香菇多糖治療癌癥的研究進(jìn)展課件

香菇多糖治療癌癥的研究進(jìn)展ResearchprogressofPolysaccharidesfrommushroomsinthetreatmentofcancerThespeakers：YuyaoHuang&JiaLiu香菇多糖的“全合成”香菇多糖的提取與純化香菇多糖治療癌癥的生物活性與應(yīng)用香菇多糖治療癌癥的歷史香菇多糖治療癌癥的歷史自日本千原吳郎在對(duì)香菇的菌株進(jìn)行篩選中，發(fā)現(xiàn)特殊菌株具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性后，由山內(nèi)制藥株式會(huì)社等開發(fā)出藥品，1985年后在日本臨床上廣泛應(yīng)用。日本味之素公司是世界上第一研發(fā)生產(chǎn)香菇多糖注射劑。目前香菇多糖主要用于治療胃癌、肝癌、肺部及血液系統(tǒng)腫瘤，是一種兼有抑制腫瘤和提高免疫功能的多糖類生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，國內(nèi)、外臨床應(yīng)用已顯示出了較好的療效。最早的劑型是注射劑，2008年9月，我國首個(gè)膠囊劑型的香菇多糖正式獲得了國家食品藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的“國藥準(zhǔn)字”批文，這一尖端科研成果是由復(fù)旦大學(xué)科技園國科基地德本生物與湖北創(chuàng)力藥業(yè)聯(lián)合研制與轉(zhuǎn)化的。香菇多糖治療癌癥的生物活性與應(yīng)用1、香菇多糖的理化性質(zhì)1.1香菇多糖為白色或棕黃色粉末1.2對(duì)光和熱穩(wěn)定1.3具吸濕性1.4相對(duì)分子質(zhì)量較大1.5無甜味1.6還原性1.7部分能溶于水（在水中的溶解度隨分子質(zhì)量增大而降低）1.8溶于熱水，不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑2、香菇多糖的結(jié)構(gòu)研究2.2香菇多糖的立體結(jié)構(gòu)與生物活性的關(guān)系是現(xiàn)在研究的重點(diǎn)Surenjav等利用X射線衍射分析證明，香菇多糖的立體結(jié)構(gòu)為右旋三重螺旋的六方晶系，晶格常數(shù)

a=b=1.5nm,c=0.6nm.2.3采用高分辨核磁共振(13CNMR)研究表明，其二級(jí)結(jié)構(gòu)為凝結(jié)型的單螺旋構(gòu)象。2.4

9種抗腫瘤活性的香菇多糖，分別被破壞了三螺旋(1→3)-β-D構(gòu)型，超聲波打成碎片，除去結(jié)合蛋白質(zhì)后，其抗腫瘤活性比天然物質(zhì)有所降低，表明多糖的構(gòu)型、相對(duì)分子質(zhì)量及結(jié)合蛋白質(zhì)與其抗腫瘤活性可能相關(guān)。3、香菇多糖的生物活性3.1香菇多糖免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤活性

抗胃癌#結(jié)腸癌#乳腺癌#肺癌3.2.免疫調(diào)節(jié)和抗癌活性機(jī)制

香菇多糖可以激活很多免疫細(xì)胞如T細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，增加免疫細(xì)胞的吞噬能力來殺滅人體中的癌細(xì)胞，對(duì)遷移的癌細(xì)胞也有作用。香菇多糖還可以調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞釋放細(xì)胞信使例如細(xì)胞因子類。3.3.香菇多糖結(jié)構(gòu)修飾和抗癌活性關(guān)系

化學(xué)修飾能增加香菇多糖抗癌活性和抗病毒活性，如對(duì)香菇多糖進(jìn)行羧甲基化可以有效增強(qiáng)其水溶性，對(duì)香菇多糖進(jìn)行硫酸酯化使其有明顯的抗HIV作用。香菇多糖毒副作用低、藥效高，具有良好的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用，在抗病毒、抗感染方面也有很強(qiáng)活性。香菇多糖抗癌和免疫調(diào)節(jié)的活性機(jī)制研究較多，在其他疾病的治療上也有探索，現(xiàn)將有關(guān)方面的研究進(jìn)展總結(jié)如下：3、香菇多糖的生物活性3.4.香菇多糖的抗病毒活性香菇多糖可以激活人體免疫系統(tǒng)，使其更有效的對(duì)抗病毒增殖，對(duì)香菇多糖進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾可以增強(qiáng)其抗病毒的效果。在體外研究發(fā)現(xiàn)硫酸酯化的香菇多糖在體外抗人類免疫缺陷病毒方面有抑制活性，可以抑制病毒復(fù)制和細(xì)胞融合。與香菇多糖相比，硫酸化的香菇多糖能夠增強(qiáng)動(dòng)物新城疫疫苗的免疫效果，顯著增加血清抗體和白細(xì)胞的數(shù)量，減少感染新城疫病毒的發(fā)病率和死亡率。3.5.香菇多糖抗感染作用香菇多糖抗感染的作用機(jī)理可能是多糖分子表面與病原體表面發(fā)生黏附作用，防止病原體與正常細(xì)胞表面糖分子的結(jié)合，從而阻斷其感染途徑。3.6.對(duì)慢性乙型肝炎等病毒性疾病的治療作用慢性乙型肝炎病毒在我國的感染率非常高,其對(duì)人體的傷害非常大。香菇多糖為一種葡聚糖,主要生化作用為增加肝糖原合成及糖原異生作用,促進(jìn)巨噬細(xì)胞釋放H2O2數(shù)量能力明顯增加,同時(shí)促進(jìn)T細(xì)胞成熟,促進(jìn)抗體形成。此機(jī)制正與慢性乙肝患者均存在不同程度的免疫功能低下相符合。1.提取香菇多糖是真菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)成分之一，提取香菇多糖需要破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，利用各種手段把香菇多糖與小分子有機(jī)物、無機(jī)物等成分分離，提取物一般為粗多糖。香菇多糖提取方法1.1浸提法：用熱水、稀堿(酸)液、酶來提取香菇多糖1.2微波法，微波法即用超聲波法或微波來輔助萃取香菇多糖。1.提取1.1浸提法1.1.1用超臨界CO2萃取法對(duì)香菇粉末進(jìn)行處理，再進(jìn)行熱水浸提，可使粗多糖得率更高。1.1.2不同濃度的稀酸、堿溶液提取香菇多糖，使粗多糖得率提高，但是此法應(yīng)用較少。1.1.3酶輔助提取法就是在浸提香菇多糖的過程中加入相應(yīng)的酶來分解香菇細(xì)胞壁，促進(jìn)多糖釋放，提高粗多糖得率。1.提取1.2微波發(fā)和超聲法1.2.1超聲提取法是利用超聲波產(chǎn)生強(qiáng)烈振動(dòng)，破壞香菇多糖細(xì)胞壁，加速多糖釋放，可以縮短提取時(shí)間，降低提取液的黏度，提高提取效率。1.2.2正交試驗(yàn)優(yōu)化微波提取香菇多糖過程，結(jié)果與常規(guī)回流提取工藝相比，提取時(shí)間縮短60倍，多糖提取率提高88.7%。2.純化2.1沉淀法：先用有機(jī)溶劑如乙醇等進(jìn)行反復(fù)洗滌沉淀，除去醇溶的部分雜質(zhì)，再進(jìn)行脫色，最后除去多糖中的蛋白質(zhì);純化后得到的多糖分子量分布很寬，需要進(jìn)行分級(jí)來得到一定分子量范圍的具有較強(qiáng)生物活性的多糖。2.2層析法：2.2.1凝膠柱層析法常用的凝膠有葡聚糖凝膠(Sephadex)和瓊脂糖凝膠(sepharose)，以不同濃度的鹽溶液和緩沖溶液作為洗脫劑，使不同大小的多糖分子得到分離純化。2.2.2離子交換色譜是通過載體表面帶電基團(tuán)與樣品離子和淋洗離子進(jìn)行可逆交換、離子偶極作用和離子吸附，來實(shí)現(xiàn)色譜分離。不同多糖尤其是多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的復(fù)合多糖，在一定pH條件下所帶電荷不同，根據(jù)各多糖上電荷的差異來達(dá)到分離目的。凝膠柱層析法和離子交換柱層析法因?yàn)樵靸r(jià)昂貴，多在實(shí)驗(yàn)室研究用.2.純化2.3超濾分離法：2.3.1螺旋卷式超濾器對(duì)香菇多糖進(jìn)行提取研究，結(jié)果在此試驗(yàn)范圍內(nèi)，用微濾作預(yù)處理的好于離心法處理，用超濾溫度為250C，pH值接近浸提介質(zhì)的pH值，超濾壓力為0．15～O．18MPa，制得的香菇多糖純度達(dá)74．4％，回收率為79．6％。2.3.2超濾陶瓷膜技術(shù)，使不同分子量的香菇多糖的快速純化香菇多糖粗品，多糖蛋白質(zhì)的脫除率可達(dá)81%，多糖粗品脫色率達(dá)90.9%，精制得香菇多糖的純度為89.7%。2.3.3超濾膜分離裝置進(jìn)行香菇多糖的提取分離，建立了香菇多糖提取液超濾過程修正凝膠極化模型，這種工藝的香菇多糖提取率達(dá)6．10％，多糖粗品含量在90％以上。香菇多糖的“全合成”

合成多糖的技術(shù)應(yīng)用：兩個(gè)例子2004年，一個(gè)由古巴和加拿大研究人員組成的科研小組研制出了全球首