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肌肉組織氨基移換作用

（紙層析法）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解氨基移換作用的原理。2.熟悉紙層析法的基本原理。3.掌握紙層析法分離鑒定氨基酸的方法。氨基移換作用（轉(zhuǎn)氨基作用）在轉(zhuǎn)氨酶的作用下，某一氨基酸去掉α-氨基生成相應(yīng)的α-酮酸，而另一種α-酮酸得到此氨基生成相應(yīng)的氨基酸的過(guò)程。二、實(shí)驗(yàn)原理正常人各組織中GPT及GOT活性(單位/克濕組織)血清轉(zhuǎn)氨酶活性，臨床上可作為疾病診斷和預(yù)后的指標(biāo)之一。組織GPTGOT組織GPTGOT肝44000142000胰腺200028000腎1900091000脾120014000心7100156000肺70010000骨骼肌480099000血清1620谷氨酸丙酮酸α-酮戊二酸丙氨酸2.層析

層析系統(tǒng)通常都有兩個(gè)相組成：固定相和流動(dòng)相?；旌衔镌趯游鱿到y(tǒng)中的分離決定于該混合物的組分在這兩相中的分配情況，一般用分配系數(shù)來(lái)描述。常用的分配層析包括柱層析、紙層析、薄層層析。3.顯色反應(yīng)茚三酮與α-氨基酸反應(yīng)生成紫紅色化合物相對(duì)遷移率Rf三、實(shí)驗(yàn)步驟1、酶液的制備2、氨基移換反應(yīng)

加入物（ml）對(duì)照管測(cè)定管

肌勻漿10滴10滴煮沸5min37℃5min0.1mol/L丙氨酸溶液0.5ml0.5ml0.1mol/Lα-酮戊二酸溶液0.5ml0.5ml0.01mol/L磷酸鹽緩沖液1.5ml1.5ml混勻，37℃50min

煮沸5min3、層析圓濾紙上標(biāo)記點(diǎn)樣制作濾紙芯濾紙芯插入圓濾紙組裝層

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