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(優(yōu)選)第十的生物合成現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四A-U,T-A,G-CA-T,G-C配對(duì)mRNA,tRNA,rRNA子代雙鏈DNA產(chǎn)物NTPdNTP原料模板鏈轉(zhuǎn)錄兩股鏈均復(fù)制模板RNA聚合酶酶DNA聚合酶一般不需復(fù)制后加工加工過(guò)程轉(zhuǎn)錄后需要加工引物有無(wú)復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別復(fù)制轉(zhuǎn)錄特點(diǎn)半保留復(fù)制不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四第一節(jié)

轉(zhuǎn)錄的生物合成體系現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四一、DNA模板不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄兩方面含義:在雙鏈DNA分子上只有一條單鏈被轉(zhuǎn)錄,另一條不被轉(zhuǎn)錄;模板鏈并不永遠(yuǎn)在同一條鏈上。在DNA分子中,往往把能轉(zhuǎn)錄出RNA的區(qū)段稱為結(jié)構(gòu)基因。結(jié)構(gòu)基因的雙鏈中,僅有一股鏈作為模板轉(zhuǎn)錄成RNA,稱為模板鏈(反意義鏈或負(fù)鏈),堿基序列與mRNA互補(bǔ);另一條鏈不被轉(zhuǎn)錄稱為編碼鏈(有意義鏈或正鏈),堿基序列與mRNA相同(僅T、U替換)。GCAGTACATGTCCGCCTTAGCcgtcatgtacaggcggaatcg5'3'3'5'模板鏈編碼鏈轉(zhuǎn)錄GCAGUACAUGUCCGCCUUAGCmRNA5'3'翻譯丙纈組纈精亮絲NC多肽鏈5'3'3'5'現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四二、RNA聚合酶(一)原核生物的RNA聚合酶α36512決定那些基因被轉(zhuǎn)錄2β150618催化轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)1β'155613與模板結(jié)合、參與解鏈1σ70263識(shí)別起動(dòng)子、辨認(rèn)起始點(diǎn)1亞基分子量功能每分子酶中所含數(shù)目大腸桿菌RNA聚合酶組分ω10000

不詳1ω全酶核心酶ω現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四(二)真核生物的RNA聚合酶真核生物中的RNA聚合酶目前已發(fā)現(xiàn)三種,它們專一性轉(zhuǎn)錄不同基因,催化合成不同種類的RNA。Ⅰ45S-rRNA耐受核仁ⅡhnRNA極敏感核質(zhì)Ⅲ5S-rRNA,tRNA,snRNA中度敏感核質(zhì)種類對(duì)鵝膏蕈堿的反應(yīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物定位真核生物RNA聚合酶的種類和性質(zhì)現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四三、啟動(dòng)子啟動(dòng)子是指DNA分子上被RNA聚合酶特異性識(shí)別并結(jié)合形成的起始轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的區(qū)域,還包括一些調(diào)節(jié)蛋白因子的結(jié)合位點(diǎn)。啟動(dòng)子能夠指導(dǎo)RNA聚合酶同模板正確結(jié)合,活化RNA聚合酶,啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。無(wú)論在原核生物還是在真核生物,啟動(dòng)子控制轉(zhuǎn)錄起始,并可決定某一基因的表達(dá)強(qiáng)度。現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四(一)原核生物的啟動(dòng)子RNA聚合酶僅能夠在啟動(dòng)子處結(jié)合,啟動(dòng)子上的同源性強(qiáng)的序列(保守序列)應(yīng)該是啟動(dòng)子的功能所必需的。在原核生物的啟動(dòng)子中有四個(gè)保守性序列。TTGACATATAATAACTGTATATTA3'-35-10+1(G)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄區(qū)Pribnow盒辨認(rèn)點(diǎn)編碼鏈模板鏈5'3'5'5'3'現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四(二)真核生物的啟動(dòng)子GCGC-CAAT-TATA-ATGAATAAA增強(qiáng)子GC盒CAAT盒TATA盒轉(zhuǎn)錄起始內(nèi)含子外顯子修飾點(diǎn)切離加尾真正終止點(diǎn)八聚體RNApolⅡ轉(zhuǎn)錄的基因-25-75-90現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四第二節(jié)

RNA的生物合成過(guò)程現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四一、轉(zhuǎn)錄的起始轉(zhuǎn)錄起始就是RNApol識(shí)別啟動(dòng)子并與之結(jié)合從而啟動(dòng)RNA合成的過(guò)程。(一)原核生物的轉(zhuǎn)錄起始過(guò)程TTGACATATAATAACTGTATATTA3'-35-10+1(G)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄區(qū)Pribnow盒辨認(rèn)點(diǎn)編碼鏈模板鏈5'3'5'5'3'現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四(二)真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄的起始過(guò)程真核生物,三種RNA聚合酶分別催化不同RNA的合成,每種酶都需要一些蛋白質(zhì)輔助因子,稱為轉(zhuǎn)錄因子。RNApolⅡ最大亞基多肽的C末端氨基酸為(YSPTSPS)n的重復(fù)序列,稱為羧基末端結(jié)構(gòu)域(CTD)。轉(zhuǎn)錄因子功

能TFⅡATFⅡBTFⅡDTFⅡETFⅡFTFⅡH穩(wěn)定TFⅡD和DNA的結(jié)合,激活TBP亞基結(jié)合模板鏈,起始RNA聚合酶Ⅱ結(jié)合,和TFⅡE/F相互作用TBP亞基識(shí)別TATA,將RNA聚合酶Ⅱ組入復(fù)合體中TAFs識(shí)別特殊啟動(dòng)子結(jié)合在RNA聚合酶Ⅱ的前部,使復(fù)合體的保護(hù)區(qū)延伸到下游大亞基有解旋酶活性,小亞基和RNA聚合酶Ⅱ結(jié)合使其加入復(fù)合體具有激酶活性,可磷酸化RNA聚合酶Ⅱ的CTD,使其逸出、延伸參與RNApolⅡ轉(zhuǎn)錄的TFⅡTFⅡI識(shí)別Inr,起始TFⅡF/D結(jié)合TFⅡSRNA合成延伸TFⅡJ在TFF后加入復(fù)合體,不改變DNA的結(jié)合方式現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四二、轉(zhuǎn)錄的延長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)階段的反應(yīng)包括:聚合酶向轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)下游移動(dòng),指導(dǎo)核苷酸之間磷酸二酯鍵形成;轉(zhuǎn)錄區(qū)的模板形成局部單鏈區(qū)以便于轉(zhuǎn)錄。現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四三、轉(zhuǎn)錄的終止(一)原核生物轉(zhuǎn)錄的終止

1.依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止+ATP現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四

2.不依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止UUUUUUUUUCGGGGCGAGCCCCGCRNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物AGCCCGCGCGGGCTTTTTTTTTCGCCCGAAAAAAAAATCGGGCG5'編碼鏈5'模板鏈3'3'終止子現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四(二)真核生物的轉(zhuǎn)錄終止RNA-polAATAAAGTGTGTG轉(zhuǎn)錄終止的修飾點(diǎn)55335------AAUAAA-5------AAUAAA--特異性核酸內(nèi)切酶-GUGUGUGAAAAAAA······3mRNA現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四第三節(jié)

真核生物RNA的轉(zhuǎn)錄后的加工現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四一、前體mRNA的加工原核生物中轉(zhuǎn)錄翻譯相隨進(jìn)行,多基因的mRNA生成后,絕大部分直接作為模板翻譯各個(gè)基因所編碼的蛋白質(zhì),不需要再加工。真核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯的時(shí)間和空間都不相同,且許多真核生物基因是不連續(xù)的(斷裂基因)。真核生物不連續(xù)基因中的插入序列,稱為內(nèi)含子;被內(nèi)含子隔開的基因序列稱為外顯子。一個(gè)基因的外顯子和內(nèi)含子都轉(zhuǎn)錄在初始轉(zhuǎn)錄本RNA分子中,初始轉(zhuǎn)錄本經(jīng)加工除掉內(nèi)含子,再經(jīng)其他修飾轉(zhuǎn)化為mRNA?,F(xiàn)在是18頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四(一)核不均一RNA在真核細(xì)胞核內(nèi)可分離到一類含量很高,相對(duì)分子質(zhì)量很大但不穩(wěn)定的RNA,稱為核不均一RNA(hnRNA)。有證據(jù)表明,hnRNA是mRNA的前體,但不是初始轉(zhuǎn)錄本,而是已經(jīng)通過(guò)初步加工,但尚未切除內(nèi)含子?,F(xiàn)在是19頁(yè)\一共有21頁(yè)\編輯于星期四(二)真核生物mRNA的前體加工1.加帽5pppGp…5GpppGp…pppGPPi鳥苷酸轉(zhuǎn)移酶5

m7GpppGp…甲基轉(zhuǎn)移酶SAM5ppGp…磷酸酶

Pi

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