轉錄第二部分詳解

轉錄第二部分詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有42頁\編輯于星期日優(yōu)選轉錄第二部分現(xiàn)在是2頁\一共有42頁\編輯于星期日增強子和沉默子增強子（enhancer）：是一種能夠大幅度增強基因轉錄效率的順式作用元件。沉默子（silencer）：與增強子相反，是一種阻止基因表達的順式作用元件。作用特性：與啟動子不同，其作用與距離、方向和位置均無關；對臨近的基因作用最強；某些增強子或沉默子具有組織特異性。現(xiàn)在是3頁\一共有42頁\編輯于星期日增強子和沉默子的作用特性現(xiàn)在是4頁\一共有42頁\編輯于星期日增強子作用的環(huán)出模型

現(xiàn)在是5頁\一共有42頁\編輯于星期日（三）轉錄因子（transcriptfactor,TF）反式作用因子：是能直接或間接地識別或結合各種順式作用元件，參與調控基因轉錄的蛋白質。順式作用元件必須由反式作用因子與之結合后才能對轉錄起調控作用。轉錄因子：真核RNA聚合酶不能識別DNA上的啟動子，識別這些啟動子序列的反式作用因子稱為轉錄因子。轉錄因子在轉錄中主要有兩大基本功能：一是作為裝配因子或定向因子識別和結合核心啟動子，招募RNA聚合酶正確地與啟動子結合；其次是調節(jié)RNA聚合酶的活性現(xiàn)在是6頁\一共有42頁\編輯于星期日參與RNA-polⅡ轉錄的TFⅡ

TFⅡH57（a）（）TFⅡE與RNA-polⅡ結合，解螺旋酶30，74TFⅡF促進RNA-polⅡ結合及作為其他因子結合的橋梁33TFⅡB穩(wěn)定TFⅡD與啟動子的結合12，19，35TFⅡA輔助TBP-DNA結合TAF**結合TATA盒TBP*38TFⅡD功能亞基組成，分子量(kD)轉錄因子ATPase,解螺旋酶和CTD激酶活性促進啟動子的解鏈和清空TFⅡH與RNA-polⅡ結合，協(xié)助招募TFⅡH，激活TFⅡH，促進啟動子解鏈57（a）TFⅡE30，74TFⅡF促進RNA-pol結合及作為其他因子結合的橋梁33TFⅡB12，19，35TFⅡA輔助-DNA結合TAF**結合TATA盒TBP*38TFⅡD功能亞基組成，分子量(kD)轉錄因子b34現(xiàn)在是7頁\一共有42頁\編輯于星期日（四）真核生物RNA聚合酶II所負責的基因轉錄過程1.轉錄起始真核生物的轉錄起始上游區(qū)段比原核生物多樣化，轉錄起始時，RNA-pol不直接結合模板，其起始過程比原核生物復雜。轉錄起始前復合物(pre-initiationcomplex,PIC)：真核生物RNA-pol不與DNA分子直接結合，而需依靠眾多的轉錄因子?，F(xiàn)在是8頁\一共有42頁\編輯于星期日POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化轉錄的PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA復合物TATAⅡAⅡBTBPTAFTATAⅡHⅡECTD-PPIC組裝完成，TFⅡH使CTD磷酸化現(xiàn)在是9頁\一共有42頁\編輯于星期日POLIIIIFCTD轉錄預起始復合物的形成INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJE現(xiàn)在是10頁\一共有42頁\編輯于星期日轉錄起始復合物的形成——CTD的磷酸化INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJEPOLIIIIFCTDPPPPATP現(xiàn)在是11頁\一共有42頁\編輯于星期日啟動子清空INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJEPOLIICTDPPPPNTPsmRNA前體轉錄延伸因子現(xiàn)在是12頁\一共有42頁\編輯于星期日模板理論(piecingtheory)一個真核生物基因的轉錄需要3至5個轉錄因子。轉錄因子之間互相結合，生成有活性，有專一性的復合物，再與RNA聚合酶搭配而有針對性地結合、轉錄相應的基因?，F(xiàn)在是13頁\一共有42頁\編輯于星期日（二）轉錄延長轉錄因子TFⅡS參與延伸真核生物轉錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核膜相隔，沒有轉錄與翻譯同步的現(xiàn)象。RNA-pol前移處處都遇上核小體。轉錄延長過程中可以觀察到核小體移位和解聚現(xiàn)象?，F(xiàn)在是14頁\一共有42頁\編輯于星期日RNA-PolRNA-PolRNA-Pol核小體轉錄延長中的核小體移位轉錄方向現(xiàn)在是15頁\一共有42頁\編輯于星期日5------AAUAAA-5------AAUAAA--核酸酶-GUGUGUGRNA-polAATAAAGTGTGTG轉錄終止的修飾點55333加尾AAAAAAA······3mRNA——和轉錄后修飾密切相關。（三）轉錄終止-3’末端的產(chǎn)生和多聚腺苷酸化現(xiàn)在是16頁\一共有42頁\編輯于星期日轉錄后加工Post-transcriptionalProcessing第三節(jié)現(xiàn)在是17頁\一共有42頁\編輯于星期日一、真核生物mRNA的轉錄后加工（一）首、尾的修飾5端形成帽子結構(m7GpppGp—)3端加上多聚腺苷酸尾巴(polyAtail)現(xiàn)在是18頁\一共有42頁\編輯于星期日帽子結構現(xiàn)在是19頁\一共有42頁\編輯于星期日5’端加帽：現(xiàn)在是20頁\一共有42頁\編輯于星期日5端帽子結構的功能提高mRNA的穩(wěn)定性參與識別起始密碼子的過程，提高mRNA的可翻譯性有助于mRNA通過核孔從細胞核運輸?shù)郊毎|提高剪接反應的效率?，F(xiàn)在是21頁\一共有42頁\編輯于星期日變性與成熟的mRNA雜交；在電鏡下觀察DNA模板鏈成熟的mRNA（二）mRNA的剪接R-環(huán)技術發(fā)現(xiàn)基因斷裂現(xiàn)象現(xiàn)在是22頁\一共有42頁\編輯于星期日雞卵清蛋白成熟mRNA與DNA雜交電鏡圖DNAmRNA目錄R-環(huán)技術發(fā)現(xiàn)基因斷裂現(xiàn)象現(xiàn)在是23頁\一共有42頁\編輯于星期日真核生物結構基因，由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成，去除非編碼區(qū)再連接后，可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質，這些基因稱為斷裂基因。1.斷裂基因(splitegene)CABD編碼區(qū)A、B、C、D非編碼區(qū)現(xiàn)在是24頁\一共有42頁\編輯于星期日2.外顯子(exon)和內含子(intron)外顯子在斷裂基因及其初級轉錄產(chǎn)物上出現(xiàn)，并表達為成熟RNA的核酸序列，也就是基因中編碼氨基酸的序列。內含子隔斷基因的線性表達而在剪接過程中被除去的核酸序列，也就是基因中不編碼氨基酸的序列。現(xiàn)在是25頁\一共有42頁\編輯于星期日雞卵清蛋白基因hnRNA首、尾修飾hnRNA剪接成熟的mRNA雞卵清蛋白基因及其轉錄、轉錄后修飾現(xiàn)在是26頁\一共有42頁\編輯于星期日3.mRNA的剪接（RNAsplicing）mRNA的剪接：除去hnRNA中的內含子，并將相鄰的外顯子連接起來，形成成熟的mRNA。snRNP與hnRNA結合成為剪接體（splicesome）核內的蛋白質小分子核糖核酸蛋白體（snRNP發(fā)音為snurps

）snRNA參與剪接的主要有：U1-snRNP、U2-snRNP、U4-snRNP、U5-snRNP和U6-snRNP?，F(xiàn)在是27頁\一共有42頁\編輯于星期日①剪接體組裝過程剪接供體位點剪接受體位點分支點現(xiàn)在是28頁\一共有42頁\編輯于星期日②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA-AGUGU6E1E2U1、U4無活性的剪接體U5激活的剪接體現(xiàn)在是29頁\一共有42頁\編輯于星期日剪接過程中的兩次轉酯反應現(xiàn)在是30頁\一共有42頁\編輯于星期日二、真核細胞tRNA的轉錄后加工tRNA前體RNApolⅢTGGCNNAGTGCGGTTCGANNCCDNA目錄現(xiàn)在是31頁\一共有42頁\編輯于星期日RNAaseP（外切酶）、內切酶目錄1.剪切和修剪：核糖核酸酶催化現(xiàn)在是32頁\一共有42頁\編輯于星期日tRNA核苷酸轉移酶、連接酶ATPADP目錄2.添加CCA現(xiàn)在是33頁\一共有42頁\編輯于星期日3.堿基修飾（2）還原反應如：UDHU（3）核苷內的轉位反應如：Uψ（4）脫氨反應如：AI如：AAm（1）甲基化（1）（1）（3）（2）（4）目錄現(xiàn)在是34頁\一共有42頁\編輯于星期日4.酵母Pre-tRNA的剪接真核細胞Pre-RNA具有小的內含子現(xiàn)在是35頁\一共有42頁\編輯于星期日三、真核細胞rRNA前體的后加工1)剪切、修剪和修飾2)剪接（某些真核生物，如四膜蟲）現(xiàn)在是36頁\一共有42頁\編輯于星期日四膜蟲rRNA內含子的二級結構1.四膜蟲rRNA的剪接采用自我剪接方式5′-端核苷酸序列四、核酶現(xiàn)在是37頁\一共有42頁\編輯于星期日最簡單的核酶二級結構——錘頭狀結構(hammerheadstructure)通常為60個核苷酸左右同一分子上包括有催化部份和底物部份催化部份和底物部份組成錘頭結構除rRNA外，tRNA、mRNA的加工也可采用自我剪接方式。2.核酶：具有催化性質的RNA底物部分現(xiàn)在是38頁\一共有42頁\編輯于星期日3.核酶研究的意義核酶的發(fā)現(xiàn)，對中心法則作了重要補充；核酶的發(fā)現(xiàn)是對傳統(tǒng)酶學的挑戰(zhàn)；利用核酶的結構設計合成人工核酶；生命的起源：“RNA世界”？現(xiàn)在是39頁\一共有42頁\編輯于星期日反轉錄ReverseTranscription現(xiàn)在是40頁\一共有42頁\編輯于星期日反轉錄酶(reversetranscriptase）：

以RNA為模板，四種dNTP為底物，依據(jù)堿基互補原則指導合成DNA鏈的酶，又稱逆轉錄酶、反向轉錄酶。含有此種酶的病毒稱為反轉錄病毒?，F(xiàn)在是41頁\一共有42頁\編輯于星期日反