槐米中蘆丁的提取分離與鑒定

槐米中蘆丁的提取分離與鑒定第1頁/共20頁一，蘆丁的提取1.實驗原理：蘆丁在冷水中的溶解度為1:10000，在熱水中的溶解度為1：200，在冷乙醇中的溶解度為1:650.因此，采用水煎法提取蘆丁經(jīng)濟，效率高。2.實驗方法槐米20g，研碎藥渣濾液蘆丁粗品濾液300ml，煎煮0.5h，過濾第2頁/共20頁取20g槐米，研碎。置于400mL沸水中，直火煎煮1h(需補充蒸發(fā)掉的水分)。第3頁/共20頁趁熱過濾，濾渣再加入300mL水，直火加熱0.5h。趁熱過濾，合并兩次濾液。第4頁/共20頁放置，析出沉淀，抽濾，干燥得淡黃色蘆丁粗品。第5頁/共20頁二蘆丁的精制和水解一實驗原理1.蘆丁的精制是根據(jù)蘆丁在熱水中溶解度大，冷水中溶解度小的性質(zhì)進(jìn)行重結(jié)晶而獲得蘆丁粗品。2.蘆丁是黃酮苷類，可進(jìn)行酸水解，苷鍵斷裂生成苷元槲皮素，葡萄糖和鼠李糖。第6頁/共20頁2.實驗方法蘆丁粗品0.5g蘆丁粗品按1:200加水，煮沸溶解，趁熱抽濾濾液蘆丁精品放置析晶1g蘆丁粗品2%H2SO480ml，直火回流，加熱30min，抽濾濾液（PC）沉淀濾液槲皮素精品水洗至中性，95%EtOH重結(jié)晶第7頁/共20頁蘆丁的精制：取0.5g蘆丁粗品，置500mL燒杯中，按1:200加水，加熱至沸，使之充分溶解。趁熱抽濾，濾液放冷析晶，第8頁/共20頁抽濾，干燥，得蘆丁精品。第9頁/共20頁2.蘆丁的酸水解：取蘆丁粗品1g，置圓底燒瓶中，加入2%硫酸溶液80mL，直火回流0.5h。趁熱抽濾，濾液留作糖鑒定。濾渣水洗至中性，第10頁/共20頁用95%乙醇進(jìn)行重結(jié)晶：濾渣與乙醇加入圓底燒瓶，進(jìn)行回流，趁熱抽濾。第11頁/共20頁三.蘆丁、槲皮素及糖鑒定1.實驗原理（1）用碳酸鋇將硫酸根離子去除，調(diào)至中性。（2）因糖的極性差異造成Rf值，與對照品比較鑒定（3）黃酮類的顯色反應(yīng)特異性較強，故可與聚酰胺產(chǎn)生氫鍵締合，常用于分離和鑒別。第12頁/共20頁1.糖的紙色譜（圓形濾紙）鑒定取澄清的水解液20mL，加碳酸鋇中和至中性，濾去生成的硫酸鋇沉淀，濾液濃縮至小體積1mL，供紙色譜點樣用。第13頁/共20頁對照品：葡萄糖，鼠李糖展開劑：n-BuOH-HAc-H20(4:1:1)顯色劑：苯胺鄰笨二甲酸鼠李糖葡萄糖第14頁/共20頁2.蘆丁、槲皮素的鑒定取1元硬幣大小的蘆丁、槲皮素，分別放入兩支試管中兩試管分別加入6mL95%乙醇加熱溶解①HCl-Mg粉反應(yīng)②Molish反應(yīng)③1%AlCl3反應(yīng)蘆丁第15頁/共20頁①HCl-Mg粉反應(yīng)②Molish反應(yīng)③1%AlCl3反應(yīng)槲皮素第16頁/共20頁3.聚酰胺薄膜樣品：自制蘆丁、槲皮素乙醇溶液對照品：蘆丁、槲皮素展開劑：95%EtOH顯色劑：1%AlCl3第17頁/共20頁4.熔點測