槐米中蘆丁的提取和精制(2023年)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

試驗(yàn)一、槐米中蘆丁的提取、精制和鑒定〔一〕試驗(yàn)?zāi)康囊笾苽涮J丁，供藥用。通過(guò)蘆丁的制備，把握黃酮類(lèi)化合物的提取分別的原理和操作。生疏重結(jié)晶技巧。了解和把握黃酮類(lèi)化合物的一些主要性質(zhì)和鑒定方法?！捕吃囼?yàn)的根本原理蘆丁的提取原理利用蘆丁構(gòu)造中含有多個(gè)酚羥基，呈酚酸性，能在堿水中溶解的性質(zhì)，可用堿性溶劑進(jìn)展提取，提取液加酸后可沉淀析出〔堿溶酸沉法。也可利用蘆丁在冷水中溶解度小，在熱水中溶解度大的性質(zhì)進(jìn)行提取。蘆丁的分別原理利用蘆丁構(gòu)造在冷乙醇中溶解度小，在熱乙醇中溶解度大，以及在熱水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性質(zhì)分別。蘆丁用溶劑加熱溶解后，趁熱抽濾，濾液放冷后能析出而到達(dá)分別的目的〔如不純可再重復(fù)操作進(jìn)展分別。也可承受醇溶水沉法進(jìn)展精制。蘆丁的鑒定原理〔1〕利用吸附薄層色譜的分別原理，蘆丁與蘆丁比照品在同一條件下進(jìn)展開(kāi)放，顯色，以到達(dá)鑒定蘆丁的目的。通過(guò)專(zhuān)屬的化學(xué)顯色反響〔如三氯化鋁顯色反響，確定蘆丁的成分類(lèi)型〔黃酮類(lèi)。(三)試驗(yàn)內(nèi)容用堿提法、水提法、醇提法提取槐米中蘆丁。用酸沉法和冷卻過(guò)飽和法分別蘆丁。溶劑重結(jié)晶精制蘆丁。薄層色譜法和顯色反響鑒定蘆丁(四)試驗(yàn)藥材儀器與試劑20g。儀器：磁力加熱攪拌器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、粉碎機(jī)、500ml燒杯，1000ml燒杯，50ml燒杯，250ml園底燒瓶、500ml園底燒瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml錐形瓶、50ml錐形瓶、研缽、移液管、減壓過(guò)濾裝置，布氏漏斗，抽濾瓶、層析缸等。試劑：硼砂、氧化鈣、HCI、三氯化鋁、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、濾紙、PH試紙等?！参濉吃囼?yàn)步驟提取〔水提取法〕稱(chēng)取槐米粗粉20g500ml燒瓶中，加水200ml，用磁力加熱攪拌器加熱煮沸30min，趁熱過(guò)濾。殘?jiān)ú僮饕淮?，合并兩次濾液，放置冰箱中析晶，待全部析出后，減壓抽濾，用少量蒸餾水洗滌蘆丁結(jié)晶，抽干，得粗制蘆丁，枯燥，稱(chēng)重，計(jì)算得率。精制〔醇-水重結(jié)晶法〕1g250ml80%30ml15分鐘，趁熱抽濾。濾液置250ml燒杯中，向?yàn)V液中加蒸餾水〔3~4倍量〕至溶液呈明顯混濁，室溫放置，抽濾得精巧蘆丁。用少量蒸餾水洗滌蘆丁結(jié)晶，晾干，稱(chēng)重。(六)過(guò)程與現(xiàn)象記錄Day1〔2023-05-07〕提取20.02g，組裝儀器。500mL200m1--10℃沸騰，產(chǎn)生大量氣泡，藥渣翻滾，漩渦被氣泡遮蓋1-。加熱過(guò)程中時(shí)常停頓沸騰，續(xù)略升2~℃。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，液體顏色加深。煮沸規(guī)程中應(yīng)掌握液量，過(guò)少難以提出藥品，過(guò)多簡(jiǎn)潔噴出瓶口。③最初用抽濾法分別殘?jiān)?--，并且易堵塞和物較少。濾液為深黃色色，粘稠，氣味深厚甘甜。

效果略好，但是溶液還是冷卻，溶解的提取500mL燒瓶中加水200mL磁力攪拌加熱30min，液體顏色略比第一次深。⑤將兩次得到的浸液〔300mL〕收集放入冰箱備用。Day2〔2023-05-08〕精制11-〕1-〕1-〕，枯燥得粗制蘆丁1-1〕。加-1〕，得到黃色油狀液體1-1〕。另旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)粗提物的濾液1-1〕，沒(méi)有產(chǎn)物。Day3〔2023-05-14〕鑒定點(diǎn)滴顯色反響 從放置一周的粗提物中取蘆丁的甲醇溶液〔供試液〕分別點(diǎn)在濾紙上，揮去溶劑，紫外照耀，光吸取明顯1-1〕，然后分別添加供試液蘆丁的甲醇溶液和顯色2三氯化鋁乙醇溶液，顯黃色1-1〕，在紫外燈下365nm觀看有明顯亮斑1-1〕。薄層色譜鑒定吸附劑：硅膠GF254薄層板5.0cmX10.0c。1-11-21-3樣品：自制蘆丁〔1mg/ml〕1-11-21-3開(kāi)放劑：三氯甲烷-甲醇-甲酸〔7∶3∶0.5〕顯 色：a.先在可見(jiàn)光下觀看，然后在紫外光下觀看，有明顯紫外吸收65nm紫外燈下觀察〕b1-1，365nm黃色，左側(cè)有明顯紫外吸取1-1。4.留意事項(xiàng)硼砂因能與蘆丁中的鄰二酚羥基結(jié)合，起保護(hù)鄰二酚羥基，不被氧化破壞的作用。試驗(yàn)證明，提取時(shí)參加硼砂，產(chǎn)品的質(zhì)量會(huì)好些。石灰乳既能到達(dá)堿溶解提取蘆丁的目的，還可以除去槐米中大量的粘液質(zhì)和酸性樹(shù)脂〔形成鈣鹽沉淀，但PH不能過(guò)高和長(zhǎng)時(shí)間煮沸，由于會(huì)導(dǎo)致蘆丁的水解而開(kāi)環(huán)和形成鈣鰲合物，影響產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)率。PH〔酸性太強(qiáng)〕會(huì)使蘆丁形成洋鹽而收率降低?！财摺辰Y(jié)果計(jì)算及分析產(chǎn)率29.69g30.20g樣品凈重0.51g比移值Rf=3/5.75=0.522分析：1、水提法不能充分溶解蘆丁；2、精制時(shí)粗提物聚攏成固體顆粒，沒(méi)有充分溶解；3、抽濾、轉(zhuǎn)移等過(guò)程的損失?！舶恕承牡皿w會(huì)第一次做這樣長(zhǎng)時(shí)間的試驗(yàn)，漸漸寵愛(ài)上了試驗(yàn)室這樣安靜的氣氛，在這里做試驗(yàn)，只需要關(guān)注操作和試驗(yàn)過(guò)程，思考、分析反響機(jī)理和得到某個(gè)結(jié)果的緣由，不需要考慮試驗(yàn)之外的那些世俗和喧囂。1-5 1-61-8