血型系統(tǒng)新抗原概述

血型系統(tǒng)新抗原概述“血型”這個(gè)術(shù)語通常是指一個(gè)人的紅細(xì)胞(RBC)表面抗原的組合。抗原是不同蛋白質(zhì)、糖蛋白或糖脂上的特定位點(diǎn)，它們構(gòu)成了紅細(xì)胞膜的一部分，免疫系統(tǒng)可以與之相互作用。這些蛋白質(zhì)有許多功能，如：膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(Diego,Kidd),受體和粘附分子(Duffy,Lutheran),補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(Cromer,Knops),酶(Yt,Kell,Dombrock),結(jié)構(gòu)成分(Diego,Gerbich)或多糖包被成分(MNS)。抗原是由抗體定義的，這些抗體要么是由于遇到環(huán)境中無處不在的抗原而“自然”發(fā)生的，要么是在接觸他人的紅細(xì)胞后，主動(dòng)免疫非自體紅細(xì)胞抗原而形成的。紅細(xì)胞表面抗原的遺傳變異決定了一個(gè)人的血型。血型系統(tǒng)被正式定義為由單一基因控制的一種或多種抗原系統(tǒng)，或由兩個(gè)或兩個(gè)以上緊密相連的同源基因組成的復(fù)合物。每個(gè)血型系統(tǒng)在基因上都與其他血型系統(tǒng)分離。為了識別血型系統(tǒng)及其抗原，必須確定潛在的遺傳變異，測序并確認(rèn)其影響表型。2022年9月30日，國際輸血協(xié)會(ISBT)紅細(xì)胞免疫遺傳學(xué)和血型術(shù)語工作組(ISBTWP)公布了最新的血型系統(tǒng)抗原數(shù)目和列表，其中涉及了Lutheran、Kell.Yt、LW、GLOB、RHAG共6個(gè)血型系統(tǒng)抗原的變動(dòng)，其中Lutheran系統(tǒng)減掉1個(gè)抗原Lull(011號),Kell系統(tǒng)確認(rèn)1個(gè)新抗原KHIZ(040號)，Yt系統(tǒng)確認(rèn)1個(gè)新抗原YTGT(006號)，I卅系統(tǒng)增加1個(gè)新抗原LWEM(008號)，GLOB系統(tǒng)新增1個(gè)抗原突變（rsll87324502）在歐洲人群的基因組匯集數(shù)據(jù)庫（gnomAD）中發(fā)現(xiàn)，頻率為2/113.342。有趣的是，p.355氨基酸位于預(yù)測的RhAG的第六細(xì)胞外環(huán)上，這支持了其在形成新的異體抗原中的潛在含義?；純耗赣H的第一個(gè)女兒和新生兒都繼承了突變的父親等位基因，不出所料，母體血清與第一個(gè)女兒的紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。血清學(xué)和分子學(xué)研究擴(kuò)展到其他家庭成員，并觀察到了相關(guān)性，因?yàn)槟冈纯贵w僅凝集父親的兄弟姐妹之一的紅細(xì)胞，這位唯一的家庭成員（不包括兩個(gè)孩子）也攜帶c.1063A>C突變。相反，在所有其他攜帶野生型RHAG基因序列的家庭成員中觀察到交叉配血均為陰性。綜上，對這一胎母血型不相容病例的研究得以在RhAG蛋白中發(fā)現(xiàn)了一種新的低頻率抗原，該抗原的表達(dá)與p.Asn355His的變化有關(guān)，目前為止只在這個(gè)家族和兩個(gè)不相關(guān)的個(gè)體中檢測到。EXTB（005號），RHAG系統(tǒng)確認(rèn)1個(gè)新抗原SHER（006號）。血型集合和血型系列（700/901系列）抗原不變。ISBT保存了所有目前公認(rèn)的血型系統(tǒng)的官方記錄，目前有43個(gè)公認(rèn)的血型系統(tǒng)，其中共包含349個(gè)紅細(xì)胞抗原（截至2022年9月30日），這43個(gè)系統(tǒng)是由48個(gè)基因所決定的。01Lutheran系統(tǒng)（005號）抗原變動(dòng)Lutheran血型系統(tǒng)目前包括26種抗原，2022年9月30日，國際輸血協(xié)會（ISBT）公布的最新的Lutheran血型系統(tǒng)抗原數(shù)和列表，減掉1個(gè)抗原LulKOll號）。Lull抗原于1974年被發(fā)現(xiàn)，其是高頻抗原，所有人群抗原陽性率均達(dá)100%,抗原曾用名ReynoldsoLull是弱反應(yīng)性抗原，其抗原表位目前也尚不清楚。Lull抗原化學(xué)性質(zhì)：無花果酶/木瓜酶不破壞抗原；胰蛋白酶、糜蛋白酶、鏈霉蛋白酶可以破壞抗原；DTT可破壞抗原。抗-Lull抗體有IgM,也存在IgG性質(zhì)的，但并沒有關(guān)于與溶血性輸血反應(yīng)和HDFN的報(bào)道。Lutheran血型這些抗原攜帶在一個(gè)單一的I型膜糖蛋白上，而該膜糖蛋白具有五個(gè)細(xì)胞外免疫球蛋白超家族（IgSF）結(jié)構(gòu)域。糖蛋白以兩種同種型存在于紅細(xì)胞表面：85kDa的Lu糖蛋白和75kDa為基礎(chǔ)的細(xì)胞粘附分子抗原（B-CAM）,85kDa同種型更為豐富。這兩種異構(gòu)體都是粘附分子，具有層粘連蛋白結(jié)合的主要功能，都是單個(gè)基因LU的選擇性剪接產(chǎn)物。Lutheran抗原主要由單核甘酸突變編碼形成,導(dǎo)致四對對立抗原（Lua/Lub、Aua/Aub、Lu6/Lu9和Lu8/Lul4）加上另外18種高頻抗原。抗-Lua可引起輕度DHTR,應(yīng)選擇在IAT相容的血液?？?Lub也引起輕度DHTR,應(yīng)選擇抗原陰性血液。非常罕見的抗-Lu3是由具有被稱為Lunull表型的隱性Lu（a-b-）的個(gè)體被免疫產(chǎn)生的。應(yīng)選擇Lu（a-b-）紅細(xì)胞輸注。Lu（a-b-）被稱為In（Lu）表型。其他針對Lutheran系統(tǒng)高頻抗原的抗體尚未被報(bào)道具有臨床意義。然而，作為預(yù)防措施應(yīng)選擇Lu（a-b-）血液用于具有強(qiáng)抗體的患者。Lutheran抗體沒有涉及嚴(yán)重的HDFN；這可能是由于Lu糖蛋白存在于胎盤組織，從而通過吸附而阻止了抗體通過胎盤的轉(zhuǎn)移。此外，Lutheran抗原在新生兒紅細(xì)胞上常常發(fā)育不良。02Kell系統(tǒng)（006號血型系統(tǒng)）抗原變動(dòng)曾經(jīng)（截至2021.06）Kell血型系統(tǒng)包括36種抗原：24種高頻率抗原、10種低頻率抗原和2種多態(tài)性抗原，最后一個(gè)特征性抗原是KEAL（039號），排序到39號是因?yàn)橛?個(gè)數(shù)字對應(yīng)抗原被認(rèn)為是過時(shí)的（KEL8、KEL9、KEL15）已經(jīng)被剔除出Kell血型系統(tǒng)抗原序列。Kei1血型系統(tǒng)由KEL基因（定位染色體為7q34,19個(gè)外顯子）編碼。2022年9月30日，國際輸血協(xié)會（ISBT）公布的最新的Kell血型系統(tǒng)抗原數(shù)和列表，確認(rèn)增加1個(gè)新抗原KHIZ（040號），目前共37個(gè)抗原。2022年6月，ISBT第37屆國際會議上，來自法國輸血協(xié)會國家血型參比實(shí)驗(yàn)室的Martin-Blanc等人報(bào)告了一種新的高頻率的Kell血型系統(tǒng)抗原——KHIZo先證者是一名61歲的女性患者，血型0、D+（弱）C+E-c+e+、K-,居住在突尼斯，但定期在法國逗留。先證者父母是具有土耳其血統(tǒng)的表親?；颊咴?975年第一次分娩后有過四次懷孕和一次輸血。在2016年因結(jié)腸鏡檢查入院，在第一家醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了紅細(xì)胞抗體篩選和鑒定，檢測到與譜細(xì)胞的全凝集，自身對照陰性。在該報(bào)告作者的參比實(shí)驗(yàn)室，通過IAT試驗(yàn)抗體與所有譜紅細(xì)胞反應(yīng)均為3+,應(yīng)用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶處理后的紅細(xì)胞及自身對照均陰性。在IAT卡式法試驗(yàn)中，抗體效價(jià)測得為32（得分52）。經(jīng)差異性同種異體吸收實(shí)驗(yàn)后可排除幾乎所有的特異性抗體。并用患者血漿對多種罕見血型的紅細(xì)胞進(jìn)行檢測，唯一無反應(yīng)性的紅細(xì)胞為K0（Ku-）型。然而患者的表型是k+、Kp（b+）、Js（b+）、Ku+,這意味著抗體不是抗-k,抗-Kpb,抗-Jsb或抗-Ku。此外，可溶性重組Kell蛋白完全消除了抗體全部凝集的反應(yīng)性。因此，報(bào)告者得出結(jié)論，該抗體是對應(yīng)一個(gè)不常見的或仍然未知的高頻率的Kell系統(tǒng)抗原。WES（全外顯子組測序）顯示在外顯子14中存在純合的c.1538G>A非同義突變（由Sanger測序證實(shí)），預(yù)測編碼p.Arg513Gln氨基酸變化，并已經(jīng)在基因組數(shù)據(jù)庫中報(bào)道：”143144958。有趣的是，該突變發(fā)生率最高的是南亞人（1.2104）這與先證者的土耳其起源相當(dāng)一致。血清學(xué)和分子生物學(xué)研究為在Kell血型系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的這一種新型高頻率抗原提供了證據(jù)，報(bào)告者提議了該KHIZ抗原成為Kell系統(tǒng)中的第37個(gè)抗原，ISBT最終將這種新抗原命名為KEL40o03YT系統(tǒng)（011號血型系統(tǒng)）抗原變動(dòng)2022年9月美國明尼蘇達(dá)州圣保羅市血液中心Nancy等人在《Transfusion》雜志發(fā)表文章，報(bào)道了兩個(gè)無關(guān)的美洲原住民的紅細(xì)胞Yt血型系統(tǒng)中的一種新發(fā)現(xiàn)的高頻抗原——YTGToYt系統(tǒng)原來由五種抗原組成：成對的Yta/Ytb和高頻抗原YTEG、YTLI和YTOTo報(bào)告者調(diào)查了一名患有術(shù)后貧血和一種不明抗體的女性原住民(NA)的樣本，她在輸注不相容的紅細(xì)胞時(shí)出現(xiàn)了劇烈的心動(dòng)過速和低血壓。對先證者進(jìn)行檢測，血清學(xué)檢測方法應(yīng)用了包括LISS、PEG和IgG卡式法。試驗(yàn)紅細(xì)胞應(yīng)用了木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、。-凝乳胰蛋白酶和二硫蘇糖醇處理。檢測了罕見的紅細(xì)胞，并進(jìn)行了抑制試驗(yàn)研究。從白細(xì)胞中提取了DNA用于Sanger測序。結(jié)果顯示，在LISS的IAT中血漿對所有譜細(xì)胞都有很強(qiáng)的反應(yīng)性3?4+；自身對照是陰性。觀察到許多罕見的紅細(xì)胞與患者血漿呈陽性反應(yīng)，除了PNH-IIK缺乏GPT鏈接的DO、Yt、CROM、JMH和Emmo酶的敏感性模式表明符合Yt的特異性，和可溶性重組srYt有中和反應(yīng)性。測序顯示YT*A/A基因型，外顯子2發(fā)生c.290A>G(p.Gln97Arg)的純合子改變。抗體的反應(yīng)性與之前調(diào)查的一名無關(guān)的原住民男性相似。該男子的紅細(xì)胞與患者的血漿沒有反應(yīng)。此兩名不相關(guān)的原住民患者被發(fā)現(xiàn)有同一種針對新的高頻率Yt抗原的抗體，將此抗原命名為YTGT(YT6),該抗原及對應(yīng)抗體與臨床顯著的輸血反應(yīng)相關(guān)。特異性的鑒定依賴于酶的敏感性，并使用可溶性重組Yt抗原可以進(jìn)行中和，并發(fā)現(xiàn)測序結(jié)果有新的突變c.290A>G(p.Gln97Arg),這一突變被命名為Yt*01.-06o使用IVIG和類固醇來減輕輸血后的不良反應(yīng)效果良好。2022年9月30日，國際輸血協(xié)會(ISBT)公布的最新Yt血型系統(tǒng)抗原數(shù)和列表，亦將該抗原(006號)列入。該系統(tǒng)目前已共6個(gè)抗原。04LW系統(tǒng)(016號血型系統(tǒng))抗原變動(dòng)2022年7月，澳大利亞紅十字會Lopez等人在《VoxSang》(血液之聲)雜志報(bào)告了一例在純合子LW*Ac.309OA突變的澳大利亞土著人紅細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)的被相應(yīng)抗體檢測到的一種新高頻LW抗原一一LWEMoLW基因編碼攜帶LW血型系統(tǒng)抗原的LW糖蛋白。LW抗原與D抗原不同，然而它們表型相關(guān)，抗-LW抗體經(jīng)常被誤認(rèn)為抗-D。研究者在一名澳大利亞土著后裔患者中檢測到一種針對高頻抗原的抗體，其抗原類型始終為LW(a+b-)。研究者對該名患者及其四個(gè)兄弟姐妹的樣本進(jìn)行了檢測。采用了單核甘酸多態(tài)性(SNP)微陣列和大規(guī)模平行測序(MPS)平臺對樣本DNA進(jìn)行基因分型。采用標(biāo)準(zhǔn)的血凝技術(shù)對紅細(xì)胞進(jìn)行表型分析?？贵w鑒定使用了來自成人的紅細(xì)胞和臍帶血細(xì)胞。MPS結(jié)果顯示基因型為LW*A/A(c.299A),預(yù)測LW(a+b-)。此外，在所有家族成員中檢測到一種新的LW*Ac.3090A單核甘酸突變?；颊吲c她的一個(gè)兄弟姐妹為LWc.3090A純合子。來自患者的抗體對所有試劑譜紅細(xì)胞和臍帶血細(xì)胞呈陽性反應(yīng)，但對LW(a-b-)、Rhnull和另一個(gè)兄弟的紅細(xì)胞反應(yīng)陰性?？贵w與二硫蘇糖醇處理的紅細(xì)胞無反應(yīng)。研究者認(rèn)為，在患者體內(nèi)檢測到的抗體在LW血型系統(tǒng)中識別了一種新的高頻率抗原LWEMo產(chǎn)生抗-LWEM的LWEM陰性患者可安全輸注D+紅細(xì)胞，但首選D-。并認(rèn)為準(zhǔn)確的抗體識別有助于更好地管理血液制品的分配，特別是在D-紅細(xì)胞供應(yīng)短缺的情況下。2022年9月30日，國際輸血協(xié)會(ISBT)公布的最新LW血型系統(tǒng)抗原數(shù)和列表，亦將該抗原(008號)列入。該系統(tǒng)目前共4個(gè)抗原。05GL0B系統(tǒng)(028號)抗原變動(dòng)AB0血型系統(tǒng)在近120多年前被發(fā)現(xiàn)，其基本結(jié)構(gòu)后來被闡明為糖蛋白和攜帶糖脂的碳水化合物。末端三糖GalNAca3(Fuca2)Gal和Gala3(Fuca2)Gal分別構(gòu)成臨床上重要的A和B表位。Clausen等(PNAS,1985)研究顯示A抗原可以延伸到一重復(fù)的糖脂A表位GaINAca3(Fuca2)Galb3GalNAca3(Fuca2)Galb4GlcNAc-Ro然而，B抗原的擴(kuò)展形式尚未被描述。丹尼爾《人類血型》也曾報(bào)道重復(fù)的3型鏈僅存在于A型細(xì)胞的糖脂和分泌液的黏蛋白中，限制性表達(dá)在A型個(gè)體，因?yàn)槠渖锖铣墒怯深~外的半乳糖通過B1-3鍵連接到具有A活性的2型鏈末端的2乙酰氨基半乳糖。2019年6月，在瑞士巴塞爾召開的ISBT第29屆區(qū)域大會上，來自瑞典隆德大學(xué)實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)系的Hagman等人報(bào)告了《人血型B抗原的Pl,3GalNAc-Tl依賴性延伸在紅細(xì)胞上產(chǎn)生新的AB0血型相關(guān)的糖脂結(jié)構(gòu)》，并詳盡證明了B血型糖脂與末端83連接的GalNAc擴(kuò)展的存在，并建議將這種先前未有過描述的結(jié)構(gòu)命名為EXTB。該研究發(fā)現(xiàn)與許多0型血漿一樣，來自Globoside（GLOB血型，028號系統(tǒng)）抗原缺乏的AB或B個(gè)體外周血的血漿也含有抗-EXTB抗體。研究者鑒定了延長的糖基轉(zhuǎn)移酶為P合成酶（Bl,3GalNAc-TD。因此,EXTB符合所有血型系統(tǒng)抗原的標(biāo)準(zhǔn)，因此被認(rèn)為是一種新的GLOB系統(tǒng)抗原。該研究結(jié)果解釋了抗-B酶在交叉配型中的反應(yīng)，這種反應(yīng)阻礙了為輸血制造通用AB0紅細(xì)胞的嘗試。Bl,3GalNAc-Tl也即81,3-N-乙酰半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶,是GLOB血型抗原的編碼基因B3GALNT1的產(chǎn)物，這種酶負(fù)責(zé)合成P抗原的最后一步，即將GalNAc轉(zhuǎn)移到Pk抗原的末端Gal。B3GALNT1基因的關(guān)鍵突變是GLOB系統(tǒng)中罕見的Globoside抗原缺乏的null表型Plk和P2k的遺傳基礎(chǔ)。在2015年發(fā)現(xiàn)同樣的糖基轉(zhuǎn)移酶也負(fù)責(zé)PX2抗原的合成。此外，上述2019年Hagman等報(bào)道B抗原可被P1,3GalNAc-T1拉長形成EXTB抗原。綜上，目前該系統(tǒng)現(xiàn)在包含三種抗原。2022年9月30日，國際輸血協(xié)會（ISBT）公布的最新GLOB血型系統(tǒng)抗原數(shù)和列表，亦將該抗原（005號）列入。06RHAG系統(tǒng)（030號）抗原變動(dòng)2022年6月4日至8日，ISBT召開第37屆國際大會虛擬會議。來自巴塞羅那SangiTeixits血液中心免疫血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室的Gonzalez-Santesteban等人報(bào)道了RIIAG糖蛋白中一種低頻的新抗原SHER的鑒定。而2022年9月，國際輸血協(xié)會（ISBT）亦將該抗原（