng)避開自然疫源地。生產(chǎn)設(shè)施宜遠(yuǎn)離可能產(chǎn)生交叉感染的動(dòng)物飼養(yǎng)產(chǎn)所，宜選擇在空氣質(zhì)量及自然環(huán)境較好的區(qū)域。內(nèi)環(huán)境：溫度、最大日溫差、相對(duì)濕度、最小換氣次數(shù)、籠具處氣流速度、與相通房間最小靜壓差、空氣潔凈度、沉降菌、氨濃度、噪聲、動(dòng)物照度、最低工作照度、晝夜明暗交替時(shí)間等13項(xiàng)PS:國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施》和《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施建筑技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定了小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬、猴等7類動(dòng)物的生產(chǎn)區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)環(huán)境指標(biāo)要求。（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境（4種環(huán)境★）環(huán)境分類使用功能適用動(dòng)物等級(jí)普通環(huán)境實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫基礎(chǔ)級(jí)屏障環(huán)境正壓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫清潔級(jí)、SPF級(jí)負(fù)壓動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫隔離環(huán)境正壓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫SPF級(jí)、悉生動(dòng)物、無菌動(dòng)物負(fù)壓動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫屏障環(huán)境與普通環(huán)境參數(shù)的比較▲生產(chǎn)設(shè)施實(shí)驗(yàn)設(shè)施屏障環(huán)境13項(xiàng)普通環(huán)境日溫差、靜壓差、空氣潔凈度、沉降菌4項(xiàng)未作要求靜壓差、空氣潔凈度、沉降菌3項(xiàng)未作要求1.★普通環(huán)境（ConventionalEnvironment,CV）:符合動(dòng)物居住基本要求，控制人員、物品、動(dòng)物出入，不能完全控制傳染因子，但能控制野生動(dòng)物的進(jìn)入，適用于飼養(yǎng)基礎(chǔ)級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。2.★屏障環(huán)境（BarrierEnvironment）:符合動(dòng)物居住要求，嚴(yán)格控制人員、物品、動(dòng)物、空氣出入，適用于飼育清潔級(jí)和無特定病原體實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。3.隔離環(huán)境（IsolationEnvironment）:采用無菌隔離裝置（隔離器）以保持裝置內(nèi)無菌狀態(tài)或無外來污染物，裝置內(nèi)的空氣，飼料、水、墊料和設(shè)備應(yīng)無菌，動(dòng)物和無聊的傳遞系統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對(duì)隔離，又滿足轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)與內(nèi)環(huán)境一致，適用于飼養(yǎng)無特定病原體、悉生動(dòng)物及無菌級(jí)動(dòng)物。（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施分類空氣凈化的控制程度使用功能平面布局具體應(yīng)用普通環(huán)境設(shè)施生產(chǎn)設(shè)施無走廊式臨時(shí)使用；屏障環(huán)境設(shè)施（正壓和負(fù)壓）實(shí)驗(yàn)設(shè)施單走廊式：易污染雙走廊式：有效分割潔污多走廊式：實(shí)際是多個(gè)雙走廊的組合，如三走廊式。但空間利用比率低、投資大、維持費(fèi)用高隔離環(huán)境設(shè)施（正壓和負(fù)壓）特殊實(shí)驗(yàn)設(shè)施不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施人員、物種、動(dòng)物的進(jìn)入（了解）普通環(huán)境設(shè)施▲屏障環(huán)境設(shè)施隔離環(huán)境設(shè)施（隔離器）空氣有換氣次數(shù)、風(fēng)速要求（通風(fēng)設(shè)備）增加空氣潔凈度（7）、沉降菌、相通區(qū)域的最小靜壓差3項(xiàng)要求（凈化設(shè)備）提高了空氣潔凈度（5或7）、靜壓差的要求，不得有沉降菌（凈化設(shè)備）物品（飼料、飲水、墊料、籠具、實(shí)驗(yàn)器材等）有一定消毒措施；飲用水符合城市飲用水要求經(jīng)高壓滅菌、傳遞消毒、渡槽消毒傳入；飲用水和屏障內(nèi)用水均為無菌水所有物品經(jīng)高壓滅菌后進(jìn)入人員著工作服進(jìn)入著無菌工作服進(jìn)入不進(jìn)入，通過手套操作■屏障環(huán)境1.屏障環(huán)境的組成管理者、物品庫(kù)、值班室、普通更衣室、衛(wèi)生間、工人休息室前區(qū)動(dòng)物接收處、動(dòng)物檢疫及觀察室、質(zhì)檢室組成中心控制區(qū)潔凈更衣室、潔凈庫(kù)和清潔準(zhǔn)備室、清潔走廊、實(shí)驗(yàn)室或動(dòng)物飼養(yǎng)室、污物走廊、緩沖間后區(qū)洗刷消毒用房、動(dòng)物尸體的存放和焚燒及污物的處理設(shè)施、空調(diào)機(jī)房、配電房、機(jī)械維修房等2.屏障設(shè)施：①雙扉鍋：蒸汽高壓滅菌；②傳遞窗：紫外滅菌③緩沖間:紫外滅菌，防氣流直通④更衣室：紫外滅菌，防氣流直通⑤淋浴室和風(fēng)淋室：個(gè)人衛(wèi)生⑥藥液渡槽：藥液浸泡滅菌⑦環(huán)氧乙烷消毒柜：氣體滅菌⑧空氣過濾器：保證空氣的潔凈度⑨氣閘：防止內(nèi)外氣流互通3.屏障設(shè)施空氣壓力布局★常見屏障設(shè)施的布局為單走廊式、雙走廊式和三走廊式①單走廊式正壓屏障設(shè)施應(yīng)保證：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)區(qū)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)區(qū)壓力最高；②雙走廊式或多走廊式正壓屏障設(shè)施靜壓差應(yīng)保證：潔凈走廊>實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)區(qū)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)區(qū)>污物走廊；③單走廊式的布局，流線上下不可避免有交叉，應(yīng)通過管理盡量避免相互污染，如采取嚴(yán)格包裝、分時(shí)控制、前室再次更衣等措施；→進(jìn)出一般原則①人員、動(dòng)物、物品（如飼料、墊料、飲水、試劑、實(shí)驗(yàn)器材等）需要進(jìn)出屏障設(shè)施，形成了人流、動(dòng)物流和物流，應(yīng)避免交叉污染→進(jìn)出一般原則①人員、動(dòng)物、物品（如飼料、墊料、飲水、試劑、實(shí)驗(yàn)器材等）需要進(jìn)出屏障設(shè)施，形成了人流、動(dòng)物流和物流，應(yīng)避免交叉污染②動(dòng)物進(jìn)入宜與人員和物品進(jìn)入的通道分開③人流：進(jìn)與出盡量不交叉，以免出去的人流污染進(jìn)入的④潔物進(jìn)與污物出路線盡量不交叉⑤動(dòng)物進(jìn)入與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后運(yùn)出路線盡量不交叉⑥不同人員之間、不同動(dòng)物之間也應(yīng)避免相互交叉污染（1）人員流向：外環(huán)境→一更→淋?。ㄈ魺o淋浴裝置，應(yīng)用消毒間）→二更→入口緩沖間→潔凈走廊→潔凈庫(kù)→潔凈走廊→動(dòng)物飼養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)操作間動(dòng)物檢疫觀察室（有關(guān)人員）→污染走廊→出口緩沖→一更→淋?。ū匾獣r(shí)）★★人員進(jìn)入屏障動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室1.換鞋：在緩沖間鞋柜2.脫外衣、私人物品：一更3.洗手：一更洗手池4.二更順序穿戴：帽子→口罩→手套→連體滅菌服→鞋套5.進(jìn)入室內(nèi)準(zhǔn)備間、實(shí)驗(yàn)室、或者飼養(yǎng)室進(jìn)行相應(yīng)操作6.進(jìn)出時(shí)不得同時(shí)開啟雙門房間的兩扇門；口罩、帽、無菌工作服、手套、鞋套要穿戴嚴(yán)實(shí)，盡量不露出自己的衣服和皮膚→動(dòng)物進(jìn)入屏障動(dòng)物房要求①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須是清潔級(jí)或以上級(jí)別的動(dòng)物：動(dòng)物質(zhì)量合格證原件、生產(chǎn)許可證復(fù)印件②合格的運(yùn)輸盒包裝：清潔級(jí)和SPF級(jí)的動(dòng)物運(yùn)輸盒必須以高效濾膜封閉窗口。以膠帶封口，封口破損或?yàn)V膜破損者不能進(jìn)入屏障系統(tǒng)（2）動(dòng)物流向：外環(huán)境→傳遞窗（間）→檢疫觀察室→潔凈走廊→動(dòng)物飼養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)操作間→污物走廊→（解剖室→→動(dòng)物進(jìn)入屏障動(dòng)物房要求①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須是清潔級(jí)或以上級(jí)別的動(dòng)物：動(dòng)物質(zhì)量合格證原件、生產(chǎn)許可證復(fù)印件②合格的運(yùn)輸盒包裝：清潔級(jí)和SPF級(jí)的動(dòng)物運(yùn)輸盒必須以高效濾膜封閉窗口。以膠帶封口，封口破損或?yàn)V膜破損者不能進(jìn)入屏障系統(tǒng)（3）物品流向：外環(huán)境清洗消毒→高壓滅菌（傳遞窗）→潔物儲(chǔ)存室→潔凈走廊→動(dòng)物飼養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)操作間、動(dòng)物檢疫間（有關(guān)物品）→污物走廊（解剖室→）（無害化消毒→）出口緩沖間→尸體暫存→無害化處理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)廢棄物品的處理①墊料等廢棄物與動(dòng)物籠盒一起從緩沖間出系統(tǒng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)廢棄物品的處理①墊料等廢棄物與動(dòng)物籠盒一起從緩沖間出系統(tǒng)②注射器等尖銳物品上套子后再放入垃圾桶，以防刺傷工作人員③口罩、手套、帽子、鞋套等一次性物品④滅菌工作服放在一更，工作人員對(duì)其進(jìn)行處理5.屏障環(huán)境設(shè)施的輔助生產(chǎn)區(qū)（輔助實(shí)驗(yàn)室）主要環(huán)境指標(biāo)（GB14925-2010）房間名稱潔凈度級(jí)別最小換氣次數(shù)/(次/h)>=相通區(qū)域的最小壓差/Pa溫度/℃相對(duì)濕度/%噪聲/dB(A)<=照度/LX>=潔物儲(chǔ)存室7151018-2830-7060150無害化消毒室7或815或101018-28-60150潔凈走廊7151018-2830-7060150污物走廊7或815或101018-28-60150入口緩沖間715或101018-28-60150出口緩沖間7或815或101018-28-60150二更7151018-28-60150清洗消毒室-4-18-28-60150淋浴室---18-28-60100獨(dú)立通氣凈化系統(tǒng)（IndividuallyVentilatedCages，IVC）----小規(guī)模短暫實(shí)驗(yàn)獨(dú)立通氣凈化系統(tǒng)（IndividuallyVentilatedCages，IVC）----小規(guī)模短暫實(shí)驗(yàn)隔離器①隔離器室：應(yīng)密封、無泄漏②傳遞系統(tǒng)：應(yīng)密封、有不同種類動(dòng)物、物品傳遞空間③操作系統(tǒng)：連接隔離器室操作用的膠質(zhì)手套應(yīng)密封、大小適用④進(jìn)出風(fēng)過濾系統(tǒng)：進(jìn)風(fēng)處應(yīng)有初、中、高效過濾，隔離器室內(nèi)在靜態(tài)時(shí)的送風(fēng)口潔凈度達(dá)到5級(jí)，出風(fēng)處應(yīng)有中、高效過濾（三）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施環(huán)境檢測(cè)1.檢測(cè)指標(biāo)（13項(xiàng)）（1）日常性檢測(cè)：溫度、相對(duì)濕度、壓差（2）監(jiān)督性檢測(cè)：日溫差、噪聲、氣流速度、照度、氨氣濃度（3）必要時(shí)檢測(cè)：空氣潔凈度、換氣次數(shù)、沉降菌最平均濃度、晝夜明暗交替時(shí)間2.檢測(cè)方式（1）靜態(tài)檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施已建成，空調(diào)凈化系統(tǒng)和設(shè)備正常運(yùn)行，但無工作人員和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的狀態(tài)稱為靜態(tài)。靜態(tài)檢測(cè)除氨濃度外的所有指標(biāo)，新建設(shè)施、重新啟用的設(shè)施，在引進(jìn)動(dòng)物前應(yīng)進(jìn)行靜態(tài)檢測(cè)▲（2）動(dòng)態(tài)檢測(cè)：日常性檢測(cè)指標(biāo)和監(jiān)督性檢測(cè)指標(biāo)（3）設(shè)施設(shè)備調(diào)試和/或更換過濾后檢測(cè)必要檢測(cè)指標(biāo)四、營(yíng)養(yǎng)學(xué)質(zhì)量控制①水（飲水、飼料水、代謝水5-10%）；②蛋白質(zhì)；①水（飲水、飼料水、代謝水5-10%）；②蛋白質(zhì)；③礦物質(zhì)；④碳水化合物；⑤脂類；⑥維生素（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水的質(zhì)量控制①對(duì)于清潔級(jí)及以上級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其飲用水必須經(jīng)過高溫高壓滅菌處理②普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飲用水應(yīng)符合人飲用水質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（2）理想蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的氨基酸與動(dòng)物所需蛋白質(zhì)的氨基酸的組成和比例一致，包括必需氨基酸之間，必需氨基酸和非必須氨基酸之間的組成和比例，動(dòng)物對(duì)該種蛋白質(zhì)的利用率應(yīng)為100%2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要由兩部分組成（維持需要、生產(chǎn)需要）①維持動(dòng)物正常體溫、呼吸、心跳、基礎(chǔ)代謝等各項(xiàng)基本生命活動(dòng)及滿足動(dòng)物隨意活動(dòng)的需要，即維持需要②供動(dòng)物的生長(zhǎng)、妊娠、泌乳、產(chǎn)肉、產(chǎn)蛋等生產(chǎn)活動(dòng)的需要，即生產(chǎn)需要3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料許可我國(guó)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料生產(chǎn)和銷售實(shí)行許可制度，要求生產(chǎn)企業(yè)必須具備一定的生產(chǎn)條件，取得省科技廳核發(fā)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料生產(chǎn)許可》后，才有資格生產(chǎn)銷售實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料PS:我國(guó)第一部《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全價(jià)飼料營(yíng)養(yǎng)》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB14924-21994）,目前實(shí)施的是2001版（GB14924-2001）4.飼料的質(zhì)量控制★①飼料的加工調(diào)制：飼料原料、飼料配方、清除有害有毒物質(zhì)②飼料的消毒：飼料消毒對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的破壞主要消毒方法：高溫高壓消毒和射線滅菌法③飼料的儲(chǔ)存:冬春季3個(gè)月，雨季2個(gè)月④進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)5.各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)和飼料每日飲水量、耗料量小鼠各占體重1/4大鼠各占體重1/10（1）大鼠和小鼠的飼料①蛋白質(zhì)20%以上②特別補(bǔ)充V.A、V.E③飼料形式：全價(jià)顆粒飼料④為防止霉變，水分含量應(yīng)<=10%⑤防止飼料細(xì)菌數(shù)超標(biāo)⑥防止飼料原料重金屬污染每日耗料成年兔子（2-3kg）各占體重1/15成年豚鼠(約600g)（2）豚鼠和兔子的飼料①蛋白質(zhì)20%②粗纖維10-20%③特別補(bǔ)充V.C（豚鼠不會(huì)合成，飲水中添加）或青飼料6.營(yíng)養(yǎng)素對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響早期的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究主要目的在于保證動(dòng)物正常的生長(zhǎng)和繁殖，即營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生長(zhǎng)和生產(chǎn)的影響，但近年來，人們逐步認(rèn)識(shí)到動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)狀況與其生化指標(biāo)、免疫反應(yīng)息息相關(guān)，進(jìn)而對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果產(chǎn)生很大的影響。（1）進(jìn)行非營(yíng)養(yǎng)研究時(shí)的影響★①對(duì)動(dòng)物采食量的影響②對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的影響---生長(zhǎng)曲線、臟器系數(shù)、體重③對(duì)動(dòng)物生理生化指標(biāo)的影響a.血液、臟器營(yíng)養(yǎng)素合成的改變；b.對(duì)動(dòng)物免疫功能的影響；c.最佳免疫的營(yíng)養(yǎng)需求要高于以政策生長(zhǎng)發(fā)育、生化指標(biāo)為飼養(yǎng)要求的營(yíng)養(yǎng)需求④對(duì)動(dòng)物疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的影響⑤對(duì)動(dòng)物麻醉反應(yīng)的影響⑥其他因素的影響---抗?fàn)I養(yǎng)因子、毒素或農(nóng)藥殘留（2）進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)研究時(shí)的影響①動(dòng)物早期的營(yíng)養(yǎng)狀況對(duì)營(yíng)養(yǎng)研究的影響----早期的營(yíng)養(yǎng)狀況、監(jiān)測(cè)與研究課題有關(guān)的營(yíng)養(yǎng)狀況指標(biāo)②動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)的營(yíng)養(yǎng)對(duì)所研究營(yíng)養(yǎng)問題的影響----控制除研究因素本身，重視與研究因素密切相關(guān)的因素③動(dòng)物日糧對(duì)營(yíng)養(yǎng)研究的影響----動(dòng)物日糧的種類對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果比如：鉛在純養(yǎng)分日糧中比天然日糧中表現(xiàn)較強(qiáng)的毒性，即使同為天然養(yǎng)分日糧，因其組分不同，也會(huì)得到不同的試驗(yàn)結(jié)果，因此，應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮托再|(zhì)，正確的選擇和配合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物日糧，以確保試驗(yàn)取得成功第二章常見實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生物學(xué)特性及比較應(yīng)用教學(xué)要求1.裸小鼠2.小鼠、大鼠、豚鼠、兔、小型豬在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用3.在生物醫(yī)學(xué)中的最常用的小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、猴的品系名稱4.為什么畢格犬是公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)用犬5.樹鼩特殊的分類地位和應(yīng)用一、小鼠（mouse,Musmuscculus）（一）生物學(xué)特性1.哺乳綱嚙齒目下頜骨形態(tài)由某些多態(tài)性位點(diǎn)決定，其形態(tài)有品系特征，是遺傳力極高的性狀。2.胃容量小，約1-1.5ml，不耐饑餓；灌胃給藥不超過1.0ml3.3周離乳，5-6周即可達(dá)到18-20g。一只成年小鼠的食料量為4-8克/天，飲水量4-7毫升/天，排糞量1.4-2.8克/天，排尿量1-3毫升/天4.生殖生理：成熟早，繁殖能力強(qiáng)。①6-7周齡性成熟。②體成熟：雄鼠70-80日齡；雌鼠65-75日齡；③雌鼠性周期4-5天，發(fā)情后2-3小時(shí)排卵；④妊娠期和哺乳期各21天。妊娠期/哺乳期性周期各階段陰道涂片特征階段涂片卵巢動(dòng)情前期僅有有核上皮細(xì)胞卵泡增大動(dòng)情期角質(zhì)化上皮細(xì)胞排卵動(dòng)情后期有核上皮細(xì)胞混有白細(xì)胞卵泡閉鎖，黃體生成動(dòng)情間期白細(xì)胞、少數(shù)有核細(xì)胞及粘液卵泡生長(zhǎng)陰道栓：雄性生殖腺分泌物在雌鼠陰道內(nèi)凝固形成陰道栓，可維持10-12h，作為妊娠起始時(shí)間的依據(jù)。5.小鼠生理、血液學(xué)指標(biāo)體溫38(37-39)℃呼吸頻率163（84-230）次/分心跳頻率625（470-780）次/分RBC9.3(7.7-12.5)百萬(wàn)/mm3Hb14.8(10-19)g/100mlWBC8.0(6-12)千/mm3耗氧量1530mm2/g活體重通氣量24（11-36）ml/分潮氣量0.15（0.09-0.23）mlSBP113（95-125）mmHg、DBP81(67-90)mmHg總蛋白4.8（4.2-5.5）g%(二)常用近交系小鼠名稱縮寫品系名縮寫品系名縮寫B(tài)ALB/cCCBACBC57BL/10B10AKRAKC57BL/6B6DBA/1D1C57BRBRDBA/2D2C57LLHRS/JHRC3HC3STSS(三)常見突變系動(dòng)物★1.裸小鼠和裸大鼠：細(xì)胞免疫缺陷2.Scid小鼠：少數(shù)Scid小鼠，Scid小鼠的滲漏現(xiàn)象。其滲漏現(xiàn)象不遺傳，但與小鼠的年齡、品系、飼養(yǎng)環(huán)境有關(guān)3.肌萎縮癥（dy）小鼠：進(jìn)行性肌衰弱和廣泛性肌萎縮4.肥胖癥鼠：ob突變型；ad突變型成年肥胖和糖尿癥；NZO突變型；Fa突變型伴糖尿病5.糖尿?。―eabetes,簡(jiǎn)稱db）小鼠6.自發(fā)性高血壓大鼠（SpoataneouslyHypertensiveRat,SHR）：正常110-120mmHg；170-180mmHg，最高達(dá)200mmHg，并有高血壓性心血管病變7.侏儒癥（dw）小鼠：垂體性侏儒癥8.貧血小鼠：顯性斑點(diǎn)突變：an突變；f突變；JO突變；ha突變（四）裸小鼠常用裸小鼠突變系：BALB/c-nu；NC-nu；C3H-nu；Swiss-nu等裸基因生物學(xué)特性★裸基因1.細(xì)胞免疫低下；2.B淋巴細(xì)胞功能正常；3.腫瘤學(xué)方面不可缺少的模型動(dòng)物之一①腫瘤模型：皮下、腋下、頸部注射腫瘤細(xì)胞；②移植器官模型；③注意營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)；4.繁殖：采用純合型雄鼠與雜合型雌鼠交配（♂nu/nu×♀nu/+）可獲1/2純合型子代→轉(zhuǎn)基因鼠命名品系-Tg〔(基因)〕〔（序號(hào)）〕〔Labcode〕比如FVB/NCrl-Tg(Pgk1-EGFP)3Narl品系轉(zhuǎn)基因標(biāo)記（五）封閉群小鼠1.KM小鼠（昆明鼠）1946,1952年，1954年推廣到全國(guó)①?gòu)V泛用于藥理、毒理、病毒、細(xì)菌、傳染病、藥品檢定②由于長(zhǎng)期在全國(guó)各地飼養(yǎng)，群體間有些差異，需進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化以獲得國(guó)際地位2.ICR小鼠1983年廣泛用于藥理、毒理、腫瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生產(chǎn)和教學(xué)3.NIH小鼠（六）小鼠在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用★1.各種藥物安全性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)，急性/亞急性/慢性試驗(yàn)/半數(shù)致死量的測(cè)定等；2.各種篩選性實(shí)驗(yàn)。一般篩查實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用量較大，多半是先從小鼠作起，選用封閉群小鼠即可，如篩選獲得一個(gè)藥物的綜合效果后，再用純系小鼠或大動(dòng)物作進(jìn)一步的肯定；3.生物效應(yīng)測(cè)定和藥物效價(jià)比較試驗(yàn)；如廣泛用于血清，疫苗等生物鑒定工作，照射劑量與生物效應(yīng)實(shí)驗(yàn)，各種藥物效價(jià)測(cè)定等；4.微生物、寄生蟲病學(xué)的研究：因小鼠對(duì)多種病原體具有易感性，適合于研究感染血吸蟲、瘧疾、馬錘蟲、流行性感冒、腦炎、狂犬病等；5.腫瘤、白血病研究：已廣泛地用于癌、肉瘤、白血病以及其他惡性腫瘤、自發(fā)性腫瘤（如C3H小鼠乳腺癌高達(dá)90%，AKR小鼠白血病發(fā)病率很高等），誘發(fā)腫瘤模型，進(jìn)行腫瘤病因?qū)W、發(fā)病學(xué)和防治研究。如胃癌和宮頸癌：甲基膽蒽；肺癌：二乙基亞硝胺等；6.避孕藥和營(yíng)養(yǎng)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究：如常選用小鼠作抗生育、抗著床、抗早孕、中孕和抗排卵實(shí)驗(yàn)；7.鎮(zhèn)咳藥研究：氫氧化銨霧劑---咳嗽反應(yīng)；8.遺傳性疾病的研究：如小鼠黑色素瘤病，即Chediak-Hioashi綜合征，為自發(fā)性遺傳病，與人相似。還有白化病、家族性肥胖，遺傳性貧血、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、尿崩癥等；9.傳染性疾病研究：如鉤體病、巴士桿菌病、沙門氏桿菌病、淋巴性脈絡(luò)膜叢腦膜炎、脊髓灰白質(zhì)炎、日本血吸蟲病等；10.免疫學(xué)研究：免疫缺陷小鼠。二、大鼠（Rat,Rattus,nowegrcus）（一）生物學(xué)特性哺乳綱，嚙齒目對(duì)濕度要求高，干燥導(dǎo)致壞尾??；對(duì)各營(yíng)養(yǎng)素缺乏非常敏感；無膽囊，總膽管長(zhǎng)1.2-4.5cm；肝臟六葉，再生能力極強(qiáng)，切除70%；大小鼠心電圖無S-T段，豚鼠及以上動(dòng)物有明顯S-T段。（二）大鼠在生物醫(yī)學(xué)中的作用1、神經(jīng)-內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)研究：垂體-腎上腺系統(tǒng)發(fā)達(dá)，應(yīng)激反應(yīng)靈敏，如可復(fù)制應(yīng)激性胃潰瘍模型。常用大鼠切除內(nèi)分泌方法，進(jìn)行腎上腺、垂體、卵巢等內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)。2、營(yíng)養(yǎng)-代謝性疾病研究：營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究的重要?jiǎng)游?，維生素A、B、C和蛋白質(zhì)缺乏，氨基酸和鈣磷代謝研究。動(dòng)脈粥樣硬化、淀粉樣變化、酒精中毒、營(yíng)養(yǎng)不良等。3、藥物學(xué)研究：大鼠血壓和血管阻力對(duì)藥物反應(yīng)敏感，最適合于篩選新藥和研究心血管藥理。如灌流大鼠肢體血管術(shù)、離體心臟進(jìn)行心血管藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)；毒扁豆堿引起的大鼠血壓反應(yīng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，影響腎上腺素能神經(jīng)遞質(zhì)釋放的藥物。4、腫瘤研究：大鼠可復(fù)制成各種腫瘤模型，是腫瘤實(shí)驗(yàn)研究最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，可特別易患癌癥——二乙基亞硝胺、二甲基胺苯（DAB）；大鼠食管癌——甲基芐基亞硝胺。5、傳染病研究：研究支氣管肺炎、副傷寒的重要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。選用幼年大鼠進(jìn)行流感病毒傳代，厭氧菌細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)，假結(jié)核、麻風(fēng)、巴氏桿菌病、葡萄球菌感染（激素處理后）、念珠菌病，黃曲病等真菌病研究。6、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎和化膿性淋巴腺炎等的研究：大鼠足跖浮腫法是目前最常用的篩選抗炎藥物的方法。踝關(guān)節(jié)對(duì)炎癥反應(yīng)很敏感，用于藥物研究。7、行為學(xué)研究：已廣泛用于高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)的研究，行為多樣，情緒敏感。8、肝膽外科研究：常用它做膽總管插管收集膽汁。9、中耳疾病和內(nèi)耳炎的研究，畸胎學(xué)研究和避孕藥研究，放射學(xué)研究10、遺傳學(xué)研究，大鼠的毛色變型很多，2200（50）多種，突變系40多種，基因工程動(dòng)物1600種。（三）常用品種1、SD大鼠；封閉群2、wistar：目前有近交系與封閉群2種。近交系——ACI和F3441N，腫瘤自發(fā)率較高，用于腫瘤等研究。（四）大鼠生理、細(xì)胞學(xué)參數(shù)1、T39（38.5-39.5）℃2、HR475（370-580）次/min3、R85.5（66-114）次/min，血?dú)饬?.3（5-10.1）ml/min，潮氣量0.86（0.6-1.25）ml，耗氧量2000mm3/g（體重）4、麻醉時(shí)SBP/16(88-138)mmHg5、RBC8.9（7.2-9.6）百萬(wàn)/mm3，Hb14.8（12-17.5）g/100ml血RBC比重1.090，總蛋白7.2（6.9-7.6）g%6、WBC500-1500/mm3,PLT10-30萬(wàn)/mm3,血容量占體重的7.4%三、豚鼠（一）生物學(xué)特性哺乳綱，嚙齒目（海豬、天竺鼠、荷蘭豬）喜群居，干燥清潔，膽小易驚；屬草食性動(dòng)物，粗纖維比兔還多；體內(nèi)不能合成維C，易患?jí)难?。?duì)各種刺激極為敏感：噪音、霉變飼料常造成流產(chǎn)。寒冷、空氣污染常造成肺炎或流產(chǎn)。對(duì)多種微生物高度敏感，淋巴結(jié)易腫、發(fā)炎。麻醉藥物、抗生素常導(dǎo)致豚鼠死亡。性成熟早（雌30-45d，雄70d），五月齡體成熟。性周期平均為16d，以陰道栓判斷懷孕，妊娠期長(zhǎng)（65-70d），每胎3-5個(gè)，胎兒發(fā)育完全，21天斷奶。（二）豚鼠在生物醫(yī)學(xué)中應(yīng)用1、免疫學(xué)研究1）過敏性休克和變態(tài)反應(yīng)研究豚鼠是首選動(dòng)物，特別是遲發(fā)型超敏反應(yīng)（豚鼠>兔>犬>小鼠）。2）免疫實(shí)驗(yàn)所用的補(bǔ)體。2、傳染病研究結(jié)核、白喉、鼠疫、鉤端螺旋體、孢疹病毒病、鏈桿菌、副大腸桿菌病、旋毛蟲病、希氏桿菌、斑疹傷寒、炭疽等細(xì)菌性疾病和Q熱、淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎首選動(dòng)物。耳科學(xué)研究：常用于聽覺和內(nèi)耳疾病的研究（700-2000Hz）藥理學(xué)研究：對(duì)組胺極敏感，平喘藥和抗組胺藥研究皮膚局部刺激實(shí)驗(yàn)：豚鼠和家兔皮膚對(duì)毒物刺激反應(yīng)靈敏，近似于人。缺氧耐受和耗氧量研究實(shí)驗(yàn)性肺水腫：切斷頸兩側(cè)迷走神經(jīng)復(fù)制急性肺水腫模型。（三）常用品系1、國(guó)內(nèi)應(yīng)用的豚鼠為英國(guó)種豚鼠，來源不甚清楚，加之為封閉群動(dòng)物，因此未準(zhǔn)確描述其品種品系名稱，統(tǒng)稱豚鼠。2、近交系有13種，封閉群有30種。（四）豚鼠生理、細(xì)胞學(xué)參數(shù)1、體重：成熟—雄性900-1000g雌性700—900g初生兒50-115g2、體表面積：400g為565cm2，800g為720cm2直腸T：37.2-39.5℃，胃腸排空時(shí)間13-30h，壽命4-5年二倍體數(shù)64，飲水10ml/100g體重/天，排尿量15-75ml/只/天飼料6g/100g體重/天，排便量21-85g/只/天，妊娠期65-72天（平均68天）性周期15-16天，臨界溫度30℃3、心血管和呼吸系統(tǒng)：HR230-380次/min，BP80-94/55-58mmHg，呼吸量1.0-3.9ml/次,R69-104次/min，血漿pH7.15-7.53血容量69-75ml/kg體重，CO240-300ml/min/kg體重RBC5.4*106/mm3±12%，HCT43±12%，Hb13Hg/dl±12%白蛋白濃度（MCHC）30%，MCV81μm3，WBC9.9*103/mm3±30%,嗜中性粒細(xì)胞4（2-12）%四、家兔Rabbit;Oyctolaguscuniculus哺乳綱；兔形目；食草性動(dòng)物，性情溫順有食糞特性；軟糞在晚上排出，家兔直接由肛門吞食喜干怕熱，對(duì)致熱物質(zhì)反應(yīng)敏感胸腔特殊構(gòu)造，縱膈將胸腔分左右兩室，暴露心臟時(shí)不需要神經(jīng)呼吸（？）刺激排卵，交配后10-12h排卵妊娠期30-35天，哺乳期25-45天兔在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用免疫學(xué)：生產(chǎn)抗體，高價(jià)效和特異性強(qiáng)的免疫血清。生殖生理和避孕藥：可準(zhǔn)確檢測(cè)排卵時(shí)間并容易取得胚胎材料。發(fā)熱、解熱和檢查致熱源研究。眼科研究：手術(shù)操作和觀察，也常用于眼科藥物篩選和療效研究。皮膚刺激實(shí)驗(yàn)：毒物、藥物、化妝品等。膽固醇代謝和動(dòng)脈粥樣硬化癥研究：造型短、成型快，似人急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：失血性、腸毒素休克、微血管縫合，阻塞性黃疸等。不宜研究：放射病、甲狀旁腺切除術(shù)（甲狀旁腺較分散）、嘔吐咳嗽實(shí)驗(yàn)（家兔很少有咳嗽反應(yīng)）生理學(xué)、細(xì)胞學(xué)參數(shù)1、T39℃（38.5-39.5℃）2、R51次/min（38-60）3、P205（123-304），RP89.3mm/Hg(59-119)4、WBC9000（6000-13000），Hb10.4-15.6g/100ml5、嗜堿性粒細(xì)胞5.0%（2.0-7.0），嗜酸性粒細(xì)胞2.0%，淋巴細(xì)胞39.0%（30.0-52.0）6、血液比重1.050五、犬（一）生物學(xué)特性1、哺乳綱，食肉目2、聽覺、嗅覺反應(yīng)靈敏，對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)。3、視力差，視野僅20-30m，對(duì)移動(dòng)物體感覺靈敏，紅綠色盲。4、性成熟200-400d，妊娠期58-63d，哺乳期60d。5、具有發(fā)達(dá)的血液循環(huán)和神經(jīng)系統(tǒng)，皮膚汗腺極不發(fā)達(dá)。（二）犬在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用1、實(shí)驗(yàn)外科：上臨床前的新手術(shù)和麻醉方法。先取得熟練而精確的技巧，然后接著用于臨床。2、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)：犬是目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究和教學(xué)中最常用的動(dòng)物之一，尤其是生理、病理研究。3、藥理毒理：磺胺類代謝，新藥臨床前毒性實(shí)驗(yàn)。（三）常用品種1、比格犬（beagle）:原產(chǎn)英國(guó)，目前世界上該犬的年用量約為10萬(wàn)頭，國(guó)際公認(rèn)最標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)用犬。a.體型小，有利于實(shí)驗(yàn)操作（體重7-10kg，體長(zhǎng)30-40kg）b.秉性溫順，易于馴服和抓捕，親近人。c.遺傳性能穩(wěn)定，遺傳性疾病少，實(shí)驗(yàn)反應(yīng)一致。d.性成熟早，約8-12個(gè)月，產(chǎn)仔數(shù)多。2、紐芬蘭犬（labrador）:廣泛用于實(shí)驗(yàn)外科。六、獼猴（Rheusmonkey）哺乳綱，靈長(zhǎng)目，猴科，獼猴屬12種，我國(guó)五種生物學(xué)特性1、哺乳綱，靈長(zhǎng)目，猴科，獼猴屬，12種，我國(guó)五種2、熱帶和亞熱帶群居動(dòng)物，有社會(huì)性、等級(jí)制。3、體內(nèi)不能合成維C（猴和豚鼠）4、牙齒結(jié)構(gòu)、發(fā)育層次、數(shù)目和人類相似。5、血型抗原可產(chǎn)生同族免疫反應(yīng)，同種異體輸血要做血型配合試驗(yàn)。6、恒河猴的分布——由印度的北部往東、尼泊爾、緬甸、泰國(guó)、老撾、越南；我國(guó)西南、華南各省、福建、江西、浙江一帶。7、雄性8.0kg（8-12kg），雌性5.0kg（4-7kg）（二）猴在生物學(xué)研究中的應(yīng)用獼猴的生物學(xué)特性與人類及其相似，是其他動(dòng)物無法相比的，是最重要的動(dòng)物模型。藥理：是人類避孕藥物研究極為理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。毒理研究：對(duì)麻醉藥和毒品的依賴性表現(xiàn)與人類接近，是新麻醉劑進(jìn)入臨床必需的實(shí)驗(yàn)。傳染病學(xué)研究：幾乎可感染人類所有的傳染病，特別是其他動(dòng)物不能復(fù)制的傳染病。傳染過程、臨床癥狀、病理變化非常相似，是新藥和鑒定脊髓灰質(zhì)炎疫苗疫苗的唯一動(dòng)物。其他：肝炎病毒、麻疹病毒、HIV病毒、SARS病毒等，但要特別注意猴和人之間疾病的傳播。七、小型豬（Mini-pig）哺乳綱，偶蹄目體型小，成年豬一般在80kg以下性情溫順，易馴服，便于進(jìn)行反復(fù)采樣和外科手術(shù)全年多發(fā)情，生產(chǎn)力高Eg：滇南小牙豬、廣西巴馬小型豬、貴州小型豬、五指山小型豬在生物學(xué)當(dāng)中的應(yīng)用皮膚燒傷研究：由于豬皮膚和人相似，用于燒傷的敷料比液體石蠟和紗布效果好，可縮短愈合時(shí)間，減少疼痛和感染，免疫排斥反應(yīng)小，血管聯(lián)合好。血管病研究：滇西豬的冠狀動(dòng)脈結(jié)構(gòu)和人相似，血液動(dòng)力學(xué)和人也相似，豬的罐裝動(dòng)脈粥樣硬化和人相似。器官移植：豬體和人體免疫排斥反應(yīng)很弱，用豬的心臟瓣膜治療人的瓣膜疾病已經(jīng)普遍推廣。辛克萊小型豬是研究人類黑色素瘤的良好模型。八、樹鼩（Treeshrew;Tupaiabelangeri）（一）生物學(xué)特性1、原屬食蟲目，1945年靈長(zhǎng)目，目前主張攀鼩目2、形似松鼠，急速?gòu)椞竭\(yùn)動(dòng)3、在解剖生理特征上是除獼猴等靈長(zhǎng)目動(dòng)物以外和人最接近的動(dòng)物，WHO呼吁樹鼩代替日趨瀕危的靈長(zhǎng)目動(dòng)物。4、化學(xué)信息在雄性個(gè)體的領(lǐng)地占領(lǐng)中起到重要作用，從腺體分化物、尿液、唾液等排泄物中均能發(fā)現(xiàn)氣味物質(zhì)，這些重味物質(zhì)反應(yīng)了個(gè)體生理等信息特性。受雄性激素控制。（二）生物學(xué)當(dāng)中的應(yīng)用1、腫瘤研究自發(fā)性腫瘤樹鼩乳腺癌，淋巴肉瘤，肝細(xì)胞瘤，霍奇金病，惡性淋巴瘤，骨瘤，表皮肝細(xì)胞瘤（鱗狀細(xì)胞癌、皮膚脂腺癌）等?？烧T發(fā)肝細(xì)胞癌（黃曲霉素）、纖維肉瘤（3-甲基膽蒽MCA）、肺腺癌（二羥基丙烯亞胺）2、肝炎研究：甲、乙、丙、丁3、膽結(jié)石研究：高密度脂蛋白成分占血脂總量的60-70%，已用與探索抑制動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制的研究。4、病毒研究：輪狀病毒、孢疹病毒、登革熱病毒、流感病毒、屈曲病毒等病毒易感。5、神經(jīng)系統(tǒng)研究的模型：用光化學(xué)反應(yīng)誘導(dǎo)樹鼩局部腦缺血模型及缺血后適應(yīng)的模型，抑郁癥動(dòng)物模型。6、樹鼩的滑板現(xiàn)象的研究：用于人類斑禿和無發(fā)再生的研究。7、糖尿病研究：用STE腹腔注射誘導(dǎo)樹鼩糖尿病模型。8、近視眼模型，利用單眼近視鏡片對(duì)包造成的近視矯正，能建立正視眼并且在少年樹鼩維持。九、其他動(dòng)物（一）貓食肉目食肉動(dòng)物，誘導(dǎo)性排卵，血壓恒定，藥物反應(yīng)靈敏，適合做血壓實(shí)驗(yàn)，心搏力強(qiáng)，能描述出完好的血壓曲線。魚環(huán)境監(jiān)測(cè)，胚胎研究，腫瘤研究等。斑馬魚、小鼠外用于遺傳工程研究的動(dòng)物劍尾魚RW-H系常用的封閉群動(dòng)物：SD大鼠、ICR小鼠、比格犬、大耳白兔第三章人類疾病動(dòng)物模型Animalmodelsofhumandisease,AMHD教學(xué)要求AMHP人類疾病動(dòng)物模型存在的意義。人類疾病動(dòng)物模型的目標(biāo)，或指標(biāo)？根據(jù)生產(chǎn)原因，人類疾病動(dòng)物模型的分類。動(dòng)物模型設(shè)計(jì)的原則。動(dòng)物模型設(shè)計(jì)的注意事項(xiàng)。如何正確地評(píng)估動(dòng)物疾病模型。AMHD概念：生物醫(yī)學(xué)研究中建立的具有模擬人類疾病表現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和相關(guān)材料。應(yīng)用AMHD的意義：避免人體實(shí)驗(yàn)造成的危害實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可以作為人類的“替難者”，可在人為設(shè)計(jì)的特定實(shí)驗(yàn)條件下反復(fù)實(shí)驗(yàn)研究。應(yīng)用動(dòng)物模型可研究平時(shí)不易見到的疾病平時(shí)臨床很難見到放射病、毒氣病、烈性傳染病、戰(zhàn)傷等疾病，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求能復(fù)制該疾病的動(dòng)物模型，供研究使用?？商峁┌l(fā)病率低，潛伏期和病程長(zhǎng)的疾病的動(dòng)物模型有些疾病如免疫、代謝性、內(nèi)分泌和血液等疾病在臨床上發(fā)病率低；有些疾病如腫瘤、慢性氣管炎、動(dòng)脈粥樣硬化、遺傳病、肺心病、類風(fēng)濕等疾病發(fā)生發(fā)展速度緩慢，潛伏期、病程也長(zhǎng)，短的幾年，長(zhǎng)的十幾年甚至幾十年，有的疾病要隔幾代才顯性發(fā)病。4)克服復(fù)雜因素，增加方法學(xué)上的可比性臨床上許多疾病是十分復(fù)雜的：病人并非患有一種疾病，有的多種疾病同時(shí)并存，即使某單一疾病，由于病人的年齡、性別、體質(zhì)、遺傳以及社會(huì)因素對(duì)其疾病發(fā)生發(fā)展都會(huì)有影響，產(chǎn)生不同的效果。樣品收集方便，實(shí)驗(yàn)結(jié)果易分析動(dòng)物模型作為研究人類疾病的“代替品”，便于實(shí)驗(yàn)人員按時(shí)采集所需各種樣品，及時(shí)或分批處死動(dòng)物收集樣本，以便更好的了解疾病過程，完成實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，這點(diǎn)在臨床上是不易辦到的。有利于更全面地認(rèn)識(shí)疾病的本質(zhì)有些病原體不僅引起人類發(fā)生疾病，也可引起動(dòng)物感染，其臨床表現(xiàn)各有特點(diǎn)，通過對(duì)人畜共患病的比較，可觀察到同一病原體在不同機(jī)體中引起的損害，更有利于全面認(rèn)識(shí)疾病的本質(zhì)。目標(biāo)和指標(biāo)模擬人類疾病的同源性、預(yù)見性，表象及治療應(yīng)答的相似性。AMHD的分類自發(fā)性動(dòng)物模型（SpontaneousAnimalModels）是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意思的人工處置，在自然情況下所發(fā)生的疾病。包括突變系的遺傳疾病和近交系的腫瘤疾病模型。突變系的遺傳疾病：代謝性疾病、分子疾病和特種蛋白質(zhì)合成異常性疾病。近交系的腫瘤模型隨實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬、品系不同，其腫瘤的發(fā)生類型和發(fā)病率有很大差別。優(yōu)點(diǎn)：疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)的疾病很相似，其應(yīng)用價(jià)值很高。缺點(diǎn)：來源比較困難，種類有限，因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物品種、品系不同，其所發(fā)生的類型和發(fā)病機(jī)制也有差異。誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型（ExpreimentalAnimalModels）實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動(dòng)物，造成動(dòng)物組織、器官或全身的損害，表現(xiàn)類似人類疾病是的功能、代謝異?；蚨拘宰饔?。優(yōu)點(diǎn)：可短時(shí)間內(nèi)大量復(fù)制；通過嚴(yán)格控制各種條件使復(fù)制出的疾病模型適合研究目的的需要。缺點(diǎn)：由于病程短，在某些方面不能模擬人類疾病的特征。物理因素誘發(fā)動(dòng)物模型常見的物理因素如機(jī)械損傷、放射線損傷、氣壓、手術(shù)等許多因素。外科手術(shù)方法復(fù)制大鼠急性肝衰竭動(dòng)物模型。放射線復(fù)制的大鼠、小鼠、狗的放射病模型。此法復(fù)制動(dòng)物模型比較直觀、簡(jiǎn)便，是較常見的方法。化學(xué)因素誘發(fā)動(dòng)物模型常見的化學(xué)因素如化學(xué)藥致癌、化學(xué)毒物中毒、強(qiáng)酸強(qiáng)堿燒傷、某種有機(jī)成分的增加或減少導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)性疾病等。羥基乙胺—大鼠急性十二指腸潰瘍動(dòng)物模型D-氨基半乳糖—大鼠肝硬化動(dòng)物模型缺碘飼料--大鼠缺碘性甲狀腺腫動(dòng)物模型膽固醇、膽鹽、甲基巰氧嘧啶及動(dòng)物脂肪油—雞、兔、大鼠的動(dòng)脈粥樣硬化癥動(dòng)物模型。生物因素誘發(fā)動(dòng)物模型常見的生物因素如細(xì)菌、病毒、寄生蟲、生物毒素等。在人類疾病中，由生物因素導(dǎo)致發(fā)生的人畜共患病（傳染性或非傳染性）。很大的比例。傳染病、寄生蟲病、微生物學(xué)和免疫學(xué)等研究經(jīng)常使用生物因素復(fù)制動(dòng)物模型?？滤_奇B組病毒—小鼠、大鼠、豬等心肌炎動(dòng)物模型；福氏Ⅳ型痢疾桿菌或志賀桿菌—猴細(xì)菌性痢疾動(dòng)物模型；錐蟲病原體—錐蟲病小鼠動(dòng)物模型；鉤端螺旋體—豚鼠肺出血?jiǎng)游锬Ｐ?。?fù)合因素誘發(fā)動(dòng)物模型以上3種誘發(fā)動(dòng)物模型的因素都是單一的，有些疾病必須使用多種復(fù)合因素誘導(dǎo)才能復(fù)制成功，這些動(dòng)物模型的復(fù)制往往需要時(shí)間較長(zhǎng)，方法比較繁瑣，但其與人類疾病比較相似。細(xì)菌加寒冷方法或香煙加寒冷或細(xì)菌加二氧化硫—大鼠或豚鼠慢性支氣管炎動(dòng)物模型。西氯化碳（40%棉籽油溶液）、膽固醇、乙醇等—大鼠肝硬化動(dòng)物模型。二甲基偶氮苯胺和60Co射線方法—大鼠肝癌動(dòng)物模型。遺傳工程動(dòng)物模型（GeneticallyEngineeredAnimalModels）利用遺傳工程技術(shù)獎(jiǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳物質(zhì)進(jìn)行人為修飾或改變，今兒獲得具有特殊表型的新品系動(dòng)物。目前，遺傳工程動(dòng)物模型僅指遺傳工程小鼠模型，而其他動(dòng)物的遺傳工程化操作還處于基礎(chǔ)研究階段。轉(zhuǎn)基因小鼠、可調(diào)控基因表達(dá)的小鼠、基因敲除小鼠、基因定點(diǎn)整合小鼠、特定組織或器官基因敲除小鼠等均屬于遺傳工程小鼠。同種或異種移植的動(dòng)物模型動(dòng)物模型的設(shè)計(jì)原則可比性能夠找到與人類疾病相同的動(dòng)物自發(fā)性疾病當(dāng)然最好。例如日本人找到大白鼠原發(fā)性高血壓就是研究人類原發(fā)性高血壓的理想模型，老母豬自發(fā)性冠狀動(dòng)脈粥樣硬化是研究人類冠心病的理想模型；自發(fā)性狗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎與人類幼年型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎十分相似，也是一種理想模型，等等。與人類完全相同的動(dòng)物自發(fā)性疾病模型畢竟不可多得，往往需要人工加以復(fù)制，為了盡量做到與人類疾病相似，首先要注意動(dòng)物的選擇。其次，為了盡可能做到模型與人類相似，還要在實(shí)踐中對(duì)方法不斷加以改進(jìn)。如果動(dòng)物模型與臨床情況不相似，在動(dòng)物身上有效治療方案就不一定能用于臨床，反之亦然?？芍貜?fù)性理想的動(dòng)物模型應(yīng)該是可重復(fù)的，甚至是可以標(biāo)準(zhǔn)化的。為了增強(qiáng)動(dòng)物模型復(fù)制時(shí)的重復(fù)性，必須在動(dòng)物品種、品系、年齡、性別、體重、健康情況、飼養(yǎng)管理；實(shí)驗(yàn)及環(huán)境條件，季節(jié)、晝夜節(jié)律、應(yīng)激、室溫、濕度、氣壓消毒滅菌；實(shí)驗(yàn)方法步驟；藥品生產(chǎn)廠家、批號(hào)、純度規(guī)格、給藥類型、劑量、途徑、方法；麻醉鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛等用藥情況；儀器型號(hào)、靈敏度、精確度；實(shí)驗(yàn)者操作技術(shù)熟練程度等等方面保持一致，因?yàn)橐恢滦允侵噩F(xiàn)性的可靠保證?？煽啃詮?fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)該力求可靠地反映人類疾病，即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，應(yīng)具備該疾病主要的癥狀和體征，經(jīng)化驗(yàn)或X光照片、心電圖、病理切片等證實(shí)。若易自發(fā)地某些相應(yīng)病變的動(dòng)物，就不應(yīng)加以選用，易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。適用性和可控性供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究用的動(dòng)物模型，在復(fù)制時(shí)，應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究的開展。易行性和經(jīng)濟(jì)性在復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)，所采用的方法應(yīng)盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)原則。小動(dòng)物如大小鼠、地鼠、豚鼠等也可以復(fù)制出十分近似的人類疾病模型。它們?nèi)菀鬃龅竭z傳背景明確，體內(nèi)微生物可加以控制，模型性顯著且穩(wěn)定，年齡、性別、體重等可任意選擇，而且價(jià)廉易得、便于飼養(yǎng)管理，因此可盡量采用。除非不得已或一些特殊疾?。ㄈ缌〖病⒓顾杌屹|(zhì)炎等）研究需要外，盡量不用靈長(zhǎng)類動(dòng)物，除了在動(dòng)物選擇上要考慮易行性和經(jīng)濟(jì)性原則外，而且在模型復(fù)制的方法上、指標(biāo)的觀察上也要注意這一原則。動(dòng)物模型設(shè)計(jì)的注意事項(xiàng)注意環(huán)境因素對(duì)模型動(dòng)物的影響復(fù)制模型的成敗往往與環(huán)境的改變有密切關(guān)系。擁擠、飲食改變、過度光照、噪音、屏蔽系統(tǒng)的破壞等，任何一項(xiàng)被忽視都可能給模型動(dòng)物帶來嚴(yán)重影響。除此之外，復(fù)制過程中固定、出血、麻醉、藥物和并發(fā)癥等處理不當(dāng)，同樣會(huì)產(chǎn)生難以估計(jì)的惡果。因此，盡可能使模型動(dòng)物處于最小的變動(dòng)和最少的干擾之中。不能盲目使用近交系動(dòng)物，不然會(huì)導(dǎo)致不能控制因素進(jìn)入實(shí)驗(yàn)例如自發(fā)性糖尿病大鼠（BB，Wistar）除具有糖尿病臨床特征外，還發(fā)現(xiàn)多種病理變化（外周神經(jīng)系統(tǒng)嚴(yán)重病變、睪丸萎縮、甲狀腺炎、胃潰瘍、惡性淋巴瘤等）。因此要有目的地選擇。半個(gè)世紀(jì)以來，近交系的開發(fā)不斷提供著新的動(dòng)物模型材料，大、小鼠疾病作為模型在醫(yī)學(xué)使用量已高達(dá)70-90%。動(dòng)物進(jìn)化的高級(jí)程度并不意味著所以器官和功能接近于人的程度復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)，在條件允許的情況下，應(yīng)盡量考慮選用與人相似，進(jìn)化程度高的動(dòng)物作模型。但不能因此就認(rèn)為進(jìn)化程度越高等的動(dòng)物其所有器官和功能越接近于人。例如，非人靈長(zhǎng)類誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)，病變部位經(jīng)常在小動(dòng)脈，即使出現(xiàn)在大動(dòng)脈也與人類分布不同。據(jù)報(bào)導(dǎo)用鴿（WhiteGameauPigeon）作這類模型時(shí)，胸主動(dòng)脈出現(xiàn)的黃斑面積可達(dá)10%，鏡下變化與人也比較相似，因此也廣泛被研究者使用。正確地評(píng)估動(dòng)物疾病模型應(yīng)該懂得沒有一種動(dòng)物模型能完全復(fù)制人類疾病真實(shí)情況，動(dòng)物畢竟不是人體的縮影。實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭皇且环N間接性研究，只可能在一個(gè)局部或幾個(gè)方面與人類疾病相似。因此，模型實(shí)驗(yàn)結(jié)論的正確性只是相對(duì)的，最終必須在人體身上得到驗(yàn)證。復(fù)制過程中一旦出現(xiàn)與人類疾病不同的情況，必須分析其分歧范圍和程度，找到相平行的共同點(diǎn)，正確評(píng)估哪些是有價(jià)值的。第四章動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)和方法教學(xué)要求1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用的給藥方法（5種）。2.常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大小鼠、兔、豚鼠的抓取、固定和性別判斷方法。（每種動(dòng)物各1種）3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單次采血和多次采血的容量限度和恢復(fù)期。4.對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉劑用量的注意事項(xiàng)？5麻醉保溫的推薦方法及大小鼠和兔直腸溫度。6.戊巴比妥鈉補(bǔ)充麻醉的時(shí)間及劑量。7.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂死的原則是什么？大小鼠和兔、豚鼠、犬的最常用的處死方法。（每種動(dòng)物1種）一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備理論準(zhǔn)備：了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)；制定研究計(jì)劃和方案；查閱關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法的參考文獻(xiàn)。條件準(zhǔn)備：儀器、器械、藥品；運(yùn)輸;實(shí)驗(yàn)和飼養(yǎng)場(chǎng)所。二、抓取固定動(dòng)物（略）三、性別、發(fā)情（略）四、編號(hào)和標(biāo)記1、染色法：淺色動(dòng)物3.5-5％苦味酸溶液（黃色）0.5%中性紅或堿性品紅溶液（紅色）2％硝酸銀溶液（咖啡色，涂后光照10分鐘）煤焦油酒精溶液（黑色）龍膽紫溶液（紫色）用黃色表示個(gè)位數(shù)，紅色表示十位數(shù)。2．個(gè)體耳號(hào)標(biāo)記法3．個(gè)體斷趾標(biāo)記法4．耳號(hào)鉗標(biāo)記法5．掛牌法五、分組隨機(jī)化分組：避免人為影響。六、去毛1、剪毛；2、拔毛；3、剃毛4、化學(xué)脫毛常用脫毛劑①8%硫化鈉水溶液②硫化鈉3份，洗衣粉1份、淀粉7份，加水調(diào)成糊狀③硫化鋇50克，氧化鋅25克，淀粉25克，加水100毫升調(diào)成糊狀④硫化鈉10克，生石灰15克，加水到100毫升，適合犬和其他大動(dòng)物。七、給藥途徑與方法給藥途徑注意事項(xiàng)經(jīng)口給藥胃容量負(fù)荷，禁食，藥物溫度皮下注射藥物吸收速度和程度，不使用弗氏左劑皮內(nèi)注射給藥體積腹腔注射藥物注入腸道，腹膜炎，注射液溫度，多次給藥時(shí)少用肌肉注射疼痛，傷及神經(jīng)，局部炎癥，藥物吸收速度，多次給藥避免在同一部位，每日注射部位不超過2個(gè)靜脈注射分為快速（1min)、緩慢注射(5-10min)和輸液，注射速度和容積，持續(xù)時(shí)間，注射溫度?？焖僮⑸湟笏幬锖脱河邢嗳菪郧茵ざ炔桓吣X內(nèi)注射注射速度和容積（一）皮下注射(s.c)：頸背部、腋下、腿、側(cè)腹注射時(shí)以左手拇指和食指提起皮膚，將連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、貓多在大腿外側(cè)，豚鼠在后大腿的內(nèi)側(cè)或小腹部；大白鼠可在側(cè)下腹部。兔在背部或耳根部注射。（二）靜脈注射（iv）1．兔：耳緣靜脈注射用手指彈動(dòng)或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號(hào)針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入，移動(dòng)拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入，然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。2．小白鼠和大白鼠尾靜脈注射①動(dòng)物固定（固定器內(nèi)或燒杯等）：尾巴露出②擴(kuò)張尾部血管，軟化表皮角質(zhì)（45～50℃的溫水浸潤(rùn)半分鐘或酒精擦拭）③注射：以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè)，使靜脈充盈，用中指從下面托起尾巴，以無名指和小指