基因工程的應(yīng)用

基因工程的應(yīng)用.第1頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四一、基因工程的應(yīng)用1.轉(zhuǎn)基因植物類別應(yīng)用實例抗蟲抗病抗逆改良殺蟲的基因主要有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等抗病毒基因:病毒外殼蛋白基因和病毒的復(fù)制酶基因;抗真菌基因:幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因抗鹽堿和抗干旱的調(diào)節(jié)細胞滲透壓基因、抗凍蛋白基因、抗除草劑基因①轉(zhuǎn)基因玉米中賴氨酸的含量比對照提高30%②轉(zhuǎn)基因延熟番茄儲存時間可延長1～2個月③轉(zhuǎn)基因矮牽牛呈現(xiàn)出自然界沒有的顏色變異第2頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四3.基因工程藥物(1)來源：轉(zhuǎn)基因的_______。(2)成果：_________、抗體、_____、激素等。(3)作用：預(yù)防和治療_________、心血管疾病、_______、各種傳染病、糖尿病、類風濕等疾病。4.基因治療(1)方法：把_________導入病人體內(nèi)，使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能。(2)效果：治療_______的最有效的手段。(3)分類：_____基因治療和_____基因治療。

工程菌細胞因子疫苗人類腫瘤遺傳病正?；蜻z傳病體內(nèi)體外第3頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四(2)兩者的區(qū)別比較項目乳腺生物反應(yīng)器工程菌基因結(jié)構(gòu)基因表達受體細胞導入目的基因的方式動物基因的結(jié)構(gòu)與人類基因的結(jié)構(gòu)基本相同細菌或酵母菌等生物基因的結(jié)構(gòu)與人類基因的結(jié)構(gòu)有較大差異合成的藥物蛋白與天然蛋白質(zhì)相同細菌細胞內(nèi)沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細胞器,產(chǎn)生的藥物蛋白可能沒有活性動物的受精卵微生物細胞顯微注射法感受態(tài)細胞法第4頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四比較項目乳腺生物反應(yīng)器工程菌生產(chǎn)條件藥物提取生產(chǎn)設(shè)備不需嚴格滅菌,溫度等外界條件對其影響不大需嚴格滅菌,嚴格控制工程菌所需的溫度、pH、營養(yǎng)物質(zhì)濃度等外界條件從動物乳汁中提取從微生物細胞中提取畜牧業(yè)生產(chǎn),加提取設(shè)備工業(yè)生產(chǎn),設(shè)備精良第5頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四2.基因治療與基因診斷原理操作過程進展基因治療基因診斷基因表達堿基互補配對利用正?；?qū)胗谢蛉毕莸募毎?以表達出正常性狀來治療臨床實驗制作特定DNA探針與病人樣品DNA混合分析雜交帶情況臨床應(yīng)用第6頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四一、植物基因工程碩果累累

哪些轉(zhuǎn)基因作物已進入大規(guī)模商業(yè)化應(yīng)用階段?轉(zhuǎn)基因大豆、玉米、棉花和油菜第7頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四植物基因工程技術(shù)主要用于哪些方面?提高農(nóng)作物的抗逆能力（如抗除草劑、抗蟲、抗病、抗干旱和抗鹽堿等）,以及改良農(nóng)作物的品質(zhì)和利用植物生產(chǎn)藥物等方面.第8頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四(一)抗蟲轉(zhuǎn)基因植物1.蟲害給農(nóng)作物帶來了哪些影響?

傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)如何防治害蟲?有哪些不足?2.現(xiàn)在已有哪些抗蟲植物問世?第9頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四3.抗蟲基因Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等請閱讀P18生物資料技術(shù)卡,了解一些抗蟲基因的抗蟲機理。4.抗蟲棉的目的基因是什么?目的基因從何而來?5.我國的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉取得了哪些進展?第10頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四（二）抗病轉(zhuǎn)基因植物1.什么是病原微生物？有哪些種類？引起生物生病的微生物，主要有病毒、真菌和細菌等2.為什么說常規(guī)育種很難培育出抗病毒的新品種？3.在抗病轉(zhuǎn)基因植物中使用最多的是什么基因？病毒外殼蛋白（coatprotein，CP）基因；病毒的復(fù)制酶基因第11頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四3.在抗真菌轉(zhuǎn)基因植物中使用什么基因？幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因第12頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四（三）其他抗逆轉(zhuǎn)基因植物1.哪些環(huán)境條件會造成農(nóng)作物低產(chǎn)、減產(chǎn)？鹽堿、干旱、低溫和澇害等2.鹽堿和干旱對農(nóng)作物的危害與什么有關(guān)？細胞內(nèi)的滲透壓調(diào)節(jié)在抗鹽堿和抗干旱作物中使用了什么基因？調(diào)節(jié)細胞滲透壓的基因第13頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四3.轉(zhuǎn)基因耐寒的煙草和番茄中哪種目的基因提高了其抗寒能力？目的基因從何而來？魚的抗凍蛋白基因第14頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四4.抗除草劑基因有何用途？噴灑除草劑時，殺死田間的雜草而不損傷作物第15頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四（四）利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)人體（或其它脊椎動物）必不可少，而機體內(nèi)又不能合成的，必須從食物中補充的氨基酸，稱必需氨基酸。必需氨基酸共有８種：賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸（甲硫氨酸）、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸。如果飲食中經(jīng)常缺少必需氨基酸，可影響健康。另外12種氨基酸是人體細胞能夠合成的叫做非必需氨基酸。第16頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四轉(zhuǎn)基因延熟番茄的目的基因是什么？控制番茄果實成熟的基因第17頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四轉(zhuǎn)基因矮牽牛的目的基因是什么？與植物花青素代謝有關(guān)的基因轉(zhuǎn)基因藍玫瑰第18頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四總結(jié)：基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用（1）高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具優(yōu)良品質(zhì)的品種用基因工程的方法可以改善糧食作物的蛋白質(zhì)含量。如“向日葵豆”植株。（2）抗逆性品種將細菌的抗蟲、抗病毒、抗除草劑、抗鹽堿、抗干旱、抗高溫等抗性基因轉(zhuǎn)移到作物體內(nèi)，將從根本上改變作物的特性。如轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。第19頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四二、動物基因工程前景廣闊（一）用于提高動物生長速度——動物品種改良、建立生物反應(yīng)器、器官移植等導入外源生長激素基因第20頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四（二）用于改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)舉例說明將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M，轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大減低。（三）用轉(zhuǎn)基因的動物生產(chǎn)藥物設(shè)問:就基因藥物而言，最理想的表達場所是哪里？轉(zhuǎn)基因動物的乳腺。第21頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四

（1）乳腺是一個外分泌器官，乳汁不進入體內(nèi)循環(huán)，不會影響轉(zhuǎn)基因動物本身的生理代謝反應(yīng)。（2）從乳汁中獲取目的基因產(chǎn)物，產(chǎn)量高，易提純，表達的蛋白質(zhì)已經(jīng)過充分的修飾加工，具有穩(wěn)定的生物活性。（3）從乳汁中源源不斷獲得目的基因的產(chǎn)物的同時，轉(zhuǎn)基因動物又可無限繁殖。設(shè)問:為什么乳腺能成為基因藥物最理想的表達場所呢？第22頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，通過顯微注射等方法，導入哺乳動物的受精卵中，將受精卵送入母體，使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。轉(zhuǎn)基因動物進入泌乳期后，可以通過分泌乳汁生產(chǎn)所需要的藥品，稱為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器。乳腺生物反應(yīng)器乳腺生物反應(yīng)器的優(yōu)點：①產(chǎn)量高；②質(zhì)量好；③成本低；④易提取。第23頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四（四）用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的供體利用基因工程對豬的器官進行改造方法：將器官供體基因組導入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達或設(shè)法除去抗原決定基因，再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官第24頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四將目的基因?qū)氲絼游锏氖芫牙?，目的基因若與受精卵染色體DNA整合，細胞分裂時，該基因隨染色體的倍增而倍增，使每個細胞中都帶有目的基因，使性狀得以表達，并穩(wěn)定地遺傳給后代，從而獲得基因產(chǎn)品。這樣一種新的個體，稱為轉(zhuǎn)基因動物?？偨Y(jié)：什么叫轉(zhuǎn)基因動物？基因工程在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上的應(yīng)用主要是什么？繁殖具有抗病能力、高產(chǎn)仔率、高產(chǎn)奶率和高質(zhì)量的皮毛等優(yōu)良品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因動物。該過程的重要步驟是通過感染或顯微注射技術(shù)將重組DNA轉(zhuǎn)移到動物受精卵中。第25頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四答案：(1)啟動子標記基因終止子(2)受精卵發(fā)育的全能性最容易表達(3)分子雜交個體生物學水平鑒定DNA分子雜交抗原—抗體雜交(答對任意兩種即可)(4)工程菌培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)直接從生物組織、細胞或血液由于受操作條件相對較苛刻等的限制，價格十分昂貴典例1第26頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四1.在傳統(tǒng)的藥品生產(chǎn)中，某些藥品如胰島素、干擾素等直接從生物體的哪些結(jié)構(gòu)中提?。繌纳锏慕M織、細胞或血液中提取。2.傳統(tǒng)生產(chǎn)方法的缺點:由于受原料來源的限制，價格十分昂貴。三、基因工程藥品異軍突起第27頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四3.可利用什么方法來解決上述問題？利用基因工程方法制造轉(zhuǎn)基因的工程菌，可高效率地生產(chǎn)出各種高質(zhì)量、低成本的藥品。工程菌:用基因工程方法，使外源基因得到高效率表達的菌類細胞株系?；蚬こ趟幤钒ǎ杭毎蜃樱戳馨鸵蜃尤绨准毎樗亍?、干擾素）、抗體、疫苗、激素等第28頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四

胰島素是治療糖尿病的特效藥。一般臨床上使用的胰島素主要從豬、牛等家畜的胰腺中提取，每100kg胰腺只能提取4－5g胰島素。用該方法生產(chǎn)的胰島素產(chǎn)量低，價格昂貴，遠不能滿足社會需要。1979年，科學家將動物體內(nèi)的胰島素基因與大腸桿菌DNA分子重組，并在大腸桿菌內(nèi)實現(xiàn)了表達。1982年，美國一家基因公司用基因工程方法生產(chǎn)的胰島素投入市場，售價降低了30%－50%?；蚬こ趟幤贰?/p>

胰島素第29頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四

治療侏儒癥的唯一方法，是向人體注射生長激素。而生長激素的獲得很困難。以前，要獲得生長激素，需解剖尸體，從大腦的底部摘取垂體，并從中提取生長激素。現(xiàn)可利用基因工程方法，將人的生長激素基因?qū)氪竽c桿菌中，使其生產(chǎn)生長激素。人們從450L大腸桿菌培養(yǎng)液中提取的生長激素，相當于6萬具尸體的全部產(chǎn)量?；蚬こ趟幤贰?/p>

生長激素第30頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四干擾素是動物或人體細胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白。干擾素幾乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一種抗病毒的特效藥。此外干擾素對治療癌癥和某些白血病也有一定療效。傳統(tǒng)的干擾素生產(chǎn)方法是從人血液中的白細胞內(nèi)提取，每300L血液只能提取出1mg干擾素。1980－1982年，科學家用基因工程方法在大腸桿菌及酵母菌細胞內(nèi)獲得了干擾素，是傳統(tǒng)的生產(chǎn)量的12萬倍。1987年上述干擾素大量投放市場?；蚬こ趟幤贰?/p>

干擾素第31頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四利用微生物生產(chǎn)藥物的優(yōu)越性何在?利用微生物生產(chǎn)蛋白質(zhì)類藥物，是指將人們需要的某種蛋白質(zhì)的編碼基因，構(gòu)建成表達載體后導入微生物，然后利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)蛋白質(zhì)類藥物。有以下優(yōu)越性：（1）利用活細胞作為表達系統(tǒng)，表達效率高，無需大型裝置和大面積廠房就可以生產(chǎn)出大量藥品。（2）可以解決傳統(tǒng)制藥中原料來源的不足。利用基因工程菌發(fā)酵生產(chǎn)就不需要從動物或人體上獲取原料。（3）降低生產(chǎn)成本，減少生產(chǎn)人員和管理人員。第32頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四1、基因治療概念：四、基因治療曙光初照

把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的，是治療遺傳病的最有效的手段。（把特定的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募毎校瑥亩_到治療疾病的目的）2、實例：

將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入取自患者的淋巴細胞中，再將這種淋巴細胞轉(zhuǎn)入患者體內(nèi)。(1)對嚴重復(fù)合型免疫缺陷癥的治療第33頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四3、基因治療的類型體外基因治療：先從病人體內(nèi)獲得某種細胞，進行培養(yǎng)，然后在體外完成基因轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細胞擴增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。體內(nèi)基因治療：直接向人體組織細胞中轉(zhuǎn)移的治病方法。（如將治療囊性纖維病的正?；蜣D(zhuǎn)入患者肺組織）4、基因治療的發(fā)展現(xiàn)狀：處于初期的臨床試驗階段5、用于基因治療的基因種類：正常基因、反義基因和自殺基因第34頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四DNA分子雜交是基因診斷最基本的方法之一。當用一段已知基因的核苷酸序列作為探針，與被測基因進行接觸，若兩者的堿基完全配對成雙鏈，則表明被測基因中含有已知的基因序列。知識回顧：基因診斷第35頁，共37頁，2023年，2月20日，星期四五、基因芯片

從正常人的基因組中分離出DNA與DNA芯片雜交就可以得出標準圖譜；從病人的基因組中分離出DNA與DNA芯片雜交就可以得出病變圖譜。