實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和一般技術(shù)

實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和一般技術(shù)第1頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四

實(shí)驗(yàn)室是細(xì)胞工程研究的主要場(chǎng)所，應(yīng)能滿足清洗、培養(yǎng)基制備、儲(chǔ)藏、無(wú)菌操作、培養(yǎng)、鑒定等多方面的工作需要。第2頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第一節(jié)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)洗滌間培養(yǎng)基配制間消毒間無(wú)菌操作間培養(yǎng)室鑒定室第3頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四洗滌間面積:30-50m2配置：在實(shí)驗(yàn)室的一側(cè)設(shè)置專用的洗滌水槽，用來(lái)清洗玻璃器皿。中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)還應(yīng)配置2個(gè)水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大，可以購(gòu)置一臺(tái)洗瓶機(jī)。準(zhǔn)備1-2個(gè)洗液缸，專門用于洗滌對(duì)潔凈度要求很高的玻璃器皿。此外還應(yīng)配置落水架、干燥箱、柜子、超聲波清洗器等，地面應(yīng)耐濕并排水良好。第4頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四超聲波清洗機(jī)全自動(dòng)洗瓶機(jī)第5頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四培養(yǎng)基配制間

面積60平方米左右配備的主要儀器設(shè)備有：冰箱、天平、微波爐、pH計(jì)、培養(yǎng)基分裝器、藥品柜、器械柜、抽氣泵、電爐、各種規(guī)格的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶、儲(chǔ)藏瓶等。冰箱以體積180-200L為宜(最好冷藏容積大于冷凍容積），用于儲(chǔ)存培養(yǎng)基母液、激素維生素等貴重藥品、彩色膠卷、及保存植物材料。天平應(yīng)有不同感量。

第6頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四消毒間

配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、高壓滅菌鍋、排風(fēng)滅火設(shè)備、細(xì)菌過(guò)濾設(shè)備、干熱消毒柜、電爐等。滅菌鍋的選擇應(yīng)根據(jù)不同的要求選擇不同型號(hào)的滅菌鍋。一般實(shí)驗(yàn)室可選用小型的醫(yī)用手提式高壓滅菌鍋，較大的實(shí)驗(yàn)室可選用立式自動(dòng)控制壓力和溫度的滅菌鍋。生產(chǎn)性的實(shí)驗(yàn)室可選用大型的臥式滅菌鍋。如果沒(méi)有條件的話，可以將上述工作間合并成一個(gè)準(zhǔn)備間，要求是設(shè)備的安裝和排列要合理、房間要寬敞、明亮、透風(fēng)，地面要便于清潔、防滑。

第7頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四無(wú)菌操作室（接種室）

通常由里外兩間組成，外間是緩沖間，用于準(zhǔn)備工作，還有防止污染的作用。緩沖間的門應(yīng)該與接種室的門錯(cuò)開(kāi)，兩個(gè)門也不要同時(shí)開(kāi)啟，以保證無(wú)菌室不因開(kāi)門和人的進(jìn)出帶進(jìn)雜菌。緩沖間內(nèi)應(yīng)該設(shè)有水槽、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、鞋帽架、和柜子、紫外燈。無(wú)菌操作室的內(nèi)壁應(yīng)當(dāng)用塑鋼板或瓷磚裝修，工作人員進(jìn)入操作間前要穿上消過(guò)毒的工作服和拖鞋。室內(nèi)應(yīng)配有超凈工作臺(tái)，紫外燈、解剖鏡、各種接種器械等。第8頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第9頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四培養(yǎng)室

為了控制培養(yǎng)室的溫度和光照時(shí)間及其強(qiáng)度，培養(yǎng)室的房間不要窗戶，但應(yīng)當(dāng)留一個(gè)通氣窗，并安上排氣扇。室內(nèi)溫度由空調(diào)控制，光照由日光燈控制。天花板和內(nèi)墻最好用塑料鋼板裝修，地面用水磨石或瓷磚鋪設(shè)，一般要分兩間，一為光照培養(yǎng)室，一為暗培養(yǎng)室。培養(yǎng)室外應(yīng)有一預(yù)備間或走廊。培養(yǎng)室應(yīng)配有培養(yǎng)架、轉(zhuǎn)床、搖床、光照培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、自動(dòng)控時(shí)器等。日光燈一般用40W，固定在培養(yǎng)架的側(cè)面或擱板的下面，每層有兩支日光燈，距離在20cm，光照強(qiáng)度為2000-3000lx。

第10頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第11頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四輔助實(shí)驗(yàn)室鑒定室溫室第12頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四鑒定室細(xì)胞學(xué)鑒定室其功能是對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定和研究。要求清潔、明亮、干燥，使各種光學(xué)儀器不受潮濕和灰塵污染。應(yīng)配置各種顯微鏡、照相系統(tǒng)等。生化分析室在以培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗(yàn)室中，應(yīng)建立相應(yīng)的分析化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，以便于對(duì)培養(yǎng)物的有效成分隨時(shí)進(jìn)行取樣檢查。離心機(jī)、酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀、天平、PCR儀等。第13頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四溫室為試管苗提供滿足生長(zhǎng)的適宜環(huán)境條件。

第14頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第二節(jié)常用設(shè)備和器材準(zhǔn)備室裝置：水純化裝置超聲波清洗器蒸汽壓力消毒器電熱干燥箱過(guò)濾除菌裝置操作室裝置：超凈工作臺(tái)移液器培養(yǎng)室裝置：培養(yǎng)箱搖床檢測(cè)設(shè)備：顯微鏡顯微操作儀血球計(jì)數(shù)板細(xì)胞冷凍存儲(chǔ)設(shè)備第15頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四一、水純化裝置

細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)水的要求：純水(重蒸水、三蒸水）蒸餾式水純化裝置過(guò)濾式水純化裝置第16頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四二、超聲波清洗器原理：利用超聲波在液體中的“空化”作用，使污物剝落。第17頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四三、蒸汽壓力消毒器作用：滅菌種類：手提式、臥式、立式手提式滅菌鍋操作步驟：注水－裝鍋－加熱－排冷氣－到規(guī)定氣壓時(shí)維持滅菌時(shí)間－自然降溫－開(kāi)閥－取物第18頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四四、電熱干燥箱作用：烘干、干熱滅菌使用方法：第19頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四五、過(guò)濾除菌裝置玻璃漏斗式濾器Zeiss濾器針頭式濾器正壓式金屬濾器第20頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四六、超凈工作臺(tái)作用：分類：結(jié)構(gòu)組成：鼓風(fēng)機(jī)、濾板、操作空間、照明設(shè)備、滅菌設(shè)備使用第21頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四七、培養(yǎng)箱光照培養(yǎng)箱人工氣候箱第22頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四八、搖床作用：第23頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四九、移液器單通道移液器多通道移液器連續(xù)加樣器電動(dòng)加樣器第24頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四十、顯微鏡體視顯微鏡透射顯微鏡倒置顯微鏡熒光顯微鏡相差顯微鏡第25頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四十一、細(xì)胞冷凍存儲(chǔ)設(shè)備第26頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第三節(jié)常用器皿選擇及清洗

一、器皿選擇二、器皿清洗第27頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四1、培養(yǎng)用器皿培養(yǎng)皿培養(yǎng)瓶培養(yǎng)板第28頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四2金屬器械鑷子剪刀解剖刀接種針第29頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四二、常用器材的清洗1玻璃器材的清洗2橡膠制品的清洗3除菌濾器的清洗4塑料器皿的清洗5金屬器械的清洗6常用洗滌液的種類和配制方法

第30頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四1玻璃器材的清洗主要包括培養(yǎng)瓶、試管、培養(yǎng)皿、移液管的清洗新玻璃器材的清洗：浸泡－－刷洗－－浸酸－－沖洗－－蒸餾水沖洗使用過(guò)的玻璃器材的清洗浸泡－－刷洗注意：1.量器不可刷洗

2.有毒物容器處理第31頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四2橡膠制品的清洗新橡膠制品清洗：堿煮沸－－沖洗－－酸煮沸－－沖洗－－自來(lái)水煮沸－－蒸餾水沖洗－－烘干使用過(guò)的膠塞按照玻璃器材方法清洗第32頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四3除菌濾器的清洗新的G6除菌濾器的清洗

清潔液中浸泡24h－－流水沖洗至pH5.5－－4倍體積蒸餾水緩慢沖洗－－三蒸水沖洗－－烤干－－包裝消毒用過(guò)的G6除菌濾器的清洗立即浸泡水中過(guò)夜－－流水沖洗24h－－濾面基本疏通時(shí)50℃烤干－－清潔液中浸泡24h－－流水沖洗至pH5.5－－4倍體積蒸餾水緩慢沖洗－－三蒸水沖洗－－烤干－－包裝消毒蔡式濾器清洗第33頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四4塑料器皿的清洗注意：防止劃痕，防止附著物干結(jié)過(guò)程：脫脂棉擦拭－－流水沖洗－－晾干－－2%NaOH浸泡過(guò)夜－－自來(lái)水沖洗－－5%鹽酸浸泡30min－－自來(lái)水沖洗－－蒸餾水沖洗第34頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四5金屬器械的清洗金屬用品一般不宜用各種洗滌液洗滌（新的可以用熱洗衣粉水洗凈），需要清洗時(shí)，一般用酒精擦洗，然后火焰干燥。

第35頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期四6常用洗滌液的種類和配制方法鉻酸洗液