免疫學(xué)課件實(shí)驗(yàn)一 抗體制備和凝集反應(yīng)Ⅰ

免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)總分:

100分實(shí)驗(yàn)報(bào)告:30%（原理、方法、結(jié)果、結(jié)果分析）考勤:20%考試:50%隔離衣衛(wèi)生概述體液免疫功能檢測抗體制備和檢測未知抗原或抗體的體外檢測細(xì)胞免疫功能檢測PBMC的分離、擴(kuò)增非特異性免疫功能檢測巨噬細(xì)胞吞噬功能檢測免疫病理超敏反應(yīng)

實(shí)驗(yàn)一

抗體的制備和凝集反應(yīng)(1)Test1抗體的制備——初次免疫1.原理:異種型抗原:

抗體產(chǎn)生規(guī)律：SRBCmouse抗原

動(dòng)物

血清(含抗體)

皮下注射，3次2.方法:脫纖維綿羊紅細(xì)胞（SRBC）加入3ml生理鹽水，混勻2000rpm,離心，5min棄上清制備綿羊紅細(xì)胞溶液20%、40%取0.1ml皮下注射免疫小鼠加入3ml生理鹽水，混勻2000rpm,離心，5min棄上清Test2凝集反應(yīng)Ⅰ抗原抗體反應(yīng)的特征“LockandKey”模式:高度特異性非共價(jià)鍵結(jié)合

氫鍵、靜電引力、范德華力、疏水鍵可逆性結(jié)合親和力；親合力抗原抗體比例Ⅱ影響抗原抗體反應(yīng)的因素抗原抗體比例親和力；親合力抗原抗體比例抗原的理化性質(zhì)溫度:37℃~56℃凝集反應(yīng):顆粒性抗原沉淀反應(yīng):可溶性抗原Ⅱ影響抗原抗體反應(yīng)的因素溫度親和力；親合力抗原抗體比例抗原的理化性質(zhì)溫度:37℃~56℃PH值:6~8離子濃度:0.9%NaClⅡ影響抗原抗體反應(yīng)的因素凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)中和反應(yīng)Ⅲ經(jīng)典抗原抗體反應(yīng)定義:Ⅳ凝集反應(yīng)分類:直接凝集反應(yīng):玻片凝集

試管凝集間接凝集反應(yīng)可見的凝集團(tuán)塊顆粒性抗原相應(yīng)抗體+可見的凝集團(tuán)塊顆粒性抗原相應(yīng)抗體+直接凝集反應(yīng)可溶性抗原致敏顆粒相應(yīng)抗體+可見的凝集團(tuán)塊間接凝集反應(yīng)原理:ABO血型:玻片凝集反應(yīng):材料:抗A、B血清玻片采血針木簽

ABO血型檢測+抗A血清or抗B血清？方法:a.玻片AB抗A血清抗B血清b.采血消毒手指采血針刺破手指滴一滴血至玻片上c.反應(yīng)以木簽將血清和血滴混勻d.觀察結(jié)果預(yù)期結(jié)果血型ABABO注意事項(xiàng)徹底分離兩種血清消毒木簽兩側(cè)不可混用及時(shí)觀察結(jié)果將血液污染品放置在特定容器1組：左1；2組：左2；3組：左3；4組：右1；5組：右2；6組：右3；7組：左1右1；取0.1ml皮下注射20%40%8組：左1；9