TORCH病理培訓(xùn)課件

TORCH工程學(xué)習(xí)資料鄭州安圖綠科生物工程2021年3月TORCH工程介紹TORCH診斷意義TORCH診斷方法TORCH國(guó)內(nèi)外產(chǎn)品介紹風(fēng)疹病毒RubllaVirus(RV)Cytomegalovirus(CMV)巨細(xì)胞病毒HerpesSimplexVirus2(HSV-2)單純皰疹病毒2型Toxoplasmagondii(Toxo)弓形蟲HerpesSimplexVirus1(HSV-1)單純皰疹病毒1型TORCH簡(jiǎn)介TORCH一詞是Nahmia于1971年撰造的，是由許多引起宮內(nèi)感染的微生物英文名稱的第一個(gè)字母組成的。To指弓形蟲〔toxoplasma〕，R指風(fēng)疹病毒〔rubellavirus〕，C指巨細(xì)胞病毒〔cytomegalovirus〕，H指皰疹病毒〔herpesvirus〕。TORCH的英文含義是“火炬〞，以此提起人們對(duì)母嬰傳播疾病的重視。這五種病原體感染的范圍廣、危害大，孕婦由于內(nèi)分泌系統(tǒng)的改變導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降，容易發(fā)生原發(fā)性感染，以前感染過(guò)的孕婦體內(nèi)潛伏的病毒也容易被激活而發(fā)生復(fù)發(fā)感染。妊娠期感染不僅危害母體，往往還對(duì)胎兒和新生兒產(chǎn)生嚴(yán)重不良后果，可以導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或胎兒生長(zhǎng)緩慢和發(fā)育畸形，通過(guò)產(chǎn)道和母乳可以引起新生兒感染，如果累及神經(jīng)系統(tǒng)，可造成不同程度的智力障礙以及各種癱瘓、失聰、失明等嚴(yán)重后遺癥，從而影響人口素質(zhì)。TORCH感染在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中稱之為“TORCH綜合征〞，已經(jīng)受到全世界醫(yī)學(xué)界尤其是婦產(chǎn)科和兒科醫(yī)生的高度重視。歐美等興旺國(guó)家早在七十年代就將風(fēng)疹、弓形體、巨細(xì)胞病毒等檢測(cè)列為孕期篩查工程，目前我國(guó)的醫(yī)療及方案生育部門也逐步開展了孕早期TORCH檢測(cè)工作，隨著國(guó)家優(yōu)生優(yōu)育工作的深入進(jìn)行，人們將更加重視對(duì)TORCH感染的檢測(cè)及預(yù)防。衛(wèi)生部于“七五〞、“八五〞、“九五〞連續(xù)將此列為攻關(guān)課題，其中“八五〞、“九五〞為全國(guó)重點(diǎn)課題。

巨細(xì)胞病毒是一種雙鏈DNA病毒，屬于皰疹病毒β亞科，是人類皰疹病毒組中最大的一種病毒。其感染的特征是出現(xiàn)有典型的胞漿及核內(nèi)包涵體的巨大細(xì)胞，故名巨細(xì)胞病毒。其形態(tài)最大由162個(gè)殼粒〔capsomer〕，正20面體構(gòu)成。有典型的皰疹病毒結(jié)構(gòu)，形態(tài)與單純皰疹病毒及水痘-帶狀皰疹病毒非常相似，不易區(qū)別。

巨細(xì)胞病毒結(jié)構(gòu)貓頭鷹眼細(xì)胞一、病原體巨細(xì)胞病毒〔CMV〕CMV只能在人纖維母細(xì)胞的組織培養(yǎng)中增殖，而不能在其他動(dòng)物細(xì)胞中生長(zhǎng)，增殖非常緩慢，其復(fù)制周期為36-48小時(shí)，比單純皰疹病毒復(fù)制周期8小時(shí)要長(zhǎng)得多。初次別離需一個(gè)多月才能出現(xiàn)特殊的細(xì)胞：細(xì)胞變圓，膨脹，細(xì)胞及核巨大化，核周圍出現(xiàn)一輪“暈〞的大型嗜酸性包涵體，因而稱為“貓頭鷹眼細(xì)胞〞，這種細(xì)胞具有形態(tài)學(xué)診斷意義。

CMV在20%乙醚中最多存活2小時(shí)。PH<5時(shí)，或置于56℃30分鐘，或紫外線照射5分鐘可被充分滅活。CMV的感染性對(duì)凍融或存于-20℃或-50℃均不穩(wěn)定，10%的家用漂白粉可使其感染性明顯降低。人類CMV各株之間有廣泛交叉反響，只有一個(gè)血清型，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株為AD169株。

CMV遍布世界各地，人是CMV的唯一宿主且對(duì)其有廣泛的易感性。血清學(xué)調(diào)查說(shuō)明：40%-100%成人有CMV抗體，其流行無(wú)季節(jié)性傾向。CMV感染在人群中隨著年齡、社會(huì)環(huán)境以及經(jīng)濟(jì)條件不同而不同。在亞洲和非洲90%的人口受感染，其中大多數(shù)人在青少年時(shí)期即有抗體，說(shuō)明感染年齡較早，而西方國(guó)家其感染發(fā)生較晚。調(diào)查還說(shuō)明，低經(jīng)濟(jì)收入人群較高經(jīng)濟(jì)收入人群感染率高。70歲左右人群比20歲左右人群抗體陽(yáng)性率高，男女之間抗體陽(yáng)性率根本相同。

二、流行病學(xué)通過(guò)對(duì)鄭州地區(qū)約1200份臨床樣本的血清學(xué)檢測(cè)，人群感染率在95%以上。多數(shù)人一生中都感染過(guò)CMV，但主要為無(wú)癥狀的亞臨床感染。成人CMV感染和免疫功能有密切關(guān)系，病毒往往以潛伏感染的形式持續(xù)終生，只有當(dāng)宿主免疫狀態(tài)失去平衡，如器官和骨髓移植、癌癥、妊娠以及應(yīng)用免疫抑制劑等時(shí)，潛伏的病毒才復(fù)活。潛伏病毒的復(fù)活和無(wú)癥狀的攜帶者都能引起病毒的傳播。三、臨床感染孕婦感染：孕婦的原發(fā)或新的復(fù)發(fā)感染均可引起新生兒宮內(nèi)或圍產(chǎn)期感染，當(dāng)孕婦患有巨細(xì)胞活動(dòng)感染時(shí)，病毒可通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)引起先天性感染。孕婦的原發(fā)感染對(duì)胎兒的危害比復(fù)發(fā)感染嚴(yán)重，它不僅可引起先天性感染，而且后遺癥較多且嚴(yán)重，原發(fā)性孕期感染CMV的胎兒50%可出現(xiàn)智力低下，視力受損，聽力喪失等病癥，特別是引起嬰兒的巨細(xì)胞包涵體病〔CID，CID的特點(diǎn)是網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)受〕，患兒可多個(gè)系統(tǒng)、多個(gè)器官受損，其病死率達(dá)10％－20％。胎兒先天性感染：先天性感染的胎兒中有5%表現(xiàn)為典型全身性巨細(xì)胞包涵體病〔CID〕，嬰兒在數(shù)日或數(shù)周內(nèi)死亡，CID特征見網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損，有的合并聽覺損害，紫?！?0%〕，肝脾腫大〔75%〕，黃疸〔65%〕，小頭畸形〔50%〕，體重過(guò)輕〔40%〕，早產(chǎn)(孕期少于38周)26%，腹股溝疝〔26%〕；脈絡(luò)視網(wǎng)膜炎〔12%〕。圍產(chǎn)期感染：嬰兒出生后不排毒，經(jīng)8周之后才發(fā)病，因喂母乳引起感染多發(fā)生于出生后2-4個(gè)月，臨床上表現(xiàn)為CID的特征，亦可有肺炎病癥，肺炎的發(fā)生率10%。幼年兒童感染：7歲以下兒童中，CMV感染可引起肝炎，常伴有肝脾腫大，4歲以下兒童可引起嚴(yán)重呼吸道感染。青少年和成年人感染：表現(xiàn)為單核細(xì)胞增多癥，由原發(fā)感染引起，病癥表現(xiàn)為無(wú)力、肌痛、長(zhǎng)期發(fā)燒、肝功異常、淋巴細(xì)胞增多、出現(xiàn)大量非典型淋巴細(xì)胞。輸血后感染：輸血后引起單核細(xì)胞增多癥，突然發(fā)燒，典型發(fā)生于輸血后3-4周，以后出現(xiàn)淋巴細(xì)胞增多，脾大。免疫抑制者的感染：在免疫抑制者中，原發(fā)CMV感染發(fā)病率和死亡率都明顯增高，器官移植者和患惡性腫瘤接受化療者，CMV感染與發(fā)病危險(xiǎn)性增加，移植后1-4個(gè)月易發(fā)生潛伏病毒的復(fù)發(fā)，有肝脾腫大，淋巴細(xì)胞增多等病癥。艾滋病人的感染：幾乎所有的艾滋病人都有CMV感染，病人尿內(nèi)排毒并有病毒血癥。艾滋病人CMV感染有細(xì)胞免疫功能的損害，病人常因視神經(jīng)炎引起視力衰退，有嚴(yán)重結(jié)腸炎及消耗癥，常合并CMV肺炎，死亡率較高。先天性感染對(duì)胎兒威脅最大，故預(yù)防的重點(diǎn)應(yīng)當(dāng)是預(yù)防先天性感染。先天性感染主要是母親原發(fā)性感染時(shí)母親血中的病毒通過(guò)胎盤而感染胎兒。先天性感染對(duì)胎兒的損害與胎兒的月齡有關(guān)，胎齡越早受損越嚴(yán)重。從優(yōu)生學(xué)考慮，凡妊娠期間診為CMV原發(fā)性感染者，特別是妊娠早期，應(yīng)視為高度危險(xiǎn)性。對(duì)妊娠期間診為CMV復(fù)發(fā)或再感染者，對(duì)胎兒影響較小，可繼續(xù)考慮妊娠。對(duì)宮頸別離到CMV者一般不需特別處理，因分娩時(shí)感染新生兒多不引起明顯病癥。有人認(rèn)為宮頸局部的CMV會(huì)逆行造成先天性CMV感染，這個(gè)問(wèn)題尚未得到證實(shí)。受CMV感染的小兒在一、二年內(nèi)常常傳播病毒，故對(duì)CMV無(wú)免疫力的孕婦〔抗CMV抗體陰性者〕應(yīng)防止與之接觸。四、巨細(xì)胞病毒感染的預(yù)防1、臨床標(biāo)本直接檢查：包括脫落細(xì)胞及組織病理檢查〔1〕尿脫落細(xì)胞檢查：用患者新鮮尿10-20ml，經(jīng)離心沉淀、涂片、固定、染色后，在顯微鏡下可見特征性的巨細(xì)胞及核內(nèi)包涵體。此細(xì)胞病理學(xué)方法簡(jiǎn)單，但靈敏度差?！?〕組織病理學(xué)檢查：常規(guī)組織病理學(xué)方法檢查外科活檢組織或尸檢病理切片中上述典型的巨細(xì)胞和核內(nèi)包涵體?！?〕電鏡檢查：標(biāo)本固定后包埋，超薄切片，鉛染色后電鏡下觀察。雖然能看到病毒顆粒，但不能從形態(tài)上區(qū)分CMV和單純皰疹病毒顆粒，故很少用。五、巨細(xì)胞病毒感染的診斷2、病毒別離和抗原檢測(cè)〔1〕病毒別離：可用人胚肺二倍體細(xì)胞等人的成纖細(xì)胞進(jìn)行病毒培養(yǎng)別離，但因病變產(chǎn)生較晚，常需2-3周以上，故不適用于臨床應(yīng)用。但不管是先天性或后天獲得性CMV感染，病毒別離是最特異的診斷方法，可以作為實(shí)驗(yàn)室確診實(shí)驗(yàn)。〔2〕抗原檢測(cè)：從肝素抗凝血中提出白細(xì)胞，丙酮固定在玻片上，應(yīng)用酶標(biāo)記的CMV早期抗原的單克隆抗體直接進(jìn)行免疫酶染色。亦可對(duì)標(biāo)本進(jìn)行單克隆抗體間接免疫熒光法檢測(cè)CMV早期抗原，24小時(shí)內(nèi)取得陽(yáng)性結(jié)果。3、核酸檢測(cè)中山大學(xué)達(dá)安基因已經(jīng)有批準(zhǔn)的熒光PCR試劑盒上市4、血清中抗體檢測(cè)僅CMV-IgM陽(yáng)性或總抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性可診斷為原發(fā)性CMV感染，假設(shè)IgG抗體第一次檢測(cè)即陽(yáng)性，在病程中有4倍以上升高者，考慮為復(fù)發(fā)或再感染。風(fēng)疹病毒〔RV〕

風(fēng)疹病毒是披膜病毒科風(fēng)疹病毒屬的唯一成員，為有包膜的單股正鏈RNA病毒，外形呈球形，直徑為50～70nm，核衣殼為二十面體，其直徑為30nm，疏松的包膜環(huán)繞，包膜外表有微小刺突，直徑5～6nm，分子量為3.8×106，具有血凝和溶血活性。風(fēng)疹病毒有三種結(jié)構(gòu)蛋白即E1、E2和C蛋白，分子量分別為58kD、42～47kD、33kD。E1和E2為包膜蛋白，以二聚物的形式分布在包膜上，核衣殼由病毒的RNA和C蛋白組成。風(fēng)疹病毒只有一個(gè)血清型，但有多種基因型?？稍赩ero細(xì)胞或Vero／SLAM細(xì)胞中培養(yǎng)。風(fēng)疹病毒不耐熱，易被高溫或枯燥滅活。一、病原體風(fēng)疹病毒結(jié)構(gòu)二、流行病學(xué)風(fēng)疹病毒主要經(jīng)空氣飛沫傳播，也可通過(guò)口、鼻咽、眼的分泌物及血液直接感染。傳染期在發(fā)病前5～7天和發(fā)病后3～5天，起病當(dāng)天和前一天傳染性最強(qiáng)。易感人群多為5～9歲的兒童，6個(gè)月以下小兒因母體來(lái)的被動(dòng)免疫，故很少患病。感染者可獲得終身免疫。風(fēng)疹一般在冬春兩季發(fā)病，可散發(fā)或流行。在歐美某些城市，每年或每隔2年冬春季出現(xiàn)小流行，6-9年發(fā)生大流行。我國(guó)尚缺乏完整的流行病學(xué)調(diào)查資料，不能顯示其流行規(guī)律，但自1988年以來(lái)報(bào)道，北京、上海、天津、遼寧、等地均有爆發(fā)流行以冬春季多發(fā)，與國(guó)外報(bào)道相符。在美國(guó)、挪威、法國(guó)等血清陽(yáng)性的妊娠婦女中，每年嬰兒先天性風(fēng)疹綜合癥的發(fā)病率為萬(wàn)分之四。隨著不同季節(jié)和時(shí)期，流行與非流行有較大差異，不同地區(qū)和種族易感性亦不一致。二、流行病學(xué)通過(guò)對(duì)鄭州地區(qū)臨床樣本的血清學(xué)檢測(cè)，人群IgG抗體陽(yáng)性率在90%左右。三、臨床表現(xiàn)風(fēng)疹的臨床表現(xiàn)類似麻疹但較麻疹感染病癥輕，合并癥少，感染風(fēng)疹病毒后，一般有10～21天的潛伏期，之后進(jìn)入前驅(qū)期，通常這一期比較短，病情也多不重。常見病癥有咳嗽、打噴嚏、流鼻涕、頭痛、咽痛、食欲不振以及發(fā)熱等感冒樣病癥。一般發(fā)熱1—2天開始出疹。皮疹為淡紅色的斑丘疹，分散或融合成片，一般由面部延及軀干和四肢，于24小時(shí)內(nèi)布滿全身，手掌及足底無(wú)皮疹，面部及四肢皮疹稀疏，軀干尤其背部皮疹密集，融合成片，3～5天皮疹逐漸消退，全身病癥也同時(shí)消失，亦有人稱之為“三日麻疹〞。皮疹消退后，通常無(wú)色素沉著及脫屑。一般情況下，風(fēng)疹全身病癥比較輕微，與顯著的皮疹顯得很不相稱。出疹前后有耳后、枕部及頸后淋巴結(jié)腫大，腫大淋巴結(jié)輕度壓痛，不融合、不化膿，此點(diǎn)對(duì)風(fēng)疹的早期診斷有幫助。實(shí)驗(yàn)室檢查示血白細(xì)胞總數(shù)偏低、淋巴細(xì)胞增多，可出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞；患病3天后?？稍谘袡z測(cè)到風(fēng)疹病毒特異性抗體。無(wú)皮疹性風(fēng)疹患者可只有發(fā)熱、上呼吸道炎癥、淋巴結(jié)腫痛，血清學(xué)檢查風(fēng)疹病毒特異性抗體為陽(yáng)性。三、臨床表現(xiàn)

風(fēng)疹感染分為先天和后天兩種。一般后天感染即通常說(shuō)的風(fēng)疹，先天感染指CRS。調(diào)查說(shuō)明，感染風(fēng)疹病毒與未感染風(fēng)疹病毒的妊娠婦女相比，其死產(chǎn)和自然流產(chǎn)要高2-4倍。風(fēng)疹病毒對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷作用是嚴(yán)重先天性器官缺損的重要原因。孕婦病毒血癥可引起胎盤絨毛膜上皮發(fā)炎或毛細(xì)血管內(nèi)皮受損，破壞了胎盤的屏障，使病毒進(jìn)入胎兒體內(nèi)，引起胎兒先天性感染，臨床病癥可于出生后發(fā)生，也可延長(zhǎng)至幾年后出現(xiàn)。先天性感染除引起流產(chǎn)、死產(chǎn)外，活產(chǎn)者大約29%表現(xiàn)為“先天性風(fēng)疹綜合征〞〔congenitalrubellasyndrome,CRS〕，即出生時(shí)體重低于公斤，發(fā)育緩慢，出生后全身性器官受損，先天性心臟病，畸形，耳聾、失明等。CRS患兒最常見的是白內(nèi)障等眼疾患，其次是耳聾，60%有心血管系統(tǒng)缺損。孕婦妊娠1個(gè)月內(nèi)感染風(fēng)疹病毒，嬰兒先天性畸形的發(fā)生率為11%-58%，2個(gè)月內(nèi)為11%-36%，3個(gè)月內(nèi)為7%-15%，4個(gè)月內(nèi)為7%以下，5個(gè)月內(nèi)仍舊有先天性耳聾胎兒出生，妊娠6個(gè)月以外感染風(fēng)疹病毒根本沒有胎兒畸形的危險(xiǎn)。四、臨床感染接種疫苗：目前對(duì)風(fēng)疹預(yù)防的主要方法是接種凍干風(fēng)疹減毒活疫苗。接種對(duì)象為年齡為8個(gè)月以上的風(fēng)疹易感者和育齡期婦女。在興旺國(guó)家，風(fēng)疹已幾乎被實(shí)施疫苗方案免疫所消滅，只是在未免疫人群中仍有少數(shù)發(fā)生，但在免疫工程開展不好的國(guó)家，風(fēng)疹仍有流行。防止疫苗病毒對(duì)胎兒的損害：盡管疫苗病毒對(duì)胎兒危害較小，但已有報(bào)道從妊娠前后誤種疫苗者人工流產(chǎn)的胎兒組織中別離到疫苗病毒。因此必須明確規(guī)定，接種疫苗前后2個(gè)月內(nèi)禁止懷孕。由于CRS患兒能長(zhǎng)期排毒，所以對(duì)CRS患兒應(yīng)予適當(dāng)管理，醫(yī)院中懷孕的風(fēng)疹抗體陰性的醫(yī)護(hù)人員應(yīng)防止與CRS患兒接觸。應(yīng)把工作重點(diǎn)放在預(yù)防CRS患兒的出生上，有條件的醫(yī)院應(yīng)逐步開展早孕TORCH感染檢查工作，其中包括風(fēng)疹病毒的血清學(xué)監(jiān)測(cè)。五、風(fēng)疹病毒的預(yù)防病毒別離培養(yǎng)病毒別離常用的臨床標(biāo)本有咽拭子、外周血單核細(xì)胞、胚胎、新生兒血漿和尿液，將標(biāo)本接種于Vero細(xì)胞中對(duì)RV進(jìn)行檢測(cè)：(1)用免疫熒光標(biāo)記的RV特異性單克隆抗體直接檢測(cè)；(2)將病毒感染的細(xì)胞進(jìn)行離心，收集細(xì)胞，用戊二醛將細(xì)胞團(tuán)塊固定2h，經(jīng)飽和醋酸鈾和檸檬酸鉛染色，觀察病毒顆粒。盡管RV能感染多種培養(yǎng)細(xì)胞系，但其感染程度和排毒水平往往較低，給病毒體的檢測(cè)帶來(lái)一定困難。核酸檢測(cè)此技術(shù)所常用的標(biāo)本有咽拭子、臍血、外周血單核細(xì)胞、絨毛膜、羊水等。PCR是一種具有敏感性高、特異性強(qiáng)的靶DNA快速檢測(cè)方法?？贵w血清學(xué)診斷RV蛋白包括非結(jié)構(gòu)蛋白(nonstructuralprotein，NSP)和結(jié)構(gòu)蛋白(structuralprotein，SP)兩局部，前者由P150和P90組成，后者由核蛋白C和2個(gè)外膜糖蛋白E1、E2組成。目前的血清學(xué)抗體診斷技術(shù)都是基于RV結(jié)構(gòu)蛋白的酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)，主要有間接ELISA法檢測(cè)RV-IgG和IgM，捕獲法檢測(cè)RV-IgM。六、風(fēng)疹病毒感染的診斷風(fēng)疹病毒感染后抗體出現(xiàn)及存在時(shí)間弓形蟲弓形蟲〔Toxoplasmagondii〕屬于球蟲寄生蟲，是寄生于人和哺乳動(dòng)物組織細(xì)胞內(nèi)廣泛性分布的時(shí)機(jī)性致病原蟲，因其滋養(yǎng)體如弓形而得名，它引起的弓形體病toxoplasmpsis〕是一種人畜共患病，廣泛流行于世界各地。國(guó)際公認(rèn)的強(qiáng)毒株代表為RH株，弱毒代表為Beverley株。弓形蟲生活史中出現(xiàn)5種形態(tài)，即滋養(yǎng)體〔速殖子tachyzoite〕；包囊〔可長(zhǎng)期存活于組織內(nèi)〕；裂殖體；配子體和卵囊〔oocyst〕。前3期為無(wú)性生殖，后2期為有性生殖，弓形蟲生活史的完成需雙宿主。在終宿主〔貓與貓科動(dòng)物〕體內(nèi)，上述5種形態(tài)俱存；在中間宿主〔包括禽類、哺乳類動(dòng)物和人〕體內(nèi)那么僅有無(wú)性生殖。無(wú)性生殖?？稍斐扇砀腥荆行陨硟H在終宿主腸粘膜上皮細(xì)胞內(nèi)發(fā)育造成局部感染。弓形蟲〔Tox〕一、病原體弓形蟲生活史弓形蟲的傳播方式有兩種：①貓犬糞便中的弓形蟲卵囊污染了水或食物而使人感染。②人接觸或進(jìn)食含有傳染性包囊的生肉或不熟肉類。病原體通過(guò)粘膜侵入機(jī)體后即在局部增殖并侵入局部淋巴結(jié)，以后再通過(guò)血液或淋巴循環(huán)進(jìn)一步擴(kuò)散到全身器官，引起病變。弓形蟲主要侵犯單核吞噬細(xì)胞和各種臟器的實(shí)質(zhì)細(xì)胞。病原體在細(xì)胞內(nèi)增殖，直至細(xì)胞破裂釋放出弓形蟲再侵入其他細(xì)胞。如此反復(fù)，形成壞死灶和周圍組織的急性炎癥。病變主要由滋養(yǎng)體引起，包囊一般不引起炎癥，但如弓形蟲毒力強(qiáng)，數(shù)量多，特別當(dāng)機(jī)體免疫力下降，可發(fā)生急性感染，嚴(yán)重者可發(fā)生死亡。感染晚期，機(jī)體內(nèi)弓形蟲逐漸趨于靜止，但在腦與眼部因抗體不易到達(dá)，病情可繼續(xù)開展。陰性感染或病情已靜止的病人，由于腫瘤、接受免疫抑制劑等引起免疫力低下時(shí)，也能導(dǎo)致復(fù)發(fā)，甚至急性傳播。二、流行病學(xué)世界各國(guó)人群弓形蟲感染率不等，從％到94％，許多國(guó)家感染率在25％～50％左右，在西方國(guó)家中以法國(guó)感染率最高，達(dá)80％。我國(guó)各地人群弓形蟲感染率不同，不同作者在不同地方采用不同方法調(diào)查的感染率人％到％不等。鄭州地區(qū)人群的平均感染率在2-5%之間。弓形蟲的侵襲作用除與蟲體毒力有關(guān)外，宿主的免疫狀態(tài)亦起著重要作用，因此弓形蟲病的嚴(yán)重程度取決于寄生蟲與宿主相互作用的結(jié)果。根據(jù)蟲株的侵襲力、繁殖速度、包囊形成與否及對(duì)宿主的致死率等，剛地弓形蟲可分為強(qiáng)毒和弱毒株系，目前國(guó)際上公認(rèn)的強(qiáng)毒株代表為RH株；弱毒代表為Beverley株，極大多數(shù)哺乳動(dòng)物、人及家畜家禽類對(duì)弓形蟲都是易感中間宿主，易感性那么因種而有所差異。三、致病機(jī)制速殖子期是弓形蟲的主要致病階段，以其對(duì)宿主細(xì)胞的侵襲力和在有核細(xì)胞內(nèi)獨(dú)特的內(nèi)二芽殖法增殖破壞宿主細(xì)胞。蟲體逸出后又重新侵入新的細(xì)胞，刺激淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)，導(dǎo)致組織的急性炎癥和壞死。包囊內(nèi)緩殖子是引起慢性感染的主要形式，包囊因緩殖子增殖而體積增大，擠壓器官，使功能受到障礙。包囊增大到一定程度，可因多種因素而破裂。游離的蟲體可刺激機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)性變態(tài)反響，并形成肉芽腫病變，后期的纖維鈣化灶多見于腦、眼部等。宿主感染弓形蟲后，在正常情況下，可產(chǎn)生有效的保護(hù)性免疫，多數(shù)無(wú)明顯病癥，當(dāng)宿主有免疫缺陷或免疫功能低下時(shí)才引起弓形蟲病，即使在隱性感染，也可導(dǎo)致復(fù)發(fā)或致死的播散性感染；近幾年有報(bào)導(dǎo)艾滋病患者因患弓形蟲腦炎而致死。弓形蟲的感染分為先天性感染和獲得性感染二類。先天性感染發(fā)生于初孕婦女，蟲體經(jīng)胎盤血流傳播，受染胎兒或嬰兒多數(shù)表現(xiàn)為隱性感染，有的出生后數(shù)月甚至數(shù)年才出現(xiàn)病癥；也可造成孕婦流產(chǎn)、早產(chǎn)、畸胎或死產(chǎn)，尤以早孕期感染，畸胎發(fā)生率高。據(jù)研究說(shuō)明，嬰兒出生時(shí)出現(xiàn)病癥或發(fā)生畸形者病死率為12％，而存活中80％有精神發(fā)育障礙，50％有視力障礙。以腦積水、大腦鈣化灶、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎和精神、運(yùn)動(dòng)的障礙為先天性弓形蟲病典型病癥。此外，可伴有全身性表現(xiàn)，在新生兒期即有發(fā)熱、皮疹、嘔吐、腹瀉、黃疸、肝脾腫大、貧血、心肌炎、癲癇等。四、臨床感染獲得性弓形蟲病可因蟲體侵襲部位和機(jī)體反響性而呈現(xiàn)不同的臨床表現(xiàn)。因而無(wú)特異病癥，須與有關(guān)疾病鑒別?；颊叨鄶?shù)與職業(yè)、生活方式、飲食習(xí)慣有一定關(guān)系。淋巴結(jié)腫大是獲得性弓形蟲病最常見的臨床類型，多見于頜下和頸后淋巴結(jié)。其次弓形蟲常累及腦、眼部，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常表現(xiàn)，在免疫功能低下者，常表現(xiàn)為腦炎、腦膜腦炎、癲癇和精神異常。弓形蟲眼病的主要特征以視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎為多見，成人表現(xiàn)為視力突然下降，嬰幼兒可見手抓眼癥，對(duì)外界事物反響遲鈍，也有出現(xiàn)斜視、虹膜睫狀體炎，色素膜炎等，多見雙側(cè)性病變，視力障礙外常伴全身反響或多器官病損。多數(shù)隱性感染者，當(dāng)患有惡性腫瘤，施行器官移植，長(zhǎng)期接受免疫抑制劑、放射治療、細(xì)胞毒劑等醫(yī)源性免疫受損情況下或先天性、后天性免疫缺陷者，如艾滋病患者、孕期婦女等都可使隱性感染狀態(tài)轉(zhuǎn)為急性重癥，使原有病癥惡化。1、病原學(xué)檢查〔具確診意義〕①涂片染色法：取急性期患者的體液、腦脊液、血液、骨髓、羊水、胸水經(jīng)離心后，沉淀物作涂片，或采用活組織穿刺物涂片，經(jīng)姬氏染色后，鏡檢弓形蟲滋養(yǎng)體。此法簡(jiǎn)便，但陽(yáng)性率不高易漏檢。此外也可切片用免疫酶或熒光染色法，觀察特異性反響，可提高蟲體的檢出率。②動(dòng)物接種別離法：采用敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小白鼠，樣本接種于腹腔內(nèi)，一周后剖殺取腹腔液鏡檢，陰性需盲目傳代至少3次，樣本亦可接種于離體培養(yǎng)的單層有核細(xì)胞。動(dòng)物接種和細(xì)胞培養(yǎng)是目前常用的病原查診方法。五、弓形蟲的臨床診斷2、抗原檢測(cè)用免疫學(xué)方法檢測(cè)宿主細(xì)胞內(nèi)的病原〔速殖子或包囊〕或循環(huán)抗原。循環(huán)抗原〔CAg〕為弓形蟲在宿主體內(nèi)增殖過(guò)程中的代謝和裂解產(chǎn)物，在弓形蟲感染早期、急性期或活動(dòng)期的血清及體液中有較高的含量。因此，CAg的檢測(cè)可作為弓形蟲現(xiàn)癥感染的輔助診斷方法，認(rèn)為它有助于診斷人類弓形蟲感染，特別是對(duì)于免疫受損患者。但是弓形蟲病的蟲血癥短暫，所以檢測(cè)抗原血癥的實(shí)用性還有待研究。3、抗體檢測(cè)〔IgAIgMIgG〕間接血凝試驗(yàn)(IndirectHaemagglutinationTestIHA)間接免疫熒光試驗(yàn)(IndirectImmunofluores-centTest,IFT)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)〔ELISA〕1、形態(tài)結(jié)構(gòu)單純皰疹病毒〔Herpessimplexvirus,HSV〕屬于皰疹病毒科α亞科，呈球形，完整病毒由核心、衣殼、被膜(Tegument)及囊膜組成。核心含雙股DNA，纏繞成纖絲卷軸。衣殼呈二十面體對(duì)稱，由162個(gè)殼微粒組成，直徑為100nm。衣殼外被一層被膜覆蓋，厚薄不勻，最外層為典型的脂質(zhì)雙層囊膜，上有突起。囊膜外表含gB、gC、gD、gE、gG、gH糖蛋白，與病毒對(duì)細(xì)胞吸附/穿入〔gBgCgDgE〕、控制病毒從細(xì)胞核膜出芽釋放(gH)及誘導(dǎo)細(xì)胞融合〔gBgCgDgH〕有關(guān)。并有誘生中和抗體(gD最強(qiáng))和細(xì)胞毒作用〔的HSV糖蛋白均可〕。

單純皰疹病毒〔HSV〕一、病原體2、培養(yǎng)特性HSV可在多種細(xì)胞中生長(zhǎng)，常用的細(xì)胞系有BHK細(xì)胞，Vero細(xì)胞、Hep-2細(xì)胞等。病毒初次別離時(shí)，原代乳兔腎細(xì)胞、人胚肺細(xì)胞較敏感。HSV感染動(dòng)物范圍廣泛，多種動(dòng)物腦內(nèi)接種可引起皰疹性腦炎，小白鼠足墊接種可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)致死性感染，家兔角膜接種引起皰疹性角膜炎，豚鼠陰道內(nèi)接種可引起宮頸炎和宮頸癌。接種雞胚絨毛尿囊膜上，形成增殖性白色斑塊。3、耐受性因?yàn)閱渭儼捳畈《镜哪夷榈湫偷闹|(zhì)雙層，所以它對(duì)乙醚及脂溶劑特別敏感，對(duì)高溫和低PH都不穩(wěn)定，在低溫下可生存數(shù)月，濕熱50℃或枯燥90℃30分鐘滅活。單純皰疹病毒分為1型和2型，兩者有50%的同源性，其形態(tài)結(jié)構(gòu)根本一致，很難區(qū)分，但其感染途徑、感染率和引起的病癥有很大不同。HSV-1主要是通過(guò)呼吸道、皮膚和粘膜密切接觸傳播，感染腰以上部位的皮膚粘膜和器官，人感染非常普遍，開展中國(guó)家成人抗HSV-1抗體陽(yáng)性率為95-100％，其中原發(fā)性感染中80－90％為隱性感染。新生兒HSV感染發(fā)病率為萬(wàn)例，其中絕大多數(shù)為母親生殖道HSV上行播散或分娩時(shí)經(jīng)產(chǎn)道感染所致。常見的臨床表現(xiàn)是粘膜或皮膚局部集聚的皰疹，偶而也可發(fā)生嚴(yán)重的全身性疾病，累及內(nèi)臟。如引起皰疹性口腔炎〔herpeticstomatitis〕、皰疹性角膜炎〔herpessimplexkeratitis，HSK〕、皰疹性腦炎〔HerpesSimplexVirusEncephalitis，HSE〕等。HSV-2主要是通過(guò)性接觸傳播和母嬰傳播，感染腰以下部位的皮膚粘膜和器官，可以引起生殖器皰疹、也是宮頸癌、陰莖癌的協(xié)同誘因，同時(shí)會(huì)增加感染包括艾滋病在內(nèi)的病毒性疾病的幾率。生殖器感染HSV-2較HSV-1易活化，常出現(xiàn)復(fù)發(fā)性感染。目前生殖器HSV感染發(fā)生率不斷上升，在某些西方國(guó)家已躍居性病常見病因的第二位，我國(guó)成人HSV-2的抗體陽(yáng)性率為3-5%。二、流行病學(xué)原發(fā)感染半歲以后的嬰兒，因?yàn)閬?lái)自母體的抗體消失，此時(shí)容易發(fā)生HSV-1的原發(fā)感染。HSV-1原發(fā)感染常發(fā)生于1～15歲，最常引起齦口炎，在牙齦、咽頰部黏膜產(chǎn)生成群皰疹，皰疹破裂后形成潰瘍，病灶內(nèi)含有大量病毒。此外，還可以引起皰疹性角膜結(jié)膜炎、皮膚皰疹性濕疹、皰疹性甲溝炎或皰疹性腦炎。初次感染約90%無(wú)臨床病癥，多為隱性感染。皰疹性口炎(herpetic

stomatitis)是小兒容易發(fā)生的單純皰疹病毒1型IgG〔HSV-1〕引起的急性口腔粘膜感染，也可能單獨(dú)發(fā)生在唇及口周皮膚。本病多見于6歲以下兒童，尤其是6個(gè)月至2歲的兒童更多。本病潛伏期約4～7天，開始多有發(fā)燒、咽痛、頭痛、全身不適等先兆，2～3天后口腔開始出現(xiàn)病癥，先是出現(xiàn)散在紅色斑疹，很快斑疹上形成散在或成叢的小水泡，周圍有紅邊。初起時(shí)發(fā)癢，繼而有痛感。水泡很快潰破，形成淺潰瘍迅即結(jié)痂，數(shù)日即脫落自愈。全身病癥或輕或重，所屬淋巴結(jié)有時(shí)略腫大。三、臨床感染單純皰疹病毒性角膜炎(herpessimplexkeratitis,HSK)，簡(jiǎn)稱單皰角膜炎，是由單純皰疹病毒1型IgG(herpessimplexvirus,HSV-1)引起的角膜感染，是一種嚴(yán)重的世界性致盲眼病，其發(fā)病率和致盲率均占角膜病的首位。HSK原發(fā)感染常見于幼兒，有全身發(fā)熱和耳前淋巴結(jié)腫痛，唇部和皮膚單皰感染，眼部受累表現(xiàn)為急性濾泡性結(jié)膜炎、膜性結(jié)膜炎、眼瞼皮膚皰疹，大約2/3患者出現(xiàn)點(diǎn)狀或樹枝狀角膜炎，不到10%的患者發(fā)生角膜基質(zhì)炎和葡萄膜炎；HSK復(fù)發(fā)感染包括樹枝狀和地圖狀角膜炎、非壞死性和壞死性角膜基質(zhì)炎等，感染的病毒株及機(jī)體的遺傳體質(zhì)，與疾病類型及復(fù)發(fā)的嚴(yán)重程度有關(guān)。單純皰疹病毒性腦炎(HerpesSimplexVirusEncephalitis，HSE)是一種由于單純皰疹病毒感染腦實(shí)質(zhì)引起的，以發(fā)熱、口唇皰疹、頭痛嘔吐、意識(shí)障礙、偏癱、抽搐、精神異常為主要表現(xiàn)、腦脊液可檢出單純皰疹病毒抗原或特異性抗體陽(yáng)性的腦部感染性疾病，又稱急性壞死性腦炎、急性包涵體腦炎，是臨床較為常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，其中95％以上為HSV-1感染。本病呈散發(fā)性，見于世界各地，無(wú)季節(jié)性傾向，任何年齡均可發(fā)病，也無(wú)性別差異，病情險(xiǎn)惡，病死率高，據(jù)報(bào)道為30%～70%。潛伏感染和復(fù)發(fā)感染HSV原發(fā)感染產(chǎn)生免疫力后，將大局部病毒去除，局部病毒可沿神經(jīng)髓鞘到達(dá)三叉神經(jīng)節(jié)〔HSV-1〕和脊神經(jīng)節(jié)〔HSV-2〕細(xì)胞中或周圍星形神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)，以潛伏狀態(tài)持續(xù)存在，與機(jī)體處于相對(duì)平衡，不引起臨床病癥。當(dāng)機(jī)體發(fā)熱、受寒、日曬、月經(jīng)、情緒緊張，使用垂體或腎上腺皮質(zhì)激素，遭受某些細(xì)菌病毒感染等，潛伏的病毒會(huì)被激活增殖，沿神經(jīng)纖維索下行至感覺神經(jīng)末梢，至附近表皮細(xì)胞內(nèi)繼續(xù)增殖，引起復(fù)發(fā)性局部皰疹。其特點(diǎn)是每次復(fù)發(fā)病變往往發(fā)生于同一部位，最常見在唇鼻間皮膚與粘膜交界處出現(xiàn)成群的小皰疹。皰疹性角膜炎、皰疹性宮頸炎等亦可反復(fù)發(fā)作。先天性及新生兒感染妊娠期婦女因HSV原發(fā)感染或潛伏的病毒被激活，病毒可經(jīng)過(guò)胎盤感染胎兒，誘發(fā)流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或先天性畸形。孕婦生殖器有皰疹病損者，分娩時(shí)病毒可傳給嬰兒而發(fā)生新生兒皰疹感染，感染危險(xiǎn)性在40-60%，其中60-70%致死，幸存而無(wú)后遺癥只有15%。一般有四種感染類型：無(wú)病癥型、皰疹型、中樞神經(jīng)系統(tǒng)型及全身播散型感染。大多數(shù)病兒于產(chǎn)后1-3周出現(xiàn)臨床病癥，其中80%首先顯現(xiàn)皮膚損害，約20%不出現(xiàn)皮膚損害，只表現(xiàn)為播散性或中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染。1、直接檢查單純皰疹病毒常采用皰疹液、皮膚粘膜病灶刮取物、活檢組織在免疫電鏡下特異性地檢查感染細(xì)胞和組織標(biāo)本，可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)有不成熟的病毒顆粒。也可將標(biāo)本涂片用姬姆薩染色，于光學(xué)顯微鏡下觀察多巨細(xì)胞和細(xì)胞內(nèi)嗜酸性包涵體。上述方法受取樣部位和病變時(shí)機(jī)的影響，敏感性和特異性不高，不適于臨床大規(guī)模檢測(cè)之用。2、病毒別離培養(yǎng)病毒培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室診斷HSV感染較為敏感的方法，HSV-1和HSV-2能產(chǎn)生典型的CPE(致細(xì)胞病變作用)。如鏡檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞腫脹、變圓、有巨細(xì)胞或融合細(xì)胞出現(xiàn)等典型的細(xì)胞病變和細(xì)胞核內(nèi)包涵體說(shuō)明病毒存在。細(xì)胞培養(yǎng)的病毒別離率常受感染的特異部位不同而有差異。據(jù)報(bào)道腦脊液(CSF)中單純皰疹病毒培養(yǎng)的陽(yáng)性率很低，一般不超過(guò)5％。生殖器皰疹標(biāo)本細(xì)胞培養(yǎng)HSV的陽(yáng)性率那么較高。但也有文獻(xiàn)報(bào)道培養(yǎng)別離生殖器標(biāo)本易于污染，操作復(fù)雜。無(wú)法檢測(cè)亞臨床型、潛伏性生殖器皰疹。3、核酸檢測(cè)中山大學(xué)達(dá)安基因已有熒光PCR試劑盒上市。4、抗體檢測(cè)主要通過(guò)酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清標(biāo)本內(nèi)的HSV抗體(IgM及IgG)。目前市場(chǎng)上的檢測(cè)試劑盒有分型〔HSV-1HSV-2〕和不分型〔HSV-1+2〕試劑盒兩種。四、單純皰疹病毒的診斷TORCH的診斷意義孕婦在懷孕期間原發(fā)性感染TORCH，可引起胎兒的先天性感染，造成出生缺陷，TORCHIgG和IgM抗體的檢測(cè)可以區(qū)分孕婦是否在懷孕期間感染了五種病原體，并可結(jié)合其他診斷方法確定胎兒是否受到先天性感染。再次感染和懷孕后期感染對(duì)胎兒的危害比較小，最好在孕前檢查免疫狀態(tài)以了解孕期血清學(xué)的轉(zhuǎn)化?；蛟趹言衅陂g檢查以確定感染時(shí)間。多數(shù)母親感染后無(wú)特殊病癥或無(wú)病癥，因此臨床診斷的意義不大。病毒感染可產(chǎn)生特異性抗體，但并不總能提供免疫力。所以可發(fā)生再次感染并傳播給胎兒。孕早期應(yīng)識(shí)別易感孕婦，提供相關(guān)高危因素的咨詢。早期證實(shí)母親的感染，能幫助及早確定采取侵入性或非侵入性的產(chǎn)前診斷方法。為有效評(píng)估胎兒的風(fēng)險(xiǎn)及制訂合理的處理方案，應(yīng)準(zhǔn)確掌握：流行病學(xué)情況、高危因素、自然病程、后遺癥的發(fā)生率、產(chǎn)前診斷的方法和其局限性、預(yù)防和治療的措施。檢查結(jié)果意義危險(xiǎn)性處理措施IgM+IgG+早期感染過(guò)體內(nèi)有抗體；近期復(fù)發(fā)感染或體內(nèi)潛伏的病毒被激活。高同時(shí)采取其它檢測(cè)方法進(jìn)一步確診，若近期感染指標(biāo)仍舊為陽(yáng)性或胎兒情況不佳，應(yīng)終止妊娠。IgM+IgG-急性期初次感染極高臨床上少見。處理方法與上相同。IgM-IgG+早期感染過(guò)，體內(nèi)有抗體，有一定免疫力；無(wú)近期感染。低無(wú)需進(jìn)一步處理。IgM-IgG-無(wú)感染史，體內(nèi)無(wú)抗體，無(wú)免疫力。視為易感人群無(wú)嚴(yán)格監(jiān)控，有條件應(yīng)進(jìn)行人工免疫。IgG抗體4倍升高近期復(fù)發(fā)感染或體內(nèi)潛伏的病毒被激活。高同時(shí)采取其它檢測(cè)方法進(jìn)一步確診，若近期感染指標(biāo)仍舊為陽(yáng)性或胎兒情況不佳，應(yīng)終止妊娠。TORCH檢測(cè)的臨床診斷意義IgM抗體、IgG抗體出現(xiàn)時(shí)間

IgM抗體在感染后2～3天出現(xiàn)，7-14天到達(dá)最大值，此后維持一段時(shí)間的平衡。在愈合期IgM抗體水平快速下降，8周左右根本檢測(cè)不到抗體。潛伏感染、無(wú)病癥感染和復(fù)發(fā)感染時(shí)根本檢測(cè)不到IgM抗體，所以IgM抗體是近期感染的指標(biāo)。IgG抗體在感染后7天左右出現(xiàn)，2周左右到達(dá)最大值，此后緩慢下降，至愈合期根本維持平衡。一旦病毒再次復(fù)發(fā)，IgG抗體水平再次快速升高并于1周內(nèi)到達(dá)頂峰，此后快速恢復(fù)到正常值，所以IgG抗體是繼往感染的指標(biāo)。一般來(lái)說(shuō)，感染后IgM抗體的滴度會(huì)在一個(gè)月內(nèi)到達(dá)頂峰，2-4個(gè)月根本消失，這段時(shí)期也稱急性或近期感染，隨后抗體滴度開始下降，但是有些人IgM抗體會(huì)持續(xù)陽(yáng)性或存在半年以上，所以僅從IgM抗體的檢測(cè)結(jié)果還并不能完全判定孕婦是否為急性感染。更加準(zhǔn)確的臨床意義還應(yīng)結(jié)合IgG親和力測(cè)定來(lái)區(qū)分是否為急性感染，因?yàn)榈陀H和力的IgG抗體出現(xiàn)在感然后的第一個(gè)月，既往和復(fù)發(fā)感染才會(huì)出現(xiàn)高親和力的IgG抗體。親和力的上下以親和指數(shù)表示，感染后3個(gè)月內(nèi)的血清樣本CMV-IgG親和指數(shù)一般為21%±13%，既往感染的親和指數(shù)一般為78%±10%。所以高IgM抗體滴度的同時(shí)IgG親和指數(shù)較低那么預(yù)示著初次急性感染。羊水的病原體培養(yǎng)和PCR檢測(cè)可以確認(rèn)胎兒是否受到先天性感染。僅IgM抗體的檢測(cè)存在缺陷IgG抗體親和力的檢測(cè)作為補(bǔ)充確診方法以CMV和RV為例對(duì)臨床檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行解釋和進(jìn)一步處理初次感染后的17周內(nèi)IgG抗體為低親和力抗體〔AI<40%〕，25周后完全成熟為高親和力抗體〔AI≥60%〕。臨檢中心引用以巨細(xì)胞病毒為例說(shuō)明孕婦原發(fā)感染與新生兒的先天性感染和有病癥感染的關(guān)系1994–1999意大利 出現(xiàn)病癥 沒有病癥

n=18(46.2%) n=21(53.8%)未感染病毒別離培養(yǎng)陰性IgG-/IgM-;IgG+/IgM-(高親和力)原發(fā)感染病毒別離培養(yǎng)陽(yáng)性或陰性IgG-/IgM+;IgG+/IgM+(低親和力)復(fù)發(fā)感染病毒別離培養(yǎng)陽(yáng)性/陰性IgG+/IgM+(高親和力)感染狀態(tài)不明病毒別離培養(yǎng)陰性未檢測(cè)IgM抗體，IgG親和力中等經(jīng)進(jìn)一步檢測(cè)分成4組611個(gè)有垂直傳播巨細(xì)胞病毒風(fēng)險(xiǎn)的孕婦Ⅰ未感染者n=300(49.1%)沒有出現(xiàn)先天性感染Ⅱ原發(fā)感染者n=161(26.3%)出現(xiàn)先天性感染Ⅲ復(fù)發(fā)感染者n=125(20.5%)沒有出現(xiàn)先天性感染Ⅳ感染狀態(tài)不明n=25(%)沒有出現(xiàn)先天性感染病毒別離培養(yǎng)和PCR在胎兒和新生兒CMV感染診斷中靈敏度和特異性比較結(jié)果顯示：PCR靈敏度100%，可以作為初篩實(shí)驗(yàn)。病毒別離培養(yǎng)特異性100%，可以作為確診實(shí)驗(yàn)。TORCH感染嚴(yán)重程度的影響因素病原體種類、數(shù)量、毒力、是否持續(xù)孕婦免疫力初染/再染，孕母免疫力下降胎兒孕周/成熟度孕周小，成熟度低者病變嚴(yán)重TORCH先天性感染的途徑經(jīng)胎盤感染經(jīng)羊水感染

經(jīng)產(chǎn)道感染經(jīng)母乳感染標(biāo)本采集：孕婦：血液、尿液、乳汁、宮頸分泌物胎兒：胎盤組織、絨毛、羊膜、羊水新生兒：臍血、鼻咽/外耳道分泌物、胃液、腦脊液、尿液。檢測(cè)方法：形態(tài)學(xué)：光鏡下檢查病原學(xué)：別離培養(yǎng)/接種血清學(xué)：IHA、IFA、ELISA分子生物學(xué)：PCRTORCH綜合癥的診斷TORCH-IgG和TORCH-IgM抗體檢測(cè)方法間接ELISA法檢測(cè)TORCH-IgG抗體包被抗原血清中特異性IgG抗體酶標(biāo)記抗人IgG抗體底物終止液間接ELISA法檢測(cè)TORCH-IgM抗體包被抗原酶標(biāo)記抗人IgM抗體底物終止液血清中特異性IgM抗體血清中特異性IgG抗體血清需用吸附劑去除特異性IgG和RF因子的干擾包被抗人IgM抗體捕獲ELISA法檢測(cè)TORCH-IgM抗體〔中和抗原法〕酶標(biāo)記特異性抗原的抗體底物終止液血清中人IgM抗體此反響模式被國(guó)內(nèi)外普遍采用特異性中和抗原包被抗人IgM抗體捕獲ELISA法檢測(cè)TORCH-IgM抗體〔酶標(biāo)記抗原法〕底物終止液血清中人IgM抗體目前國(guó)內(nèi)已上市產(chǎn)品均采用此法酶標(biāo)記特異性抗原間接法和捕獲法檢測(cè)TORCH-IgM方法的優(yōu)劣間接法優(yōu)點(diǎn)：方法簡(jiǎn)單，原材料容易制備。間接法缺點(diǎn)：易受特異性IgG競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合固相抗原的干擾，造成假陰性。易受類風(fēng)濕因子的干擾，造成假陽(yáng)性。為去除以上兩因素的干擾，需要對(duì)樣本用吸附劑處理，操作復(fù)雜。本底較高，陰陽(yáng)性樣本反差不明顯。包被抗原間接法檢測(cè)TORCH-IgM抗體的干擾因素酶標(biāo)記抗人IgM抗體血清中特異性IgM抗體血清中特異性IgG抗體血清中特異性IgG抗體IgM型RF因子包被抗原RF因子酶標(biāo)記抗人IgM抗體血清中特異性IgG抗體

捕獲法優(yōu)點(diǎn)：有效地去除了特異性IgG的干擾，降低了類風(fēng)濕因子的干擾。不需要實(shí)驗(yàn)前對(duì)樣本進(jìn)行預(yù)處理，操作簡(jiǎn)便。陰性本底干凈，陰陽(yáng)性樣本反差明顯。酶標(biāo)記抗原的方法較中和抗原的方法更具優(yōu)勢(shì)。捕獲法缺點(diǎn)：原材料要求高。TORCH國(guó)內(nèi)外產(chǎn)品介紹項(xiàng)目生產(chǎn)廠家批準(zhǔn)文號(hào)批準(zhǔn)日期CMV-IgM北京現(xiàn)代高達(dá)國(guó)藥準(zhǔn)字S200600702006-11-22北京貝爾國(guó)藥準(zhǔn)字S200600032006-1-28達(dá)安基因（熒光PCR)國(guó)藥準(zhǔn)字S200600562006-6-23普生(天津)科技有限公司食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2008第3401004號(hào)2008-8-19上海中信亞特斯診斷試劑有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2009第3400148號(hào)2009.01.22意大利DIESSEDiagnosticaSenese國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2009第3400167號(hào)2009.01.22CMV-IgG上海中信亞特斯診斷試劑有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2008第3403565號(hào)2008.12.15RV-IgM北京現(xiàn)代高達(dá)國(guó)藥準(zhǔn)字S200700082007-4-2北京貝爾國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字第2007第3401343號(hào)2007-12-29上海中信亞特斯診斷試劑有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2008第3403562號(hào)2008.12.15DIESSEDiagnosticaSenese國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2009第3400165號(hào)2009.01.22珠海經(jīng)濟(jì)特區(qū)海泰生物制藥有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2008第3401414號(hào)2008.12.24RV-IgG上海中信亞特斯診斷試劑有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2008第3403564號(hào)2008.12.15美國(guó)美德聲科學(xué)技術(shù)公司北京代表處國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2009第3400305號(hào)2009.02.18國(guó)內(nèi)批準(zhǔn)上市的TORCH試劑盒目錄項(xiàng)目生產(chǎn)廠家批準(zhǔn)文號(hào)批準(zhǔn)日期TOX-IgM珠海海泰國(guó)藥準(zhǔn)字S200200012002-1-4北京現(xiàn)代高達(dá)國(guó)藥準(zhǔn)字S200600992006-12-31北京貝爾國(guó)食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2008第3400988號(hào)2008.08.19上海中信亞特斯診斷試劑有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2008第3403561號(hào)2008.12.15索林診斷（集團(tuán)）有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2007第3402146號(hào)2007.12.29康乃格診斷公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2005第3401339號(hào)2005.05.23TOX-IgG珠海海泰國(guó)藥準(zhǔn)字S200400192004-3-17TOX-CA浙江醫(yī)學(xué)科學(xué)院國(guó)藥準(zhǔn)字S200300292003-2-13HSV-2IgM北京貝爾生物工程有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2008第3400990號(hào)2008.08.19北京現(xiàn)代高達(dá)國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字第2007第3401094號(hào)2007-11-12HSVIgM(1+2)上海中信亞特斯診斷試劑有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2009第3400306號(hào)2009.02.18意大利DIESSEDiagnosticaSenese國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2009第3400168號(hào)2009.01.22HSV-IgG(1+2)上海中信亞特斯診斷試劑有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2009第3400307號(hào)2009.02.18HSV-2PCR中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司國(guó)食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2008第3400443號(hào)2008.03.31項(xiàng)目國(guó)外廠家檢測(cè)方法RV-IgGAbbott微粒子酶聯(lián)免疫熒光法(MEIA)RV-IgMAbbott微粒子酶聯(lián)免疫熒光法(MEIA)CMV-IgGAbbott微粒子酶聯(lián)免疫熒光法(MEIA)CMV-IgMAbbott微粒子酶聯(lián)免疫熒光法(MEIA)TOX-IgGAbbott微粒子酶聯(lián)免疫熒光法(MEIA)TOX-IgMAbbott微粒子酶聯(lián)免疫熒光法(MEIA)HSV-1IgGBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)HSV-1IgMBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)HSV-2IgGBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)HSV-2IgMBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)RV-IgGBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)RV-IgMBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)CMV-IgGBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)CMV-IgMBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)TOX-IgGBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)TOX-IgMBioCheck酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)國(guó)外有代表性的TORCH試劑盒目錄項(xiàng)目國(guó)外廠家檢測(cè)方法RV-IgGBio-Rad酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)RV-IgMBio-Rad酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)CMV-IgGBio-Rad酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)CMV-IgMBio-Rad酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)RV-IgGBECKMAN磁珠酶免(間接)RV-IgMBECKMAN磁珠酶免(捕獲)TOX-IgGBECKMAN磁珠酶免(間接)TOX-IgMBECKMAN磁珠酶免(捕獲)HSV1-IgG/-IgM/-IgAViroImmun酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)HSV2-IgG/-IgM/-IgAViroImmun酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)RV-IgGViroImmun酶聯(lián)免疫間接法(ELISA)RV-IgMViroImmun酶聯(lián)免疫捕獲法(immunocaptureassay)CMV-IgG/-IgM/-IgAViroImmun酶聯(lián)免