病毒學(xué)腸道病毒

病毒學(xué)腸道病毒第1頁/共67頁腸道病毒

Enterovirus第2頁/共67頁急性胃腸炎病毒脊髓灰質(zhì)炎病毒甲型肝炎病毒

主要內(nèi)容第3頁/共67頁簡稱腸道病毒(enterovirus)，通過污染的飲食，經(jīng)糞－口途徑傳播，引起消化道傳染病。主要包括腸道病毒和急性胃腸炎病毒腸道病毒(小RNA病毒科)

輪狀病毒腸道腺病毒杯狀病毒星狀病毒呼腸病毒科急性胃腸炎病毒

腸道感染病毒第4頁/共67頁

病毒種類型別所致疾病脊髓灰質(zhì)炎病毒1～3脊髓灰質(zhì)炎柯薩奇病毒A組1～24*皰疹性咽喉炎、手足口病

B組1～6心肌炎和心包炎、流行胸痛?？刹《?～34**無菌性腦膜炎、腦炎等新腸道病毒68～71手足口病、眼病等甲型肝炎病毒72甲型肝炎*A23為?？刹《?型;**第10型為呼腸病毒1型;第28型為7天連鎖酒店鼻病毒1型;第34型為柯薩奇病毒24型。腸道病毒的分類

第5頁/共67頁致病特點(diǎn)在腸道中增殖，卻很少引起腸道疾病不同的型別可引起相同的臨床綜合癥，同型病毒也可引起不同的臨床疾病第6頁/共67頁小RNA病毒，直徑22-30nm，球形，20面立體對稱，無包膜；核心為單正鏈RNA，起mRNA作用，具感染性；耐乙醚，耐酸(pH3-5)，耐膽汁，可在污水、糞便中存活數(shù)周；對紫外線、干熱敏感；糞-口傳播為主，腸細(xì)胞內(nèi)增殖，能侵入血流、神經(jīng)系統(tǒng)等，導(dǎo)致腸道外多種疾病（中樞神經(jīng)、心肌損害，皮疹等），隱性感染率高。

腸道病毒共同特性第7頁/共67頁

病例一3歲男童，為新近非洲移民。因不對稱下肢送醫(yī)。其母訴說患兒5個月前患發(fā)熱和腹瀉，后自然消失，幾周后發(fā)現(xiàn)他右腿行走不便。查體發(fā)現(xiàn)右下肢細(xì)短，軟弱無力不能行走，右腿深部腱反射消失，但無感覺障礙。上肢活動正常，精神狀態(tài)及頭部神經(jīng)反射正常。實(shí)驗(yàn)室檢查：肌電圖（EMG）呈慢性部分神經(jīng)切除改變，并伴有靜脈肌肉異常自發(fā)活動。與自愿者對照，其運(yùn)動神經(jīng)元數(shù)量減少，感覺功能正常。第8頁/共67頁

脊髓灰質(zhì)炎病毒

Poliovirus

第9頁/共67頁

脊髓灰質(zhì)炎又稱小兒麻痹癥，是一種多發(fā)生于夏秋季節(jié)由脊髓灰質(zhì)炎病毒引起的急性腸道傳染病。

患者在多汗發(fā)熱、周身疼痛數(shù)日后常常會手足軟綿無力、不會動彈，稱為“馳緩性癱瘓”。嚴(yán)重患者病毒可侵入其腦神經(jīng)，出現(xiàn)面癱、吞咽和呼吸困難，甚至危及生命。

開展活疫苗預(yù)防以來，已基本消滅了此病。第10頁/共67頁生物學(xué)性狀

形態(tài)與結(jié)構(gòu)球形，直徑27nm，無包膜。核衣殼:呈20面體立體對稱。第11頁/共67頁病毒衣殼有60個相同的殼粒，殼粒由4種不同的結(jié)構(gòu)蛋白組成：表面：結(jié)構(gòu)蛋白VP1-VP3帶有中和抗原位點(diǎn)，VP1與病毒吸附有關(guān)。內(nèi)部：VP4與RNA結(jié)合，與脫殼穿入有關(guān)。第12頁/共67頁基因結(jié)構(gòu)示意圖基因組單正鏈RNA5’—VPg—VP4—VP2—VP3—VP1—2A—2B—2C—3A—3B—3C—3D—AAAn—3’非編碼區(qū)連續(xù)開放讀框非編碼區(qū)5’端：共價結(jié)合一小分子蛋白質(zhì)VPg

與病毒RNA合成和7天連鎖酒店基因組裝配有關(guān)3’端：帶有poly(A)尾加強(qiáng)了病毒的感染性第13頁/共67頁

病毒蛋白質(zhì)合成

Poliovirus基因組

作模板

翻譯

前體蛋白質(zhì)(2200aa)

結(jié)構(gòu)蛋白+酶蛋白

VP3+VP1+VP0

VP4+VP2病毒RNA的復(fù)制

Poliovirus

基因組RNA（+）

復(fù)制互補(bǔ)RNA（-）

復(fù)制病毒RNA（+）

第14頁/共67頁抗原組成D抗原(N抗原):完整的病毒顆粒，有感染性，為型特異性抗原。根據(jù)其D抗原的不同，分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。C抗原(H抗原):為未裝配的空心顆粒，不含RNA，無感染性，無型特異性。

第15頁/共67頁抵抗力對理化因素抵抗力較強(qiáng)；在污水和糞便中可存活數(shù)月；能耐受胃酸、蛋白酶和膽汁；室溫下可存活數(shù)日；56℃經(jīng)30min可滅活第16頁/共67頁致病性與免疫性傳染源：患者，無癥狀帶毒者。傳播途徑:

糞—口途徑為主，上呼吸道、咽喉和腸道為入侵門戶。從潛伏期→全病程→病后數(shù)月均有傳染性(糞便)易感者：兒童過程：1）病毒數(shù)量和毒力；2）機(jī)體狀態(tài)所致疾?。荷窠?jīng)性麻痹（小兒麻痹）識別受體：免疫球蛋白超家族的細(xì)胞粘附分子

脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元第17頁/共67頁病毒口咽部、腸道淋巴結(jié)大量繁殖血（第一次病毒血癥）全身淋巴組織增殖血（第二次病毒血癥）靶器官（脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞、腦膜）病變輕微暫時性肢體麻痹0.1%病變嚴(yán)重弛緩性麻痹極少數(shù)延髓麻痹呼衰、心衰、死亡90%隱性感染5%頓挫感染非麻痹型脊髓灰質(zhì)炎/無菌性腦膜炎麻痹型致病性和免疫性10%（發(fā)燒、不適、腹瀉）（發(fā)熱頭疼乏力咽痛嘔吐）1％～2％第18頁/共67頁90％的感染為隱性感染約5％出現(xiàn)頓挫感染1％～2％為非麻痹性脊髓灰質(zhì)炎或無菌性腦膜炎僅約0.1%出現(xiàn)永久性弛緩性肢體麻痹極少數(shù)發(fā)展為延髓麻痹臨床特征第19頁/共67頁病毒↓胃腸道↓血液和淋巴液↓血腦屏障↓中樞神經(jīng)系統(tǒng)在神經(jīng)元中增殖↓癱瘓脊髓灰質(zhì)炎的發(fā)病機(jī)理第20頁/共67頁P(yáng)olioinanancientcivilization.Thisstonetabletfromthe18thDynastyinEgyptdepictsSiptahbearingthesignsofparalyticpolio.Poliomaycauseparalysis.Childrenarestrickenwithpoliomoreoftenthanadults,leadingtothenameinfantileparalysis.第21頁/共67頁免疫性感染后，可建立起牢固的特異性免疫應(yīng)答：同型：防御力異型：也有低度防御能力體液免疫為主:

腸道:S-IgA,防止病毒在咽喉、腸道內(nèi)吸附和初步增殖。血中:IgG,IgM,中和病毒,阻止侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。IgG抗體可由母親通過胎盤傳給胎兒,故生后6個月以內(nèi)的嬰兒較少發(fā)病。第22頁/共67頁微生物學(xué)檢查

病毒分離:

糞便＋抗生素→靈長類（猴腎或人胚腎細(xì)胞),37℃,7～10天→細(xì)胞病變→鑒定型脊髓灰質(zhì)炎病毒感染Vero細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞病變正常的Vero細(xì)胞第23頁/共67頁血清學(xué)診斷:

雙份血清查抗體,ELISA,IFA病毒基因檢測:

核酸雜交、PCR、序列分析微生物學(xué)檢查第24頁/共67頁防治原則

人工主動免疫:嬰幼兒(2月齡),兒童。疫苗種類:

滅活脊髓灰質(zhì)炎疫苗(IPV,Salk苗);脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗(OPV,Sabin苗);三價(3個型)口服脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗(TOPV):即從生后2個月開始連服三次TOPV(間隔1個月),抗體陽轉(zhuǎn)率100％,4歲再加強(qiáng)一次。危險:疫苗相關(guān)麻痹性脊髓灰質(zhì)炎(VAPP)發(fā)生第25頁/共67頁

脊髓灰質(zhì)炎疫苗比較

種類制備服用抗體產(chǎn)生優(yōu)缺點(diǎn)

滅活由三型病肌肉血流中保存、運(yùn)輸方便，疫苗毒經(jīng)甲醛注射和抗體無復(fù)毒危險，副作

(Salk

滅活后混用少；需重復(fù)注射，疫苗)合制成IPV維持時間短，無局部免疫。

減毒活特定條件口服血流中免疫效果確實(shí)，間接疫苗下篩選出(冬春和抗體,免疫，保存、運(yùn)輸要

(Sabin

的減毒變季)腸道冷藏；不能用開水送疫苗)異株制成sIgA

服，有復(fù)毒危險；免

OPV

疫缺陷者可致麻痹。建議：最初兩次免疫使用IPV，再用OPV。第26頁/共67頁

人工被動免疫

對流行期與患者有過密切接觸的易感者，按照0.3－0.5ml/kg注射丙種球蛋白可避免發(fā)病或減輕癥狀。

第27頁/共67頁

急性胃腸炎病毒第28頁/共67頁急性胃腸炎病毒引起急性胃腸炎，種類有：呼腸病毒科輪狀病毒杯狀病毒科諾如病毒沙波病毒腺病毒科腸道7天連鎖酒店腺病毒40、41型星狀病毒科星狀病毒第29頁/共67頁病毒性與細(xì)菌性胃腸炎的主要區(qū)別：無細(xì)菌病原；多為突然發(fā)生且很快恢復(fù)；臨床表現(xiàn)相似，主要為中等程度的腹瀉與嘔吐；流行特點(diǎn)為無年齡和地域限制。

臨床表現(xiàn)：腹瀉和嘔吐

急性胃腸炎病毒第30頁/共67頁

流行方式：五歲以內(nèi)的兒童腹瀉：輪狀病毒（A-C組）占80%，腸道腺病毒占第2位；星狀病毒2.8%。與年齡無關(guān)的暴發(fā)流行腹瀉：杯狀病毒（無菌性胃腸炎暴發(fā)最重要病原）。急性胃腸炎病毒第31頁/共67頁輪狀病毒(rotavirus)直徑70～75nm的球形，具雙層衣殼，無包膜。內(nèi)殼輻射呈車輪狀雙鏈RNA病毒，分11個節(jié)段，分別編碼6個結(jié)構(gòu)蛋白和5個非結(jié)構(gòu)蛋白，其中：

1、2、3片段編碼核心蛋白VP1、VP2和VP3，具有轉(zhuǎn)錄酶和復(fù)制酶的作用。

第32頁/共67頁

輪狀病毒第33頁/共67頁輪狀病毒的結(jié)構(gòu)及其核心RNA11條節(jié)段與編碼蛋白質(zhì)第34頁/共67頁病毒內(nèi)衣殼病毒外衣殼

6片段編碼內(nèi)衣殼蛋白VP6，為病毒組和亞組特異性抗原。

4和9片段編碼外衣殼蛋白VP4（血凝素，決定血清型和感染性），VP7（糖蛋白，促病毒穿入），均為中和抗原。第35頁/共67頁輪狀病毒的分組A組人類致病的主要病原體---嬰兒B組感染人----成人C組感染豬，偶爾也感染人D組感染鳥類E組感染豬根據(jù)輪狀病毒抗原性及遺傳性的不同將其分為A～G7個血清型，其中A、B、C3型是人類腹瀉的重要病原，D～G型只引起動物腹瀉。血清型之間無交叉反應(yīng)。第36頁/共67頁致病性及免疫性晚秋及冬季為主要發(fā)病季節(jié)糞－口途徑為主要傳播方式潛伏期短，臨床表現(xiàn)為大量水樣便、嘔吐及輕度發(fā)熱。典型病兒排泄白色水樣便，故稱為小兒假性霍亂。少數(shù)嚴(yán)重病人可出現(xiàn)脫水及中毒癥狀。主要保護(hù)性抗體為SIgA，對同型病毒有保護(hù)作用，對異型也有部分保護(hù)作用，細(xì)胞免疫亦有交叉保護(hù)作用第37頁/共67頁微生物學(xué)檢查取患者糞便標(biāo)本用電鏡(診斷率90-95%)

、ELISA或乳膠凝集試驗(yàn)檢出病毒或其抗原。

糞便中提取病毒RNA進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳，分析A、B、C三組輪狀病毒11個基因片段特殊RNA圖譜，在臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查中有重要意義。

第38頁/共67頁防治原則控制傳染源，嚴(yán)格消毒，經(jīng)常洗手，防止醫(yī)源性傳播，特別是在嬰幼兒病房中的傳播治療時注意補(bǔ)液；糾正電解質(zhì)平衡預(yù)防用猴、牛輪狀病毒，可提供交叉保護(hù)第39頁/共67頁杯狀病毒(calicivirus)直徑27nm，球形表面有杯狀凹陷，無包膜單正鏈RNA只有一種衣殼蛋白

引起人類胃腸炎的包括諾如病毒和沙波病毒。諾如病毒是最多見的杯狀病毒，也是世界上引起人類非細(xì)菌性胃腸炎暴發(fā)流行最重要的病原體。

第40頁/共67頁耐酸、對熱較穩(wěn)定、60℃30min不能完全滅活。糞-口途徑為主要傳播方式，呼吸道也可傳播污染的海產(chǎn)品是引起流行的重要原因破壞小腸絨毛和粘膜上皮細(xì)胞，引起嘔吐、腹瀉惡心、低熱等癥狀。一般1～2d自愈，但免疫力不持久，易再次感染。

杯狀病毒(calicivirus)第41頁/共67頁腸道腺病毒(enterrisadenovirus)生物學(xué)性狀與其他腺病毒相似糞-口途徑傳播主要侵犯5歲以下兒童是引起嬰兒病毒性腹瀉的第二位病原體第42頁/共67頁星狀病毒(astrovirus)球形，表面結(jié)構(gòu)呈星形，有5~6個角無包膜，單正鏈RNA糞-口途徑傳播，易感染5歲以下兒童，多為隱性感染。侵犯十二指腸粘膜細(xì)胞主要癥狀為發(fā)熱，惡心，腹瀉可持續(xù)2-3d或更長。感染后免疫力牢固是醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原體之一第43頁/共67頁

輪狀病毒腸道腺病毒杯狀病毒星狀病毒

雙衣殼如車輪20面體對稱杯狀凹陷表面呈星狀血凝素觸須，血凝素dsRNA，11

dsDNAss(+)RNAss(+)RNA節(jié)段基因組

7.3～7.7kb7.0kb常規(guī)培養(yǎng)特殊細(xì)胞不能體外培養(yǎng)大腸癌細(xì)胞A-G7組40、41型成員眾多嬰幼兒腹瀉嬰幼兒腹瀉無菌性胃腸炎嬰幼兒腹瀉嬰幼兒死亡主要原因糞-口,呼吸道糞-口糞-口,呼吸道糞-口大童成人很少發(fā)熱或傳染性強(qiáng)(海免疫力無癥狀感染出現(xiàn)呼吸道癥狀產(chǎn)品污染)牢固第44頁/共67頁

甲型肝炎病毒

(HepatitisAvirus,HAV)毛蚶，又名麻蛤、麻地、毛蛤、瓦壟子、珠蚶。肉味鮮美，營養(yǎng)豐富，且產(chǎn)量大，價格便宜，很受群眾歡迎。家庭多用鹽水池煮后蘸姜醋汁食用。第45頁/共67頁概況1988年春季上海曾發(fā)生因生食毛蚶而爆發(fā)甲型肝炎流行，患者達(dá)31萬，死亡47例，震驚全國!HAV首先是弗瑞斯特（Feinstone）于1973年應(yīng)用免疫電鏡技術(shù)在急性期肝炎患者糞便中發(fā)現(xiàn)的。1982年國際病毒命名委員會將列為小RNA病毒科腸道病毒屬72型。因其生物學(xué)性狀與腸道病毒明顯不同,1993年被單列為小RNA病毒科的嗜肝病毒屬（heparnavirus）。第46頁/共67頁

生物學(xué)性狀

形態(tài)與結(jié)構(gòu)：球形（直徑27-32nm）二十面體立體對稱，無包膜。HAV電子顯微鏡圖第47頁/共67頁基因組

單股正鏈RNA，約7500核苷酸基因結(jié)構(gòu)

5’-Vpg-非編碼區(qū)-P1（VP1-VP2-VP3-VP4）-P2-P3-非編碼區(qū)-AAAn-3’5’末端區(qū)：較保守，制備探針，快速診斷編碼區(qū)：衣殼蛋白VP1-4、RNA多聚酶、蛋白酶

第48頁/共67頁抗原性衣殼蛋白：由VP1～VP4等4種多肽組成，其中VP1是主要的衣殼蛋白，其抗原決定簇的中和抗體，能中和所有的HAV株。只有一個血清型第49頁/共67頁抵抗力：較強(qiáng)較腸道病毒更耐熱。60℃可存活4小時，4℃可存活數(shù)月。對乙醚、酸（pH3）處理有抵抗力。加熱100℃、5分鐘或用甲醛溶液、氯等處理，可使之滅活。對肝炎患者及其排泄物處理應(yīng)特別小心！第50頁/共67頁感染動物模型

黑猩猩,狨猴和紅面猴對HAV易感，且能傳代，經(jīng)口或靜脈注射可使動物發(fā)生肝炎，恢復(fù)期血清中能檢出HAV的相應(yīng)抗體。細(xì)胞培養(yǎng)狨猴肝細(xì)胞或恒河猴腎細(xì)胞FPhk6株肝癌細(xì)胞株但不引起CPE，因此需用免疫熒光法或放射免疫法檢出培養(yǎng)的HAV第51頁/共67頁致病性

HAV引起的甲型肝炎是急性肝炎，可造成暴發(fā)或散發(fā)流行，潛伏期短，發(fā)病較急，一般不轉(zhuǎn)為慢性，亦無慢性攜帶者，預(yù)后良好。

第52頁/共67頁

多侵犯兒童及青少年，且多為隱性感染。潛伏期為2-6周，冬春季節(jié)是甲肝的高發(fā)期。臨床表現(xiàn)多從發(fā)熱、疲乏和食欲不振開始，繼而出現(xiàn)肝腫大、壓痛、肝功能損害，部分患者可出現(xiàn)黃疸。90%以上患者可在2-3個月完全康復(fù)。

致病性第53頁/共67頁少數(shù)經(jīng)血液、尿液和密切接觸等傳播。傳播途徑糞-口：污染水源、食物、海產(chǎn)品和食具等造成散發(fā)流行或大流行。第54頁/共67頁傳染源糞便血液急性甲肝患者隱性感染者潛伏期末至病后2周我國HAV感染率高于70%第55頁/共67頁甲肝在世界范圍內(nèi)發(fā)病率示意圖第56頁/共67頁致病機(jī)制糞－口途徑傳播小腸淋巴結(jié)中大量增殖入血并形成病毒血癥肝臟為最終靶器官（免疫病理作用）通過膽汁隨糞便排出體外第57頁/共67頁免疫性隱性或顯性感染急性期及恢復(fù)期早期抗-HAVIgM恢復(fù)期后期抗-HAVIgG維持終身80%40歲以上成人第58頁/共67頁免疫學(xué)檢查：雙份血清HAV抗原檢測：糞便病