實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本知識(shí)及基本操作

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本知識(shí)及基本操作第1頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類。小鼠（Mouse)小鼠被廣泛的用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)、藥理、毒理、腫瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生產(chǎn)和教學(xué)。第2頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類。大鼠（Rat)大鼠應(yīng)用于生理學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)，內(nèi)分泌學(xué)、神經(jīng)生理、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、傳染病、腫瘤和肝外科等的研究。第3頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類。豚鼠（Guineapig)常用于免疫學(xué)、微生物學(xué)、傳染病學(xué)、聽覺生理、實(shí)驗(yàn)性壞血癥等研究。

第4頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類。家兔(Rabbit)常用于免疫學(xué)、腫瘤、實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、生殖生理、遺傳性疾病等的方面的研究，制造生物制品。

第5頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類。貓（Cat）貓的神經(jīng)系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)較發(fā)達(dá)，與人很相似。常用于神經(jīng)、循環(huán)和呼吸方面的實(shí)驗(yàn)。

第6頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類。犬(Dog)常用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、藥理、毒理學(xué)、實(shí)驗(yàn)外科學(xué)、行為學(xué)、腫瘤學(xué)等方面研究

在以犬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的研究成果中，只有應(yīng)用Beagle才能被國(guó)際公認(rèn)。

第7頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類。豬(Pig)常應(yīng)用于皮膚燒傷、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、心血管及糖尿病、遺傳性和營(yíng)養(yǎng)性疾病、移植、外科手術(shù)等方面的研究

第8頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類。猴(Monkey)主要用于傳染病學(xué)、藥理學(xué)和毒理學(xué)、生殖生理、口腔醫(yī)學(xué)）營(yíng)養(yǎng)、代謝、行為學(xué)和高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)研究及老年病、器官移植、眼科、內(nèi)分泌病和畸胎學(xué)、腫瘤學(xué)第9頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和利用一般來(lái)說，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物愈高等，進(jìn)化程度愈高、其機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜．反應(yīng)就愈接近人類，猴、拂拂、猩猩、長(zhǎng)臂猿等靈長(zhǎng)目動(dòng)物是最近似于人類的理想動(dòng)物。但實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，并非僅靈長(zhǎng)類動(dòng)物在生物學(xué)特性、解剖生理特點(diǎn)等方面與人具有相似性。第10頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四蛙的大腦不發(fā)達(dá)，不可作為高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)，但蛙的脊髓具有最簡(jiǎn)單的發(fā)射中樞，做神經(jīng)反射弧實(shí)驗(yàn)，簡(jiǎn)單、直觀、明確、容易分析。第11頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四時(shí)象或年齡狀態(tài)的相似性第12頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四所選的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中一種為嚙齒類動(dòng)物，另一種為非嚙齒類動(dòng)物。常用的實(shí)驗(yàn)序列是小鼠、大鼠、狗、猴或小型豬。第13頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四動(dòng)物的捉拿、固定動(dòng)物性別的辨別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)常用給藥方法二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本操作第14頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四蟾蜍（一）動(dòng)物的捉拿、固定AB圖3-2-1青蛙(或蟾蜍)捉拿法圖3-2-2青蛙(或蟾蜍)固定法第15頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四小鼠的捉持1.捉持法以右手捉小鼠尾，將小鼠放于粗糙面上，向后輕拉小鼠尾部，使小鼠固定于粗糙面上。用左手的拇指、食指和中指捏住小鼠兩耳及頭部皮膚，無(wú)名指、小指和掌心夾住其背部皮膚和尾部，使頭部朝上，頸部拉直但不宜過緊，以免窒息。

圖3-2-2小白鼠的捉拿法第16頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四大鼠、豚鼠家兔（一）動(dòng)物的捉拿、固定圖3-2-5兔捉拿方法AB圖3-2-4大鼠和豚鼠的捉拿和固定第17頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第18頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四家兔的捉持方法動(dòng)作要輕柔，用右手抓住兔背部近頸處皮膚，輕輕提起，另用左手托住臀部，使重量?jī)A于左手減輕頸部拉力第19頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四注意：切勿只抓兩耳朵，因兔耳是軟骨，不能承受全身重量，受抓時(shí)必感疼痛而亂跳，使耳根受傷，兩耳垂落，血管擴(kuò)張影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察。也不應(yīng)抓后腿，因突然使頭部向下倒置，易發(fā)生頭部血液循環(huán)障礙而致死第20頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四小白鼠家兔（二）動(dòng)物性別的辨別雄雌圖3-2-7小鼠性別的特征第21頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別鑒定動(dòng)物♂♀小白鼠和大白鼠家兔豚鼠青蛙與蟾蜍生殖器與肛門距離較遠(yuǎn)，用手捏外生殖器，可見陰莖凸出，天熱時(shí)可見陰囊下垂。左手抓住頸部皮膚，右手中指與無(wú)名指夾住尾巴；拇指與食指分開生殖器的皮毛，可見陰莖露出。一手抓住頸部，另一手扒開靠生殖器的突起，可見陰莖露出。用右手指捏住腰部將其提起，前肢作環(huán)抱狀，并有鳴叫，前肢拇指與食指間趾蹼上有棕黑色小突起（婚痣）外生殖器與肛門距離較近，乳頭明顯。僅呈橢圓形間隙，有陰道。呈三角形間隙。前肢呈伸直狀，無(wú)鳴叫，無(wú)婚痣。第22頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（三）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)

可用不同的顏色分別代表編號(hào)的個(gè)位、十位、百位。紅色：0.5％中性紅或品紅溶液

黃色：3％-5％苦味酸溶液

咖啡色：2％硝酸銀溶液

黑色：煤焦油酒精溶液標(biāo)號(hào)順序：先左后右，從上到下147258369第23頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四標(biāo)記方法：用棉簽或毛筆沾一種顏料溶液，涂于動(dòng)物體表不同部位標(biāo)記，順序是：先左后右，從上到下，從前到后。左前腿記為1號(hào)，左側(cè)腹部記為2號(hào)，左后腿記為3號(hào)；頭部記為4號(hào)，腰部記為5號(hào)，尾基部記為6號(hào)；右前腿記為7號(hào)，右側(cè)腹部記為8號(hào)，右下腿記為9號(hào)。空白處則記為10號(hào)。第24頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（四）常用給藥方法經(jīng)消化道給藥法自動(dòng)攝取法喂藥法灌胃給藥法經(jīng)直腸給藥圖3-2-9小鼠灌胃法胃管開口器圖3-2-10兔灌胃方法第25頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（四）常用給藥方法注射給藥法皮下注射腹腔注射小鼠腹腔注射方法第26頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（四）常用給藥方法注射給藥法肌肉注射靜脈注射8.5cm3.5cm1cm小鼠尾靜脈注射法兔耳緣靜脈注射法第27頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（四）常用給藥方法涂布給藥法藥物經(jīng)皮膚吸收、局部作用或致敏作用時(shí)間根據(jù)藥物性質(zhì)和要求定第28頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（五）動(dòng)物被毛的去除法拔毛法剪毛法剃毛法脫毛法第29頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法小鼠1.灌胃法左手拇指和食指捏住小鼠頸背部皮膚，無(wú)名指和小指將尾部緊壓在手掌上，使小鼠腹部朝上。右手持灌胃管(注射針頭稍加彎曲制成)經(jīng)口角插入口腔，用灌胃管向后上方壓迫小鼠頭部，使口腔與食道成一直線，再將胃管沿上顎壁輕輕推進(jìn)食道，推注藥液。2.皮下注射注射部位可選背部皮下，操作時(shí)輕輕拉起背部皮膚，將注射針頭刺入皮下，稍稍擺動(dòng)針頭，若容易擺動(dòng)則表明針尖的位置確定在皮下，此時(shí)注射藥物。拔針時(shí)，輕捏針刺部位片刻，以防藥液逸出。第30頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四3.肌肉注射小鼠固定如上述，將注射器針頭刺入小鼠臀部外側(cè)肌肉，注入藥物。4.腹腔注射左手固定動(dòng)物，使小鼠呈頭低位，腹部朝上，右手持注射器，在左或右側(cè)下腹部將針頭刺入皮下，沿皮下向前推進(jìn)3～5mm，然后使針頭與皮膚呈45度角方向穿入腹腔。針尖進(jìn)入腹腔可有抵抗消失感，此時(shí)可輕推藥物。第31頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四尾靜脈注射將小鼠裝入籠內(nèi)，使其尾部外露。尾部用溫水浸泡半分鐘或用酒精棉球擦拭，使其血管充血和表皮角質(zhì)軟化，以拇指和食指捏住尾根部的兩側(cè)，阻斷其靜脈回流，使尾靜脈充盈明顯，以無(wú)名指和小指夾持其尾尖，用中指托起尾巴，使之固定。選其一側(cè)尾靜脈穿刺，如針頭確在血管內(nèi)，則推注藥液。需反復(fù)靜脈注射時(shí)，易從尾端開始。第32頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四給藥量(一)

小白鼠：灌胃法（0.1-0.3ml/10g）

皮下注射（0.1-0.3ml/10g）

腹腔注射（0.1-0.2ml/10g）（二）家兔：灌胃法（≤20ml/只）皮下注射（0.5-1.0ml/kg）

腹腔注射（0.5-1.0ml/kg）

靜脈注射（0.5-1.0ml/kg）

肌肉注射（0.5-1.0ml/kg）第33頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四家兔的取血方法1.耳靜脈采血

本法為最常用的取血法之一，常作多次反復(fù)取血用，因此，保護(hù)耳緣靜脈，防止發(fā)生栓塞特別重要。

將兔放入僅露出頭部及兩耳的固定盒中，或由助手以手扶住。選耳靜脈清晰的耳朵，將耳靜脈部位的毛拔去，用75%酒精局部消毒，待干。用手指輕輕摩擦兔耳，使靜脈擴(kuò)張，用連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或?qū)⑨橆^逆血流方向刺入耳緣靜脈取血，取血完畢用棉球壓迫止血，此種采血法一次最多可采血5-10ml。

第34頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四2.耳中央動(dòng)脈采血

將兔置于兔固定筒內(nèi)，在兔耳的中央有一條較粗、顏色較鮮紅的中央動(dòng)脈，用左手固定兔耳，右手取注射器，在中央動(dòng)脈的末端，沿著動(dòng)脈平行地向心方向刺入動(dòng)脈，即可見動(dòng)脈血進(jìn)入針筒，取血完畢后注意止血。此法一次抽血可達(dá)15ml。但抽血時(shí)應(yīng)注意，由于兔耳中央動(dòng)脈容易發(fā)生痙攣性收縮，因此抽血前，必須先讓兔耳充分充血，當(dāng)動(dòng)脈擴(kuò)張，未發(fā)生痙攣性收縮之前立即進(jìn)行抽血，如果等待時(shí)間過長(zhǎng)，動(dòng)脈經(jīng)常會(huì)發(fā)生較長(zhǎng)時(shí)間的痙攣性收縮。取血用的針頭一般用6號(hào)針頭，不要太細(xì)。針刺部位從中央動(dòng)脈末端開始。不要在近耳根部取血，因耳根部軟組織厚，血管位置略深，易刺透血管造成皮下出血。

第35頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四3.心臟取血

將家兔仰臥固定，在第三肋間胸骨左緣3毫米處注射針垂直刺入心臟，血液隨即進(jìn)入針管。注意事項(xiàng)有：⑴動(dòng)作宜迅速，以縮短在心臟內(nèi)的留針時(shí)間和防止血液凝固；⑵如針頭已進(jìn)入心臟但抽不出血時(shí)，應(yīng)將針頭稍微后退一點(diǎn)。⑶在胸腔內(nèi)針頭不應(yīng)左右擺動(dòng)以防止傷及心，肺、一次可取血20-25ml。

第36頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四4.后肢脛部皮下靜脈取血將兔仰臥固定于兔固定板上，或由一人將兔固定好。拔去脛部被毛，在脛部上端股部扎以橡皮管，則在脛部外側(cè)淺表皮下，可清楚見到皮下靜脈。用左手兩指固定好靜脈，右手取帶有5（1/2）號(hào)針頭的注射器內(nèi)皮下靜脈平行方向刺入血管，抽一下針?biāo)?，如血進(jìn)入注射器，表示針頭已刺入血管，即可取血。一次可取2～5ml。取完后必須用棉球壓迫取血部位止血，時(shí)間要略長(zhǎng)些，因此處不易止血。如止血不妥，可造成皮下血腫，影響連續(xù)多次取血。

第37頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四5.股靜脈、頸靜脈取血先作股靜脈和頸靜脈暴露分離手術(shù)

⑴股靜脈取血注射器平行于血管，從股靜脈下端向心方向刺入，徐徐抽動(dòng)針?biāo)纯扇⊙３檠戤吅笠⒁庵寡?。股靜脈較易止血，用于紗布輕壓取血部位即可。若連續(xù)多次取血，取血部位宜盡量選擇靠離心端。

⑵外頸靜脈取血注射器由近心端（距頸靜脈分支2-3厘米處）向頭側(cè)端順血管平等方向刺入，使注射針一直引深至頸靜脈分支叉處，即可取血。此處血管較粗，很容易取血，取血量也較多，一次可取10ml以上。取血完畢，拔出針頭，用干紗布輕輕壓迫取血部位也易止血。兔急性實(shí)驗(yàn)的靜脈取血，用此法較方便。第38頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四各種動(dòng)物麻醉的方式吸入麻醉、注射麻醉、局部麻醉。局部麻醉常用的麻醉藥:浸潤(rùn)麻醉、阻滯麻醉和椎管麻醉常用0.5%~1%普卡因注射液，表面麻醉宜用2%丁卡因溶液。第39頁(yè)，共44頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法很多，應(yīng)根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)動(dòng)物品種（品系）、以及需要采集標(biāo)本的部位等因素，選擇不同的處死方法。無(wú)論采用哪一種方法，都應(yīng)遵循安樂死的原則。安樂死是指在不影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提下，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物短時(shí)間無(wú)痛苦地死亡。處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)應(yīng)注意，首先要保證實(shí)驗(yàn)人員的安全；其次要確認(rèn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物已經(jīng)死亡，通過對(duì)呼吸、心跳、瞳孔、神經(jīng)反射等指征的觀察，對(duì)死亡作出綜合判斷；再者要注意環(huán)保，避免污染環(huán)境，還要妥善處理好尸體。

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