藥物分析與生物藥物分析課件

藥物分析與生物藥物分析

2004年2月9日---7月3日課程安排兩門課合起來(lái)安排學(xué)時(shí)，分別考試。授課17-18周，5學(xué)時(shí)/周講授內(nèi)容:遵循教學(xué)大綱，以課本內(nèi)容為主，盡量全面講解。授課方式：講授-自學(xué)相結(jié)合成績(jī)?cè)u(píng)定：平時(shí)20%(作業(yè)及paper)，期末80%實(shí)驗(yàn)課安排:兩門課同時(shí)開緒論一．藥物分析的性質(zhì)

藥物分析是以藥品質(zhì)量控制為研究目的一門學(xué)科。主要運(yùn)用化學(xué)、物理學(xué)或生物學(xué)等學(xué)科的方法和技術(shù)研究各種藥物及其制劑（合成藥物、天然藥物、生物藥物及其制劑，中藥制劑）的質(zhì)量控制方法。1．綜合性

常規(guī)化學(xué)分析；儀器分析；計(jì)算藥物分析；X-射線衍射，熱分析；DNA、蛋白質(zhì)、基因分析，免疫分析，細(xì)胞分析，體內(nèi)藥物分析。3．研究藥物分析新方法、新技術(shù)分析手段的發(fā)展：化學(xué)分析

紙色譜、TLC

GC（填充柱、毛細(xì)管柱）HPLCCE、CEC

各種聯(lián)用技術(shù)分析狀態(tài)的發(fā)展：靜態(tài)分析實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)分析分析對(duì)象的發(fā)展：血漿

多細(xì)胞

單細(xì)胞、單分子手性藥物分析的發(fā)展：外消旋體

左、右旋體分別分析研究目的：以新方法、新技術(shù)本身為主要目的---基礎(chǔ)理論研究以分析對(duì)象為主要目的---應(yīng)用研究4．與藥物分析有關(guān)的其它工作三．藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是國(guó)家對(duì)藥品質(zhì)量規(guī)格及檢驗(yàn)方法所作的技術(shù)規(guī)定，是藥品生產(chǎn)、供應(yīng)、使用、檢驗(yàn)和管理部門共同遵循的法定依據(jù)。包括：國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)：藥典、中國(guó)生物制品規(guī)程等部頒標(biāo)準(zhǔn)：如中國(guó)醫(yī)院制劑規(guī)范地方標(biāo)準(zhǔn)四．藥典pharmacopoeia是記載藥品標(biāo)準(zhǔn)的法典。凡是藥典收錄的藥品，其質(zhì)量不符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)的均不得出廠，不得銷售，不得使用。（一）中國(guó)藥典1．沿革：已出版：1953，1963，1977，1985，1990，1995，2000年版2．基本結(jié)構(gòu)和主要內(nèi)容ChP由凡例、正文、附錄和索引四部分組成。（1）凡例

1）標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：對(duì)有關(guān)規(guī)定、要求和含義等所作的說(shuō)明。如避光是指用不透光的容器包裝；陰涼處系指不超過(guò)20oC等

2）檢驗(yàn)方法和限度ChP收載的原料藥及制劑均應(yīng)按規(guī)定方法進(jìn)行檢驗(yàn)；或?qū)⑵渌椒ㄅc規(guī)定方法對(duì)照。限度不是真實(shí)含量。若未規(guī)定上限，系指不超過(guò)101.0%。

3）標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品

指用于鑒別、檢查和含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。不包括色譜用的內(nèi)標(biāo)。標(biāo)準(zhǔn)品：是指用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或效價(jià)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按效價(jià)單位或μg計(jì)。對(duì)照品：除另有規(guī)定外，均按干燥品或無(wú)水物計(jì)算后使用。

恒重：小于0.3mg按干燥品（或無(wú)水物，或無(wú)溶劑）計(jì)算：除另有規(guī)定外，應(yīng)取未經(jīng)干燥（或未去水或未去溶劑）的供試品進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)得干燥失重后，再在計(jì)算時(shí)從取用量中扣除．空白試驗(yàn)：不加供試品或以等量溶劑替代供試液，同法操作所得結(jié)果。試驗(yàn)溫度：如不說(shuō)明，系指室溫，通常以25±2℃為準(zhǔn)。

6）包裝、標(biāo)簽（2）正文

收載不同藥品、制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

藥品名稱包括：中文名（中國(guó)藥品通用名稱），漢語(yǔ)拼音名稱和英文名稱。*中藥材不使用英文名稱，而采用拉丁名稱。（3）附錄主要內(nèi)容：制劑通則，生物制品通則，通用檢測(cè)方法，生物檢定法，試藥與試液，溶液配制，原子量表等（4）索引：中（按漢語(yǔ)拼音順序排列）、英文五．藥品檢驗(yàn)工作的基本程序1．取樣從大量樣品中取出少量樣品，應(yīng)考慮取樣的科學(xué)性、真實(shí)性和代表性。取樣基本原則：均勻、合理。2．藥物的鑒別：判斷藥品的真?zhèn)胃鶕?jù)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進(jìn)行某些化學(xué)反應(yīng)，根據(jù)反應(yīng)現(xiàn)象判斷；或測(cè)定理化常數(shù)或光譜特征，來(lái)判斷。其它包括藥品的外觀、顏色、氣味等的鑒別。應(yīng)結(jié)合多個(gè)鑒別試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判斷，而不能以單個(gè)鑒別試驗(yàn)判斷，否則會(huì)誤判。3．藥物的檢查

主要指純度檢查：是限度檢查4．藥物的含量測(cè)定測(cè)定主要有效成分的含量。**第3和第4項(xiàng)可用來(lái)判斷藥品質(zhì)量的優(yōu)劣。5．檢驗(yàn)報(bào)告的書寫完整、清楚地記錄原始資料，并寫出檢驗(yàn)報(bào)告（給出結(jié)論）。六．全面控制藥品質(zhì)量的科學(xué)管理良好藥品實(shí)驗(yàn)研究規(guī)范（goodlaboratorypractice,GLP）即藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范?？茖W(xué)、可靠的研究方法才能得出有效、可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，故需對(duì)新藥研究條件作嚴(yán)格規(guī)定。良好藥品臨床試驗(yàn)規(guī)范（goodClinicalpractice,GCP）GCP可保護(hù)受試者的安全和權(quán)利，有助于保證提供有價(jià)值的臨床研究資料。良好藥品生產(chǎn)規(guī)范（goodmanufacturepractice,GMP）即藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范良好藥品供應(yīng)規(guī)范（goodsupplypractice,GSP）保證藥品在運(yùn)輸、貯存和銷售過(guò)程中的質(zhì)量AnalyticalChemistryJournalofMedicinalChemistryMolecularPharmaceuticsBiomacromoleculesBiochemistryAnalyst

ElectrophoresisJournalofPharmaceuticalScienceJournalofSeparationScienceChiralityJournalofMicrocolumnSeparationJournalofMassSpectrosmetryLuminescenceBiomedicalChromatographyBiopharmaceuticsanddrugDispositionDrugdevelopmentResearchElectroanalysisJournalofBioluminescenceandChemiluminescenceSingleMolecules藥學(xué)學(xué)報(bào)中國(guó)藥學(xué)雜志藥物分析雜志藥學(xué)通報(bào)國(guó)外醫(yī)學(xué)-藥學(xué)分冊(cè)藥學(xué)進(jìn)展化學(xué)學(xué)報(bào)分析化學(xué)高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào)色譜化學(xué)進(jìn)展各主要大學(xué)學(xué)報(bào)一．鑒別項(xiàng)目（一）性狀：包括外觀、色澤、臭、味、溶解度及一些物理常數(shù)。（二）一般鑒別試驗(yàn)（generalidentificationtest,GIT）GIT僅適用于確認(rèn)單一的化學(xué)藥物，對(duì)多種化學(xué)藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時(shí)，除另有規(guī)定外，不適用。GIT只能證實(shí)藥物的類別，將藥物與其它類別的藥物區(qū)分開，不能證實(shí)是哪一種藥物。（三）專屬鑒別試驗(yàn)（specificidentification,SIT)在GIT的基礎(chǔ)上進(jìn)行，可證實(shí)藥物屬于某類藥物的哪一種。SIT根據(jù)每種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性的差異，采用靈敏、選擇性強(qiáng)的定性反應(yīng)進(jìn)行。二．鑒別試驗(yàn)條件1．溶液的濃度：主要指被鑒別藥物的濃度，但其他試劑的濃度也應(yīng)注意控制，特別是以化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的化學(xué)現(xiàn)象為依據(jù)進(jìn)行鑒別的情況。藥物+試劑產(chǎn)物（顏色、沉淀等）2．溶液的溫度影響化學(xué)反應(yīng)的快慢。一般溫度每升高10℃，可使反應(yīng)速度增加2-4倍。3．溶液的酸堿度溶液的酸堿度應(yīng)能使各反應(yīng)物有足夠的濃度處于反應(yīng)活化狀態(tài)，并使反應(yīng)生成物處于穩(wěn)定、易于觀測(cè)的狀態(tài)。4．干擾成分采用專屬性更高的鑒別反應(yīng)或?qū)⒏蓴_成分分離除去，以消除干擾。５．試驗(yàn)時(shí)間對(duì)有機(jī)化合物的化學(xué)反應(yīng)影響較大。因?yàn)橛袡C(jī)反應(yīng)能否進(jìn)行，取決于舊共價(jià)鍵斷裂和新共價(jià)鍵形成的難易，而這些共價(jià)鍵的更替需要一定時(shí)間。2.空白試驗(yàn)blanktest消除試劑和器皿可能帶來(lái)的影響。在與供試品鑒別試驗(yàn)完全相同的條件下，除不加供試品外（或以等量溶劑替代供試液），其他試劑同樣加入進(jìn)行的試驗(yàn)。3．提高反應(yīng)靈敏度的方法1）消除干擾：如熒光法需濾出天然光和激發(fā)光的干擾。2）改進(jìn)觀測(cè)方法：如將目視觀測(cè)溶液的顏色改為可見分光光度法。3）加入與水互不相溶的有機(jī)溶劑：濃集有色生成物（脂溶性）于有機(jī)溶劑中→顏色加深，易觀察。第二節(jié)藥物的一般鑒別試驗(yàn)一．鑒別方法（一）化學(xué)鑒別法1．干法：無(wú)溶劑參與反應(yīng)焰色試驗(yàn)：鑒別鹽的類型氣體產(chǎn)生法：在適當(dāng)溫度條件下，加熱使供試品分解，生成有特殊氣味的氣體。

常用熒光發(fā)射形式：藥物本身在UV或可見光下發(fā)射熒光----自發(fā)熒光。藥物溶液+硫酸呈酸性后，發(fā)射；藥物+Br2反應(yīng)后，發(fā)射；藥物+間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射----衍生后發(fā)熒光。４）氣體生成反應(yīng)鑒別法

氨氣（胺氣）生成法：適用于胺（銨）類、酰胺類及酰脲類藥物。藥物經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，可產(chǎn)生NH3or胺氣。

H2S氣體生成法：適用于含硫藥物。經(jīng)強(qiáng)酸處理，加熱，產(chǎn)生H2S。碘蒸氣生成法：適用于含碘有機(jī)