《分子生物學(xué)檢驗技術(shù)》基本知識點

分子生物學(xué)基本知識點一、填充題1、質(zhì)粒按功能分類有F質(zhì)粒、R質(zhì)粒和Col質(zhì)粒。2、基因病分為單基因病和多基因病。3、分子雜交反應(yīng)主要由預(yù)雜交、雜交和洗脫三個步驟組成。4、臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室必須包括四個工作區(qū)域①試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)；②標(biāo)本制備區(qū)；③擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)；④產(chǎn)物分析區(qū)。5、腫瘤發(fā)生分三個階段：啟動階段、促癌階段和轉(zhuǎn)化階段。6、生物芯片技術(shù)是根據(jù)生物分子之間特異性相互作用的原理，如DNA-DNA、DNA-RNA、抗原-抗體、受體-配體之間可以發(fā)生的復(fù)性與特異性結(jié)合，設(shè)計其中的一方為探針。7、核酸分子雜交技術(shù)按雜交探針標(biāo)記的不同可以分為同位素雜交和非同位素雜交。8、PCR反應(yīng)中，模板包括基因組DNA、RNA、質(zhì)粒DNA和線粒體DNA。9、DNA芯片技術(shù)可應(yīng)用于基因診斷、DNA序列測序、臨床藥物篩選以及其它領(lǐng)域。10、質(zhì)粒提取方法主要有堿裂解法、煮沸裂解法、SDS裂解法和其它方法。11、PCR反應(yīng)中的dNTP指的是dATP、dCTP、dGTP和dTTP四種脫氧核苷三磷酸。12、在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制過程稱為PCR，其反應(yīng)基本過程有變性、退火（雜交）和延伸。DNA雙螺旋的氫鍵斷裂是在變性步驟中。13、基因重組中用來識別和切割雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列的酶是限制性內(nèi)切酶，若產(chǎn)生的缺口錯開突出，稱為粘末端。若產(chǎn)生的缺口不錯開，稱為平末端。14、國家級的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫有蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫、蛋白質(zhì)直系同源簇數(shù)據(jù)庫和DIP數(shù)據(jù)庫。15、轉(zhuǎn)位的遺傳效應(yīng)是基因重排、引起突變和引人新的基因。16、根據(jù)雜交核酸分子的種類，可以將核酸分子雜交分為DNA與DNA雜交，DNA與RNA雜交和RNA與RNA雜交。17、常用的DNA重組載體有：質(zhì)粒載體、噬菌體載體、穿梭載體和人工染色體。18、基因工程中，平末端連接法主要有平接法、同聚體加尾法和人工接頭法三種方法。19、聚合酶鏈反應(yīng)條件主要是溫度、時間和循環(huán)次數(shù)。20、在生物芯片技術(shù)中，依據(jù)芯片上固定的探針類型分為DNA芯片、蛋白質(zhì)芯片、細(xì)胞芯片和組織芯片等。21、核酸探針的種類有DNA探針、RNA探針和寡核苷酸探針。22、核酸探針標(biāo)記方法主要有同位素標(biāo)記和非同位素標(biāo)記。23、在真核生物結(jié)構(gòu)基因中，編碼序列與非編碼序列呈間隔排列。前者稱為外顯子，后者稱為內(nèi)含子。24、PCR實驗系統(tǒng)中的污染主要有擴(kuò)增片段的污染（產(chǎn)物污染）、試劑污染和標(biāo)本間的交叉污染。25、基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程。26、DNA重組技術(shù)中常用的DNA聚合酶有DNA聚合酶Ⅰ、TaqDNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和T4末端轉(zhuǎn)移酶。27、以RNA為模板的PCR反應(yīng)被稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR。28、細(xì)胞調(diào)亡又稱為細(xì)胞程序性死亡，具有特殊的生物學(xué)意義。29、轉(zhuǎn)位因子包括插入序列、轉(zhuǎn)座子、可轉(zhuǎn)座的噬菌體。二、選擇題1、沒有功能的基因是（）。（A）假基因（B）重復(fù)序列（C）多基因家族（D）重疊基因2、PCR反應(yīng)中，變性溫度一般定在（）。（A）95-97℃（B）40-70℃（C）72℃（3、凋亡小體出現(xiàn)在（）。（A）細(xì)胞壞死中（B）程序性死亡中（C）細(xì)胞變性中（D）超敏反應(yīng)中4、SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳可應(yīng)用在（）。（A）蛋白質(zhì)分析（B）DNA分析（C）RNA基因分析（D）糖分析5、異硫氰酸鉀—酚氯仿一步法是提?。ǎ┑姆椒ā＃ˋ）DNA（B）RNA（C）蛋白質(zhì)（D）cDNA6、DNA重組中使用的質(zhì)粒大多為（）。（A）嚴(yán)緊型質(zhì)粒（B）松馳型質(zhì)粒（C）抗藥性質(zhì)粒（D）F質(zhì)粒7、細(xì)胞調(diào)亡是一種（）現(xiàn)象。（A）細(xì)胞壞死（B）細(xì)胞程序性死亡（C）炎性反應(yīng)（D）超敏反應(yīng)8、人的體細(xì)胞具有46條染色體，屬于（）。（A）單倍體（B）二倍體（C）三倍體（D）二價體9、PCR反應(yīng)的引物需要（）。（A）1條（B）2條（C）3條（D）4條10、原位雜交在（）進(jìn)行。（A）濾膜的DNA上（B）凝膠的DNA上（C）試管中的DNA上（D）細(xì)胞的核酸上11、研究蛋白質(zhì)組學(xué)是屬于（）。（A）生命計劃（B）人類基因組計劃（C）后基因組計劃（D）基因工程計劃12、真核細(xì)胞基因組的結(jié)構(gòu)基因是斷裂基因，它含有（）。（A）內(nèi)含子（B）操縱子（C）復(fù)制子（D）重組子13、第一個建立的人工染色體是（）。（A）細(xì)菌人工染色體（B）噬菌體人工染色體（C）酵母人工染色體（D）哺乳動物人工染色體14、核酸分子雜交依據(jù)雜交介質(zhì)的不同，可以分為液相雜交，固相雜交和（）。（A）原位雜交（B）菌落雜交（C）點與狹縫雜交（D）同位素雜交15、變性梯度凝膠電泳可應(yīng)用在（）。（A）蛋白質(zhì)分析（B）DNA分析（C）RNA分析（D）糖類分析16、下列幾種實驗方法中，哪種方法不是DNA序列測定方法（）。（A）雙脫氧鏈終止法（B）化學(xué)降解法（C）雜交法（D）平端連接法現(xiàn)嘌呤、嘧啶堿基堆積。（5）PCR擴(kuò)增中的退火溫度是要根據(jù)引物的Tm值而決定的，二條引物的Tm值不能差別太大。（6）根據(jù)需要，合成引物時在其5ˊ端可以加修飾成分。17、PCR產(chǎn)物的檢測技術(shù)主要有哪些？（1）PCR-限制性片段長度多態(tài)性（2）等位基因特異性寡核苷酸（3）單鏈構(gòu)象多態(tài)性（4）變性梯度凝膠電泳（5）融點曲線分析（6）PCR產(chǎn)物的序列分析18、腫瘤發(fā)生學(xué)說主要內(nèi)容是什么？腫瘤的發(fā)生是由多種致癌因素綜合作用的結(jié)果。當(dāng)正常細(xì)胞受到物理因素(如紫外線、電離輻射等)、化學(xué)因素(如黃曲霉毒素)以及生物因素(DNA或RNA致癌病毒)等致癌因子作用后，經(jīng)多次打擊多階段變化便形成了腫瘤。19、蛋白質(zhì)分析中鹽析法的主要原理是什么？原理是蛋白質(zhì)在低鹽濃度下的溶解度隨著鹽濃度升高而增加，此時稱為鹽溶；當(dāng)鹽濃度繼續(xù)升高時，蛋白質(zhì)溶解度又以不同程度下降并先后析出，稱為蛋白質(zhì)的鹽析。四、概念題1、癌基因包括病毒癌基因(v-onc)和細(xì)胞癌基因(c-onc)兩種，具有潛在誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的特征。2、DNA重組不同來源的DNA分子，通過磷酸二酯鍵鏈接而重新組合的過程，稱為DNA重組。3、逆轉(zhuǎn)錄PCR逆轉(zhuǎn)錄PCR是以細(xì)胞內(nèi)總RNA或mRNA為材料進(jìn)行體外擴(kuò)增的技術(shù)。4、核酸分子雜交技術(shù)來源不同的單鏈核酸分子在合適的溫度和離子強(qiáng)度下，通過堿基互補(bǔ)形成雙鏈雜交體，這類技術(shù)稱作核酸分子雜交技術(shù)。5、基因是遺傳的基本功能單位，除了編碼蛋白質(zhì)或某些RNA外，還包括為獲得一個特異性產(chǎn)物所必須的相關(guān)序列。6、內(nèi)含子是結(jié)構(gòu)基因中的非編碼序列，往往與編碼序列呈間隔排列。當(dāng)基因轉(zhuǎn)錄后，在mRNA的成熟過程中被剪切。7、變性在一定條件下，雙螺旋之間氫鍵斷裂，雙螺旋解開，形成無規(guī)則線團(tuán)，DNA分子成為單鏈，這一過程稱作變性或融解。8、克隆克隆是指由一個細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖以后形成的子代群體。9、限制性內(nèi)切酶它是一類核酸水解酶，能識別和切割雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列。10、抑癌基因抑癌基因又稱抗癌基因(anti-onc)，是存在于正常細(xì)胞內(nèi)的一類可抑制細(xì)胞生長的基因，并有潛在抑癌作用。當(dāng)這類基因發(fā)生突變、缺失或失活時，可引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。11、基因組是細(xì)胞或生物體中一套完整的遺傳物質(zhì)。12、質(zhì)粒是獨立于細(xì)菌細(xì)胞染色體以外，能自主復(fù)制的共價閉合環(huán)狀DNA分子。13、端粒酶一種可催化寡聚核苷酸單鏈的末端延長的酶，由于這種酶可催化端粒的延長，因此將它命名為端粒酶。14、操縱子是指原核生物基因組中數(shù)個功能上相關(guān)聯(lián)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，構(gòu)成信息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)(包括啟動基因和操縱基因)以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號所構(gòu)成的基因表達(dá)單位。15、融解溫度在溫度升高引起的DNA變性過程中，DNA的變性會在一個很狹窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生，這一溫度范圍的中點被稱作融解溫度。16、DNA重組載體載體是攜帶靶DNA（目的DNA）片段進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增和表達(dá)的運載工具。常用的載體是通過改造天然的細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體和病毒等構(gòu)建而成。17、外顯子是結(jié)構(gòu)基因中的編碼序列，往往被內(nèi)含子所間隔，當(dāng)基因轉(zhuǎn)錄后，mRNA在成熟過程中切去內(nèi)含子，外顯子才被拼接成完整的序列，成為成熟的mRNA，作為指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的模板。18、重疊基因指同一段DNA序列能編碼2～3種蛋白質(zhì)多肽鏈。即編碼順序位于同一段DNA序列中，并相互重疊。19、核酸雜交將一種核酸單鏈標(biāo)記成為探針，再與另一種核酸單鏈進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對，可以形成異源核酸分子的雙鏈結(jié)構(gòu)，這一過程稱作核酸雜交。20、多重PCR在同一反應(yīng)體系中加入多對引物，同時擴(kuò)增一份DNA樣品中多個不同序列的靶片段。21、核酶是一類具有酶的催化活性的小RNA分子，在RNA合成后的剪接修飾中具有重要作用。22、復(fù)性變性DNA只要消除變性條件，具有堿基互補(bǔ)區(qū)域的單鏈又可以重新結(jié)合形成雙鏈，這一過程稱作復(fù)性。23、松弛型質(zhì)粒其復(fù)制不受宿主細(xì)胞嚴(yán)格控制的質(zhì)粒。24、原位雜交是應(yīng)用核酸探針與組織細(xì)胞中的核酸按堿基配對原則進(jìn)行特異性雜交，然后應(yīng)用組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)方法在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)定位或基因表達(dá)的檢測技術(shù)。25、Northern印跡靶核酸是RNA的印跡雜交。26、間隔區(qū)DNA真核生物的基因之間存在著編碼空白區(qū)或轉(zhuǎn)錄的空白區(qū)，稱之為間隔區(qū)DNA。這些序列往往在單拷貝的結(jié)構(gòu)基因側(cè)翼，并使結(jié)構(gòu)基因彼此分開，間隔區(qū)DNA也可以存在于rDNA區(qū)。27、單順反子真核生物的一個結(jié)構(gòu)基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄生成一條mRNA分子，翻譯成一條多肽鏈。這種只攜帶一條多肽鏈編碼信息的mRNA稱為單順反子。28、斷裂基因真核生物結(jié)構(gòu)基因的編碼序列大多是不連續(xù)的，被非編碼序列所隔開，稱為斷裂基因。編碼序列稱為外顯子，非編碼序列稱為內(nèi)含子。29、多基因家族是指由某一祖先基因經(jīng)過重復(fù)和變異所產(chǎn)生的一組基因。如組蛋白基因家族、珠蛋白基因家族。30、假基因不產(chǎn)生有功能的基因產(chǎn)物的基因，稱為假基因。31、自私DNA人類基因組中，存在著大量的非編碼序列，其中只有很小一部分具有重要的調(diào)節(jié)功能，絕大部分都沒有什么特殊功用，這類DNA稱為自私DNA。32、類核原核生物沒有細(xì)胞核，其染色體經(jīng)高度折疊、盤繞聚集在一起，形成一個較為致密的區(qū)域，稱為類核。33、多順反子原核生物數(shù)個功能上相關(guān)聯(lián)的結(jié)構(gòu)基因先轉(zhuǎn)錄在一